基于糖基化合物胶体金纳米探针及其制备方法和应用

本发明涉及生物医药，尤其涉及基于糖基化合物胶体金纳米探针及其制备方法和应用。

背景技术：

1、随着现代工业技术的快速发展，由于来源不同，提取的多糖的结构和分子量也会存在差异，其中灵芝多糖为含有以β-(1-3)-d-葡聚糖为主和多种单糖残基及多元糖苷键水溶性多糖，具有抗氧化、抗凝血和抗病毒等多种生物活性。目前，检测灵芝多糖的方法有气相色谱法、高效液相色谱-柱前衍生化紫外检测法或蒸发光法、离子色谱法等。

2、传统制备碳基荧光探针一般要进行前期预处理，后期纯化处理等，使其制备过程时间成本高，制备步骤繁琐，且获得的探针荧光效率不高。以及由于对前驱体杂原子选择不佳或多配体混合使其活性位点对被分析物选择性较低，存在诸多问题，传统检测方法时间长，操作比较复杂，特异性和准确性较差。

3、糖基化合物作为胶体金纳米材料家族中一位崭新的成员，以其突出的荧光特性、低毒和较高生物相容性等特性，使其在细胞标记、活体成像、医疗诊断和环境分析检测等领域得到较为广泛的应用，它的出现有望在现代材料科学领域引发一轮革命，应用前景非常广阔。而目前并没有将其应用于胶体金纳米探针领域，至制备得到检测多糖物质的糖基化合物胶体金纳米探针。

技术实现思路

1、本发明为解决上述问题，而提供基于糖基化合物胶体金纳米探针及其制备方法和应用。

2、本发明基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备方法，将糖基化合物溶于胶体金溶液中，超声处理后，添加3，5-二硝基水杨酸，置于高温反应釜中反应；冷却、离心，保留上清液，得到所述基于糖基化合物胶体金纳米探针。

3、进一步地，所述的糖基化合物为甜菊糖、低聚木糖、蔗糖、海藻糖或葡萄糖。

4、进一步地，所述的糖基化合物浓度为0.5～1.5g/l。

5、进一步地，具体包括如下步骤：

6、s1、称取质量百分含量为1％柠檬酸三钠溶液和质量百分含量为0.01％氯化金四水合物溶液，混匀，得到a液；其中，质量百分含量为1％柠檬酸三钠溶液与质量百分含量为0.01％氯化金四水合物溶液的体积比为(0.1～0.5)：(8～12)；

7、s2、将nabh4溶于k2aucl4溶液，形成混合液，向混合液中加入3,5-二硝基水杨酸试剂，混匀，得到b液；

8、s3、将所述a液和b液混合后在室温下超声，形成分散均匀的胶体金溶液，即得前驱液；

9、s4、再加入浓度为0.5～1.5g/l的糖基化合物与步骤s3所得的前驱液混合后，在50～80℃条件下超声反应6～10h；其中，所述的糖基化合物与前驱液的体积比为(8～12)：(16～24)；

10、s5、反应后，冷却至室温，离心，取上清液，即制得基于糖基化合物胶体金纳米探针(afp-aunps)。

11、进一步地，步骤s2中所述的3,5-二硝基水杨酸试剂，是按如下方法制备的：

12、1)、将苯酚溶解于质量百分含量为10％naoh溶液中，加入nahso3，得到a液；其中，苯酚、质量百分含量为10％naoh溶液与nahso3的质量体积比为(0.8～1.2)g：(80～150)ml：(0.8～1.2)g；

13、2)、称取酒石酸钾钠，加到质量百分含量为10％ naoh溶液中，再加入质量百分含量为1％的3,5-二硝基水杨酸溶液，得到b液；其中，酒石酸钾钠、质量百分含量为10％naoh溶液与质量百分含量为1％的3,5-二硝基水杨酸溶液的质量体积比为(240～260)g：(280～320)ml：(800～1000)ml；

14、3)、将所述a、b液混合，避光放置7-10天，得到3,5-二硝基水杨酸试剂。

15、进一步地，步骤s1中所述的质量百分含量为1％柠檬酸三钠溶液与质量百分含量为0.01％氯化金四水合物溶液的体积比为(0.1～0.5)：10。

16、进一步地，步骤s2中所述的3,5-二硝基水杨酸试剂与混合液的体积比为1:1。

17、本发明所述的制备方法制备得到的基于糖基化合物胶体金纳米探针。

18、本发明的基于糖基化合物胶体金纳米探针在检测多糖方面的应用。

19、进一步地，所述的多糖为灵芝多糖

20、与现有技术相比，本发明能够取得如下有益效果：

21、(1)本发明基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备工艺简单、操作条件温和；

22、(2)采用简单的一步溶剂热合成法合成处理含氮有机化合物直接制备均匀分散且光学性能优异的糖基化合物胶体金纳米探针afp-aunps，通过荧光光谱测试，由于碳基材料糖基化合物中有阳离子的嵌入，增加了其糖基化合物活性位点，使其荧光性能及物化性能发生了很大程度的改变，扩展了糖基化合物胶体金荧光材料在环境分析检测中的应用范围；

23、(3)合成的afp-aunps表面糖基化合物与阳离子的相互作用强，可实现阳离子的特异性检测，并且灵敏度较高。

技术特征：

1.基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备方法，其特征在于，将糖基化合物溶于胶体金溶液中，超声处理后，添加3，5-二硝基水杨酸，置于高温反应釜中反应；冷却、离心，保留上清液，得到所述基于糖基化合物胶体金纳米探针。

2.根据权利要求1所述的基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备方法，其特征在于，所述的糖基化合物的糖基为甜菊糖、低聚木糖、蔗糖、海藻糖或葡萄糖。

3.根据权利要求1或2所述的基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备方法，其特征在于，所述的糖基化合物浓度为0.5～1.5g/l。

4.根据权利要求1所述的基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备方法，其特征在于，具体包括如下步骤：

5.根据权利要求1或4所述的基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述的3,5-二硝基水杨酸试剂，是按如下方法制备的：

6.根据权利要求4所述的基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述的质量百分含量为1％柠檬酸三钠溶液与质量百分含量为0.01％氯化金四水合物溶液的体积比为(0.1～0.5)：10。

7.根据权利要求4所述的基于糖基化合物胶体金纳米探针的制备方法，其特征在于，步骤s2中所述的3,5-二硝基水杨酸试剂与混合液的体积比为1:1。

8.权利要求1-7任一项所述的制备方法制备得到的基于糖基化合物胶体金纳米探针。

9.权利要求8所述的基于糖基化合物胶体金纳米探针在检测多糖方面的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述的多糖为灵芝多糖。

技术总结
基于糖基化合物胶体金纳米探针及其制备方法和应用，本发明涉及生物医药技术领域，尤其涉及一种糖基化合物胶体金纳米探针及其制备方法和应用。将糖基化合物溶于胶体金溶液中，超声，添加3，5‑二硝基水杨酸，置于高温反应釜中反应；冷却、离心，保留上清液，得到所述糖基化合物胶体金纳米探针。该方法制备工艺简单、操作条件温和，有效提高了电荷聚集，增加了纳米金胶体颗粒分散性，通过联合3，5‑二硝基水杨酸(DNS)与还原性糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物，有利于扩展糖基化合物碳基材料的物化特性及应用范围。该探针联合3，5‑二硝基水杨酸合成糖基化合物对羰基具有较强的特异性作用，实现了糖苷键高灵敏低浓度检测。

技术研发人员：刘俊梅,李爽,刘铮,张羽,李沁烊,姜欣彤,金哲顺,潘蓉,袁梦佳
受保护的技术使用者：吉林农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/3/24