专利名称：一种藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂的质量检测方法
技术领域：
本发明涉及一种藏药组合物制剂的质量检测方法，特别涉及一种藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂的质量检测方法。
背景技术：
益肝活血明目丸最早收载于宇妥·元丹贡布(708-835)的《四部医典》，原方的藏文名为“塞西阿哇角阿”(十五味阿哇明目散)，至今有1300余年的临床应用史。益肝活血明目丸收载于中成药地方标准上升国家标准部分，标准编号WS-11183(ZD-1183)-2002，大多使用益肝活血之药物，如红花、岩精膏、葛缕子等，具有养肝益气，活血明目的功效，主要用于肝阴不足，视物不清，视疲劳，青少年视力低下。铁粉为益肝活血明目丸配方中君药。铁粉在《本草纲目拾遗》、《开宝本草》、《东医 宝鉴》均有记载，具有平肝，镇心，治惊痫，发狂，脚气冲心，疔疮等作用。铁为人体的微量元素，具有促进红细胞生成等重要作用。藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂配方中所用铁粉是通过炮制后进行入药，更加有利于吸收。但是铁摄入过多可能造成急性铁中毒，严重者可能造成休克，甚至于死亡。因此为了保证患者的安全用药，应该对铁的含量进行控制，在能达到治疗疾病的同时，不造成其他健康隐患。益肝活血丸原标准只有丁香酚鉴别、丁香酚含量测定项，质量标准偏低，不能保证该制剂的质量，因此有必要进行标准提高，对方中君药铁粉中铁含量进行全面控制，增加红花、甘草等有效成分的含量测定，从而保证该制剂的安全、有效。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明的目的是公开一种藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂的质量检测方法。发明概述本发明提供了一种藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂铁粉中铁含量的控制方法，红花中羟基红花黄色素A、甘草中甘草酸的含量测定方法，保证铁含量在安全有效范围之内，使得该制剂在有效治疗疾病的同时，确保用药的安全性。术语说明益肝活血明目丸是国家中成药标准汇编(中成药地方标准上升国家标准部分)记载的药品名称。益肝活血明目丸及其制剂包括用益肝活血明目丸原料药配方制备的其他制剂，包括益肝活血明目丸。各原料药的配比可以与益肝活血明目丸配比相同，也可以在药效范围内适当调整。本发明的技术方案如下一种藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂的质量检测方法，该制剂的原料药组成为北寒水石、天竺黄、红花、丁香、诃子、毛诃子、余甘子、甘草、金钱白花蛇、木贼、葛缕子、绿绒蒿、岩精膏、铁粉(制)、文石，所述质量检测方法包括以下含量测定方法中的一种或几种A.铁粉的含量测定将待测定的中药制剂灰化后，用浓盐酸溶解，加入甲基橙指示液，滴加二氯化锡溶液将Fe3+还原为Fe2+，溶液变为淡粉色，然后以二苯胺磺酸钠为指示齐U，用重铬酸钾标准溶液滴定至溶液呈紫色即为终点，以已知的重铬酸钾标准溶液的量计算铁粉的含量；B.红花的含量测定取羟基红花花色素A对照品加体积份数比25%甲醇水溶液配制成对照品溶液，取待检测制剂粉末加入体积份数比25%甲醇水溶液经超声溶解、除杂后配制成供试品溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积份数比 25-35:75-65的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为400-410nm的高效液相色谱法；C.甘草的含量测定取甘草酸铵对照品加甲醇配制成对照品溶液，取待检测制剂粉末加入体积份数比70%乙醇水溶液经超声溶解、除杂后配制成供试品溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积份数比32-36:68-64的乙腈-体积份数比O. 05%磷酸水溶液为流动相，检测波长为250nm的高效液相色谱法。作为本发明的进一步改进，所述铁粉的含量测定具体步骤是取藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂粉末l_2g，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸O. 5-2ml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于500-700°C炽灼3-5小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%_38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在60-70°C左右加热溶解3-5小时，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%_38%浓盐酸0_15ml，加热至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5% 二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，可补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液2-10ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用重铬酸钾滴定液(O. 002mol/l)滴定。每Iml重铬酸钾滴定液(O. 002mol/l)相当于O. 6702mg的铁。作为本发明的进一步改进，所述红花含量测定的具体步骤是照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25-35:75-65的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为400_410nm ;理论板数按羟基红花红色素A峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含60-70 μ g的溶液，即得；供试品溶液的制备取藏药组合物益肝活血明目丸或制剂粉末3_5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液20-30ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
作为本发明的进一步改进，所述甘草的含量测定具体步骤是照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比32-36:68-64的乙腈-体积份数比O. 05%磷酸水溶液为流动相；检测波长为250nm。理论板数按甘草酸峰计算应不低于5000 ；对照品溶液的制备精密称取甘草酸铵对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，即得(甘草酸重量=甘草酸铵/I. 0207)；
供试品溶液的制备取藏药组合物益肝活血明目丸或制剂粉末l_3g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入体积份数比70%乙醇水溶液20-30ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比70%乙醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。本发明优选下面原料药组成的解毒胶囊及其制剂北寒水石111. O重量份、天竺黄28. O重量份、红花27. 9重量份、丁香28. O重量份、诃子28. O重量份、毛诃子28. O重量份、余甘子28. O重量份、甘草28. O重量份、金钱白花蛇27. 9重量份、木贼28. O重量份、葛缕子28. O重量份、绿绒蒿28. O重量份、岩精膏28. O重量份、铁粉(制)78. O重量份、文石83. O
重量份。对于上述优选制剂，所述质量检测方法是A.铁粉的含量测定取藏药组合物益肝活血明目丸粉末lg，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧(避免燃烧、膨胀、溢出)，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸1ml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于600°C炽灼4小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%_38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在65°C左右加热溶解4小时(不时摇动，避免沸腾)，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%_38%浓盐酸5ml，加热至70-80 0C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5% 二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，可补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液4ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用重铬酸钾滴定液(O. 002mol/l)滴定。每Iml重铬酸钾滴定液(O. 002mol/l)相当于O. 6702mg的铁。B.红花的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比28:72的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为403nm ;理论板数按羟基红花红色素A峰计算应不低于3000 ；对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含65 μ g的溶液，即得；
供试品溶液的制备取藏药组合物益肝活血明目丸粉末4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。C.甘草的含量测定照高效液相色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI D)测定；色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比34:66的乙腈-体积份数比O. 05%磷酸水溶液为流动相；检测波长为250nm。理论板数按甘草酸峰计算应不低于5000 ；对照品溶液的制备精密称取甘草酸铵对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，即得(甘草酸重量=甘草酸铵/I. 0207)； 供试品溶液的制备取藏药组合物益肝活血明目丸粉末2g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入体积份数比70%乙醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比70%乙醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。在对优选制剂的质量检测方法中，所述铁粉的含量测定中铁含量为7.6mg/g-12.8mg/g。所述红花的含量测定中红花含量以羟基红花黄色素A (C27H3tlO15)计，不得少于
O.33mg/g。所述甘草的含量测定中甘草以甘草酸(C42H62O16)计,不得少于O. 75mg/g。所述制剂是指取藏药组合物益肝活血明目丸原料药，按常规工艺，加入常规辅料制备成临床可接受的任何一种剂型，包括微丸、滴丸、片剂、胶囊、颗粒、饮片或分散片。本说明书中所述的重量份与体积份的单位对应关系为g/ml或kg/1。本发明公开了一种藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂的质量检测方法，属于医药技术领域。本发明第一次对藏药组合物益肝活血明目丸中铁的含量进行了控制，使用操作简便、快速准确的无汞重铬酸钾滴定法对藏药组合物六味明目丸中的铁进行了含量检测，确保了该制剂的安全；同时采用高效液相色谱法对红花中羟基红花黄色A、甘草中甘草酸进行了含量测定，确保了该制剂的稳定、质量可控。本发明方法能够有效控制藏药组合物益肝活血明目丸的质量。同时本法还可用于益肝活血明目丸的其他制剂，如益肝活血明目颗粒、益肝活血明目胶囊、益肝活血明目明目片等。下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。实验例I :铁粉的含量测定实验I.仪器、试药和供试样品仪器ΒΤ12 型赛多利斯电子分析天平(德国赛多利斯sartorius公司)；2· 5-10型箱式电阻炉(北京市永光明医疗器械厂);HH-4型数显恒温水浴锅(常州荣冠实验分析仪器厂)。主要试剂重量百分浓度5% 二氯化锡溶液(称取二氯化锡溶于40ml质量百分浓度36%-38%浓盐酸，加水稀释至100ml。临用前用水稀释一倍，即得);甲基橙指示液(取甲基橙
O.Ig溶于IOOml水中，即得);二苯胺磺酸钠指示液(取二苯胺磺酸钠O. 2g溶于IOOml水中，即得)；硫磷混酸溶液(将150ml质量百分浓度95%-98%浓硫酸在搅拌下缓慢注入500ml水中，冷却后再加入150ml磷酸，用水稀释至1000ml，混匀，即得)。重铬酸钾标准溶液(基准试剂于150-160°C干燥2小时，存于干燥器中，准确称取O. 0980g重铬酸钾于250ml烧杯中，加适量水溶解后定量转入IOOOml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，其浓度为O. 002mol/l)。样品益肝活血明目丸(青海金诃藏药药业股份有限公司提供)，批号分别为20100901,20100902,20100903ο2.样品的灰化将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧(避免燃烧、膨胀、溢出)，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温。滴加质量百分浓度95%_98%浓硫酸适量，使炭化物全部湿润，以O. 5ml至2ml为优，其中Iml为最优。继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于500-700°C炽灼3-5小时。其中以600°C炽灼4小时为最优。使用灼烧炭化，然后加入硫酸，再灰化的方法目的在于除去藏药制剂中其他药味的干扰，同时提高了铁的含量，使铁转化为Fe3+，便于测定。 3.盐酸浓度的选择反应在盐酸(HCl)介质中进行，还原Fe3+时盐酸(HCl)浓度以4mol/l为好，大于6mol/l时Sn2+则先还原甲基橙为无色，使其无法指示Fe3+的还原，同时Cl_浓度过高也可能消耗K2Cr2O7, HCl浓度低于2mol/l则甲基橙褪色缓慢。4.溶样温度的选择溶样温度对铁含量的测定结果有较大影响。溶样温度低于55°C时，溶样缓慢；超过75V HCl挥发太快，浓度降低，溶样不完全。实验表明溶样温度控制在65°C左右效果最佳。5.氧化还原温度的控制在用二氯化锡还原时，温度应控制在70-80°C，并不断摇动。而在最后的氧化滴定中，溶液温度应控制在20-30°C为好，以使反应能较快进行。6.硫磷混酸溶液的选择滴定过程中生成的Fe3+呈黄色，影响终点的观察，若在溶液中加入磷酸(H3PO4),H3PO4与Fe3+生成无色的Fe(HP04)2_，可掩蔽Fe3+。同时由于Fe(HP04)2_的生成，使得Fe3+/Fe2+电对的条件电位降低，滴定突跃增大，指示剂可在突跃范围内变色，从而减少滴定误差。7.原理本品试样经样品灰化、盐酸溶解后，其中的铁转化为Fe3+。在强酸性条件下，Fe3+可通过SnCl2还原为Fe2+。Sn2+将Fe3+还原完毕后，甲基橙也可被Sn2+还原成氢化甲基橙而褪色，因而甲基橙可指示Fe3+还原终点。Sn2+还能继续使氢化甲基橙还原成N，N- 二甲基对苯二胺和对氨基苯磺酸钠。其反应式为(CH3) 2NC6H4N = NC6H4S03Na+2e>2H+ — (CH3) 2NC6H4NH_NHC6H4S03Na(CH3) 2NC6H4NH-NHC6H4S03Na + 2e_ + 2H+ — (CH3) 2NC6H4NH2+NH2C6H4S03Na这样一来，略为过量的Sn2+也被消除。由于上述反应是不可逆的，因此甲基橙的还原产物不消耗K2Cr207。反应完后，以二苯胺磺酸钠为指示剂，用K2Cr2O7标准溶液滴定至溶液呈紫色即为终点，主要反应式如下2FeCl4_+SnCl2_+2Cl_ = 2FeCl42_+SnCl62_6Fe2++Cr2072>14H+ = 6Fe3++2Cr3++7H20
8.样品中铁的含量测定取益肝活血明目丸粉末lg，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧(避免燃烧、膨胀、溢出)，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸1ml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于600°C炽灼4小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%-38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在65 °C左右加热溶解4小时(不时摇动，避免沸腾)，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%_38%浓盐酸5ml，加热至70_80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5% 二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，可补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液4ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用重铬酸钾滴定液(O. 002mol/l)滴定。每Iml重铬酸钾滴定液(O. 002mol/l)相当于O. 6702mg的铁。结果见表I。 表I益肝活血明目丸中铁含量测定结果
权利要求
1.一种藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂的质量检测方法，该制剂的原料药组成为北寒水石、天竺黄、红花、丁香、诃子、毛诃子、余甘子、甘草、金钱白花蛇、木贼、葛缕子、绿绒蒿、岩精膏、制铁粉、文石，其特征是，所述质量检测方法包括以下含量测定方法中的一种或几种 A.铁粉的含量测定将待测定的中药制剂灰化后，用浓盐酸溶解，加入甲基橙指示液，滴加二氯化锡溶液将Fe3+还原为Fe2+，溶液变为淡粉色，然后以二苯胺磺酸钠为指示剂，用重铬酸钾标准溶液滴定至溶液呈紫色即为终点，以已知的重铬酸钾标准溶液的量计算铁粉的含量； B.红花的含量测定取羟基红花花色素A对照品加体积份数比25%甲醇水溶液配制成对照品溶液，取待检测制剂粉末加入体积份数比25%甲醇水溶液经超声溶解、除杂后配制成供试品溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积份数比25-35:75-65的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为400-410nm的高效液相色谱法； C.甘草的含量测定取甘草酸铵对照品加甲醇配制成对照品溶液，取待检测制剂粉末加入体积份数比70%乙醇水溶液经超声溶解、除杂后配制成供试品溶液，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以体积份数比32-36:68-64的乙腈-体积份数比O. 05%磷酸水溶液为流动相，检测波长为250nm的高效液相色谱法。
2.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述铁粉的含量测定具体步骤是 取待检测制剂粉末l_2g，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸O.5-2ml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于500-700°C炽灼3_5小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%-38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在60_70°C左右加热溶解3-5小时，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%-38%浓盐酸0-15ml，加热至70-80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5% 二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，则补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液2-10ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用O. 002mol/l重铬酸钾滴定液滴定。
3.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述红花的含量测定具体步骤是 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比25-35:75-65的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为400_410nm ;理论板数按羟基红花红色素A峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含60-70 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末3-5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液20-30ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各5-10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
4.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述甘草的含量测定具体步骤是照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比32-36:68-64的乙腈-体积份数比O. 05%磷酸水溶液为流动相；检测波长为250nm。理论板数按甘草酸峰计算应不低于5000 ； 对照品溶液的制备精密称取甘草酸铵对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末l_3g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入体积份数比70%乙醇水溶液20-30ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比70%乙醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5 10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
5.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述制剂的原料药组成为北寒水石111.0重量份、天竺黄28. O重量份、红花27. 9重量份、丁香28. O重量份、诃子28. O重量份、毛诃子28. O重量份、余甘子28. O重量份、甘草28. O重量份、金钱白花蛇27. 9重量份、木贼28. O重量份、葛缕子28. O重量份、绿绒蒿28. O重量份、岩精膏28. O重量份、制铁粉78. O重量份、文石83. O重量份。
6.如权利要求5所述的质量检测方法，其特征是，所述质量检测方法是 Α.铁粉的含量测定 取待检测制剂粉末lg，精密称定，将盛有样品的坩埚置电炉上缓缓炽烧，炽灼至供试品全部炭化，呈黑色，并不再冒烟，放冷至室温；滴加质量百分浓度95%-98%浓硫酸1ml，使炭化物全部湿润，继续加热至蒸汽除尽，白烟冒尽，于600°C炽灼4小时，放冷，用50ml质量百分浓度36%-38%浓盐酸分次洗涤移至250ml具塞锥形瓶中，在65°C左右加热溶解4小时，冷却后将溶液移至250ml容量瓶中，用少量水分次洗涤容器，洗液并入同一量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液25ml，置250ml锥形瓶中，加入质量百分浓度36%_38%浓盐酸5ml，加热至70-80°C，加入6滴甲基橙指示液后，趁热边摇边滴加重量百分浓度5%二氯化锡溶液至溶液变为淡粉色，若摇动后粉色褪去，则补加I滴甲基橙至溶液呈现稳定的淡粉色，迅速用冷水冷却至室温后，加入蒸馏水50ml，硫磷混酸溶液4ml，二苯胺磺酸钠指示液15滴，立即用O. 002mol/l重铬酸钾滴定液滴定； B.红花的含量测定 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比28:72的甲醇-体积份数比O. 5%甲酸水溶液为流动相；检测波长为403nm ;理论板数按羟基红花红色素A峰计算应不低于3000 ； 对照品溶液的制备取羟基红花花色素A对照品适量，精密称定，置棕色瓶中，加体积份数比25%甲醇水溶液制成每Iml含65 μ g的溶液，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入体积份数比25%甲醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声40分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比25%甲醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别吸取对照品溶液和供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得；C.甘草的含量测定 照高效液相色谱法测定； 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积份数比34:66的乙腈-体积份数比O. 05%磷酸水溶液为流动相；检测波长为250nm ;理论板数按甘草酸峰计算应不低于5000 ； 对照品溶液的制备精密称取甘草酸铵对照品适量，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，即得； 供试品溶液的制备取待检测制剂粉末2g，精密称定，置具塞的锥形瓶中，精密加入体积份数比70%乙醇水溶液25ml，密塞，称定重量，超声30分钟，放冷，再称定重量，用体积份数比70%乙醇水溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。
7.如权利要求6所述的质量检测方法，其特征是，所述铁粉的含量测定中铁含量为·7.6mg/g-12. 8mg/g ;所述红花的含量测定中红花含量以羟基红花黄色素A计，不得少于·O.33mg/g ;所述甘草的含量测定中甘草以甘草酸计,不得少于O. 75mg/g。
8.如权利要求I所述的质量检测方法，其特征是，所述的制剂是指取藏药组合物益肝活血明目丸原料药，按常规工艺，加入常规辅料制备成临床可接受的任何一种剂型，包括微丸、滴丸、片剂、胶囊、颗粒、饮片或分散片。
全文摘要
本发明公开了一种藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂的质量检测方法，属于医药技术领域。本发明第一次对藏药组合物益肝活血明目丸中铁的含量进行了检测，使用操作简便、快速准确的无汞重铬酸钾滴定法对藏药组合物六味明目丸中的铁进行了含量控制，确保了该制剂的安全；同时采用高效液相色谱法对红花中羟基红花黄色A、甘草中甘草酸进行了含量测定，确保了该制剂的稳定、质量可控。本发明方法能够有效控制藏药组合物益肝活血明目丸及其制剂的质量。
文档编号G01N30/06GK102879389SQ20121036650
公开日2013年1月16日 申请日期2012年9月27日 优先权日2012年9月27日
发明者张义智, 李怀平, 刘玉芹, 邵成雷, 彭坤 申请人:山东阿如拉药物研究开发有限公司