一种杜仲的冻干方法
【专利摘要】本发明涉及一种杜仲的冻干方法，取鲜杜仲，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冻干，制备的杜仲多种活性成分含量高，临床疗效好。
【专利说明】一种杜仲的冻干方法发明领域
[0001]本发明涉及药品制法，特别涉及一种杜仲的冻干方法，属医药【技术领域】。
【背景技术】
[0002]杜仲为杜仲科植物杜仲的干燥树皮，具有补肝肾、强筋骨的功效，是药食两用的中药材，富含绿原酸等苯丙素类，京尼平苷酸、京尼平苷、桃皮珊瑚苷等环烯醚萜类，松脂醇二葡萄糖苷等木脂素类，芦丁等黄酮类等多种有效成分。
[0003]《中国药典》(2010版一部)收载的杜仲的干燥为:4?6月剥取，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，晒干。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是提供一种杜仲的冻干方法，该方法干燥的杜仲，多种有效成分含量高，临床疗效更好。
[0005]本发明的目的是这样实现的:
一种杜仲的冻干方法，其特征在于:取鲜杜仲，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冻干。
[0006]本发明的一种杜仲的冻干方法，其特征在于:冻干是冷冻至_20°C以下，抽真空至干燥室压力30Pa以下，加热升华，升华的温度控制在40°C以下，解析阶段的温度应控制在45°C以下，至干。
[0007]至此完成了本发明，制备的杜仲多种活性成分含量高，治疗高血压效果更好。
[0008]下面通过试验例进一步说明本发明的有益之处，试验例旨在进一步说明本发明的有益之处，而非对本发明的限制。
[0009]将同一批鲜杜仲，刮去粗皮，按以下方法进行加工。
[0010]I)晒干杜仲堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，晒干。
[0011]2)冻干杜仲冷冻至-20°c以下，抽真空至干燥室压力30Pa以下，加热升华，升华的温度控制在40°C以下，解析阶段的温度应控制在45°C以下，至干。
[0012]3)堆置冻干杜仲堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冷冻至_20°C以下，抽真空至干燥室压力30Pa以下，加热升华，升华的温度控制在40°C以下，解析温度控制在45°C以下，至干。
[0013]一、不同方法干燥的杜仲活性成分比较
1、主要仪器与设备
LC-20A高效液相色谱仪；UV-5300PC型紫外可见分光光度计；AG135型十万分之一电子天平，冻干机。
[0014]2、试剂:对照品绿原酸、京尼平苷、芦丁、咖啡酸均购自中国药品生物制品检定所，桃皮珊瑚苷、松脂醇二葡萄糖苷、京尼平苷酸均由山东中医药大学提供。乙腈(色谱纯，美国Tedia公司)；磷酸(色谱纯，天津市科密欧化学试剂开发中心)。
[0015]3、试验方法
准确称取各样品适量，用60%的乙醇浸润12h后，再用超声波辅助提取lh，过滤至10mL容量瓶中，重复2次，合并滤液，用60%的乙醇定容至刻度，滤液过45 μ m滤膜，提取液备用。
[0016]I)高效液相色谱法测定绿原酸色谱条件:色谱柱Dimamonsil C18(250mmX 4.6mm, 5 μ m);流动相甲醇:水=35:75 ;流速1.0mL/min检测波长240nm ;进样体积 20 μ L ;温度 25 °C。
[0017]2)高效液相色谱法测定京尼平苷酸色谱条件:色谱柱Dimamonsil C 18 ( 250mm X 4.6, 5 μ m);流速1.0 mL/min ;检测波长240nm ;进样体积20 μ L ;温度25°C ; 二元高压梯度洗脱时间程序=Omin时，甲醇:0.001%磷酸溶液=22:78 ；15 min时，甲醇:0.001%磷酸溶液=30:70 ；35 min时，甲醇:0.001%磷酸溶液=22:78 ；40min时，采样结束。
[0018]3)硝酸铝一亚硝酸钠比色法测定总黄酮准确吸取适量提取液于10 mL容量瓶中，加含5%NaN02水溶液0.3 mL,摇匀，静置6min ;再加含10%A1 (NO3) 3水溶液0.3 mL,摇勻，静置6min ;再加含l.0mol/L NaOH水溶液4mL，摇匀，静置15min ;用蒸馏水定容至刻度。在400-600nm波长范围内扫描,确定最大吸收波长为506nm。
[0019]4)对二甲氨基苯甲醛显色法测定桃皮珊瑚苷准确吸取适量提取液于10 mL比色管中，依次加入95%的乙醇2.5 mL, Epstahl试剂1.7 mL, 20%的盐酸0.5 mL,再用蒸懼水定容至刻度。置于水浴锅中在75°C下加热20min进行显色，取出冷却1min后，以试剂空白为参比，在500-700nm波长范围内扫描，确定最大吸收波长为596nm。
[0020]4、标准曲线
依据上述方法分别对绿原酸、京尼平苷酸、总黄酮和桃皮珊瑚苷标样进行测定，绘制标准曲线。
[0021]5、结果与分析:结果如表I。
[0022]表I不同方法干燥杜仲中有效成分含量结果(％)
^Pa.活性成分._绿原酸京尼平苷酸总黄酮桃皮珊_苷
哂干杜仲__0.164__3.937__0.551__2.364
I干杜仲0.157 ~ 3.8460.5332.109
著置冻干杜仲丨 0.2205.531L 0734.111
由表I看出，鲜杜仲堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冻干多种有效成分含量高，进而可知临床疗效好。
[0023]三、不同方法干燥的杜仲降压效果比较
1、材料
1.1主要仪器大鼠电脑血压心率仪，四导生理记录仪。
[0024]1.2动物自发性高血压大鼠(SHR)，全部为雄性10周龄，体重(223.5±23)g，血压均大于20kPa。
[0025]1.3制备药液分别取各样品切成丝，加水提取3次，加水量分别为药材重量的
10、6、6倍，提取时间为1.5、1、lh，合并提取液，浓缩并定容至每毫升相当于原药材0.25g，即得。
[0026]2、方法和结果
2.1动物造模取大鼠饲养在恒温观察室内，室温(21±2)°C，人工照明12 h*d-l，自由饮水，喂以21%高蛋白饲料，I周后测定血压，高于22.7kPa者为自发性高血压大鼠，将其随机分为以上各杜仲样品组和高血压组，每组8只。各用药组分别以1.12g*kg-l灌胃，每日2次，连续1d ;正常大鼠8只，与高血压组以同量蒸馏水灌胃。
[0027]2.2血压、心率的测定大鼠末次给药后2h，采用无创伤性间接测压仪测定清醒状态下大鼠的尾动脉血压、心率。正式测量前每天测压训练I次，共5d，待大鼠适应环境、血压稳定后，开始实验观察。测压前将大鼠放入(37±1)°C电热恒温箱内预热15min后，测定大鼠尾动脉收缩压(SBP)及心率(HR)，重复测量3次。不同方法干燥杜仲对SHR血压、心率的影响，结果见表2。
[0028]表2 不同方法干燥的杜仲降压效果
ImI剂量 |SBP(kPa)|SR(次.miif1)
?常对照组———元707±0.68^354±9.64綠 ~
為血压组一-丑.93 ±1.65486 ±15.16
丽干杜仲 _1.12?^4±0.83Χ386±15.72綠 ~
系干杜仲一 1.12 T?.07±1.104.23±14.65
羅置冻干杜仲 |?.12|?6.82±1.141^ |359±12.41醫由表2可见，不同方法干燥的杜仲对实验动物的血压和心率有不同程度的影响，其中堆置冻干杜仲的降压作用最优。
【具体实施方式】
[0029]实施例1
取鲜杜仲，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冷冻至-20°C，抽真空至干燥室压力30Pa,加热升华，升华的温度控制在40°C以下，解析温度控制在45°C以下，至干。
[0030]实施例2
取鲜杜仲，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冷冻至-28°C，抽真空至干燥室压力50Pa,加热升华，升华的温度控制在50°C，解析温度控制在45°C以下，至干。
[0031]实施例3
取鲜杜仲，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冷冻至-28°C，抽真空至干燥室压力50Pa,加热升华，升华的温度控制在50°C，解析温度控制在45°C以下，至干。
[0032]实施例4
取鲜杜仲，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冷冻至_25°C，抽真空至干燥室压力60Pa，启动加热开关，促进升华，升华的温度应控制在40°C，至升华结束，解析温度控制在45°C以下，至干。
[0033]实施例5
取鲜杜仲，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冷冻至_32°C，抽真空至干燥室压力60Pa，启动加热开关，促进升华，升华的温度应控制在40°C，至升华结束，解析温度控制在45°C以下，至干。
[0034]实施例6
取鲜杜仲，刮去粗皮，，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冷冻至-32°C，抽真空至干燥室压力60Pa，启动加热开关，促进升华，升华的温度应控制在40°C，至升华结束，解析温度控制
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ο 1-1 6 I κ/^λ /~?τ -Tl.
【权利要求】
1.一种杜仲的冻干方法，其特征在于:取鲜杜仲，刮去粗皮，堆置“发汗”至内皮呈紫褐色，冻干。
2.根据权利要求1的一种杜仲的冻干方法，其特征在于:冻干是冷冻至_20°C以下，抽真空至干燥室压力30Pa以下，加热升华，升华的温度控制在40°C以下，解析阶段的温度应控制在45°C以下，至干。
【文档编号】F26B5/06GK104142047SQ201410418478
【公开日】2014年11月12日 申请日期:2014年8月25日 优先权日:2014年8月25日
【发明者】孙志芳, 赵颖, 王丽, 刘金磊 申请人:济南康众医药科技开发有限公司