专利名称：俄罗斯鲟精子密度分光光度测定方法
技术领域：
本发明属于水生动物精子密度测定方法。
背景技术：
精子密度是反映精子质量的一个重要指标，目前常用的精子密度测定方法有血球 计数板法、库尔特颗粒计数法、流式细胞仪法和分光光度法等几种，并已开发出专用的精子 密度测定仪。血球计数板法虽然结果较准确，但测定大批量样品时工作量大；库尔特颗粒计 数法、流式细胞仪法所需的仪器设备价格昂贵；而分光光度法具有操作简单、仪器价格低等 优点，利用建立的精子密度与吸光度标准曲线能够快速、精确测定精子密度，目前已在医学 和畜牧上得到应用。 因不同生物种类精液特性上的不同，在运用分光光度法测定精子密度时，均应针 对不同物种精液的特性，找出最适检测波长、有效检测密度范围等关键技术指标，建立特定 的计算公式。 俄罗斯鲟为我国重要水产养殖鱼类，在确定人工授精时最佳精卵比及超低温冷冻 保存时精液的稀释比例等重要参数时，都需要准确测定精子密度，由于血球计数法在处理 大批量样品时显得繁琐和低效，国内外又未见分光光度法测定俄罗斯鲟精子密度的相关报
发明内容
本发明需要解决的问题是提供一种俄罗斯鲟精子密度分光光度测定方法。
本发明的技术方案采用的分析设备是尤尼科UV-2802s紫外可见分光光度计或普 通可见分光光度计，其特征是检测波长为530nm，有效检测密度范围为3X106 1. 5X109/ ml，用0. 9%的NaCl溶液将俄罗斯鲟精子稀释10倍后，在530nm波长下测定吸光度值A53。， 精子密度C按公式<formula>formula see original document page 3</formula> 本发明通过不同密度下吸光度与精子密度之间的关系，建立分光光度法测定俄罗 斯鲟精子密度的方法，利用该方法对20尾俄罗斯鲟的精子密度进行了测定，并用传统血球 计数法对分光光度法的测定结果进行了检验，结果表明，误差率《8%，达到了较好的检测 效果。可为人工繁殖和精子超低温冷冻保存提供科学依据。
具体实施例方式
本发明采用的分析设备是尤尼科UV-2802s紫外可见分光光度计或普通可见分光 光度计。本发明通过对不同检测波长下精子密度与吸光度值进行回归分析，发现530nm为最适检测波长。对不同稀释比下精子密度与吸光度值进行回归分析，发现有效检测密度范 围为3X106 1.5X107ml，超出该检测范围，回归系数较低，误差率将增加。
因此，用0. 9%的NaCl溶液将俄罗斯鲟精子稀释10倍后，在530nm波长下测定吸 光度值A53。，精子密度C按如下公式
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[酬C二10^^"xlO计算。
权利要求
俄罗斯鲟精子密度分光光度测定方法，采用的分析设备是尤尼科UV-2802s紫外可见分光光度计或普通可见分光光度计，其特征是检测波长为530nm，有效检测密度范围为3×106～1.5×109/ml，用0.9％的NaCl溶液将俄罗斯鲟精子稀释10倍后，在530nm波长下测定吸光度值A530，精子密度C按公式计算。F2008102075083C0000011.tif
全文摘要
俄罗斯鲟精子密度分光光度测定方法，涉及水生动物精子密度测定方法，需要解决的技术问题是提供一种俄罗斯鲟精子密度分光光度测定方法，本发明的技术方案采用的分析设备是尤尼科UV-2802s紫外可见分光光度计或普通可见分光光度计，其特征是检测波长为530nm，有效检测密度范围为3×106～1.5×109/ml，用0.9％的NaCl溶液将俄罗斯鲟精子稀释10倍后，在530nm波长下测定吸光度值A530，精子密度C按公式计算。本发明用于俄罗斯鲟精子密度测定。
文档编号G01N15/06GK101750270SQ200810207508
公开日2010年6月23日 申请日期2008年12月22日 优先权日2008年12月22日
发明者侯俊利, 冯广朋, 刘鉴毅, 庄平, 张涛, 田美平, 章龙珍, 赵峰, 闫文罡, 黄晓荣 申请人:中国水产科学研究院东海水产研究所