用于消毒的组合物和方法与流程

背景技术：

1、对生物制剂的高商业需求已导致制药公司将重点放在最大化生产力和产品质量上，同时控制与制造相关的成本。这种针对提高效率的推动使得亲和色谱上升到最前沿，因为亲和色谱提供了高度特异性结合，并减少了从粗混合物中纯化目的分析物所需的步骤总数。当与传统的纯化技术相比时，亲和色谱树脂提供了改进的收率和纯度标准。

2、任何生物过程色谱应用(包括亲和色谱)都需要高度控制污染物和杂质去除。这些污染物包括但不限于蛋白质、碳水化合物、脂质、脂多糖(例如，内毒素)、脂蛋白、核酸和/或微生物物种。大分子杂质，例如蛋白质、碳水化合物、脂质、核酸等，通常通过以下方式被处理掉：在色谱操作的洗涤和洗脱阶段期间通过利用各种分子间作用力并且将目标分析物与杂质分离。然而，微生物污染由于其能够在与现代制造相关的延长的树脂寿命期间增殖而对任何色谱操作造成了特殊的威胁。事实上，在将色谱步骤集成到生物反应器中用于连续捕获的过程中，微生物污染造成甚至更高的风险。

3、传统上，色谱树脂净化方法包括用氢氧化钠和/或γ辐照处理。然而，亲和树脂(例如，与基于肽的配体缀合的树脂)在暴露于氢氧化钠或γ辐照时不那么稳定。

技术实现思路

1、在一个方面，本公开文本提供了用于对色谱介质和/或配套设备进行消毒或灭菌的方法，其包括使所述色谱介质和/或配套设备与包含羧酸和约20％己二醇的消毒或灭菌溶液接触，其中所述羧酸的浓度为约40mm至约200mm。

2、在另一方面，本公开文本提供了用于洗脱结合至色谱介质的目标分析物的方法，其包括使所述色谱介质与包含羧酸和约20％己二醇的洗脱缓冲溶液接触，其中所述羧酸的浓度为约40mm至约200mm。

3、在另一方面，本公开文本提供了用于对色谱介质和/或配套设备进行消毒或灭菌的方法，其包括使所述色谱介质和/或配套设备与消毒或灭菌溶液接触，所述消毒或灭菌溶液包含羧酸和己二醇，使得该溶液的ph≤3.5，其中该方法在用所述溶液处理的1小时内提供了高度的细菌、孢子和/或霉菌灭活或杀灭。

4、在另一方面，本公开文本提供了用于洗脱结合至色谱介质的目标分析物的方法，其包括使所述色谱介质与洗脱缓冲溶液接触，所述洗脱缓冲溶液包含羧酸和己二醇，使得该溶液的ph≤3.5，其中所述方法提供了改进的产物收率和峰锐度。

5、在另一个方面，本公开文本提供了用于增加色谱介质的寿命的方法，其包括用包含约65mm乙酸和约20％己二醇的溶液对所述色谱介质进行消毒或灭菌，其中与用：(i)γ辐照或(ii)包含氢氧化钠的缓冲液中的至少一种对所述色谱介质进行消毒或灭菌相比，所述方法使得所述色谱介质的寿命增加至少约10％。

6、在又另一个方面，本公开文本提供了包含65mm乙酸和20％己二醇的溶液。

7、在一些实施方案中，所述羧酸具有式r1-c(＝o)-oh，其中r1是取代或未取代的c1-c12烷基、烯基或炔基。在一些实施方案中，所述羧酸是乙酸。在一些实施方案中，乙酸的浓度为40-200mm。在一些实施方案中，乙酸的浓度为65mm。在一些实施方案中，己二醇的浓度为8％-80％。在一些实施方案中，己二醇的浓度为20％。

8、在一些实施方案中，所述色谱是亲和色谱。

9、在一些实施方案中，亲和配体基于蛋白a或其任何变体。在一些实施方案中，亲和配体基于天然蛋白a。在一些实施方案中，亲和配体基于重组蛋白a。在一些实施方案中，亲和配体基于基因工程化蛋白a。在一些实施方案中，亲和配体基于人工蛋白a。

10、在一些实施方案中，亲和配体基于蛋白g或其任何变体。在一些实施方案中，亲和配体基于蛋白a/g或其任何变体。在一些实施方案中，亲和配体基于蛋白l或其任何变体。

11、在一些实施方案中，所述消毒溶液的ph在3.0与3.5之间。在一些实施方案中，所述消毒溶液的ph为3.1。

12、在一些实施方案中，所述细菌、孢子和/或霉菌灭活在用所述消毒溶液处理的40分钟内实现。

13、在一些实施方案中，所述消毒方法用于多肽的纯化。在一些实施方案中，所述多肽是抗体。在一些实施方案中，所述抗体是单克隆抗体。

14、在一些实施方案中，所述多肽是重组酶。在一些实施方案中，所述重组酶是人重组酶。在一些实施方案中，所述重组酶是溶酶体糖原特异性酶。在一些实施方案中，所述重组酶是人酶酸性α-葡糖苷酶(gaa)。在一些实施方案中，所述重组酶是

1.一种用于对色谱介质和/或配套设备进行消毒或灭菌的方法，所述方法包括使所述色谱介质和/或配套设备与包含羧酸和约20％己二醇的消毒或灭菌溶液接触，其中所述羧酸的浓度为约40mm至约200mm。

2.一种用于洗脱结合至色谱介质的目标分析物的方法，所述方法包括使所述色谱介质与包含羧酸和约20％己二醇的洗脱缓冲液接触，其中所述羧酸的浓度为约40mm至约200mm。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中所述羧酸具有式r1-c(＝o)-oh，其中r1是取代或未取代的c1-c12烷基、烯基或炔基。

4.根据权利要求3所述的方法，其中所述羧酸是乙酸。

5.根据权利要求4所述的方法，其中乙酸的浓度为约65mm。

6.一种用于对色谱介质和/或配套设备进行消毒或灭菌的方法，所述方法包括使所述色谱介质和/或配套设备与消毒或灭菌溶液接触，所述消毒或灭菌溶液包含羧酸和己二醇，使得该溶液的ph≤3.5，其中该方法在用所述溶液处理的1小时内提供了高度的细菌、孢子和/或霉菌灭活或杀灭。

7.一种用于洗脱结合至色谱介质的目标分析物的方法，所述方法包括使所述色谱介质与洗脱缓冲液接触，所述洗脱缓冲液包含羧酸和己二醇，使得该缓冲液的ph≤3.5，其中所述方法提供了改进的产物收率和峰锐度。

8.根据权利要求6或7所述的方法，其中所述羧酸具有式r1-c(＝o)-oh，其中r1是取代或未取代的c1-c12烷基、烯基或炔基。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述羧酸是乙酸。

10.根据权利要求9所述的方法，其中乙酸的浓度为约40mm至约200mm。

11.根据权利要求10所述的方法，其中乙酸的浓度为约65mm。

12.根据权利要求6-11中任一项所述的方法，其中己二醇的浓度为约8％至约80％。

13.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中己二醇的浓度为约20％。

14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其中所述色谱是亲和色谱。

15.根据权利要求14所述的方法，其中所述亲和色谱包括基于蛋白a或其任何变体的亲和配体。

16.根据权利要求15所述的方法，其中所述亲和配体基于天然蛋白a。

17.根据权利要求15所述的方法，其中所述亲和配体基于重组蛋白a。

18.根据权利要求15所述的方法，其中所述亲和配体基于基因工程化蛋白a。

19.根据权利要求15所述的方法，其中所述亲和配体基于人工蛋白a。

20.根据权利要求14所述的方法，其中所述亲和色谱包括基于蛋白g或其任何变体的亲和配体。

21.根据权利要求14所述的方法，其中所述亲和色谱包括基于蛋白a/g或其任何变体的亲和配体。

22.根据权利要求14所述的方法，其中所述亲和色谱包括基于蛋白l或其任何变体的亲和配体。

23.根据权利要求1、3-6和8-22中任一项所述的方法，其中所述消毒或灭菌溶液的ph为约3.0至约3.5。

24.根据权利要求23所述的方法，其中所述消毒或灭菌溶液的ph为约3.1。

25.根据权利要求2-5和7-22中任一项所述的方法，其中所述洗脱缓冲溶液的ph为约3.0至约3.5。

26.根据权利要求25所述的方法，其中所述洗脱缓冲溶液的ph为约3.1。

27.根据权利要求6和8-23中任一项所述的方法，其中所述细菌、孢子和/或霉菌灭活在用所述消毒或灭菌溶液处理的40分钟内实现。

28.根据权利要求1、3-6、8-24和27中任一项所述的方法，其中所述消毒方法用于包括针对多肽纯化的步骤的过程中。

29.根据权利要求2-5、7-22、25和26中任一项所述的方法，其中所述洗脱方法用于包括针对多肽纯化的步骤的过程中。

30.一种增加色谱介质的寿命的方法，所述方法包括用包含约65mm乙酸和约20％己二醇的溶液对所述色谱介质进行消毒或灭菌，其中与用：(i)γ辐照或(ii)包含氢氧化钠的缓冲液中的至少一种对所述色谱介质进行消毒或灭菌相比，所述方法使得所述色谱介质的寿命增加至少约10％。

31.根据权利要求31所述的方法，其中所述色谱介质包括以下中的至少一种：亲和树脂、基于蛋白a或其变体的树脂、基于蛋白g或其变体的树脂。

32.根据权利要求30或31所述的方法，其中所述消毒或灭菌包括在用于多肽纯化的集成连续生物制造过程内的步骤。

33.根据权利要求28、29和32中任一项所述的方法，其中所述多肽是抗体。

34.根据权利要求33所述的方法，其中所述抗体是单克隆抗体。

35.根据权利要求28-29和32中任一项所述的方法，其中所述多肽是重组酶。

36.根据权利要求35所述的方法，其中所述重组酶是人重组酶。

37.根据权利要求35所述的方法，其中所述重组酶是溶酶体糖原特异性酶。

38.根据权利要求35所述的方法，其中所述重组酶是人酶酸性α-葡糖苷酶(gaa)。

39.根据权利要求35所述的方法，其中所述重组酶是

40.一种包含65mm乙酸和20％己二醇的溶液。

41.根据权利要求40所述的溶液，其用于对色谱介质和/或配套设备进行消毒或灭菌的方法中。

42.根据权利要求40所述的溶液，其用于洗脱结合至色谱介质的目标分析物的方法中。