Fam63b基因在制备诊治子宫肌瘤的产品中的用图
【技术领域】
[0001] 本发明设及生物技术领域，具体地设及FAM63B基因在子宫肌瘤的诊断、治疗中的 用途。
【背景技术】
[0002] 子宫肌瘤（别名：子宫良性肿瘤英文:myoma of uterus),是女性生殖器最常见的 一种良性肿瘤。多无症状，少数表现为阴道出血，腹部触及肿物W及压迫症状等。W多发性 子宫肌瘤常见，本病确切病因不明，现代西医学采取性激素或手术治疗，尚无其他理想疗 法，好发于卵巢功能较旺盛的30~45岁的妇女，待到患者50岁W后，由于卵巢功能明显衰 退，肌瘤大多自行缩小。
[0003] 子宫肌瘤诊断可W通过一些子宫肌瘤的症状而进行初步的判断，然后在做进一步 的检查，但是不能仅靠妇科检查进行确诊。首先，患有子宫肌瘤会感觉到腹痛，其次女性的 月经也会发生改变，甚至会引发不孕或多次流产。目前国内B超检查较为普遍，也是常见的 子宫肌瘤的诊断方法，可W较明确显示肌瘤大小及部位。腹腔镜、宫腔镜、诊断性刮宫有助 于子宫肌瘤的诊断。但是上述物理方法存在灵敏性差或者使患者感觉不适的缺陷，因此期 待新的诊断方法的出现。
【发明内容】
[0004] 为了克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种可用于子宫肌瘤早期诊断 的分子标志物。使用基因标志物来诊断子宫肌瘤具有及时性、特异性和灵敏性，从而使患者 在疾病早期就能知晓疾病风险，针对风险高低，采取相应的预防和治疗措施。
[0005] 为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0006] 本发明提供了检测FAM63B基因表达的产品在制备诊断子宫肌瘤的工具中的应用。
[0007] 进一步，所述检测FAM63B基因表达的产品包括检测FAM63B基因 mRNA水平的产品、 和/或检测FAM63B蛋白水平的产品。
[000引进一步，所述检测FAM63B基因表达的产品包括:通过RT-PCR、实时定量PCR、免疫检 巧。、原位杂交或忍片检测FAM63B基因及其表达产物的表达水平W诊断子宫肌瘤的产品。
[0009] 进一步，所述用RT-PCR诊断子宫肌瘤的产品至少包括一对特异扩增FAM63B基因的 引物;所述用实时定量PCR诊断子宫肌瘤的产品至少包括一对特异扩增FAM63B基因的引物； 所述用免疫检测诊断子宫肌瘤的产品包括:与FAM63B蛋白特异性结合的抗体;所述用原位 杂交诊断子宫肌瘤的产品包括:与FAM63B基因的核酸序列杂交的探针;所述用忍片诊断子 宫肌瘤的产品包括:蛋白忍片和基因忍片;其中，蛋白忍片包括与FAM63B蛋白特异性结合的 抗体，基因忍片包括与FAM63B基因的核酸序列杂交的探针。
[0010] 所述用实时定量PCR诊断子宫肌瘤的产品至少包括的一对特异扩增FAM63B基因的 引物如沈Q ID NO.3和沈Q ID NO.4所示。
[0011] 所述检测FAM63B基因表达的产品可W是检测FAM63B基因表达的试剂、也可W是包 含所述试剂的试剂盒、忍片、试纸等，也可w是使用所述试剂的高通量测序平台。
[0012] 所述诊断子宫肌瘤的工具包括但不限于忍片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台； 高通量测序平台是一种特殊的诊断子宫肌瘤的工具，随着高通量测序技术的发展，对一个 人的基因表达谱的构建将成为十分便捷的工作。通过对比疾病患者和正常人群的基因表达 谱，容易分析出哪个基因的异常与疾病相关。因此，在高通量测序中获知FAM63B基因的异常 与子宫肌瘤相关也属于FAM63B基因的用途，同样在本发明的保护范围之内。
[0013] 本发明还提供了一种诊断子宫肌瘤的工具，所述工具包括检测FAM63B基因表达的 试剂;所述试剂包括检测FAM63B基因 mRNA的引物和/或探针、检测FAM63B蛋白的抗体。
[0014] 所述工具包括但不限于忍片、试剂盒、试纸、或高通量测序平台。
[0015] 其中，所述忍片包括基因忍片、蛋白质忍片;所述基因忍片包括固相载体W及固定 在固相载体的寡核巧酸探针，所述寡核巧酸探针包括用于检测FAM63B基因转录水平的针对 FAM63B基因的寡核巧酸探针;所述蛋白质忍片包括固相载体W及固定在固相载体的FAM63B 蛋白的特异性抗体;所述基因忍片可用于检测包括FAM63B基因在内的多个基因（例如，与子 宫肌瘤相关的多个基因）的表达水平。所述蛋白质忍片可用于检测包括FAM63B蛋白在内的 多个蛋白质(例如与子宫肌瘤相关的多个蛋白质）的表达水平。通过将多个与子宫肌瘤的标 志物同时检测，可大大提高子宫肌瘤诊断的准确率。
[0016] 其中，所述试剂盒包括基因检测试剂盒和蛋白免疫检测试剂盒;所述基因检测试 剂盒包括用于检测FAM63B基因转录水平的试剂;所述蛋白免疫检测试剂盒包括FAM63B蛋白 的特异性抗体。进一步，所述试剂包括使用RT-PCR、实时定量PCR、免疫检测、原位杂交或忍 片方法检测FAM63B基因表达水平过程中所需的试剂。优选度，所述试剂包括针对FAM63B基 因的引物和/或探针。根据FAM63B基因的核巧酸序列信息容易设计出可W用于检测FAM63B 基因表达水平的引物和探针。
[0017] 所述试纸包括检测FAM63B基因表达的试剂。
[0018] 所述高通量测序平台包括检测FAM63B基因表达的试剂。
[0019] 与FAM63B基因的核酸序列杂交的探针可W是DNA、RNA、DNA-RNA嵌合体、PNA或其它 衍生物。所述探针的长度没有限制，只要完成特异性杂交、与目的核巧酸序列特异性结合， 任何长度都可W。所述探针的长度可短至25、20、15、13或10个碱基长度。同样，所述探针的 长度可长至60、80、100、150、300个碱基对或更长，甚至整个基因。由于不同的探针长度对杂 交效率、信号特异性有不同的影响，所述探针的长度通常至少是14个碱基对，最长一般不超 过30个碱基对，与目的核巧酸序列互补的长度W15-25个碱基对最佳。所述探针自身互补序 列最好少于4个碱基对，W免影响杂交效率。
[0020] 进一步，所述FAM63B蛋白的特异性抗体包括单克隆抗体、多克隆抗体。所述FAM63B 蛋白的特异性抗体包括完整的抗体分子、抗体的任何片段或修饰(例如，，嵌合抗体、scFv、 化6、尸(曰6'）2、尸乂等。只要所述片段能够保留与尸41638蛋白的结合能力即可。用于蛋白质水 平的抗体的制备时本领域技术人员公知的，并且本发明可W使用任何方法来制备所述抗 体。
[0021] 在本发明的具体实施方案中，所述检测FAM63B基因 mRNA的引物包括SEQ ID NO.3 和SEQ ID NO.4所示的引物对。
[0022] 本发明还提供了 FAM63B基因和/或其表达产物的促进剂在制备治疗子宫肌瘤的药 物中的应用。
[0023] 所述促进剂包括促进FAM6 3B基因表达的试剂和促进FAM6 3B基因表达产物的试剂； 所述促进FAM63B基因表达的试剂包括促进基因转录的试剂、促进基因翻译的试剂、促进 FAM63B蛋白含量的试剂;所述促进FAM63B基因表达产物的试剂包括促进FAM63B基因表达产 物稳定性的试剂、促进FAM63B基因表达产物活性的试剂、促进FAM63B基因表达产物功能的 试剂。
[0024] 具体地，所述促进FAM63B基因表达的试剂包括：含有FAM63B基因的试剂、携带 FAM63B基因的载体或宿主细胞所形成的试剂、含有FAM63B蛋白质的试剂。
[0025] 本发明的促进剂一方面可W用于补充内源性的FAM63B蛋白的缺失或不足，通过提 高FAM63B蛋白的表达，从而治疗因 FAM63B蛋白缺乏导致的子宫肌瘤。另一方面可W用于促 进FAM63B蛋白的活性或者功能，从而治疗子宫肌瘤。
[0026] 本发明所述携带基因的载体是本领域已知的各种载体，如市售的载体、包括质粒、 粘粒、隧菌体、病毒等。
[0027] 在本发明中，术语"宿主细胞"包括原核细胞和真核细胞。常用的原核宿主细胞的 例子包括大肠杆菌、枯草杆菌等。常用的真核宿主细胞包括酵母细胞、昆虫细胞和哺乳动物 细胞。较佳地，该宿主细胞是真核细胞，如C册细胞、COS细胞等。
[0028] 本发明还提供了一种用于治疗子宫肌瘤的药物组合物，所述药物组合物包括上面 所述的FAM63B基因和/或其表达产物的促进剂。
[0029] 进一步，本发明的药物还包括药学上可接受的载体，载体，运类载体包括(但并不 限于）：稀释剂、赋形剂如水等、填充剂如淀粉、薦糖等;粘合剂如纤维素衍生物、藻酸盐、明 胶和聚乙締化咯烧酬;湿润剂如甘油；崩解剂如琼脂、碳酸巧和碳酸氨钢;吸收促进剂季锭 化合物;表面活性剂如十六烧醇;吸附载体如高岭±和皂粘±;润滑剂如滑石粉、硬脂酸巧 和儀、聚乙二醇等。
[0030] 本发明的药物导入组织或者细胞的方式可W分为体外或者体内的方式。体外方式 包括将含有FAM63B基因的药物或者含有FAM63B蛋白质的药物导入细胞中，再将细胞移植或 回输到体内。体内方式包括直接将含有FAM63B基因的药物或者含有FAM63B蛋白质的药物注 入体内组织中。