专利名称：：一种龙葵总碱制剂的质量控制方法
技术领域：
：本发明涉及一种中药提取物制剂的质量控制方法，特别是一种龙葵总碱制剂的质量控制方法。
背景技术：
：龙葵总碱是从茄科植物龙葵SolamminigrumL.的干燥地上部分经现有技术中公开的任何一种提取工艺或中药常规工艺提取精制而成，优选按申请号为200510095455.7、名称为"具有抗肿瘤作用的植物总生物碱提取物的提取工艺及制剂"的中国专利申请中所公开的提取方法提取的植物总生物碱提取物(也即龙葵总碱提取物)，龙葵总碱在提取物中的含量最好是在50%以上。龙葵总碱制剂是以龙葵总碱为原料，加入常规医用辅料按常规工艺制成制剂。现有技术中，尚未有龙葵总碱原料和制剂的质量控制方法的研究报道。
发明内容本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种可控制制剂质量、保证制剂安全的龙葵总碱制剂的质量控制方法。本发明所要解决的技术问题是通过以下的技术方案来实现的。本发明是一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂的鉴别方法如下取本品，含龙葵总碱515毫克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液;照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(23:11.5:0.10..2)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液(以0.5多聚甲醛溶于1L磷酸中为最佳，浓度可按需要调整)，105-C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明l^f要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂的含量测定方法如下照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适用性试验十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.002mol/LNa2HP04溶液(30-45:70~55)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品^F液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂的鉴别方法如下'取本品10mg,置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液。另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每iml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法(中国药典2005年版一部附录VIB)试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1:0.1)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液(以0.5多聚甲醛溶于1L磷酸中为最佳，浓度可按需要调整)，105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；制剂的其含量测定方法如下'照高效液相色谱法(中国药典2005年版一部附录VID)测定；色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品格液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试^壤齣#取本品，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明所述的龙葵总碱制剂剂型为临床上可接受的任何一种剂型，优选片剂、颗粒剂、胶囊、滴丸、软胶囊、口服液、注射液或冻干粉针剂。下面对龙葵总碱制剂的质量控制方法中的鉴别方法进行说明。鉴别项为龙葵的TLC鉴别澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品均为自制；所用试剂均为分析纯；自制硅胶G板(10X20cm);三批样品及空白溶剂均为自制。经摸索，确定正文的薄层条件，三批样品色谱中，在与澳洲茄碱、澳洲茄边碱色谱相应的位置上，均检出了相同颜色的斑点，空白溶剂无干扰。下面对龙葵总碱制剂的质量控制方法中的含量测定方法进行说明。本品为茄科植物龙葵的提取物龙葵总碱制成的制剂，其主要成分为澳洲茄碱和澳洲茄边碱，据此，我们建立了以澳洲茄碱和澳洲茄边碱为指标测定龙葵总碱的HPLC法，以控制质量。(一).仪器和试剂。仪器AgilentllOO高效液相色谱仪，MettlerAE240电子天平(十万分之一)。色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，5m，4.6mmX150咖。流动相乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)。流速lml/min。测定波长203nm。柱温30°C。试剂乙腈为色谱纯，水是重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。(二).对照品。'澳洲茄碱、澳洲茄边碱均为自制。(三).供试品溶液的制备。取本品15mg，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含1.5mg的溶液，即得。(四).空白试验。制剂处方去龙葵总碱，按浓度配制成水溶液，得空白样品，依含量测定法处理样品及色谱分析，空白样品色谱在澳洲茄碱、澳洲茄边碱相应保留时间上没有干扰峰。(五).线性关系考察。取澳洲茄碱对照品19.73mg、澳洲茄边碱对照品20.18mg，加甲醇分别制成每lml含澳洲茄碱0.79mg、澳洲茄边碱0.80mg的溶液，即得标准储备液。分别吸取0.5ml、lml、2ml、4ml、6ml、8ml标准储备液至6个10ml量瓶中,分别加甲醇至刻度。精密吸取上述溶液各10④1进样，测定，以对照品进样量(④g)为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明澳洲茄碱在0.395④g-7.900④g范围内呈良好的线性关系；澳洲茄边碱在0.40g-8.00④g范围内呈良好的线性关系。(六).精密度实验取样品供试品溶液(批号20050609)，连续重复进样5次，每次2ul，测定澳洲茄碱、澳洲茄边碱峰面积值，结果表明，仪器精密度良好。(七).稳定性实验取样品供试品溶液(批号20050609)，分别于O、1、2、4、8、16、24小时进样21，测定澳洲茄碱、澳洲茄边碱峰面积值。结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。(八).重复性实验精密称取本品适量(批号20050609)，照正文含量测定项下供试品濬液的制备方法平行制备6份，分别测定(每次进样量2④1)。结果表明，本法重复性良好。(九).加样回收率试验精密称取已知含量的注射用龙葵总碱(批号20050609)，精密加入一定量的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品溶液(0.2mg/ml)，按上述方法制备样品，进行测定，并以下述公式计算回收率。结果表明本法具有良好的回收率。本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱制剂的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5pm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为37%40%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到55X65XA,再等度洗脱48min，再以线性梯度方式经5mk回到37X40XA，再等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速0.8lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间3540min;ii理论板数按澳洲茄边碱峰(C45H73N015，对照品)计算，应不低于3000;b、对照品溶液韵制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.5lmg的溶液，即得-，c、供试品溶液的制备取本品，越含龙葵总碱1020毫克，置5ml量瓶中，加水或甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5^1，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵总碱制剂样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总碱制剂的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质犟控制方法，其特点是，所述的龙葵总碱制剂剂型为注射剂，其指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立注射用龙葵总碱的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBCi8，4.6xl50mm，5pm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60%A，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39XA，39。%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203腿;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰(C45H73N015，对照品)计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备取本品2瓶，置5ml量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5pl，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测注射用龙葵总碱样品的指纹图谱，然后将其与上述注射用龙葵蘼^釣标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。以下是以注射用龙葵总碱为例说明龙葵总碱制剂的指纹图谱控制方法(标准)的起草。龙葵总碱是从龙葵的干燥地上部分经提取精制而成，注射用龙葵总碱由龙葵总碱冻干制成冻干粉针。为全面控制该制剂质量，特对制剂指纹图谱进行了研究，对测定指纹图谱的仪器、色谱柱、流动相、检测波长等条件进行了优选，建立了液相指纹图谱测定条件并进行了方法学考察，根据10批中试样品制订了龙葵总碱制剂液相指纹图谱标准，在生产过程中可有效的指导投料、严格规范生产操作，真正确保临床用药的安全、有效、可靠，对所测得的指纹图谱的辨认，我们采用国家药典委员会提供的中药色谱指纹图谱相似度评价系统，操作方便、快捷，以其得出的相似度结果，对制剂指纹图谱进行评价，结论较为客观、准确。供试品来源。自制，批号20050418,20050423，20050427，20050430，20050516，20050523，20050602，20050609，20050616，20050623。供试品溶液的制备。由于注射用龙葵总碱在水中的溶解性较好，因此我们确定以水为溶剂，考虑到指纹图谱中微量共有成分的检测，样品需配制得浓些，最终确定制剂指纹图谱测定供试品制备方法为取本品2瓶，置5ml量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得。对照品溶液的配制。注射用龙葵总碱的主要成分是澳洲茄碱、澳洲茄边碱，经过试验研究，我们选择出峰时间居中、且峰面积适中的澳洲茄边碱作为对照品(自制)。'检测方法的建立。1、仪器、试剂和色谱条件仪器Agilent1100液相色谱；DAD检测器，G1313A全自动进样器，AgilentLC色谱工作站。试剂乙腈为色谱纯(Tediacompany),水为超纯水，其余试剂均为分析纯。色谱柱Z0RBAXEclipseXDBC)"4.6X150跳5um);检测波长203、234、254、276、310rnn;进样10ul;柱温30。C;流速lml/min。2、流动相的选择。经比较、筛选，发现A为乙腈，B为2咖ol/LNa2HP04溶液的溶剂系统以线性梯度洗脱，所得液相色谱图基线较平稳、色谱峰峰形较对称、分离度较好，并且发现如果降低乙腈的比例，以推迟出峰时间，结果峰形拖尾比较严重，经筛选，选择乙髒的最佳比例为39%。3、梯度洗脱程序的优化。经系统摸索、优化，发现如下线性梯度洗脱程序既能较全面的检出制剂中的化学成分，又可使这些成分获得较理想的分离效果A为乙腈，B为2mmol/LN&HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60XA，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39XA，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成l个样品分析程序；流速lml/min;柱温30。C;检测波长-203nm;记录时间38min。4、最佳测定波长的确定。经液相色谱一紫外光谱三维图谱的比较分析，发现203nm的制剂图谱中出峰较多，并且在203nm下，除已知成分澳洲茄碱、澳洲茄边碱等能被较好的检出外，其它成分指纹峰分离度也较好，综合考虑色谱峰的数目、基线及信号响应强弱，确定203nm为制剂指纹图谱的最佳检测波长。5、不同品牌色谱柱的比较。比较了PhenomenexlunaC18(150X4.6mm，5jim)、ZORBAXEclipseXDBC18(150X4.6mm，5um)、AgilentHOC8(150X4.6mm,,5um)的指纹图谱，发现三者在峰形和峰数上没有明显区别，但ZORBAXEclipseXDBC18(150X4.6mm，5"m)色谱峰的分离度好，峰形也比较对称。所以确定用ZORBAXEclipseXDBC18(150X4.6咖,5um)色谱柱。6、注射用龙葵总碱液相色谱指纹图谱中主要色谱峰的指认。根据与对照品的保留时间对照，可指认成品色谱图中的主要色谱峰S为澳洲茄边碱，3是澳洲茄碱，是注射用龙葵总碱的主要有效成分。在该指纹图谱测定条件下，所测得的注射用龙葵总碱指纹图谱能够反映其处方中的主要有效成分。经滞后峰检测、专属性试验、系统适应性试验、仪器精密度试验、样品稳定性试验、方法重复性试验等验证和方法学考察结果表明，用本方法测定注射用龙葵总碱的指纹图谱，样品稳定性、仪器精密度、方法重复性均较好，能够准确测定该制剂的指纹图谱。注射用龙葵总碱标准指纹图谱的获得及相似度限度的确定。1、IO批中试制剂的测定和标准指纹图谱的获得。自制，批号分别为20050418，20050423,20050427，20050430，20050516，20050523,20050602,20050&09，20050616，20050623。按正文方法制备供试品溶液，依法测定，十批成品的液相指纹图谱叠加图谱；用中药色谱指纹图谱相似度评价系统以这十批成品指纹图谱为基础获得标准指纹图谱。2、注射用龙葵总碱相似度限度的确定。以相似度计算软件生成的注射用龙葵总碱标准液相指纹图谱为参照，用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算每批成品指纹图谱的相似度，结果相似度均大于0.95(见表l)。根据大生产实际，为了有效、全面控制产品质量，规定注射用龙葵总碱指纹图谱与标准指纹图谱经相似度软件计算，相似度应不低于0.95。表i十批注射用龙葵总碱指紋图谱相似度考察结果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>本发明所要解决的技术问题还可'以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂原料龙葵总碱提取物的鉴别方法如下，(1)取本品20mg，置10ml量瓶中，加pH为3的稀盐酸使溶解，并稀释至刻度；取2ml，滴入碘化钾碘试液，出现红棕色无定形沉淀；(2)取(1)中溶液2ml，滴入碘化铋钾试液，出现橘红色沉淀；(3)取(1)中溶液2ml，滴入10%硅钨酸试液，出现灰白色无定形沉淀；(4)取本品10mg，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1:0.1)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105。C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂原料龙葵总碱提取物的含量测定方法如下，照高效液相色谱法；色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品适量，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5U1，注入液相色谱仪，测定，即得。以下对原料龙葵提取物龙葵总碱的鉴别及含量测定方法(质量标准)进行说明。TLC鉴别。鉴别项下(4)为龙葵的TLC鉴别澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品均为自制;所用试剂均为分析纯；自制硅胶G板(10X20cm);三批样品(批号分别为20050609、20050616、20050623)及空白溶剂均为自制。经摸索，确定正文的薄层条件，三批样品色谱中，在与澳洲茄碱、澳洲茄边碱色谱相应的位置上，均检出了相同颜色的斑点，空白溶剂无干扰。含量测定。本品为茄科植物龙葵的提取物，其主要成分为生物碱，根据文献报道以及试验摸索，龙葵生物碱主要以澳洲茄碱和澳洲茄边碱为主，据此，我们建立了以澳洲茄碱和澳洲茄边碱为指标测定龙葵总碱的HPLC法，以控制质量。(一).仪器和试剂仪器AgilentlWO高效液相色谱仪，MettlerAE240电子天平(十万分之—)。色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，5④m，4.6咖X150ram。流动相乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)。流速lml/min。测定波长203nm。柱温30°C。试剂乙腈为色谱纯，水是重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。(二).对照品澳洲茄碱、澳洲茄边碱均为自制。(三).供试品溶液的制备'取本品45mg,精密称定，置25ml量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，即得。(四).空白试验因本品为单味药投料，空白样品即为溶剂，取甲醇，进样，空白样品色谱在澳洲茄碱、澳洲茄边碱相应保留时间上没有干扰峰。(五).线性关系考察取澳洲茄碱对照品20.20mg、澳洲茄边碱对照品22.50mg，加甲醇分别制成每lml含澳洲茄碱0.808mg、澳洲茄边碱0.90mg的溶液，即得标准储备液。各分别吸取0.5ml、lml、2ml、4ml、6ml、8ml标准储备液至6个10ml量瓶中，分别加甲醇至刻度。精密吸取上述溶液各10④1进样，测定，以对照品进样量(④g)为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明澳洲茄碱在0.404g-8.080④g范围内呈良好的线性关系；澳洲茄边碱在0.450g-9.000g范围内呈良好的线性关系。(六).精密度实验取供试品溶液(批号20050609)，连续重复进样5次，每次2ul，测定澳洲茄碱、澳洲茄边碱峰面积值，结果表明，仪器精密度良好。(七).稳定性实验取供试品溶液(批号20050609),.分别于0、1、2、4、8、16、24小时进样21，测定澳洲茄碱、澳洲茄边碱峰面积值。结果表明，供试品溶液在24小时内稳定性良好。(八).重复性实验精密称取本品适量(批号20050609)，照供试品溶液的制备方法平行制备6份，分别测定(每次进样量2④i)。结果表明，本法重复性良好。(九).加样回收率试验精密称取已知含量的龙葵总碱(批号20050609)，置5ml量瓶中，精密加入一定量的澳洲茄碱(2.0mg/ml)、澳洲茄边碱对照品溶液(1.0mg/ml)，加甲醇稀释至刻度。进行测定(每次进样量21)，计算回收率。结果表明本法具有良好的回收率。(十).样品测定和含量限度十批龙葵总碱(批号分别为20050418、20050423、20050427、20050430、20050516、20050523、20050602、20050609、20050616、20050623)按质量标准(草案)正文含量测定项下方法测定，结果见表2。表2龙葵总械的含量測定结果<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>本品十批样品含澳洲茄碱(C45H73NOl6)和澳洲茄边碱(C45H73N015)的总量均高于80.0%，据此确定本品中龙葵总碱含量限度以澳洲茄碱和澳洲茄边碱计不得低于80.0%。本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂原料龙葵总碱提取物的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBCis，4.6xl50mm，5nm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min,然后以线性梯度方式经28min达到60%A，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序;流速lml/min;柱温30°C;检测波长203戰记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备精密称取龙葵总碱适量，加甲醇制成每lml含3.2mg的溶液，0.45^m滤膜滤过，取续滤液，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5^1,注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵总碱样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总碱的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。以下是对龙葵总碱指纹图谱控制方法(标准)的起草说明。来源。自制，批号20050418，20050423，20050427，20050430，20050516，20050523，20050602，20050609，20050616，20050623。供试品溶液的制备。精密称取龙葵总碱适量，加甲醇制成每lml含3.2mg的溶液，0.45um滤膜滤过，取续滤液，即得。对照品溶液的制备。龙葵总碱指纹图谱与注射用龙葵总碱基本一致，因此仍选择澳洲茄边碱作为对照品(自制)。检测方法及验证。因注射用龙葵总碱是以龙葵总碱为原料药制成的，因此选用与注射用龙葵总碱相同的检测方法。方法验证参见注射用龙葵总碱指纹图谱控制方法(标准)的相关说明。(六)指纹图谱及技术参数1、IO批龙葵总碱的测定精密称取IO批龙葵总碱，分别加甲醇制成每lml含3.2mg的溶液，O.45um滤膜滤过，甎縷滤液，機緣鈸翳纖标准正文中的方法进行HPLC检测，十批龙葵总碱的液,擔纹^*鈿鼸織；用中药色谱指纹图谱相似度评价系统以这十批龙葵总滅櫞纹圏镲为基磯获得标准指纹图谱。2、龙葵总碱相似度限度的确定以相似度计算软件生成的龙葵总碱标准液相指纹图谱为参照，用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算每m成品指纹图谱的相似度，结果相似度均大于0.95(见表3)。根据大生产实际，为了有效、全面控制产品质量，规定龙葵总碱指纹图谱与标准指纹图谱经相似度软件计算，相似度应不低于0.95。表3十批龙葵总碱原料药指纹图谱相似度考察结果<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂药材龙葵的含量测定方法如下，照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品粗粉10g,精密称定，置500ml烧瓶中，精密加入300ml甲醇，称定重量，水浴回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液150ml，减压浓縮至干，加1%HC120ml溶解，用1。/QNaOH调pH至3.0，上预处理过的lOgHPD100大孔树脂进行纯化，分别用i50ml水、15%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70Q^乙醇洗脱部分，减压浓縮至干，用甲醇溶解并定容至25ml，以0.45um的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。本品龙葵为茄科植物龙葵SolariumnigrumL.的干燥地上部分。夏、秋两季采割，除去杂质，切断，干燥。本品茎呈圆柱形，有分枝，长20-60cm，直径0.2-lcm;表面绿色或黄绿色，抽皱呈沟槽状；质硬而脆，断面黄白色，中空。叶对生，皱縮或破碎，完整者展平后呈卵形，长2.5-10cm，宽1.5-5.5cm;暗绿色，全缘或有不规则的波状粗齿；两面光滑或疏被短柔毛；叶柄长1-2cm。聚伞花序侧生，花4-10朵，多脱落，花萼杯状，棕褐色，花冠棕黄色。浆果球形，直径约6mm，表面棕褐色或紫黑色，皱縮。种子多数，棕色。气微，味淡。以茎叶色绿、带果者为佳。本品炮制时除去老梗及杂质，喷淋清水，切段，干燥。按干燥品计，含澳洲茄碱(C45H73N016)和澳洲茄边碱(C45H73N015)不得少于0.075%。龙葵药材质量方法(标准)是参考《中华人民共和国药典》1977年版一部154页龙葵项下有关规定，并在其基础上，增加了龙葵药材中龙葵总碱的含量测定。含量测定项下为药材中龙葵总碱的HPLC测定方法。本发明所要解决的技术问题还可以通过以下的技术方案来进一步实现。以上所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特点是，制剂药材龙葵的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵药材的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5nm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60XA，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lmi/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品^g[鑰镧备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液;的制备取本品粗粉10g，精密称定，置500ml烧瓶中，精密加入300ml甲醇，称定重量，水浴回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液150ml，减压浓縮至干，加l%HC120ml溶解浸膏，用ln/。NaOH调pH至3,上预处理过的10gHPD100大孔树脂进行纯化，分别用150ml水、15%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱部分，减压浓縮至干，甲醇溶解并定容至5ml，以0.45um的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5^1,注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵药材样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵药材的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.60。以下是关于龙葵药材指纹图谱控制方法(标准)的起草说明。来源。本品为茄科植物龙葵SolanumnigrumL.的千燥地上部分。夏、秋两季采割，除去杂质，切断，干燥。.产地吉林省安图县万宝镇大顶子村。由吉林市卓怡康纳制药有限公司提供。批号20041019，20041020，20041021，20041022，20041023，20041024,20041025,20041026，20041027,20041028。供试品溶液的制备。根据工艺研究结果，确定了药材供试品溶液的制备方法。对照品溶液的制备。仍选择澳洲茄边碱作为对照品(自制)。检测方法及验证。控制药材质量是为了获得龙葵总碱，同时为便于了解制剂一中间体一药材之间的相关性，因此选用与注射用龙葵总碱相同的检测方法。方法验证等详见注射用龙葵总碱指纹图谱控制方法(标准)起草说明。指纹图谱及技术参数。1、IO批龙葵药材的测定精密称取10批龙葵药材，按"供试品溶液的制备"方法制备，按指纹图谱标准正文中的方法进行HPLC检测，十批龙葵药材的液相指纹图谱叠加图谱;用中药色谱指纹图谱相似度评价系统以这十批龙葵药材指纹图谱为基础获得标准指纹图谱。2、龙葵药材梅似度陽度的确定以相似度计箅软件生成的龙葵药材标准液相措纹图谱为参照，用中药色谱指纹图谱相似度评价系统计算每批药材指纹图谱的相似度，结果相似度均大于0.60。根据大生产实际，为了有效、全面控制产品质量，规定龙葵药材指纹图谱与标准指纹图谱经相似度软件计算，相似度应不低于0.60。表4十批龙葵药材指纹图谱相似度考察结果<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>药材、中间体和制剂指纹图谱之间的相关性。仔细比较龙葵药材、龙葵总碱和注射用龙葵总碱的指纹图谱，计算相似度，见表5，结果表明制剂和中间体的指纹图谱基本一致，图谱中的主要特征峰(澳洲茄碱、澳洲茄边碱)可以在药材的指纹图谱中追溯；药材图谱中含有较多的杂质成分，因此提取精制工艺对中间体和制剂的指纹图谱影响很大。表s注射用龙葵总碱和药材、中间体指纹图谱的相关性<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>+:有相关蜂；±:不饞欲定是否有相奖峰，本发明龙葵总碱翻剂及其原料和原药材的质量检测控制方法，从根本上系统的保证了龙葵总碱制剂的安全性和稳定性。具体实施方式。实施例l。一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂的鉴别方法如下-取本品，含龙葵总碱10毫克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1:0.1)为展开剂，展开约15cm,取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105卩加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。实施例2。一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂的鉴别方法如下取本品，含龙葵总碱5毫克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(3:1.5:0.2)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105。C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。实施例3。一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂的鉴别方法如下取本品，含龙葵总碱15毫克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2.5:1..2:0.15)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。实施例4。一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂的鉴别方法如下取本品，含龙葵总碱15亳克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5iU，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(3:1.5:0.2)为展开剂，展开约15cm,取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。制剂的含量测定方法如下照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(30:70)为流动相，波长为203nrn;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的镧备精密称取经五氧化二磷千燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5u1，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例5。一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂的鉴别方法如下取本品，含龙葵总碱5毫克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1.2:0.1)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。制剂的含量测定方法如下-照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统避用性试验十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.002mol/LNa2HP04瘠液(45:55)为流动相，波长为203nm;理论塔機数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品瘠液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醉制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5lU，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例6。一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂的鉴别方法如下取本品10mg，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液。另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:i:0.1)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；制剂的其含量测定方法如下照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5iU,注入液相色谱仪，测定，即得。实施例7。实施例1-6中任何一项所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱制剂的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseX0BC18，4.6xl50mm，5nm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为37XA等度洗脱10min,然后以线性梯度方式经28min达到55XA，再等度洗脱4min，再以线性梯度方式经5min回到37XXA,再等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速0.8ml/min;柱温30°C;检测波长203固；记录时间35min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.5mg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备取本品，越含龙葵总碱10毫克，置5ml量瓶中，加水或甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5^1，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵总碱制剂样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总碱制剂的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。实施例8。实施例1-6中任何一项所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱制剂的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18,4.6xl50mm，5pm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为40%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到65XA，再等度洗脱8min，再以线性梯度方式经5min回到40XA，再等度洗脱至i线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间40min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含lmg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备取本品，越含龙葵总碱20毫克，置5ml量瓶中，加水或甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5^1，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法漏定祷瀏龙辨总碱制剂样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总碱制剂的标准措纹衝谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。实施例9。实施例1-8中任何一项所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，所述的龙葵总碱制剂剂型为注射剂，其指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立注射用龙葵总碱的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBCi8,4.6x150mm,5,流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39XA等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60%A，60%A等度洗脱5min,再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备取本品2瓶，置5ml量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得；d、测定法分别精密吸取对照薛溶液、供试品溶液各5|il，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测注射用龙葵总碱样品的指纹图谱，然后将其与上述注射用龙葵总碱的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。实施例10。实施例1-9中任何一项所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂原料龙葵总碱提取物的鉴别方法如下，(1)取本品20mg，置10ml量瓶中，加pH为3的稀盐酸使溶解，并稀释至刻度；取2ml，滴入碘化钾碘试液，出现红棕色无定形沉淀；(2)取(1)中溶液2ml，滴入碘化铋钾试液，出现橘红色沉淀；(3)取(1)中溶液2ml，滴入.10%硅钨酸试液，出现灰白色无定形沉淀；(4)取本品10mg，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲,解并,成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5p1，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1:0.1)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。实施例11。实施例1-10中任何一项所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂原料龙葵总碱提取物的含量测定方法如下，照高效液相色谱法；色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲菊碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品适量，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5iU，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例12。实施例1-11中任何一项所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂原料龙葵总碱提取物的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5nm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60%A，'60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备精密称取龙葵总碱适量，加甲醇制成每lml含3.2mg的溶液，0.45Mm滤膜滤过，取续滤液，即得；d、測定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5nl，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵总碱样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总碱的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。实施例13。实施例1-12中任何一项所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂药材龙葵的含量测定方法如下，照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品粗粉10g，精密称定，置500ml烧瓶中，精密加入300ml甲醇，称定重量，水浴回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液150ml，减压浓縮至干，加1%HC120ml溶解，用P/。NaOH调pH至3.0，上预处理过的10gHPD100大孔树脂进行纯化，分别用150ml水、15%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱部分，减压浓縮至干，用甲醇溶解并定容至25ml，以0.45wm的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。实施例14。实施例1-13中任何一项所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，制剂药材龙葵的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵药材的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5pm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min,然后以线性梯度方式经28min达到60XA，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度冼脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203腿;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3OO0;b、对照品溶液,制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液酌制备取本品粗粉10g，精密称定，置500ml烧瓶中，精密加入300ml甲醇，称定重量，水浴回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液150ml,减压浓縮至干，加1%HC120ml溶解浸膏，用l°/。NaOH调pH至3，上预处理过的10gHPDIOO大孔树脂进行纯化，分别用150ml水、15%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱部分，减压浓縮至干，甲醇溶解并定容至5ml，以0.45um的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5^1，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵药材样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵药材的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.60。实施例15。一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，适合片剂、颗粒剂、胶囊剂、软胶囊剂、口服液、注射液和冻干粉针剂，制剂的鉴别方法如下取本品，含龙葵总碱10毫克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1:0.1)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105。C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。制剂的含量测定方法如下照高效液相色谱法测定；'色谱条件与系统适用性试验十八垸基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.002mol/LNa2HP04溶液(35:60)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品擦镲输^#取本品，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别賴密吸取对照品溶液、供试品擦被各5W，注入液相色谱仪，测定，即得。制剂的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱制剂的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5pm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为38%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60XA，再等度洗脱6min，再以线性梯度方式经5min回到38^A，再等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速-0.9ml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间35min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷千燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.5mg的溶液，即得；e、供试品溶液的制备取本品，越含龙葵总碱15毫克，置5ml量瓶中，加水或甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5)^1，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵总碱制剂样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总碱制剂的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。制剂原料龙葵总碱提取物的鉴别方法如下，(1)取本品20mg,置10ml量瓶中，加pH为3的稀盐酸使溶解，并稀释至刻度；取2ml，滴入碘化钾碘试液，出现红棕色无定形沉淀；(2)取(1)中溶液2ml，滴入碘化铋钾试液，出现橘红色沉淀；(3)取(1)中溶液2ml，滴入10%硅钨酸试液，出现灰白色无定形沉淀；(4)取本品10mg，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5nl，'分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1:0.1)为展开剂，展开约15cm,取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105。C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。制剂原料龙葵总碱提取物的含量测定方法如下，照高效液相色谱法；色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品适量，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。制剂原料龙葵总碱提取物的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18,4.6x150mm,5nm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60%A，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备精密称取龙葵总碱适量，加甲醇制成每lml含3.2mg的溶液，0.45pm滤膜滤过，取续滤液，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5pl，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法灘定待溯龙葵总碱样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总i釣标准攢紋图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。制剂药材龙葵的含量测定方法如下，照高效液相色谱法测定；色谱条件与系统适用性试验十'八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品粗粉10g，精密称定，置500ml烧瓶中，精密加入300ml甲醇，称定重量，水浴回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液150ml，减压浓縮至干，加1%HC120ml溶解，用l%NaOH调pH至3.0，上预处理过的10gHPDIOO大孔树脂进行纯化，分别用150ml水、15%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱部分，减压浓縮至干，用甲醇溶解并定容至25ml，以0.45lim的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。制剂药材龙葵的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵药材的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5|im;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60XA，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备取本品粗粉10g，精密称定，置500ml烧瓶中，精密加入300ml甲醇，称定重量，水浴回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液150ml，减压浓縮至干，加l%HC120ml溶解浸膏，用1。/。NaOH调pH至3，上预处理过的10gHPD100大孔树脂进行纯化，分别用150ml水、15%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱部分，减压浓縮至干，甲醇溶解并定容至5ml，以0.45pm的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5^1，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵药材样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵药材的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.60。3权利要求1.一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂的鉴别方法如下取本品，含龙葵总碱5～15毫克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿∶甲醇∶水(2～3∶1～1.5∶0.1～0.2)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。2、根据权利要求1所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂的含量测定方法如下照高效液相色谱法测定；色谱皿与系衝睡用性^验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.002mol/LNa2HP04溶液(30-45:70~55)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品l^液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。3、根据权利要求2所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂的鉴别方法如下取本品10mg，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液。另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1:0.1)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105'C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；制剂的其含量测定方法如下照高效液相色谱法测定；色谮条件与系,用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的镧备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的镧备取本品，精密称定，加纯水适量，使溶解，制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5Pl，注入液相色谱仪，测定，即得。4、根据权利要求1或2或3所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱制剂的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5pm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为37%40%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到55^65^A，再等度洗脱48min,再以线性梯度方式经5min回到37X40XA，再等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速0.8~lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间3540min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.5lmg的溶液，即得；c、供试品溶液齣制备取本品，越含龙葵总碱1020毫克，置5ml量瓶中，加水或甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即得；d、測定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5pl，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵总碱制剂样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总碱制剂的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。5、根据权利要求1或2或3所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，所述的龙葵总碱制剂剂型为注射剂，其指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立注射用龙葵总碱的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5nm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60XA，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液的制备取本品2瓶，置5ml量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5^1，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测注射用龙葵总碱样品的指纹图谱，然后将其与上述注射用龙葵总碱的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。6、根据权利要求1或2或3所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂原料龙葵总碱提取物的鉴别方法如下，(1)取本品20mg,置10ml量瓶中，加pH为3的稀盐酸使溶解，并稀释至刻度；取2ml，滴入碘化钾碘试液，出现红棕色无定形沉淀；(2)取(1)中溶液2ml，滴入碘化铋钾试液，出现橘红色沉淀；(3)取(1)中溶液2ml，滴入10%硅钨酸试液，出现灰白色无定形沉淀；(4)取本品lteig，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每lml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5ul，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿甲醇水(2:1:0.1)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105"C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。7、根据权利要求1或2或3所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂原料龙葵总碱提取物的含量测定方法如下，照高效液相色谱法；色谱条件与系统适用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈:0.002moi/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品适量，加甲醇制成每lml含2mg的溶液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5W1，注入液相色谱仪，测定，即得。8、根据权利要求1或2或3所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂原料龙葵总碱提取物的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵总碱的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5jxm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39XA等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60%A，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液鹋制备精密称取龙葵总碱适量，加甲醇制成每lml含3.2mg的溶液，0.45nm滤膜滤过，取续滤液，即得；d、测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5pl，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵总碱样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵总碱的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.95。9、根据权利要求1或2或3所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂药材龙葵的含量测定方法如下，照高效液相色谱法测定；色谱条件与系^用性试验十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈0.002mol/LNa2HP04溶液(35:65)为流动相，波长为203nm;理论塔板数按澳洲茄碱峰计算不低于3000;对照品^F液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品适量，分别加甲醇制成每lml中含0.8mg的溶液，即得；供试品溶液的制备取本品粗粉10g，精密称定，置500ml烧瓶中，精密加入300ml甲醇，称定重量，水浴回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液150ml，减压浓縮至干，加1%HC120ml溶解，用1。/。NaOH调pH至3.0，上预处理过的lOgHPD100大孔树脂进行纯化，分别用150ml水、15%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱部分，减压浓縮至干，用甲醇溶解并定容至25ml，以0.45tim的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；测定法分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各5ul，注入液相色谱仪，测定，即得。10、根据权利要求1或2或3所述的一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂药材龙葵的指纹图谱控制检测方法如下，(1)建立龙葵药材的标准指纹图谱，a、色谱条件可实现线性梯度的HPLC色谱仪，含二元高压泵、自动进样系统、在线脱气、柱温箱、DAD检测器等单元；色谱柱ZobaxEclipseXDBC18，4.6xl50mm，5pm;流动相A为乙腈，B为2mmol/LNa2HP04的溶液；洗脱程序为39%A等度洗脱10min，然后以线性梯度方式经28min达到60%A，60%A等度洗脱5min，再以线性梯度方式经5min回到39%A，39%A等度洗脱至基线平稳，即完成1个样品分析程序；流速lml/min;柱温30°C;检测波长203nm;记录时间38min;理论板数按澳洲茄边碱峰计算，应不低于3000;b、对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷干燥48小时的澳洲茄边碱对照品适量，加甲醇制成每lml中含0.6mg的溶液，即得；c、供试品溶液的^备取本品粗粉10g，精密称定，置500ml烧瓶中，精密加入300ml甲醇，称定重量，水浴回流提取2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液150ml，减压浓縮至干，加1%HC120ml溶解浸膏，用l%NaOH调pH至3，上预处理过的10gHPDIOO大孔树脂进行纯化，分别用150ml水、15%乙醇、70%乙醇洗脱，收集70%乙醇洗脱部分，减压浓縮至干，甲醇溶解并定容至5ml，以0.45ym的微孔滤膜滤过，取续滤液即得；d、测定法分别精密吸取对照昂溶液、供试品溶液各5^1，注入液相色谱仪，测定；(2)以上述相同的方法测定待测龙葵药材样品的指纹图谱，然后将其与上述龙葵药材的标准指纹图谱或其对照提取物的标准指纹图谱比较，相似度不得低于0.60。全文摘要本发明是一种龙葵总碱制剂的质量控制方法，其特征在于，制剂的鉴别方法如下取本品，含龙葵总碱5～15毫克，置2ml量瓶中，加入甲醇2ml，超声处理20分钟使溶解，加甲醇至刻度，作为供试品溶液；另取澳洲茄碱、澳洲茄边碱对照品，分别加甲醇溶解并稀释成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述三种溶液各5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G板上，以氯仿∶甲醇∶水(2～3∶1～1.5∶0.1～0.2)为展开剂，展开约15cm，取出，晾干，喷以多聚甲醛的磷酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。本发明可进一步控制制剂质量，提高制剂安全。文档编号G01N30/02GK101246151SQ20071002013公开日2008年8月20日申请日期2007年2月14日优先权日2007年2月14日发明者岗丁,孟兆青,张轶伦,朱华荣,李明慧,时杨,静蔡,洁陆申请人:刘阳