一种利用电生功能水从灵芝中提取活性成分的方法
【专利说明】
【技术领域】
[0001]本发明涉及灵芝加工技术领域，特别是一种利用电生功能水从灵芝中提取活性成分的方法。
【【背景技术】】
[0002]灵芝[Ganoderma lucidum(Lesyss ex Fr.)Karst]属真菌门担子菌亚门多孔菌目灵芝菌科灵芝属真菌，素有“仙草”之美誉，在我国已有悠久的药用历史。现代科学研究表明灵芝中的生物活性成份非常丰富，包括多糖类、三萜类、氨基酸蛋白质类等十几大类，具有抗氧化、调节免疫、抑制肿瘤、刺激胰岛素分泌、降低血糖、降血脂、抗辐射、促进葡萄糖在外周组织的利用、促进核酸和蛋白质的合成、消炎等多种功效。
[0003]灵芝多糖是灵芝中重要的活性成分之一，从灵芝中分离纯化得到灵芝多糖的分子量大都分布在几千到几十万之间，其主要存在于灵芝子实体细胞壁内。灵芝多糖溶于水而不溶于乙醇，单纯依靠扩散原理的传统提取方法，不仅存在提取温度高、溶剂用量大、操作时间长、提取效率低、能源消耗高等缺点，且多糖容易发生分解。三萜类物质是灵芝中的另一种主要活性成分，分子量一般为400?600，化学结构较复杂，为高度氧化的羊毛留烷衍生物，按碳原子数目可以分为C24、C27和C30，国内外研究人员已经陆续分离出上百种三萜成分。灵芝三萜类化合物难溶于水、易溶于有机溶剂、性质不稳定，因此分离和纯化的难度比较大。一般常用甲醇、乙醇、氯仿或乙酸乙酯等有机溶剂在常温或高温下回流提取。此外，灵芝中还含有大量的蛋白质、纤维素等成分。
[0004]灵芝子实体结构紧密、木质化程度高，对灵芝子实体形成了较好的维持力，在提取过程中传质阻力比较大，使存在于子实体细胞壁内的活性成分不容易被提取出来，从而大大限制了灵芝子实体的药用价值和灵芝的产业发展。因此，如何提高灵芝子实体细胞壁的降解效率，从而提高灵芝多糖、三萜等活性成分的提取得率，一直被灵芝产业所重点关注。
[0005]电生功能水，也叫电解水，是指使用电解装置对极低浓度的氯化钠或其他氯盐溶液进行电解，从而使溶液的pH值、氧化还原电位(0RP)、有效氯浓度(ACC)、溶解氧(D0)、电导率(TDS)等一系列指标发生变化，尤其是在高温高压下，电解水反应性强，是有效破坏纤维素紧密结构的有效方式，具有绿色环保、清洁高效的优点，但将电生功能水应用于灵芝活性成分的提取还未见报道。
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【发明内容】
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[0006]本发明的目的就是解决现有技术中的问题，提出一种利用电生功能水从灵芝中提取活性成分的方法，利用蒸汽爆破方式预处理并结合电生功能水提取灵芝多糖和灵芝三萜等，并将提取后的残渣制成膳食纤维，提高灵芝有效生物活性物质提取率。
[0007]为实现上述目的，本发明提出了一种利用电生功能水从灵芝中提取活性成分的方法，包括如下步骤:
[0008]a)将灵芝子实体粉碎并过筛，经润湿后采用蒸汽爆破方式进行预处理制得灵芝粉；
[0009]b)将所述步骤a)中经过预处理制得的灵芝粉与乙醇溶液混合均匀后，进行浸提反应I，经过滤得到上清液I和渣滓I ;
[0010]c)所述步骤b)得到的上清液I经浓缩干燥后得到灵芝三萜粗品；
[0011]d)将所述步骤b)得到的渣滓I与电生功能水混合，混合均匀后进行浸提反应II ;
[0012]e)所述步骤d)中浸提反应11完成后，过滤收集上清液11和渣滓11，并在上清液II中加入硫酸铵后进行过滤制得上清液III和沉淀；
[0013]f)所述步骤e)中的沉淀与复合酶液混合，混合均匀后进行水解反应III，水解反应结束后经过滤浓缩后制得灵芝多肽粗品；
[0014]g)所述步骤e)中的上清液III经浓缩干燥后即得灵芝多糖粗品；
[0015]h)所述步骤e)中的渣滓II经洗涤干燥后即得灵芝膳食纤维。
[0016]作为优选，所述步骤b)中乙醇溶液含有70% -95%乙醇。
[0017]作为优选，所述步骤a)中蒸汽爆破方式的处理压力为1.0-2.0MPa，保压时间为10-120 秒。
[0018]作为优选，所述步骤b)中浸提反应I中，浸提温度均为70-85°C，浸提时间为1-4小时，浸提次数为1-3次。
[0019]作为优选，所述步骤b)中灵芝粉与乙醇溶液的用量比为lg:8-25mL。
[0020]作为优选，所述步骤d)中电生功能水的pH值为9.0-13.0，氧化还原电位为_550至-lOOOmV。
[0021]作为优选，所述步骤d)的电生功能水由如下方法制备而成，包括如下步骤:将含氯盐的水溶液经电解，在阴极得到pH偏碱的所述电生功能水。
[0022]作为优选，所述氯盐为氯化钠或氯化钾。
[0023]作为优选，所述电解的电压为20-60V，电流不大于1A，电解时间为10-120分钟。
[0024]作为优选，所述步骤d)中浸提反应II的浸提温度均为100-120°C，浸提时间为1-5小时，浸提次数为1-3次。
[0025]本发明的有益效果:1)本发明中所应用的蒸汽爆破预处理，通过瞬间泄压，破坏灵芝子实体结构，使细胞壁破裂，提高成分提取率，并具有操作方便，处理效果好的优点；2)本发明中所应用的电生功能水制备简单、无毒无害、价格便宜，基本不会对环境产生负面影响，不产生废物和废液，是一种绿色生产工艺；3)充分利用原料，一套工艺从灵芝子实体干粉中综合提取灵芝多糖粗品、灵芝多肽粗品、灵芝膳食纤维和灵芝三萜粗品多种活性成分。
[0026]本发明的特征及优点将通过实施例进行详细说明。
【【具体实施方式】】
[0027]实施例1
[0028]本发明包括如下步骤:
[0029]a)将灵芝子实体粉碎并过60目筛，然后按料液比1:2与水混合后达到润湿状，采用蒸汽爆破机以蒸汽爆破方式进行预处理制得灵芝粉，蒸汽爆破方式的处理压力为1.5MPa，保压时间为90秒，灵芝子实体成熟变干后为木栓质，主要由粗大的厚壁菌丝交织排列而成，由于灵芝的功能性成分都被坚硬的细胞壁包裹，因此提取非常困难，蒸汽爆破方式中细胞壁横向连结强度下降，甚至软化可塑，当充满压力蒸汽的物料骤然减压时，孔隙中的气剧膨胀从而产生的“爆破”效果，使细胞壁破裂，并将原料撕裂为细小灵芝粉；
[0030]b)将所述步骤a)中经过预处理制得的灵芝粉与乙醇溶液按用量比为lg:10mL混合均匀后，进行浸提反应I，经过滤得到上清液I和渣滓I，乙醇溶液中含有90%乙醇，浸提温度均为80°C，浸提时间为每次2小时，浸提次数为2次；
[0031]c)所述步骤b)得到的上清液I经浓缩干燥后得到灵芝三萜粗品；
[0032]d)将所述步骤b)得到的渣滓I与电生功能水混合，混合均匀后进行浸提反应II，浸提温度均为100°C，浸提时间为2小时，浸提次数为2次，渣滓按料液比lg:8mL的比例与电生功能水混合，电生功能水的pH值为13.0，氧化还原电位为-550至-lOOOmV ;电生功能水通过将含氯盐的水溶液经电解，在阴极得到pH偏碱的所述电生功能水。所述氯盐为氯化钠或氯化钾，所述电解的电压为20-60V，电流不大于1A，电解时间为10-120分钟。
[0033]e)所述步骤d)中浸提反应11完成后，过滤收集上清液11和渣滓11，并在上清液II中加入硫酸铵后进行过滤制得上清液III和沉淀；
[0034]f)所述步骤e)中的沉淀与复合酶液混合，混合均匀后进行水解反应III，水解反应结束后经过滤浓缩后制得灵芝多肽粗品，复合酶液由复合酶由碱性和木瓜蛋白酶组成，复合酶的使用量为碱性蛋白酶0.2%、木瓜蛋白酶0.1%。所述酶解反应温度为50°C，反应时间为4小时；
[0035]g)所述步骤e)中的上清液III经浓缩干燥后即得灵芝多糖粗品；
[0036]h)所述步骤e)中的渣滓II经洗涤干燥后即得灵芝膳食纤维。
[0037]实施例2
[0038]本发明包括如下步骤:
[0039]a)将灵芝子实体粉碎并过60目筛，然后按料液比1:2与水混合后达到润湿状，采用蒸汽爆破机以蒸