胃癌进展及预后相关分子标志物miR-1258的制作方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及胃癌根治术后预后诊断领域，具体来说涉及一种胃癌疾病进展分子标 志物miR-1258,其可应用于在胃癌术后早期进行预后评估。
【背景技术】
[0002] 胃癌是我国发病率和死亡率均居前列的恶性肿瘤。近年来，随着多学科综合治 疗的推广，胃癌治疗水平有所提高。然而，进展期胃癌根治术后5年生存率长期徘徊在 30%_50%，转移扩散是其预后不良的首要原因。因此，深入探索胃癌发生及转移机制，寻找转 移高危个体预测和早期诊断的分子标志，确立新的治疗靶点对提高胃癌疗效具有特殊的重 要意义。
[0003] MicroRNA(miRNA)是一类长度约为22核苷酸的非编码单链小分子RNA，转录和 加工成熟后，可与靶基因mRNA的3'端非翻译区互补结合，降解mRNA或抑制其翻译。MiRNA 具有高度的保守性、时序性和组织特异性，目前已被证实其在个体发育、细胞分化、增殖、凋 亡等生理活动中以及在肿瘤发生、发展等病理过程中起重要调控作用。
[0004] 近年来的研究表明，胃癌预后与miRNA密切相关，miRNA可以通过作用于靶基因从 而影响胃癌进展，因此miRNA对胃癌预后评估也可能有相应的作用。
【发明内容】
[0005] 发明目的：本发明提供了一种新的与胃癌疾病进展相关的miRNA，可应用于在胃 癌术后早期进行预后评估，以给患者及时有效地随访、治疗等干预措施，延长生存时间。
[0006] 技术方案：该miRNA为miR-1258，其序列：5'-AGUUAGGAUUAGGUCGUGGAA -3' （MIMAT0005909)(SEQIDN0:1)。
[0007] 发明人发现，与癌旁非癌组织相比较，miR-1258在105对胃癌组织中明显低表达 并与胃癌侵袭深度及淋巴管癌栓显著相关，尤为重要的是miR-1258表达量低的患者预后 较差。由此可见，miR-1258的异常低表达与胃癌进展及预后密切相关。
[0008] 在上述发现的基础上，本发明提供了miR-1258在制备评估胃癌进展及预后的诊 断试剂中的用途。
[0009] 具体地，所述诊断试剂通过检测胃癌患者手术标本癌组织及癌旁非癌组织中 miR-1258的表达量，并与临床病理因素、预后进行分析，发现miR-1258在105对胃癌组织中 明显低表达并与胃癌侵袭深度及淋巴管癌栓显著相关，尤为重要的是miR-1258表达量低 的患者预后较差。在一个特定的实施方案中，使用定量PCR的方法检测胃癌患者术后标本 癌组织及癌旁非癌组织中miR-1258的表达量。
[0010] 本发明还提供了一种诊断胃癌进展及预后的诊断试剂盒，其包括： (1) 组织中总RNA提取试剂， (2) 1?隱加？〇174尾试剂， (3) 纯化RNA试剂， (4) 反转录试剂， (5) 定量PCR试剂， 其中，反转录试剂中包含RT-Primer
【主权项】
1. 一种胃癌进展及预后相关分子标志物miR-1258,其序列为 5'-AGUUAGGAUUAGGUCGUGGAA -3'（SEQ ID N0:1)，其在制备评估胃癌进展及预后的诊断试 剂中的应用。
2. -种如权利要求1所述的胃癌进展及预后相关分子标志物miR-1258的诊断试剂盒， 其特征在于：其包括： (1) 组织中总RNA提取试剂， (2) 1?隱加？〇174尾试剂， (3) 纯化RNA试剂， (4) 反转录试剂， (5) 定量PCR试剂， 其中，反转录试剂中包含RT-Primer 5 ' -GCTGTCAACGATACGCTACGTAACGGCATGACAGTGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTA-3 '（SEQ ID NO:2); 5 ' -GCTGTCAACGATACGCTACGTAACGGCATGACAGTGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTC-3 '（SEQ ID NO:3); 5 ' -GCTGTCAACGATACGCTACGTAACGGCATGACAGTGTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTTG-3 '（SEQ ID NO:4)； 定量PCR试剂包含胃癌进展与预后相关分子标志物miR-1258的特异性引物 miR-1258: 5'-AGTTAGGATTAGGTCGTGGAAAA-3' （SEQ ID N0:5); 5' -GCTGTCAACGATACGCTACGT-3' （SEQ ID N0:6); U6: 5' -Cgcttcggcagcacatatac-3' （SEQ ID N0:7); 5' -ttcacgaatttgcgtgtcat-3' （SEQ ID N0:8)。
【专利摘要】本发明涉及胃癌根治术后预后诊断领域，具体来说涉及一种胃癌疾病进展分子标志物miR-1258，其可应用于在胃癌术后早期进行预后评估。MiR-1258在胃癌组织中明显低表达并与胃癌侵袭深度及淋巴管癌栓显著相关，尤为重要的是miR-1258表达量低的患者预后较差。本发明还提供了一种诊断胃癌进展及预后的试剂盒。使用本发明的胃癌进展与预后相关分子标志物miR-1258诊断胃癌患者术后进展及评估其生存，可给患者及时有效地随访、治疗等干预措施，以延长生存时间，提高生存质量。该发明的试剂盒具有操作简单，安全无创伤，高特异性，高灵敏性以及易于大量筛查的特点。
【IPC分类】C12Q1-68, C12N15-11
【公开号】CN104531856
【申请号】CN201410791924
【发明人】王振宁, 宋永喜, 周欣, 黄选章, 高鹏, 孙景旭, 陈晓婉
【申请人】王振宁
【公开日】2015年4月22日
【申请日】2014年12月19日