专利名称：含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明b酰肼衍生物及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种罗丹明B酰肼衍生物及其制备方法与应用，尤其涉及一种含1，2，4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物及其制备方法与其作为Cu2+荧光探针的应用。
背景技术：
罗丹明B具有摩尔消光系数大，量子产率高，背景干扰小等优点，修饰后可作为金属离子荧光探针进行研究，并用作标记生物分子。近年来，利用罗丹明B荧光探针用于检测活体细胞中金属离子的报道越来越多。铜在人体中为含量仅次于铁和锌的微量元素，铜参与铜蓝蛋白、超氧化物歧化酶(S0D)、赖氨酸氧化酶、谷光氨肽还原酶、细胞色素C氧化酶等十几种酶的构成，并促进铁的 吸收和运输，间接参与造血功能，所以铜在人体新陈代谢中起非常重要作用。缺铜时容易引起缺铜性贫血、动脉粥样硬化、毛发脱色症、免疫力低下、婴儿发育迟缓、遗传性缺铜一Menkes综合征以及Wilson症等病症。人体中铜过量会引起溶血性贫血、肝肾功能损伤；铜在脑组织沉积，引起帕金氏综合症等脑组织病变。而且一般肿瘤细胞中具有较高含量的铜离子，促进肿瘤细胞血管生成，导致肿瘤增值。所以细胞内铜离子检测与定位对于阐明其生理病理作用极其重要。
发明内容
本发明目的是提供一种含1，2，4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物及其制备方法，同时利用其作为Cu2+荧光探针具有非常高的选择性和灵敏度，并用于活细胞中检测铜离子的存在。本发明所述的含1，2，4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物，结构式如式(I)所
示
权利要求
1.一种含1，2，4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物，结构式如式(I)所示
2.权利要求I所述含1，2，4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物的合成方法，是由罗丹明B酰肼(I)与对甲氧基苯甲酰基异硫氰酸酯(2 )在乙腈中回流反应得到罗丹明B硫代双酰肼衍生物(3);将制得的罗丹明B硫代双酰肼衍生物的氯仿溶液与5±0. I当量的85wt%水合肼在回流条件下，反应1±0. I小时，经柱层析纯化得到式(I)所示含1，2，4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物(4);反应式如下
3.权利要求I所述含1，2，4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物作为活细胞内Cu2+荧光探针的应用。
4.如权利要求3所述的应用，其特征在于所述活细胞为HeLa细胞。
全文摘要
本发明公开了一种含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物的制备方法及其作为Cu2+荧光探针的应用。该罗丹明B酰肼衍生物的结构式如式(I)。本发明所涉及的含1,2,4-三唑结构单元的罗丹明B酰肼衍生物本身不发荧光，在EtOH/HEPES(20mM,pH 7.2,1:1,体积比)缓冲溶液中与Cu2+作用后，溶液颜色由无色变为紫色，在十七种金属离子中可实现对Cu2+比色识别，且呈现荧光“打开”效应，可同时作为Cu2+比色和荧光探针，具有非常好的选择性，其对Cu2+的荧光检测限为3.4×10-8M，而且1,2,4-三唑—罗丹明B酰肼衍生物可以用于HeLa细胞内Cu2+荧光成像和定位检测。
文档编号C09K11/07GK102746313SQ20121020486
公开日2012年10月24日 申请日期2012年6月20日 优先权日2012年6月20日
发明者刘为永, 张尚立, 苗俊英, 赵宝祥 申请人:山东大学