专利名称：妊娠中毒症的检查方法
技术领域：
本发明涉及妊娠中毒症的检查方法，更具体地是涉及可以简便且高精度地得知现在是否罹患妊娠中毒症或者是否有将来罹患妊娠中毒症的可能性的妊娠中毒症的检查方法。这里，本发明中，现在罹患有妊娠中毒症的情况和有将来罹患妊娠中毒症的可能性的情况总称为“具有妊娠中毒症罹患性”，本发明的“妊娠中毒症的检查方法”是对于该妊娠中毒症罹患性进行检查的方法。
背景技术：
妊娠中毒症是妊娠中发病的临床上重要的并发症之一，表现出高血压、蛋白尿、浮肿等，对母体和/或新生儿有不良影响。
得知妊娠中毒症罹缓性的方法，已知有例如评价母体的脂肪量，将该评价的脂肪量和妊娠中毒症罹患性进行关联的方法(例如，参照专利文献1、专利文献2)。
专利文献1中，公开了“通过将孕妇的体脂肪率或体重的变化与胎儿的成长曲线相关联进行管理而得知妊娠中毒症的可能性”的，妊娠中定期检诊所使用的超声波诊断装置(即，评价将来罹患妊娠中毒症的可能性)。
专利文献2中，公开了使用“具备了输入身高、体重等孕妇的个人数据的输入手段、及通过生物体电阻法计算身体水分量和脂肪量的计算手段、及具有与妊娠周数相应的基准值的基准设定手段、及将由计算手段得到的计算结果和基准值进行比较的比较手段、及以比较手段的比较结果判定孕妇的健康状况的判定手段的孕妇用健康管理装置”(权利要求1)，通过“判定手段是判定妊娠中毒症的发病”(权利要求3)，来判定妊娠中毒症的发病(即，评价现在罹患妊娠中毒症)。
专利文献1日本特开2002-604号公报(例如，摘要中的课题)专利文献2日本特开2003-33356号公报(例如，权利要求1、权利要求3)
发明内容
发明要解决的技术问题但是，这些专利文献1和2中公开的发明是由母体的脂肪量来评价妊娠中毒症罹患性，虽然可以看出这两者在某种程度上具有关联性，但是并非脂肪量多的母体就一定患有妊娠中毒症，也并非脂肪量少的母体就一定不患有妊娠中毒症，至今还没有可确切地评价妊娠中毒症罹患性的方法。
因此，本发明的目的在于，提供一种可以确切地评价妊娠中毒症罹患性的妊娠中毒症的检查方法。
解决问题的技术方案本发明的妊娠中毒症的检查方法(评价妊娠中毒症罹患性的方法。即，对现在罹患有妊娠中毒症和将来罹患妊娠中毒症的可能性的至少一方进行评价的方法。)的特征为，以妊娠中的哺乳类为对象，测定体液中的血管生成素-2的浓度，将通过该测定得到的血管生成素-2的浓度与健康值进行比较(以下，称为“第1本发明方法”)。
另外，第1本发明方法中包括以下(1-1)～(1-4)的方式。
(1-1)上述妊娠中毒症的检查方法中，所述健康值是6ng/ml以上。
(1-2)上述妊娠中毒症的检查方法中，所述体液是血液。
(1-3)上述妊娠中毒症的检查方法中，所述测定是以妊娠20周以后的哺乳类为对象来进行的。
(1-4)上述妊娠中毒症的检查方法中，所述测定是通过ELISA法进行的。
另外，本发明的妊娠中毒症的检查方法(评价妊娠中毒症罹患性的方法。即，对现在罹患有妊娠中毒症和将来罹患妊娠中毒症的可能性的至少一方进行评价的方法。)是以妊娠中的哺乳类为对象，具有测定体液中的血管生成素-2浓度的测定步骤，和将通过该测定得到的血管生成素-2的浓度与健康值进行比较的对比步骤，和基于该对比步骤的结果来判定有无妊娠中毒症罹患性的判定步骤的妊娠中毒症罹患的检查方法(以下，称为“第2本发明方法”)。
另外，第2本发明方法中包括以下(2-1)～(2-4)的方式。
(2-1)上述妊娠中毒症罹患的检查方法中，所述判定步骤中，在通过所述测定步骤得到的血管生成素-2的浓度比健康值低的情况下，判定为有妊娠中毒症罹患性。
(2-2)上述妊娠中毒症罹患的检查方法中，所述体液是血液。
(2-3)上述妊娠中毒症罹患的检查方法中，所述测定步骤是以妊娠20周以后的哺乳类为对象的测定步骤。
(2-4)上述妊娠中毒症罹患的检查方法中，所述测定步骤是使用了ELISA法的测定步骤。
另外，本发明提供了用于检测妊娠中毒症罹患的妊娠中毒症检测用试剂(以下，称为“本发明试剂”)。即，本发明试剂是含有测定体液中的血管生成素-2的浓度的试剂的妊娠中毒症检测用试剂。
这里，本发明试剂可以用于妊娠中毒症的检测。
图1是表示各被检者的血清试样(正常妊娠组、中毒症组、非妊娠组、分娩后1周以内组)的血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度)的图表。
图2是表示正常妊娠组(黑点)和中毒症组(白点)的血清血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度)与妊娠周数(周)的关系的图表。
图3是表示正常妊娠组的血清血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度)与平均血压的关系的图表。
图4是表示中毒症组的血清血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度)与1日尿蛋白量的关系的图表。
具体实施例方式
本发明的妊娠中毒症罹患的检测方法(本发明方法)第1本发明方法是妊娠中毒症的检查方法，其特征为，以妊娠中的哺乳类为对象，测定体液中的血管生成素-2的浓度，将通过该测定得到的血管生成素-2的浓度与健康值进行比较。
第2本发明方法是妊娠中毒症罹患的检查方法，其特征为，以妊娠中的哺乳类为对象，具有测定体液中的血管生成素-2(Angiopoietin-2)浓度的测定步骤，和将通过该测定得到的血管生成素-2的浓度与健康值进行比较的对比步骤，和基于该对比步骤的结果来判定有无妊娠中毒症罹患性的判定步骤。
作为本发明方法对象的哺乳类，只要是根据是否现在罹患妊娠中毒症或有无将来罹患妊娠中毒症的可能性，就会在体液中的血管生成素-2的浓度上产生差别的生物，则没有特别限制，例如可以例举出人、猪、马、牛、绵羊、山羊、狗、猫、兔、仓鼠、大鼠或小鼠等。
体液中的血管生成素-2的浓度测定(测定步骤)中，作为测定血管生成素-2的浓度的体液，可以例举血液和尿。优选是血液。这里，血液中的血管生成素-2的浓度，可以以血清或血浆作为测定试样进行测定。
作为本发明方法对象的“妊娠中的哺乳类”的妊娠周数，只要是在正常妊娠者和妊娠中毒症患者之间，血管生成素-2浓度能产生有意的差异的期间，则没有特别限制。对妊娠中的人的血清(体液)中的血管生成素-2的浓度进行测定时，例如，作为起始期，优选是15周以后，更优选20周以后，尤其优选25周以后；作为终止期，优选40周以前，更优选38周以前。
特别是在20周以后的早期(例如，20周以后25周以前，或20周以后30周以前等)，通过进行体液中的血管生成素-2的浓度测定(测定步骤)，可以在早期发现妊娠中毒症的罹患，或在早期得知将来罹患妊娠中毒症的可能性，因此，可以在早期对妊娠中毒症采取措施(例如，日常生活上的注意、指导、经常去医疗机构等)，有预防病症恶化的作用，也使预后的改善成为可能。
与测定(测定步骤)得到的血管生成素-2的浓度比较的健康值(对比步骤中的健康值)，其为现在没有罹患妊娠中毒症并且将来不会罹患妊娠中毒症的妊娠(没有肾脏疾病或原发性高血压等既往史的妊娠)中的体液中的血管生成素-2的浓度即可，例如，如果是现在没有罹患妊娠中毒症并且将来不会罹患妊娠中毒症的妊娠中的人的血清(体液)中的血管生成素-2的浓度的话，则是8.0ng/ml～30.0ng/ml(正常妊娠例)左右。
这里所说的妊娠中毒症，在平成16年8月9日社团法人日本产科妇女科学会(会长藤井信吾)在日产妇志56卷9号(平成16.9)第3～4页发表的《会员通知关于“妊娠高血压症候群的定义·分类”》中有所记述。具体来说，是指妊娠20周以后、分娩后12周之前发现高血压的情况，或高血压伴随蛋白尿的情况的任一情况，并且这些症候不是由偶发并发症引起的情况。通常，妊娠中毒症分为轻症和重症，轻症和重症的定义各自如下。
1.轻症(1)高血压血压符合以下的(a)或(b)的任一情况(a)收缩期血压是140mmHg以上，小于160mmHg(b)舒张期血压是90mmHg以上，小于110mmHg(2)蛋白尿原则上，以使用了24小时尿的定量法进行判定，是300mg/日以上、小于2g/日的情况。
2.重症(1)高血压血压符合以下的(c)或(d)的任一情况(c)收缩期血压是160mmHg以上的情况(d)舒张期血压是110mmHg以上的情况(2)蛋白尿原则上，以使用了24小时尿的定量法进行判定，是2g/日以上的情况。使用随时尿的情况是，进行多次新鲜尿检查时连续为3+(300mg/dl)以上的情况。
另外，本发明中所说的“妊娠中毒症的检查方法”是指，用于得知现在罹患有妊娠中毒症、将来罹患妊娠中毒症的可能性中的至少一方的方法(不言而喻，也可以是用于两方的方法)。
至于将由测定得到的血管生成素-2的浓度与健康值进行比较(对比步骤)，并且基于其比较结果，对妊娠中毒症罹患性的有无进行判定(判定步骤)的方法，只要是能够基于该比较结果，对是否(现在)罹患有妊娠中毒症或者将来罹患妊娠中毒症的可能性可以进行判定的方法即可，没有任何限定。例如，可以举例，如对是否(现在)罹患有妊娠中毒症进行判定的情况下，当临床数据(作为妊娠中毒症的代表性临床数据的尿蛋白量等)启示妊娠中毒症的罹患时体液中血管生成素-2的浓度显示妊娠中毒症时，可以判定妊娠中毒症的(现在)罹患。那么，对将来罹患妊娠中毒症的可能性进行判定的情况下，当临床数据(作为妊娠中毒症的代表性临床数据的尿蛋白量等)不启示妊娠中毒症的罹患时体液中血管生成素-2的浓度显示妊娠中毒症时，可以判定妊娠中毒症的将来的罹患可能性。
于是，根据本发明人的研究结果，现在罹患有妊娠中毒症或将来罹患妊娠中毒症的妊娠中的体液中的血管生成素-2的浓度，比现在没有罹患妊娠中毒症并且将来不会罹患妊娠中毒症的妊娠中的体液中的血管生成素-2的浓度低。因此，测定得到的血管生成素-2的浓度与健康值比较(对比步骤)，基于其比较结果判定妊娠中毒症的罹患性的有无(判定步骤)时，测定(测定步骤)得到的血管生成素-2的浓度比健康值低的情况下，可以判定为罹患有妊娠中毒症或将来罹患妊娠中毒症。
测定体液中的血管生成素-2的浓度的方法(测定步骤)，可以是能够测定体液中的血管生成素-2浓度的任何方法，没有任何限定，例如，可以使用ELISA法(固相酶免疫测定法)、免疫印迹法、放射免疫分析(RIARadioimmunoassay)法等。
尤其是使用ELISA法的话，具有如下优点，从市售有测定试剂盒或其步骤等方面来看可以容易地进行测定，不需要使用放射性物质，能够定量性评价，以少量的必要试样(例如，测定血清中的血管生成素-2的浓度时，200微升左右)就可以完成。
本发明的妊娠中毒症检测用试剂(本发明试剂)本发明试剂为，含有测定体液中的血管生成素-2的浓度的试剂的妊娠中毒症检测用试剂。
作为测定体液中的血管生成素-2(Angiopoietin-2)的浓度的试剂(也包括多种试剂的组合)，只要是可以使用该试剂来测定体液中血管生成素-2的物质即可，没有任何限定，可以是用于上述本发明方法的测定体液中血管生成素-2的浓度的方法(测定步骤)中所使用的ELISA法(固相酶免疫测定法)、免疫印迹法、放射免疫分析(RIARadioimmunoassay)法等的任意一种方法的试剂(或其组合)。
例如，通过ELISA法测定体液中血管生成素-2的浓度时，本发明试剂可以含有小鼠单克隆抗血管生成素-2抗体、重组型人源血管生成素-2、辣根过氧化物酶标记的小鼠单克隆抗血管生成素-2抗体的试剂。这里，市售的R&Dsystems公司制造的商标为“Quantikine humanAngiopoietin-2kit”的试剂盒，就含有这样的试剂。
这样的本发明试剂，在使用其进行本发明方法的测定步骤时使用，由此根据本发明方法供于检测妊娠中毒症(评价是否现在罹患有妊娠中毒症或将来罹患妊娠中毒症的可能性)。
实施例以下，通过实施例对本发明进行进一步的详细说明，但本发明不限于这些实施例。
(1)对象被检者以下的实验是以健康孕妇29名(正常妊娠组(健康组))、妊娠中毒症患者26名(中毒症组)、健康非妊娠女性20名(非妊娠组)、分娩后1周以内的女性11名(妊娠中毒症2例、健康组9例)(分娩后1周以内组)为对象进行的。这里，这些被检验对象都是没有肾脏疾病或原发性高血压症的既往史的17～41岁的日本女性。另外，健康孕妇和妊娠中毒症患者都是以妊娠周数25～40周的人为对象的。
这里，关于孕妇，将收缩期血压140mmHg以上或舒张期血压90mmHg以上、24小时蓄尿中的尿蛋白量为300mg/日以上的情况定义为妊娠中毒症，不满足该定义的孕妇为健康孕妇。
(2)血清试样的制备从上述各被检者(正常妊娠组、中毒症组、非妊娠组、分娩后1周以内组)采取各自的血液，按照常规方法制备血清。这里，对于妊娠中毒症患者(中毒症组)，使用的是妊娠中毒症发病后立即采得的血液。制备的血清在使用前一直保存于-80℃，使用时在常温下溶解后使用。
(3)血清血管生成素-2浓度的测定对于上述制备的各被检者(正常妊娠组、中毒症组、非妊娠组、分娩后1周以内组)的血清试样，测定血管生成素-2的浓度(血清Ang-2浓度)。所述的血清Ang-2浓度的测定是使用R&D systems公司的ELISA试剂盒(商标“Quantikine HumanAngiopoietin-2kit”)(以下，称为“所使用试剂盒”)，按照其说明书进行测定的。
这里，上述ELISA试剂盒(所使用试剂盒)含有下述试剂等。
(a)“血管生成素-2微孔板(Angiopoietin-2 Microplate”用对于血管生成素-2的小鼠单克隆抗体覆盖的96孔聚苯乙烯制微孔板。
(b)“血管生成素-2结合物(Angiopoietin-2 Conjugate)”含有与辣根过氧化物酶结合的、对于血管生成素-2的小鼠单克隆抗体的试剂(含有防腐剂)。
(c)“血管生成素-2标准品(Angiopoietin-2 standard)”在缓冲蛋白质中含有作为标准品的重组人源血管生成素-2的试剂(30ng/ml)(含有防腐剂)。
(d)“分析稀释剂RD1-76(Assay Diluent RD1-76)”含有兰色色素和缓冲蛋白质的测定用的稀释溶液(含有防腐剂)。
(e)“校准稀释剂RD5-5(Calibrator Diluent RD5-5)”含有缓冲蛋白质的稀释溶液(含有防腐剂)。
(f)“清洗缓冲浓缩液(Wash buffer concentrate)”缓冲化表面活性剂的25倍浓缩液(含有防腐剂)。
(g)“显色试剂A(Color Reagent A)”稳定化的过氧化氢。
(h)“显色试剂B(Color Reagent B)”稳定化的发色团(四甲基联苯胺)。
(i)“终止溶液(Stop Solution)”2N的硫酸。
(j)“板盖(Plate covers)”板盖。
(3-1)血清血管生成素-2浓度的测定按照下述步骤，测定血清血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度)。
1.在“血管生成素-2微孔板”的各孔中分别添加100μl的“分析稀释剂RD1-76”。
2.在上述孔中，分别添加50μl的血清试样(正常妊娠组、中毒症组、非妊娠组、分娩后1周以内组)或血管生成素-2标准液，用板盖覆盖板，一边在室温下水平振荡(500rpm±50rpm)一边使其反应2小时。这里，血清试样使用的是事先使用校准稀释剂RD5-5稀释5倍的试样。作为血管生成素-2的标准液，使用的是用校准稀释剂RD5-5将血管生成素-2标准品(30ng/ml)稀释制备的8种稀释系列(0pg/ml、46.9pg/ml、93.7pg/ml、187.5pg/ml、375pg/ml、750pg/ml、1500pg/ml、3000pg/ml)。
3.反应后，从各孔中吸引除去反应液，用清洗液(400μl/孔)清洗。该操作反复进行3次。清洗液使用的是，用去离子水或蒸馏水将清洗缓冲浓缩液(×25浓缩液)稀释25倍得到清洗液。清洗后，从各孔中完全除去清洗液，用纸巾除去水分。
4.在上述各孔中添加血管生成素-2结合物200μl，用板盖覆盖板，一边在室温下水平振荡(500rpm±50rpm)一边使其反应2小时。
5.反应后，同样进行上述3的操作，清洗各孔。
6.清洗后，在各孔中添加基质溶液200μl，在避光条件下，于室温反应30分钟。这里，基质溶液使用的是将显色试剂A和显色试剂B以等量混合得到的溶液(混合后15分钟以内使用)。
7.反应后，在各孔中添加终止溶液50μl。
8.添加终止溶液后，30分钟以内测定各孔中的反应液在波长450nm处的吸光度，从该值中扣除波长540nm或570nm的吸光度。这里，测定吸光度的吸光度计(测定平板读取机)，使用的是BIO-RAD公司制造的商标为“Model550 microplate reader”的产品。测定条件是，双波长(Dual wave)(450nm、570nm)，带有搅拌机(shaker on)。
对于血管生成素-2的标准液，由得到的结果制作标准曲线，由此求得各被检者的血清试样(正常妊娠组、中毒症组、非妊娠组、分娩后1周以内组)的血管生成素-2浓度。这里，各试样每个都是测定2个检测体(相同样品，duplicate)，对各自的平均值进行统计学分析(使用的是Abacus Concepts公司制的商标为“StatView”的软件)。血管生成素-2的最小平均检测浓度为8.29ng/ml，分析(assay)间、分析内的共同系数偏差各自是6.9％、10.4％以下。
(3-2)血清血管生成素-2浓度的测定结果上述的结果，得到的各被检者的血清试样(正常妊娠组、中毒症组、非妊娠组、分娩后1周以内组)的血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度)如图1所示。图1是纵轴为血清中的血清Ang-2浓度(单位ng/ml)的图表，图1中“正常妊娠”表示正常妊娠组(健康组)，图1中“子痫前期”表示中毒症组，图1中“分娩后”表示分娩后1周以内(分娩后1周以内组)，图1中“非妊娠”表示非妊娠组。
由图1可知，正常妊娠组(正常妊娠)的血清Ang-2浓度是18.9±3.2ng/ml，明显高于非妊娠组(非妊娠)的血清Ang-2浓度(2.1±0.2ng/ml)，与此相对，中毒症组(子痫前期)的血清Ang-2浓度是4.5±0.6ng/ml，明显低于正常妊娠组(正常妊娠)的血清Ang-2浓度(1 8.9±3.2ng/ml，p＜0.0001)。另外，分娩后1周以内组(分娩后)的血清Ang-2浓度与正常妊娠和妊娠中毒症没有特别的关系，是与非妊娠组相同程度的低值。
(4)血清肌酸酐、肌酸酐清除率和1日尿蛋白量的测定对于上述制备的各被检者(正常妊娠组、中毒症组、非妊娠组、分娩后1周以内组)的血清试样，按照常规方法测定血清肌酸酐、肌酸酐清除率。另外，从各被检者采集1日尿(24 小时蓄尿)，按照常规方法测定1日蛋白量。各试样每个都是测定2个检测体(相同样品)，以各自的平均值为基础进行统计学分析(使用的是Abacus Concepts公司制造的商标为“StatView”的软件)。
这里，关于血清肌酸酐、肌酸酐清除率和1日尿蛋白量的测定方法，例如可以按照Yamamoto，Y.，Maeshima，Y.，Kitayama，H.，Kitamura，S.，Takazawa，Y.，Sugiyama，H.，Yamasaki，Y.，Makino，H.肿瘤抑素肽，一种血管生成抑制剂，预防糖尿病肾病早期的肾小球肥大(Tumstatin peptide，an inhibitor of angiogenesis，prevents glomerular hypertrophy in the early stage of diabetic nephropathy.)Diabetes，53卷1831-1840页，2004年中的记载来进行。
结果如表1所示。全部值都是以平均值±标准误差表示的。肌酸酐清除率的单位是ml/分钟，1日尿蛋白量的单位是g/日。
表1
(*)P＜0.02vs.健康组N.D.没有相应的数据如表1所示，中毒症组的平均血压与正常妊娠组的平均血压相比，表现为有意的高值。对于中毒症组来说，虽然作为肾功能参数的血清肌酸酐和肌酸酐清除率是在正常范围，但1日尿蛋白量是约3g的高值。
(5)血清血管生成素-2浓度和临床参数(妊娠周数、平均血压、血清肌酸酐、肌酸酐清除率、1日尿蛋白量)的相关关系利用克鲁斯克尔-瓦利斯法(Kruskal-Wallice检验)和薛费方法(Scheffe检验)(在第一阶段使用克鲁斯克尔-瓦利斯法，在第二阶段使用薛费方法来进行分析)，对表1表示的临床参数(具体来说，年龄、妊娠期间(妊娠周数)、平均血压、血清肌酸酐、肌酸酐清除率、1日尿蛋白量)和血清血管生成素-2浓度进行组内比较研究。统计学分析中，使用Abacus Concepts公司制造的商标为“StatView”的软件，使用斯皮尔曼(Spearman)的检验算出2组间的相关。相对于正常妊娠组(健康组)的血清血管生成素-2浓度，中毒症的血清血管生成素-2浓度低是指，当p＜0.05时才被判定为在统计学上是有意的。
正常妊娠组和中毒症组的血清血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度)与妊娠周数(周)的关系如图2所示，正常妊娠组的血清Ang-2浓度与平均血压的关系如图3所示，中毒症组的血清Ang-2浓度与1日尿蛋白量的关系如图4所示。
图2为，横轴是妊娠周数(“孕龄”，单位周)，纵轴是血清血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度，单位ng/ml)的图表，由图2可知，没有看出正常妊娠组(黑点“健康孕妇”)和中毒症组(白点“子痫前期”)的血清Ang-2浓度与妊娠周数的有意的相关，但发现随着周数的增加，有减少的倾向。
图3为，横轴是平均血压(MBP，单位mmHg)，纵轴是血清血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度，单位ng/ml)的图表，由图3可知，平均血压在正常妊娠组中显示出与血清Ang-2浓度有有意的正相关(r＝0.469，p＝0.0095)，但在中毒症组中没有发现相关。
图4为，横轴是1日尿蛋白量(DU-TP、单位g/日)，纵轴是血清血管生成素-2浓度(血清Ang-2浓度，单位ng/ml)的图表，由图4所示，1日尿蛋白量在中毒症组中显示出与血清Ang-2浓度有有意的负相关(r＝0.55，p＝0.0401)。这里，对于中毒症组来说，肾功能参数(血清肌酸酐、肌酸酐清除率)与血清Ang-2浓度之间没有发现相关。
(6)考察由以上情况可知，与非妊娠女性的血清Ang-2浓度相对，正常妊娠的女性的血清Ang-2浓度(正常妊娠血清Ang-2浓度)明显升高，与此相对地，罹患有妊娠中毒症的女性的血清Ang-2浓度没有升高，而是表现出与正常血清Ang-2浓度相比极低的值。由此认为，通过测定妊娠女性的血清Ang-2浓度，并且与正常妊娠血清Ang-2浓度(健康值)对比，就可以判定出有无罹患妊娠中毒症。
另外，上述结果表示出了血清Ang-2浓度与尿蛋白量的有意的负相关，启示Ang-2参与妊娠中的肾小球滤过屏障的维持。
另外，对于判定将来罹患妊娠中毒症的可能性的情况，临床数据(尿蛋白量或平均血压等)没有启示妊娠中毒症的罹患时，通过测定血清(体液)中的血管生成素-2的浓度，与正常妊娠血清Ang-2浓度(健康值)对比，就可以对有将来罹患妊娠中毒症的可能性的情况进行判定。
如上所述，实施例中说明的本发明方法为具有下述特征的妊娠中毒症的检查方法(第1本发明方法)，其特征为，以妊娠中的哺乳类(人)为对象，测定体液(血清)中的血管生成素-2的浓度，将通过该测定得到的血管生成素-2的浓度与健康值(健康组的18.9±3.2ng/ml)进行比较。那么，测定得到的血管生成素-2的浓度低于健康值(健康组的18.9±3.2n/ml。6ng/ml以上。)的情况下(中毒症组的血清血管生成素-2的浓度为4.5±0.6ng/ml)，判定为罹患有妊娠中毒症或将来罹患妊娠中毒症。
另外，实施例中说明的本发明方法是，以妊娠中的哺乳类(人)为对象，具有测定体液(血清)中的血管生成素-2浓度的测定步骤，和将通过该测定步骤得到的血管生成素-2的浓度与健康值(健康组的18.9±3.2ng/ml)进行比较的对比步骤，和基于该对比步骤的结果来判定有无妊娠中毒症罹患性的判定步骤(判定是否罹患有妊娠中毒症或者将来能否罹患妊娠中毒症的判定步骤)的妊娠中毒症罹患的检查方法(第2本发明方法)。这里，判定步骤中，由测定步骤得到的血管生成素-2的浓度低于健康值(健康组的18.9±3.2n/ml)的情况下(中毒症组的血清血管生成素-2的浓度为4.5±0.6ng/ml)，判定为罹患有妊娠中毒症或将来罹患妊娠中毒症。
具体来说，这里，血清中的血管生成素-2的浓度小于8ng/ml的孕妇中约77％罹患有妊娠中毒症，小于6ng/ml的孕妇中约81％罹患有妊娠中毒症。因此，例如，测定孕妇的血清中的血管生成素-2的浓度后，可以将血清中的血管生成素-2的浓度小于8ng/ml的孕妇判定为罹患有妊娠中毒症或者将来罹患妊娠中毒症的可能性高，可以将血清中的血管生成素-2的浓度小于6ng/ml的孕妇判定为罹患有妊娠中毒症或者将来罹患妊娠中毒症的可能性非常高。
并且，这里，体液(血清)中的血管生成素-2的浓度测定(测定步骤)是，以妊娠20周以后的哺乳类(人)为对象的，使用了ELISA法的测定步骤。
那么，像这里使用的所使用试剂盒那样的，含有测定体液中的血管生成素-2的浓度的试剂的物质就可以作为妊娠中毒症检测用试剂来使用。
权利要求
1.妊娠中毒症的检查方法，其特征为，以妊娠中的哺乳类为对象，测定体液中的血管生成素-2的浓度，将通过该测定得到的血管生成素-2的浓度与健康值进行比较。
2.根据权利要求1记载的妊娠中毒症的检查方法，其中，所述健康值为6ng/ml以上。
3.根据权利要求1或2记载的妊娠中毒症的检查方法，其中，所述体液是血液。
4.根据权利要求1至3的任一项记载的妊娠中毒症的检查方法，其中，所述测定是以妊娠20周以后的哺乳类为对象进行的。
5.根据权利要求1至4的任一项记载的妊娠中毒症的检查方法，其中，所述测定是通过ELISA法进行的。
6.妊娠中毒症检测用试剂，其含有测定体液中的血管生成素-2的浓度的试剂。
7.将权利要求6记载的妊娠中毒症检测用试剂用于妊娠中毒症检测的方法。
全文摘要
本发明提供可以准确评价妊娠中毒症罹患性的妊娠中毒症罹患的检测方法。该方法为，以妊娠中的哺乳类为对象，具有测定体液中的血管生成素－2浓度的测定步骤，和将通过该测定得到的血管生成素－2的浓度与健康值进行比较的对比步骤，和基于该对比步骤的结果来判定有无妊娠中毒症罹患性的判定步骤。判定步骤中，在由测定步骤得到的血管生成素－2的浓度低于健康值的情况下，判定为具有妊娠中毒症罹患性。
文档编号G01N33/53GK101091117SQ20058004494
公开日2007年12月19日 申请日期2005年12月26日 优先权日2004年12月27日
发明者前岛洋平, 广越久美子, 槙野博史, 增山寿, 平松佑司 申请人:国立大学法人冈山大学