本发明属于电化学发光、荧光传感,具体涉及一种基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器及其制备与应用。
背景技术:
1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解,而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
2、碱性磷酸酶(alp)是一种非特异性的磷酸单酯酶,对细胞内含磷酸酯分子的去磷酸化起着关键作用。alp的异常表达与许多疾病密切相关,包括骨损伤、肝功能障碍、卵巢癌、乳腺癌等多种疾病。因此,它被普遍认为是临床诊断的重要生物标志物。
3、目前常见的alp检测策略主要有荧光法、比色法、电化学法、化学发光法和光电化学法等。现有的alp检测策略多为单信号传感模式,灵敏度、选择性及响应时间等方面存在着一定缺陷,影响了alp的检测效率和准确性。双模态传感相比于单一信号传感具有更好的选择性和更高的灵敏度,其中,比率型的双模态生物传感器具有更高的准确性和检测灵敏度,然而,受限于传感原理及方法的不足,现阶段报道的双模态生物传感器在不添加其他活性试剂和不构筑复杂传感界面的情况下,很难在单次分析中实现比率信号输出,进而影响生物标志物的检测效率和精准性。
技术实现思路
1、为了解决现有技术的不足,本发明的目的是提供一种基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器及其制备与应用。本发明首先提供了同时具有荧光和电化学发光性质zntcpp/mxene复合纳米材料,基于zntcpp/mxene复合纳米材料制备得到的荧光/电化学发光比率传感器能够对碱性磷酸酶(alp)进行荧光/电化学发光(fl/ecl)比率检测,灵敏度高、选择性高、制备简单。
2、为了实现上述目的,本发明是通过如下的技术方案来实现:
3、第一方面,本发明提供了一种zntcpp/mxene复合纳米材料的制备方法,包括以下步骤:
4、将锌卟啉、ti3c2tx mxene溶于dmf进行反应,产物清洗烘干后即得zntcpp/mxene复合纳米材料。
5、本发明通过溶剂热法合成zntcpp/mxene复合纳米材料,zntcpp同时具有荧光和电化学发光性质,在与ti3c2tx/mxene复合后,可以利用alp水解aa2p产生的po43-进攻ti位点,使zntcpp脱落,发生配体交换,产生fl/ecl信号变化,用于alp的高灵敏度传感。其次,本发明通过zntcpp和ti3c2tx制备纳米复合物,具有较薄的二维片层结构,mxene的引入弥补了zntcpp导电性差的缺点,有效提高了zntcpp的ecl性质。同时,将fl信号与ecl信号进行比率计算,从而降低该材料对alp的检测限,提高传感准确性。
6、第二方面,本发明提供了一种zntcpp/mxene复合纳米材料,通过如第一方面所述的制备方法获得。
7、第三方面,本发明提供了一种基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器的制备方法,包括以下步骤:将如第二方面所述的zntcpp/mxene复合纳米材料分散于乙醇后将分散液滴加在导电电极上,再滴加四辛基溴化铵,干燥即得。
8、本发明以导电电极负载zntcpp/mxene作为荧光/电化学发光比率传感器,来实现电化学发光和荧光的双模态比率检测。
9、第四方面,本发明提供了一种基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器,通过如第三方面所述的制备方法获得。
10、第五方面,本发明提供了如第二方面所述的zntcpp/mxene复合纳米材料和/或如第四方面所述的基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器在po43-刺激响应行为研究及双模态比率检测中的应用。
11、第六方面,本发明提供了一种po43-刺激响应行为研究及双模态比率检测的方法,包括以下步骤:
12、将如第四方面所述的基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器浸入待测样品中,反应后进行荧光、电化学发光检测,建立归一化荧光强度和归一化电化学发光强度的比值与po43-浓度的关系,从而检测po43-浓度。
13、第七方面,本发明提供了一种alp浓度的检测方法,包括以下步骤:
14、将如第四方面所述的基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器浸入含有alp和磷酸单酯的待测样品中,反应后进行荧光、电化学发光检测,建立归一化的荧光强度和归一化的电化学发光强度的比值与alp浓度的关系,从而检测alp浓度。
15、由于上述zntcpp/mxene与alp水解aa2p产生的po43-相互作用,导致荧光信号增强以及电化学发光信号减弱,实现alp的fl/ecl双模态比率生物传感,该检测方法具有简便、实用性高的优点,线性范围为0.1~50mu/ml、检测限低至0.0083mu/ml。
16、上述本发明的一种或多种技术方案取得的有益效果如下:
17、(1)本发明提供的zntcpp/mxene的合成过程简单,用时少,zntcpp具有良好的fl、ecl性质,mxene与之复合能够提高其导电性,从而可以实现fl/ecl比率检测,可以被用来检测po43-和alp浓度,灵敏度高、可信度高。
18、(2)本发明的zntcpp/mxene纳米复合物是一种便捷、灵敏,适用于检测alp的工具,在荧光及电化学发光传感检测领域具有广阔的应用前景。
19、(3)本发明的检测方法操作简单、具有普适性,易于规模化生产。且zntcpp/mxene粉末易于保存,荧光/电化学发光比率传感器可按需随时制备。
1.一种zntcpp/mxene复合纳米材料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,锌卟啉和ti3c2txmxene的质量比为1:0.9-1.1。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,反应温度为145-155℃,反应时间为3-5h。
4.一种zntcpp/mxene复合纳米材料,其特征在于,通过如权利要求1-3任一项所述的制备方法获得。
5.一种基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:将如权利要求4所述的zntcpp/mxene复合纳米材料分散于乙醇后将分散液滴加在导电电极上,再滴加四辛基溴化铵,干燥即得。
6.一种基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器,其特征在于,通过如权利要求5所述的制备方法获得。
7.如权利要求4所述的zntcpp/mxene复合纳米材料和/或如权利要求6所述的基于zntcpp/mxene的荧光/电化学发光比率传感器在po43-刺激响应行为研究及双模态比率检测中的应用。
8.一种po43-刺激响应行为研究及双模态比率检测的方法,其特征在于,包括以下步骤:
9.一种alp浓度的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
10.如权利要求9所述的检测方法,其特征在于,所述磷酸单酯包括l-抗坏血酸2-磷酸盐倍半镁盐水合物。