专利名称：降糖类中成药和保健品中添加磺脲类化学成分的检测方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种降糖类中成药和保健品中添加磺脲类化学成分的检测方法，主要用于测定降糖类中成药和保健品中是否添加了磺脲类化学成分。
背景技术：
随着人们经济生活水平的提高和饮食习惯的改变，糖尿病的发病率呈现逐年上升 趋势。目前，治疗糖尿病的药物主要有磺脲类和双胍类等化学药物。这些药物虽能有效的 降低血糖，但往往也会产生某些不良反应。另外，市场上也有不少中成药用于治疗糖尿病， 其中不乏有疗效好、副作用低的药物，但也有一些中成药因疗效不佳却通过搀杂磺脲类、双 胍类化学药物，来欺骗患者。磺脲类降糖药(SU)是一类中等降糖作用的药物，至今已发展到了第三代。第一代 包括氯磺丙脲和甲磺丁脲，第二代包括格列本脲、格列吡嗪、格列齐特、格列喹酮，第三代有 格列美脲。对于磺脲类降糖药，应严格掌握药物的治疗适应症、禁忌证及用量，合理用药并 注意药物不良反应，而非法添加使得医生和病人失去了对药物的知情权，极有可能导致服 用过量的磺脲类化学成分，而引起低血糖，甚至导致患者死亡，对于社会危害极其巨大，影 响极其恶劣。对于中成药和保健品中降糖药物的非法添加，现有阶段检测方法主要有以下三 种1、薄层色谱法(TLC)薄层色谱法不需要昂贵的仪器，操作方便、快捷，结果形象、直观，因此，应用广泛。 但薄层色谱法分辨率低，专属性不强，而中药制剂成分复杂，干扰因素多，很容易将中成药 本身含有的化学成分误判为磺脲类化学成分，而产生假阳性。另外，薄层色谱法展开时间 长，甚至需要二次展开，不能满足快速检测的要求，且薄层鉴别受温度、湿度影响较大，试验 要求高，试验结果重现性差，因此，薄层色谱法在鉴别降糖药物的非法添加上有很大的局限 性。2、高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法分离性能高，分析速度快。但因仪器价格昂贵，色谱柱容易受污 染，分析成本高；且仪器需固定摆放，不适合流动性大的现场检测，检测环境条件要求也高， 另外，当共存成分色谱保留时间相近时容易造成错误判断，因此应用也有一定的局限性。3、液质联用法(LC-MS)液质联用技术，集液相的高分辨能力和质谱的高灵敏度、极强的定性专属特异性 于一体，具有许多优越性。具有高灵敏度，在大多数情况，样品量只需几毫克甚至几微克，具 有普遍性，在选择合适的电离方式的条件下，一般化合物都能被电离从而得到检测。但由于 仪器价格非常昂贵，一般药检机构难以购置，至今仍未得到广泛应用。因此，急需研发一种检测方法便捷，流动性好，环境条件要求低，准确度高的检测 方法。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术中的缺点，提供了一种分析成本低，专属性强，灵 敏度高，操作方便、简单而又快速的检测方法，用于检验中成药和保健品中是否非法添加了 磺脲类化学成分。
本发明提供了一种检测降糖类中成药和保健品中添加磺脲类化学成分的方法，依 次由以下步骤组成(1)取待测中成药或保健品适量，相当于一次口服量，作为供试品，研细，放入具塞 锥形瓶中加入10-30mL三氯甲烷，超声提取10-30分钟，过滤，收集滤液作为供试液A ；(2)将供试液A水浴蒸干，残渣加入0.01-0. lmol/L的NaOH溶液l-5mL充分溶解， 然后使用微孔滤膜过滤，得供试液B，用试管收集供试液B ；(3)向供试液B中滴入0.1-0. 3mL CuSO4试液，震荡，使溶液充分反应，得供试液 C，如果供试液C不出现沉淀，可判断供试品中未添加磺脲类化学成分，如果供试液C出现沉 淀，请继续下面的步骤；(4)如果步骤(3)供试液C中出现沉淀，向供试液C中滴入过量浓氨水，震荡试管 使充分反应，至溶液呈现深蓝色，作为供试液D ；(5)把步骤(4)反应得到的供试液D用微孔滤膜过滤，得供试液E，用试管收集供 试液E ；(6)向供试液E中滴入过量的浓盐酸，使得深蓝色消失，如果出现沉淀，可判断供 试品中添加磺脲类化学成分，如果未出现沉淀，可判断供试品中未添加磺脲类化学成分。上述检测方法中，所述的磺脲类化学成分包括格列本脲、格列奇特、格列吡嗪和格 列喹酮等。本发明检测方法中，磺脲类化学成分具有氨基磺酰基官能团，在碱性条件下能够 与CuSO4生成沉淀，以此来判断是否含有磺脲类化学成分。下面以格列本脲为例来进行说 明，具体反应步骤如下1、格列本脲与NaOH反应生成格列本脲钠盐
<formula>formula see original document page 4</formula>2、格列本脲钠盐与Cu2+反应生产铜盐沉淀
<formula>formula see original document page 5</formula>
3、加入过量氨水，使得Cu2+被络合，生成四氨合铜离子[Cu (NH3) 4]2+，使格列本脲铜
<formula>formula see original document page 5</formula>盐溶解<formula>formula see original document page 5</formula>
4、加入过量盐酸，使与四氨合铜离子[Cu (NH3)4]2+反应，释放出Cu2+，与磺脲类钠盐 重新生
.成磺胺铜盐沉淀<formula>formula see original document page 6</formula>通过以上反应检测是否添加磺脲类化学成分，准确度高，方法简单，不需要任何昂 贵的试验仪器，试验成本低，满足快检的要求。本发明的检测方法的优点在于本发明检测方法灵敏度高，分析成本低，专属性强，试验结果明显，现象易观测，操 作步骤简单，不需要任何昂贵的分析仪器。非常适宜于现场检测降糖类中成药和保健食品 中是否添加了磺脲类化学药物，对于保障药品质量和用药安全具有重要意义。
具体实施例方式一下的实施将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制 本发明。实施例1参芪降糖胶囊(经LC-MS检验，本品不含磺脲类化学成分)取3粒胶囊内容物，置IOOmL具塞锥形瓶中，加入三氯甲烷20mL，旋紧瓶塞，超声 15分钟，溶液过滤，水浴蒸干，用0. Olmol/L的氢氧化钠3mL充分溶解，用注射器吸取上清 液，接上微孔滤头(0. 45 μ m孔径，外径25mm)，挤压，收集滤液置试管中，滴入硫酸铜试液5 滴，充分振摇，加入过量氨水，使试管中溶液的颜色呈现深蓝色。然后，再用注射器吸取试管 中的深蓝色溶液，接上微孔滤头(0. 45 μ m孔径，外径25mm)，挤压，收集滤液置另一试管中， 滴入过量浓盐酸，至深蓝色消失，无沉淀生产，由此可判断样品中未添加磺脲类化学成分。实施例2降糖甲片(经LC-MS检验，本品不含磺脲类化学成分)
取样品6片，用研钵研细，置IOOmL具塞锥形瓶中，加入三氯甲烷20mL，旋紧瓶塞，超声15分钟，溶液过滤，水浴蒸干，用0. 01mol/L的氢氧化钠3mL充分溶解，用注射器吸取 上清液，接上微孔滤头(0. 45 μ m孔径，外径25mm)，挤压，收集滤液置试管中，滴入硫酸铜试 液5滴，充分振摇，加入过量氨水，使试管中溶液的颜色呈现深蓝色。然后，再用注射器吸取 试管中的深蓝色溶液，接上微孔滤头(0. 45 μ m孔径，外径25mm)，挤压，收集滤液置另一试 管中，滴入过量浓盐酸，至深蓝色消失，无沉淀生产，由此可判断样品中未添加磺脲类化学 成分。实施例3消糖灵胶囊(本品含有格列本脲，是格列本脲和中药的复方制剂，每粒 含有格列本脲0. 7mg)取3粒胶囊内容物，置IOOmL具塞锥形瓶中，加入三氯甲烷20mL，旋紧瓶塞，超声 15分钟，溶液过滤，水浴蒸干，用0. 01mol/L的氢氧化钠3mL充分溶解，用注射器吸取上清 液，接上微孔滤头(0. 45 μ m孔径，外径25mm)，挤压，收集滤液置试管中，滴入硫酸铜试液5 滴，充分振摇，加入过量氨水，使试管中溶液的颜色呈现深蓝色。然后，再用注射器吸取试管 中的深蓝色溶液，接上微孔滤头(0. 45 μ m孔径，外径25mm)，挤压，收集滤液置另一试管中， 滴入过量浓盐酸，至深蓝色消失，有沉淀生产，由此可判断样品中含有磺脲类化学成分。实施例4参芪降糖颗粒(经LC-MS检验，本品不含磺脲类化学成分)取本品lg，用研钵研细，置IOOmL具塞锥形瓶中，加入三氯甲烷20mL，旋紧瓶塞，超 声15分钟，溶液过滤，水浴蒸干，用0. 01mol/L的氢氧化钠3mL充分溶解，用注射器吸取上 清液，接上微孔滤头(0. 45 μ m孔径，外径25mm)，挤压，收集滤液置试管中，滴入硫酸铜试液 5滴，充分振摇，加入过量氨水，使试管中溶液的颜色呈现深蓝色。然后，再用注射器吸取试 管中的深蓝色溶液，接上微孔滤头(0. 45 μ m孔径，外径25mm)，挤压，收集滤液置另一试管 中，滴入过量浓盐酸，至深蓝色消失，有沉淀生产，由此可判断样品中含有磺脲类化学成分。
权利要求
一种降糖类中成药和保健品中添加磺脲类化学成分的检测方法，依次由以下步骤组成(1)取待测中成药或保健品适量，相当于一次口服量，作为供试品，研细，放入具塞锥形瓶中加入10-30mL三氯甲烷，超声提取10-30分钟，过滤，收集滤液作为供试液A；(2)将供试液A水浴蒸干，残渣加入0.01-0.1mol/L的NaOH溶液1-5mL充分溶解，然后使用微孔滤膜过滤，得供试液B，用试管收集供试液B；(3)向供试液B中滴入0.1-0.3mLCuSO4试液，震荡，使溶液充分反应，得供试液C，如果供试液C不出现沉淀，可判断供试品中未添加磺脲类化学成分，如果供试液C出现沉淀，请继续下面的步骤；(4)如果步骤(3)供试液C中出现沉淀，向供试液C中滴入过量浓氨水，震荡试管使充分反应，至溶液呈现深蓝色，作为供试液D；(5)把步骤(4)反应得到的供试液D用微孔滤膜过滤，得供试液E，用试管收集供试液E；(6)向供试液E中滴入过量的浓盐酸，使得深蓝色消失，如果出现沉淀，可判断供试品中添加磺脲类化学成分，如果未出现沉淀，可判断供试品中未添加磺脲类化学成分。
全文摘要
本发明属于医药技术领域，具体涉及一种降糖类中成药和保健品中添加磺脲类化学成分的检测方法，该方法主要应用于降糖类中成药和保健品中添加磺脲类化学药物的测定，本发明检测方法灵敏度高，分析成本低，专属性强，操作步骤简单，试验结果明显，现象易观测，准确度高，非常适宜于现场检测降糖类中成药和保健品中是否掺入了磺脲类化学成分，对于保障药品质量和用药安全具有重要意义。
文档编号G01N31/02GK101832987SQ20091001466
公开日2010年9月15日 申请日期2009年3月9日 优先权日2009年3月9日
发明者张 杰, 潘广洲, 王登旭, 赵文法, 赵淑静, 陈云, 高国敬 申请人:潘广洲