专利名称：利用嗜盐菌进行盐渍化土壤改良的微生物治理方法
技术领域：
本发明涉及盐渍化土壤的生物治理技术，尤其是一种针对新疆地区盐渍化农田的 利用嗜盐菌进行盐渍化土壤改良的微生物治理方法。
背景技术：
盐渍土是干旱、半干旱地区重要的土壤资源。随着耕地面积的急剧减少，盐渍土 的开发利用日益受到重视。新疆是我国盐渍土分布面积最大、类型最全、范围最广的省区， 除了绝大多数土地和沙漠区之外，所有其它地区几乎都有盐渍化土地分布。据目前资料显 示，盐碱地的改良措施主要有以下几个方面(1)植被改良；(2)使用土壤改良剂；(3)物理 改良。目前在新疆一些地区仍然采取大水洗盐的传统方法，但是这种只灌不排的方式只是 暂时达到局部土壤脱盐的目的，不能从根本上解决土壤盐渍化的问题；另外通过有机肥进 行盐渍化土壤的改良，是目前改良效果比较明显的一种措施，但也会产生一些负面效应，可 能会由于施用有机肥的种类、放用量、配比等导致土壤养分失衡。当前许多国家致力于盐生 植物的引种栽培，耐盐和抗盐植物的生物改良等，在国内主要趋向于研究盐生植物的生态、 盐生植物的组织特性、以及野生盐生植物的开发利用和新品种的开发等。生物修复作为土 壤改良的一种有效方法，同传统的土壤化学、物理处理技术相比，具有经济、高效、无二次污 染、适用范围广等优点。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于提供一种经济实用、高效、适用范围广、可有效改 善盐渍化土地上植被的生长环境的利用嗜盐菌进行盐渍化土壤改良的微生物治理方法。本发明特征在于包括以下步骤(1)菌液的培养播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在36. 5°C 37. 5°C温度下摇瓶 培养11. 5 12. 5h后，制备成一级种子液，再按0. 95 1. 05%的量吸取一级种子液接入牛 肉膏液体培养基中，在36. 5°C 37. 5°C温度下摇瓶培养11. 5 12. 5h的条件下培养制成 二级种子液，最后将二级种子液按0. 95 1. 05%的量接入预先配制的牛肉膏液体培养基 中，在40. 5°C 41. 5°C温度下190 210r/min摇瓶培养42. 5 43. 5h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4750 4850r/min离心机运转9. 5 10. 5min后，弃上清， 沉淀后用与原菌液0. 5 2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中菌悬液的按照1. 45 1. 55L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 24. 5 25. 5d，将上述菌悬液 直接用注射器按照14. 5 15. 5ml/穴的量灌根。上述菌悬液的制备中将培养好的菌液于4750 4850r/min离心机运转9. 5 10. 5min后，弃上清，沉淀后优选分别用与原菌液等体积、2倍体积和1/2倍体积的无菌水悬 起备用。本发明所提供的利用嗜盐菌进行盐渍化土壤改良的微生物治理方法主要是针对盐渍化土壤进行改良，在新疆地区可以适用于棉花、小麦、大豆等农作物种植土地的改良。与现有技术相比，本发明利用嗜盐菌的生物学特性，在盐渍化土壤中施用嗜盐菌， 氧化分解土壤部分盐分，可有效降低土壤盐渍化程度。在作物根部施用嗜盐菌，通过改变 土壤的微生物环境而提高作物的耐盐性，达到改良盐渍土的目标。本发明通过改变土壤微 环境而提高植物的抗逆性，可有效改善盐渍化土地上植被的生长环境，是一种经济实用、高 效、适用范围广、不会造成二次污染的微生物治理方法。
具体实施例方式实施例1 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养棉花播种前3天，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在36. 5°C温度下摇瓶 培养11. 5后，制备成一级种子液，再按0. 95 %的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养 基中，在36. 5°C温度下摇瓶培养11. 5h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液 按0. 95%的量接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在40. 5°C温度下 190r/min摇瓶培养42. 5h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4750r/min离心机运转9. 5min后，弃上清，沉淀后用与原 菌液等体积的无菌水悬起备用；(3)施菌棉花播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中备用的菌悬液按照 1. 45L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 24. 5d，将上述菌悬液直接用注射器按照14. 5ml/穴的量灌根。实施例2 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养棉花播种前3天，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在37°C温度下摇瓶培 养12h后，制备成一级种子液，再按1 %的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基中，在 37°C温度下摇瓶培养12h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按的量接 入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在41°C温度下200r/min摇瓶培养 43h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4800r/min离心机运转IOmin后，弃上清，沉淀后分别用与 原菌液2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌棉花播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中备用的菌悬液按照1. 5L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后25d，将上述菌悬液直接用注射器按照15ml/穴的量灌根。实施例3 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养棉花播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在36. 8°C温度下摇瓶培 养11. 8h后，制备成一级种子液，再按0. 98%的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基 中，在36. 8°C温度下摇瓶培养11. 8h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液 按0. 97%的量接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在40. 6°C温度下 195r/min摇瓶培养42. 8h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4790r/min离心机运转9. Smin后，弃上清，沉淀后分别用 与原菌液1/2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌棉花播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中三种菌悬液的任一种按 照1. 47L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 25. 5d，将上述菌悬液直接用注射器按照14. 7ml/穴的量灌根。实施例4 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养棉花播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在37°C温度下摇瓶培养 12h后，制备成一级种子液，再按1 %的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基中，在 37°C温度下摇瓶培养12h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按0. 99%的量 接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在40. 8°C温度下198r/min摇瓶 培养43h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4810r/min离心机运转IOmin后，弃上清，沉淀后分别用与 原菌液等体积的无菌水悬起备用；(3)施菌棉花播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中三种菌悬液的任一种按 照1. 5L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 25d，将上述菌悬液直接用注射器按照15ml/穴的量灌根。实施例5 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养棉花播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在37. 3°C温度下摇瓶培 养12. 2h后，制备成一级种子液，再按1.02%的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基 中，在37. 3°C温度下摇瓶培养12. 2h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按 1. 02 %的量接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在41°C温度下205r/min摇瓶培养43. 3h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4840r/min离心机运转10. 2min后，弃上清，沉淀后分别用 与原菌液2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌棉花播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中备用的菌悬液按照 1. 52L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 25. 3d，将上述菌悬液直接用注射器按照15. 3ml/穴的量灌根。实施例6 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在37. 5°C温度下摇瓶培养 12. 5h后，制备成一级种子液，再按1. 05 %的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基 中，在37. 5°C温度下摇瓶培养12. 5h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液 按1.05%的量接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在41. 5°C温度下 210r/min摇瓶培养43. 5h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4850r/min离心机运转10. 5min后，弃上清，沉淀后分别用 与原菌液1/2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中备用的菌悬液按照 1. 55L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 25. 5d，将上述菌悬液直接用注射器按照15. 5ml/穴的量灌根。实施例7 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养播种前3天，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在36. 5°C温度下摇瓶培养 12后，制备成一级种子液，再按0. 95%的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基中，在 36. 5°C温度下摇瓶培养12h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按0. 98%的 量接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在40. 5°C温度下200r/min摇 瓶培养43h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4850r/min离心机运转9. 5min后，弃上清，沉淀后用与原 菌液等体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中备用的菌悬液按照 1. 5L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后25d， 将上 述菌悬液直接用注射器按照14. 5ml/穴的量灌根。实施例8
本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在37°C温度下摇瓶培养12. 5h后，制备成一级种子液，再按1 %的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基中，在37°C温 度下摇瓶培养12. 5h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按1. 05%的量接入 预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在40. 5°C温度下200r/min摇瓶培养 43h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4800r/min离心机运转9. 5min后，弃上清，沉淀后分别用 与原菌液1/2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中备用的菌悬液按照 1. 45L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 25d，将上述菌悬液直接用注射器按照14. 7ml/穴的量灌根。实施例9 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养大豆播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在36. 8°C温度下摇瓶培 养11. 9h后，制备成一级种子液，再按0. 99%的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基 中，在36. 8°C温度下摇瓶培养11. 9h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按 0. 96 %的量接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在41°C温度下196r/ min摇瓶培养42. 8h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4790r/min离心机运转9. 6min后，弃上清，沉淀后分别用 与原菌液2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌大豆播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中三种菌悬液的任一种按 照1. 51L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 25. ld，将上述菌悬液直接用注射器按照14. 7ml/穴的量灌根。实施例10 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在36. 9°C温度下摇瓶培养12h 后，制备成一级种子液，再按1 %的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基中，在36. 9°C 温度下摇瓶培养12h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按的量接入预 先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在40. 8°C温度下198r/min摇瓶培养 42. 5h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4800r/min离心机运转10. 3min后，弃上清，沉淀后分别用与原菌液等体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中三种菌悬液的任一种按照1. 5L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 25d，将上述菌悬液直接用注射器按照15ml/穴的量灌根。实施例11 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在37. 2°C温度下摇瓶培养 12. 2h后，制备成一级种子液，再按1. 02 %的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基 中，在37. 2°C温度下摇瓶培养12. 2h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液 按1.01%的量接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在40. 5°C温度下 210r/min摇瓶培养42. 5h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4850r/min离心机运转9. 5min后，弃上清，沉淀后分别用 与原菌液2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中备用的菌悬液按照 1. 55L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 24. 3d，将上述菌悬液直接用注射器按照15. 5ml/穴的量灌根。实施例12 本实施例包括以下步骤(1)菌液的培养播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在36. 8°C温度下摇瓶培养12h 后，制备成一级种子液，再按1.05%的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基中，在 36. 8°C温度下摇瓶培养12h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按1. 03%的 量接入预先配制的适合嗜盐菌生长的牛肉膏液体培养基中，在41. 5°C温度下200r/min摇 瓶培养42. 6h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4760r/min离心机运转10. 3min后，弃上清，沉淀后分别用 与原菌液1/2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中备用的菌悬液按照 1. 52L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后 24. 8d，将上述菌悬液直接用注射器按照14. 9ml/穴的量灌根。
权利要求
一种利用嗜盐菌进行盐渍化土壤改良的微生物治理方法，其特征在于包括以下步骤(1)菌液的培养播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，在36.5℃～37.5℃温度下摇瓶培养11.5～12.5h后，制备成一级种子液，再按0.95～1.05％的量吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基中，在36.5℃～37.5℃温度下摇瓶培养11.5～12.5h的条件下培养制成二级种子液，最后将二级种子液按0.95～1.05％的量接入预先配制的牛肉膏液体培养基中，在40.5℃～41.5℃4温度下190～210r/min摇瓶培养42.5～43.5h后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于4750～4850r/min离心机运转9.5～10.5min后，弃上清，沉淀后用与原菌液0.5～2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，即将上述(2)步骤中菌悬液的按照1.45～1.55L/kg的量浸种，过夜后进行播种；植物苗期采用灌根的方式施菌，即农作物播种后24.5～25.5d，将上述菌悬液直接用注射器按照14.5～15.5ml/穴的量灌根。
2.如权利要求1所述的利用嗜盐菌进行盐渍化土壤改良的微生物治理方法，其特征在 于所述菌悬液的制备中将培养好的菌液于4750 4850r/min离心机运转9. 5 10. 5min 后，弃上清，沉淀后分别用与原菌液等体积、2倍体积和1/2倍体积的无菌水悬起备用。
全文摘要
本发明涉及一种针对新疆地区盐渍化农田的利用嗜盐菌进行盐渍化土壤改良的微生物治理方法，包括以下步骤(1)菌液的培养播种前，挑取斜面嗜盐菌菌种接种于LB培养液中，摇瓶培养后制成一级种子液，吸取一级种子液接入牛肉膏液体培养基中，摇瓶培养培养制成二级种子液，最后将二级种子液接入牛肉膏液体培养基中，摇瓶培养后待用；(2)菌悬液的制备将上述培养好的菌液于离心机运转后弃上清，沉淀后用与原菌液0.5～2倍体积的无菌水悬起备用；(3)施菌农作物播种时，采用拌种的方式施菌，植物苗期采用灌根的方式施菌。本发明可有效改善盐渍化土地上植被的生长环境，经济实用、高效、适用范围广、不会造成二次污染。
文档编号B09C1/00GK101844148SQ20101011101
公开日2010年9月29日 申请日期2010年2月11日 优先权日2010年2月11日
发明者向本春, 庄丽, 张伟, 李俊华, 李鲁华, 王俊刚, 胡文革 申请人:石河子大学