一种测定磷酸-5’-吡哆醛含量的高效液相色谱分析方法

文档序号:6101550阅读:412来源:国知局
专利名称:一种测定磷酸-5’-吡哆醛含量的高效液相色谱分析方法
技术领域
本发明涉及一种测定磷酸_5’ -吡哆醛含量的高效液相色谱分析方法。
背景技术
磷酸-5’ -吡哆醛又称磷酸吡醛素、吡哆醛-5-磷酸酯、辅脱羧酶,是维生素B6的辅酶形式(转氨酶、脱羧酶和消旋酶的酶),参与氨基酸代谢中的转氨基作用,它主要用于生化研究,孕留酮特性的结构修饰,酶抑制剂。磷酸-5’ -吡哆醛的结构式如下
权利要求
1.一种测定磷酸-5’-吡哆醛含量的高效液相色谱分析方法,其特征在于,包括如下步骤1)采用反相高效液相色谱法,高效液相色谱的条件如下 色谱柱ci8,5 μ m,250 X 4. 6mm (I. D.),流动相组成乙腈水=30-10 70-90(v/v),并以磷酸氢二钠缓冲液调节pH值=6, 流速:1. Oml/min, 柱温30°C, 检测波长388nm, 进样体积10. Ομ 1 ;2)配制磷酸_5’-吡哆醛标准溶液及样品溶液;3)二极管阵列检测器在340-500nm之间进行连续扫描;4)制作标准曲线,测定峰面积,计算样品主成分含量。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,流动相组成为乙腈 /K= 30 70 (ν/ν) ο
3.根据权利要求1所述的高效液相色谱分析方法,其特征在于,将测定主成分含量的样品用水溶解稀释成0. 2mg/ml后,再测定磷酸_5’ -吡哆醛的含量。
全文摘要
本发明公开了一种测定磷酸-5’-吡哆醛含量的高效液相色谱分析方法。采用反相高效液相色谱法,其高效液相色谱条件如下色谱柱为C18,5μm,250×4.6mm(I.D.);流动相组成为乙腈∶水=30-10∶70-90(v/v),并以磷酸氢二钠缓冲液调节pH值为6;流速为1.0ml/min;柱温为30℃;检测波长为388nm;进样量为10.0μl。将测定主成分含量的进样样品用水溶解稀释成0.2mg/ml后,再测定磷酸-5’-吡哆醛的含量。用本发明的分析方法能快速准确测定磷酸-5′-吡哆醛的含量,为磷酸-5’-吡哆醛产品的质量控制提供了可靠的分析方法。
文档编号G01N30/02GK102323350SQ20111022473
公开日2012年1月18日 申请日期2011年8月5日 优先权日2011年8月5日
发明者倪传红, 施虹, 胡鸣, 陈浩云, 马骏 申请人:国药集团化学试剂有限公司
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