本发明属于微生物
技术领域：
和水体除臭
技术领域：
，尤其是一种城市河流除臭的新方法。
背景技术：
：为了去除城市河流臭味，对发臭水体的治理主要包括物理法、化学法、生物法和河道曝气法等。物理方法主要包括截污、调水、清淤等水利工程；化学方法如化学试剂除藻，加入铁盐促进磷的沉淀；生物方法主要有人工湿地处理、水生植物恢复、生物修复等。以上工艺都有投资成本高，处理效果见效慢，处理效果受季节性影响较大的缺点。通过检索，尚未发现与本发明专利申请相关的专利公开文献。技术实现要素：本发明目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种城市河流除臭的新方法，该方法操作过程简单，安全性高，不会对操作人员造成影响，大量使用也不会对环境造成影响，不会造成二次污染，更加环保，使用方便而且生产成本更低，具有较好的经济价值和生态价值。本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种城市河流除臭的新方法，所述方法包括如下步骤：⑴取出部分城市河流发臭水体，其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水，分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体，分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株；⑵验证所分离菌株是否有臭味产生，水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢、氨气所致；而氨氮是指水中以游离氨和铵离子形式存在的氮，因此只要降低水体中氨氮含量，降低游离氨、氨气浓度，就能控制臭味产生；⑶通过调节不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生。而且，具体步骤如下：⑴筛选分离菌株：对菌株的筛选和分离通过在固体平板上培养来实现；选取ypd和lb固体培养基进行菌株的筛选和分离，将工业废水发臭水体和生活污水发臭水体分别稀释10-1和10-2两个梯度，以不稀释为对照，取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上，之后分别在30℃和37℃下培养48h；将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养，得到单菌落后，在相应液体培养基中培养后，用甘油冻藏于-80℃冰箱，待用；⑵产硫化氢验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液；无菌条件下，分别接种于产h2s验证斜面培养基上，为确保结果的准确性，用无菌水作为对照，无菌条件下将无菌水接种于产h2s验证斜面培养基上，恒温培养，观察菌株是否产生硫化氢气体；⑶产氨气验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液，无菌条件下，分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中，其中液体培养基置于50ml三角瓶中，在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸，相应转速培养24～48h，用无菌水作为对照组，观察红色石蕊试纸是否变蓝，如果变蓝，则证明分离所得菌株产生氨气；⑷抑制菌株生长，控制臭味产生：降低水体中氨氮含量，降低游离氨、氨气浓度：无菌条件下，将分离得到的菌株在相应的液体培养基中进行培养24～48h，制备菌悬液，取1×106个/ml菌分别转接入ph不同、添加不同防腐剂的液体培养基中，150r/min，37℃恒温培养至稳定期，之后测定其吸光度值和氨氮含量，观察红色石蕊试纸变色情况，得到抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生的不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段，即能够对城市河流进行除臭。而且，所述步骤⑷中不同ph为为3、4、5、6、7、8；所述不同防腐剂及其添加终质量浓度分别为0.25％苯甲酸钠，0.05％脱氢乙酸钠，3％乳酸钠。而且，所述步骤⑷中不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段为：当调节发臭水体的ph≦4时，添加3种防腐剂中的一种或两种以上；当调节发臭水体的ph＝5时，添加终质量浓度为0.25％的苯甲酸钠；或者，当调节发臭水体的ph≦3时，添加3种防腐剂中的一种或两种以上；当调节发臭水体的ph≦4时，添加终质量浓度为0.25％的苯甲酸钠和/或终质量浓度为0.05％的脱氢乙酸钠；当调节发臭水体的ph≦5时，添加终质量浓度为0.25％的苯甲酸钠。而且，所述步骤⑵中h2s验证斜面培养基的制备方法如下：每100ml中加入酚红0.0025g，硫酸亚铁0.02g，胰蛋白胨1g，酵母提取物0.5g，氯化钠1g，琼脂1.2g。而且，所述步骤⑷中ph不同的液体培养基的制备方法如下：分别调节液体培养基ph为3、4、5、6、7、8，并将其置于高压灭菌锅中于115℃灭菌20min。而且，所述添加不同防腐剂的液体培养基的制备方法如下：①0.25％苯甲酸钠液体培养基溶液：在无菌的条件下，先称取苯甲酸钠0.25g，并将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中，摇匀，之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌，置于4℃冰箱保存备用；②0.05％脱氢乙酸钠液体培养基溶液：在无菌条件下，先称取脱氢乙酸钠0.05g，再将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中，摇匀，之后用无菌滤膜器进行过滤并除菌，置于4℃冰箱保存备用；③3％乳酸钠液体培养基溶液：无菌条件下，用移液枪吸取3ml质量浓度为60％的乳酸钠溶液，并将其加入100ml已灭菌的液体培养基中，摇匀，之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌，置于4℃的冰箱中来保存备用。而且，所述步骤⑷中取1×106个/ml菌分别转接入ph不同、添加不同防腐剂的液体培养基中的ph不同、添加不同防腐剂的的液体培养基为：6种不同ph值分别与3种不同防腐剂组合，制备得到的液体培养基。而且，所述步骤⑴中从工业废水发臭水体中筛选分离得到5株菌，从生活污水发自水体中分离得到4株菌；所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生；所述步骤⑶中分离所得菌株的红色石蕊试纸均变蓝，则证明有氨气产生。而且，所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生，说明所述方法所取城市河流水样中无产硫化氢气体的菌株；所述步骤⑶中分离所得菌株均有氨气产生，说明所述方法所取城市河流水样中有产氨气的菌株，说明城市河流发臭水体中均含有产生氨气的菌株。本发明取得的优点和积极效果为：本发明通过筛选城市河流中产臭菌株，从根本上解决城市河流恶臭问题，解决现有的城市河流发臭水体对城市居民及城市环境的危害，该方法通过调节ph值、添加防腐剂及两者结合的综合手段抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，从而消除臭味的产生。本发明操作过程简单，安全性高，不会对操作人员造成影响，大量使用也不会对环境造成影响，不会造成二次污染，更加环保，使用方便而且生产成本更低，具有较好的经济价值和生态价值。具体实施方式下面详细叙述本发明的实施例，需要说明的是，本实施例是叙述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。本发明中所使用的原料，如无特殊说明，均为常规的市售产品；本发明中所使用的方法，如无特殊说明，均为本领域的常规方法。实施例1一种城市河流除臭的新方法，所述方法包括如下步骤：⑴取出部分城市河流发臭水体，其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水，分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体，分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株；⑵验证所分离菌株是否有臭味产生，水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢、氨气所致；而氨氮是指水中以游离氨(nh3)和铵离子(nh4+)形式存在的氮，因此只要降低水体中氨氮含量，降低游离氨、氨气浓度，就能控制臭味产生；⑶通过调节不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生。具体地，步骤步骤如下：⑴筛选分离菌株：对菌株的筛选和分离主要通过在固体平板上培养来实现。选取ypd和lb固体培养基进行菌株的筛选和分离，将工业废水和生活污水分别稀释10-1和10-2两个梯度，以不稀释为对照，取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上，之后分别在30℃和37℃下培养48h。将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养，得到单菌落后，在相应液体培养基中培养后，用甘油冻藏于-80℃冰箱，待用。结果显示，从工业废水中筛选分离得到5株菌，从生活污水中分离得到4株菌。⑵产硫化氢验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液；无菌条件下，分别接种于产h2s验证斜面培养基上，为确保结果的准确性，用无菌水作为对照，无菌条件下将无菌水接种于产h2s验证斜面培养基上，恒温培养。分离所得菌株均无硫化氢气体产生。⑶产氨气验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液，无菌条件下，分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中，其中液体培养基置于50ml三角瓶中，在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸，相应转速培养24～48h，用无菌水作为对照组，观察实验结果为分离所得菌株红色石蕊试纸均变蓝，有氨气产生。⑷抑制菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生：无菌条件下，将分离得到的菌株分别在lb液体培养基中培养24～48h，制备菌悬液，在各菌株生长到对数期时分别取1×106个/ml菌体转接入ph为3，4，5，6，7，8的lb液体培养基中，设定转速为150r/min，37℃恒温培养至稳定期，之后测定其吸光度值和氨氮含量，观察红色石蕊试纸变色情况，得到抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生的不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段，即能够对城市河流进行除臭。具体的参数条件及实验结果见表1、表2和表3。实施例2一种城市河流除臭的新方法，所述方法包括如下步骤：⑴取出部分城市河流发臭水体，其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水，分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体，分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株；⑵验证所分离菌株是否有臭味产生，水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢、氨气所致；而氨氮是指水中以游离氨(nh3)和铵离子(nh4+)形式存在的氮，因此只要降低水体中氨氮含量，降低游离氨、氨气浓度，就能控制臭味产生；⑶通过调节不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生。具体地，步骤步骤如下：⑴筛选分离菌株：对菌株的筛选和分离主要通过在固体平板上培养来实现。选取ypd和lb固体培养基进行菌株的筛选和分离，将工业废水和生活污水分别稀释10-1和10-2两个梯度，以不稀释为对照，取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上，之后分别在30℃和37℃下培养48h。将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养，得到单菌落后，在相应液体培养基中培养后，用甘油冻藏于-80℃冰箱，待用。结果显示，从工业废水中筛选分离得到5株菌，从生活污水中分离得到4株菌。⑵产硫化氢验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液；无菌条件下，分别接种于产h2s验证斜面培养基上，为确保结果的准确性，用无菌水作为对照，无菌条件下将无菌水接种于产h2s验证斜面培养基上，恒温培养。分离所得菌株均无硫化氢气体产生。⑶产氨气验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液，无菌条件下，分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中，其中液体培养基置于50ml三角瓶中，在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸，相应转速培养24～48h，用无菌水作为对照组，观察实验结果为分离所得菌株红色石蕊试纸均变蓝，有氨气产生。⑷抑制菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生：无菌条件下，将分离得到的菌株分别在lb液体培养基中培养24～48h，制备菌悬液，在各菌株生长到对数期时分别取1×106个/ml菌体转接入已制备好的未添加防腐剂、添加0.25％苯甲酸钠、0.05％脱氢乙酸钠和3％乳酸钠的lb液体培养基中。转速为150r/min，37℃恒温培养至稳定期，之后测定其吸光度值和氨氮含量，观察红色石蕊试纸变色情况，得到抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生的不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段，即能够对城市河流进行除臭。具体的参数条件及实验结果见表1、表2和表3。实施例3一种城市河流除臭的新方法，所述方法包括如下步骤：⑴取出部分城市河流发臭水体，其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水，分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体，分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株；⑵验证所分离菌株是否有臭味产生，水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢、氨气所致；而氨氮是指水中以游离氨(nh3)和铵离子(nh4+)形式存在的氮，因此只要降低水体中氨氮含量，降低游离氨、氨气浓度，就能控制臭味产生；⑶通过调节不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生。具体地，步骤步骤如下：⑴筛选分离菌株：对菌株的筛选和分离主要通过在固体平板上培养来实现。选取ypd和lb固体培养基进行菌株的筛选和分离，将工业废水和生活污水分别稀释10-1和10-2两个梯度，以不稀释为对照，取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上，之后分别在30℃和37℃下培养48h。将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养，得到单菌落后，在相应液体培养基中培养后，用甘油冻藏于-80℃冰箱，待用。结果显示，从工业废水中筛选分离得到5株菌，从生活污水中分离得到4株菌。⑵产硫化氢验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液；无菌条件下，分别接种于产h2s验证斜面培养基上，为确保结果的准确性，用无菌水作为对照，无菌条件下将无菌水接种于产h2s验证斜面培养基上，恒温培养。分离所得菌株均无硫化氢气体产生。⑶产氨气验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液，无菌条件下，分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中，其中液体培养基置于50ml三角瓶中，在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸，相应转速培养24～48h，用无菌水作为对照组，观察实验结果为分离所得菌株红色石蕊试纸均变蓝，有氨气产生。⑷抑制菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生：无菌条件下，将分离得到的菌株分别在lb液体培养基中培养24～48h，制备菌悬液，在各菌株生长到对数期时分别取1×106个/ml菌体转接入已制备好的ph为3且分别添加0.25％苯甲酸钠，0.05％脱氢乙酸钠和3％乳酸钠；ph为4且分别添加0.25％苯甲酸钠，0.05％脱氢乙酸钠和3％乳酸钠；ph为5且分别添加0.25％苯甲酸钠，0.05％脱氢乙酸钠和3％乳酸钠；ph为6且分别添加0.25％苯甲酸钠，0.05％脱氢乙酸钠和3％乳酸钠；ph为7且分别添加0.25％苯甲酸钠，0.05％脱氢乙酸钠和3％乳酸钠；ph为8且分别添加0.25％苯甲酸钠，0.05％脱氢乙酸钠和3％乳酸钠的lb液体培养基中。转速为150r/min，37℃恒温培养至稳定期，之后测定其吸光度值和氨氮含量，观察红色石蕊试纸变色情况，得到抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生的不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段，即能够对城市河流进行除臭。具体的参数条件及实验结果见表1、表2和表3。测定本发明方法各实施例吸光度值，氨氮含量，观察红色石蕊试纸变色情况结果如下：表1本发明方法各实施例吸光度值表从表1中可以看出，ph≦4时添加3种防腐剂都能抑制城市河流菌株生长，ph＝5时，添加0.25％苯甲酸钠能抑制城市河流菌株生长。表2本发明方法各实施例氨氮含量表(mg/l)从表2中可以看出，ph≦4时添加3种防腐剂都能有效降低城市河流氨氮含量，ph＝5时，添加0.25％苯甲酸钠能有效降低城市河流氨氮含量。表3本发明方法各实施例红色石蕊变色情况表注：“+”表示红色石蕊试纸变蓝，“—”表示结果红色石蕊试纸无变色。从表2中可以看出，ph≦3时添加3种防腐剂红色石蕊试纸均不变色，ph≦4时，添加0.25％苯甲酸钠和0.05％脱氢乙酸钠的红色石蕊试纸不变色，ph≦5时添加0.25％苯甲酸钠的红色石蕊试纸不变色。无氨气溢出，能有效消除城市河流臭味。实施例4一种城市河流除臭的新方法，所述方法包括如下步骤：⑴取出部分城市河流发臭水体，其中城市河流包括排入的工业废水和生活污水，分别取出部分工业废水发臭水体和生活污水发臭水体，分别从工业废水和生活污水发臭水体中筛选分离菌株；⑵验证所分离菌株是否有臭味产生，水体发臭包括含硫、氮有机物分解溢出的硫化氢、氨气所致；而氨氮是指水中以游离氨和铵离子形式存在的氮，因此只要降低水体中氨氮含量，降低游离氨、氨气浓度，就能控制臭味产生；⑶通过调节不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生。较优地，具体步骤如下：⑴筛选分离菌株：对菌株的筛选和分离通过在固体平板上培养来实现；选取ypd和lb固体培养基进行菌株的筛选和分离，将工业废水发臭水体和生活污水发臭水体分别稀释10-1和10-2两个梯度，以不稀释为对照，取200ul样液分别均匀涂布到两种培养基上，之后分别在30℃和37℃下培养48h；将得到的不同菌株分别在对应的培养基上传代培养，得到单菌落后，在相应液体培养基中培养后，用甘油冻藏于-80℃冰箱，待用；⑵产硫化氢验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液；无菌条件下，分别接种于产h2s验证斜面培养基上，为确保结果的准确性，用无菌水作为对照，无菌条件下将无菌水接种于产h2s验证斜面培养基上，恒温培养，观察菌株是否产生硫化氢气体；⑶产氨气验证：将分离得到的菌株接种到相应的液体培养基中，按相应条件培养24～48h制备菌悬液，无菌条件下，分别取1×106个/ml菌转接入相应液体培养基中，其中液体培养基置于50ml三角瓶中，在三角瓶的封瓶膜中放入湿润的红色石蕊试纸，相应转速培养24～48h，用无菌水作为对照组，观察红色石蕊试纸是否变蓝，如果变蓝，则证明分离所得菌株产生氨气；⑷抑制菌株生长，控制臭味产生：降低水体中氨氮含量，降低游离氨、氨气浓度：无菌条件下，将分离得到的菌株在相应的液体培养基中进行培养24～48h，制备菌悬液，取1×106个/ml菌分别转接入ph不同、添加不同防腐剂的液体培养基中，150r/min，37℃恒温培养至稳定期，之后测定其吸光度值和氨氮含量，观察红色石蕊试纸变色情况，得到抑制产臭菌株生长，降低氨氮含量，控制臭味产生的不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段，即能够对城市河流进行除臭。较优地，所述步骤⑷中不同ph为为3、4、5、6、7、8；所述不同防腐剂及其添加终质量浓度分别为0.25％苯甲酸钠，0.05％脱氢乙酸钠，3％乳酸钠。较优地，所述步骤⑷中不同ph、添加不同防腐剂及两者结合的手段为：当调节发臭水体的ph≦4时，添加3种防腐剂中的一种或两种以上；当调节发臭水体的ph＝5时，添加终质量浓度为0.25％的苯甲酸钠；较优地，当调节发臭水体的ph≦3时，添加3种防腐剂中的一种或两种以上；当调节发臭水体的ph≦4时，添加终质量浓度为0.25％的苯甲酸钠和/或终质量浓度为0.05％的脱氢乙酸钠；当调节发臭水体的ph≦5时，添加终质量浓度为0.25％的苯甲酸钠。较优地，所述步骤⑵中h2s验证斜面培养基的制备方法如下：每100ml中加入酚红0.0025g，硫酸亚铁0.02g，胰蛋白胨1g，酵母提取物0.5g，氯化钠1g，琼脂1.2g。较优地，所述步骤⑷中ph不同的液体培养基的制备方法如下：可以使用安全性高，低成本的酸或碱分别调节液体培养基ph为3、4、5、6、7、8，并将其置于高压灭菌锅中于115℃灭菌20min。较优地，所述添加不同防腐剂的液体培养基的制备方法如下：①0.25％苯甲酸钠液体培养基溶液：在无菌的条件下，先称取苯甲酸钠0.25g，并将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中，摇匀，之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌，置于4℃冰箱保存备用；②0.05％脱氢乙酸钠液体培养基溶液：在无菌条件下，先称取脱氢乙酸钠0.05g，再将其溶于100ml已灭菌的液体培养基中，摇匀，之后用无菌滤膜器进行过滤并除菌，置于4℃冰箱保存备用；③3％乳酸钠液体培养基溶液：无菌条件下，用移液枪吸取3ml质量浓度为60％的乳酸钠溶液，并将其加入100ml已灭菌的液体培养基中，摇匀，之后用无菌滤膜器进行过滤和除菌，置于4℃的冰箱中来保存备用。较优地，所述步骤⑷中取1×106个/ml菌分别转接入ph不同、添加不同防腐剂的液体培养基中的ph不同、添加不同防腐剂的的液体培养基为：6种不同ph值分别与3种不同防腐剂组合，制备得到的液体培养基。较优地，所述步骤⑴中从工业废水发臭水体中筛选分离得到5株菌，从生活污水发自水体中分离得到4株菌；所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生；所述步骤⑶中分离所得菌株的红色石蕊试纸均变蓝，则证明有氨气产生。较优地，所述步骤⑵中分离所得菌株均无硫化氢气体产生，说明所述方法所取城市河流水样中无产硫化氢气体的菌株；所述步骤⑶中分离所得菌株均有氨气产生，说明所述方法所取城市河流水样中有产氨气的菌株，说明城市河流发臭水体中均含有产生氨气的菌株。综合看来，本发明方法能抑制城市河流菌株生长，降低氨氮含量，控制氨气产生，有效消除城市河流臭味。且本发明方法成本低，操作方法简单，不会对环境造成危害，安全环保。表4本发明方法中使用的各防腐剂的价格成本表种类单价(g/元)苯甲酸钠0.32脱氢乙酸钠0.9860％乳酸钠0.3。尽管为说明目的公开了本发明的实施例，但是本领域的技术人员可以理解：在不脱离本发明及所附权利要求的精神和范围内，各种替换、变化和修改都是可能的，因此，本发明的范围不局限于实施例和所公开的内容。当前第1页12