一种毛细管基因扩增系统的制作方法
【技术领域】
[0001]本实用新型涉及DNA扩增技术领域，尤其涉及一种毛细管基因扩增系统。
【背景技术】
[0002]基因扩增的技术设备由三部分构成:①模板DNA制备所需设备，主要为高速微量离心机或高速冷冻离心机PCR基因扩增仪DNA扩增结果判读和测定设备，主要有水平低压电泳仪、PCR核酸电泳槽以及紫外透射仪和DNA微量荧光计等。基因扩增仪的技术方案可归结为两大类:第一类方案即三容器机械手循环方案。该类设计根据恒温器的排布可分为直线型和环型两种。该方案设计的PCR仪设置三个精确控温及温度可调的恒温器，并且固定不动，使样品盘在微电脑控制的机械手作用下，根据PCR反应所需的保温时间，在恒温器之间停留和循环。第二类方案即单容器温度循环方案。该类方案在整个反应过程中，样品在样品槽中位置不变，而通过控制样品槽温度的升降完成温度的转换、保持和循环。
[0003]总体说来，第一类方案的优点是:温度转换快，耗时少，变温速度可达10°C / S，因而温度转换率和DNA扩增效率均高于第二类方案。温度均匀性更易保证，而且对样品管的适应能力很强，不仅能用离心管、薄壁管，而且可做最新发展的毛细管PCR以及采用载玻片的原位PCR。硬件方面，因省去了制冷器，设备比较简单，降低了成本也容易控制和维修，提高了仪器的可靠性。由于PCR的退火温度通常都在42°C，因而该方案无制冷器的缺点并不影响DNA扩增的效果和质量。该方案的不足之处是由于温度升降太快，可能影响聚合酶的活性。此外由于省去制冷器，使温度下限受到环境温度的限制，温度程序的灵活性小，仪器体积较大。第二类方案的优点是由于引进了制冷器而易于变温，从而增加了温度变换程序的灵活性，仪器体积也比较小。主要缺点是由于在一个容器中进行温度循环，温度转换率将受到限制，且温度均匀性和运行效率均不如第一方案。在硬件方面，如果采取压缩机制冷将增加体积和成本；采用半导体制冷器(帕尔帖元件)，则由于热应力作用于帕尔帖元件焊接面，经多次循环将导致焊接面开裂而损坏。新近发展的空气浴、流体冷却、毛细管快速PCR仪，由于采用毛细管作样品管，利用高速气流强制冷却，在提高温度转换率和温度均匀性方面提出了新的措施。
【实用新型内容】
[0004]本实用新型旨在提供一种毛细管基因扩增系统，解决目前基因扩增仪中存在的聚合酶的活性差，温度均匀性和运行效率差，仪器体积大，仪器内设置较复杂，进而导致整个仪器制作成本高等问题。
[0005]为了解决上述问题，本实用新型提供了一种毛细管基因扩增系统，其特征在于:包括扩增混合液槽、蠕动泵、循环变温槽、毛细管、激光诱导荧光检测器，所述的扩增混合液槽通过管道与蠕动泵入口相连，蠕动泵出口与毛细管相连，所述的毛细管呈环形排布在循环变温槽中，所述的循环变温槽包括三个恒温槽，所述的毛细管穿过循环变温槽后与激光诱导荧光检测器相连。
[0006]优选的，所述的毛细管直径为50-200 μ m。
[0007]优选的，所述的毛细管依次穿过循环变温槽中三个恒温槽的顺序为温96°C恒温槽、60°C恒温槽、72°C恒温槽，最后从72V恒温槽出来。
[0008]本实用新型的有益效果在于:提供一种毛细管基因扩增系统，结构简单，使用方便，由于毛细管在不同的温度箱中穿过，毛细管中的乳液在其中缓慢变温，提高了聚合酶的活性，而且温度均匀，运行效率高，仪器体积小，整个仪器制作成本低，维修方便。
【附图说明】
[0009]图1为本实用新型的结构示意图。
[0010]其中:1.扩增混合液槽；2.蠕动泵；3.循环变温槽；4.毛细管；5.激光诱导荧光检测器；31.96°C恒温槽；32.60°C恒温槽；33.72°C恒温槽。
【具体实施方式】
[0011]下面结合附图对本实用新型做进一步的说明。
[0012]如图1所示:本实用新型提供了一种毛细管基因扩增系统，其特征在于:包括扩增混合液槽1、蠕动泵2、循环变温槽3、毛细管4、激光诱导荧光检测器5，所述的扩增混合液槽I通过管道与蠕动泵2入口相连，蠕动泵2出口与毛细管4相连，所述的毛细管4呈环形排布在循环变温槽3中，所述的循环变温槽3包括三个恒温槽，即96°C恒温槽31，60°C恒温槽32，72°C恒温槽33，所述的毛细管4穿过循环变温槽3后与激光诱导荧光检测器5相连。
[0013]优选的，所述的毛细管3直径为50-200 μ m。
[0014]优选的，所述的毛细管3依次穿过循环变温槽中三个恒温槽的顺序为温96°C恒温槽31、60°C恒温槽32、72°C恒温槽33，最后从72°C恒温槽33出来。
[0015]本实用新型的工作原理为:扩增混合液槽I中储存处理好的样品乳液，蠕动泵2将扩增混合液槽I中处理好的样品乳液泵到毛细管4中，乳液在蠕动泵2的驱动下，进入到循环变温槽3，DNA模板在960C时解聚，60°C引物退火复性，72°C在DNA聚合酶作用下的引物延伸，完成PRC扩增。由于毛细管本身直径的限制，样品在毛细管4中以小液滴的形式存在，每个液滴内最多只存在一条DNA链，保证了扩增的完整性，毛细管4在循环变温槽3循环30-50个循环，完成了 DNA链扩增，然后经过激光诱导荧光检测器5的检测，完成基因诊断，指导医师用药，提供医疗建议。
[0016]本实用新型的有益效果在于:提供一种毛细管基因扩增系统，结构简单，使用方便，由于毛细管在不同的温度箱中穿过，毛细管中的乳液在其中缓慢变温，提高了聚合酶的活性，而且温度均匀，运行效率高，仪器体积小，整个仪器制作成本低，维修方便，一个检测周期只需要30-40分钟。
【主权项】
1.一种毛细管基因扩增系统，其特征在于:包括扩增混合液槽、蠕动泵、循环变温槽、毛细管、激光诱导荧光检测器，所述的扩增混合液槽通过管道与蠕动泵入口相连，蠕动泵出口与毛细管相连，所述的毛细管呈环形排布在循环变温槽中，所述的循环变温槽包括三个恒温槽，所述的毛细管穿过循环变温槽后与激光诱导荧光检测器相连。
2.根据权利要求1所述的一种毛细管基因扩增系统，其特征在于:所述的毛细管直径为 50-200 μ m。
3.根据权利要求1或2所述的一种毛细管基因扩增系统，其特征在于:所述的毛细管依次穿过循环变温槽中三个恒温槽的顺序为温96 V恒温槽、60 V恒温槽、72 °C恒温槽，最后从72 °C恒温槽出来。
【专利摘要】一种毛细管基因扩增系统，其特征在于：包括扩增混合液槽、蠕动泵、循环变温槽、毛细管、激光诱导荧光检测器，所述的扩增混合液槽通过管道与蠕动泵入口相连，蠕动泵出口与毛细管相连，所述的毛细管呈环形排布在循环变温槽中，所述的循环变温槽包括三个恒温槽，所述的毛细管穿过循环变温槽后与激光诱导荧光检测器相连。本实用新型的有益效果在于：提供一种毛细管基因扩增系统，结构简单，使用方便，由于毛细管在不同的温度箱中穿过，毛细管中的乳液在其中缓慢变温，提高了聚合酶的活性，而且温度均匀，运行效率高，仪器体积小，整个仪器制作成本低，维修方便，一个检测周期只需要30-40分钟。
【IPC分类】C12M1-00, C12M1-34
【公开号】CN204369865
【申请号】CN201420809974
【发明人】孙喜元
【申请人】苏州承美生物科技有限公司
【公开日】2015年6月3日
【申请日】2014年12月20日