专利名称：一种甜蜜素检测方法
技术领域：
本发明涉及食品添加剂的检测方法，特别是涉及饮料食品中甜蜜素的检测方法。
背景技术：
近年来，食品的安全性已经成为社会公共关注的公共卫生，而添加剂的滥用成为食品安全性的重要影响因素。国内市场调查发现我国食品中添加剂的超量、超范围使用问题比较严重。甜蜜素，其化学名称为环己基氨基磺酸钠，是食品生产中常用的添加剂。甜蜜素是一种常用甜味剂，其甜度是蔗糖的30 40倍。消费者如果经常食用甜蜜素含量超标的饮料或其他食品，就会摄入过量，对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒能力较弱的老人、孕妇、儿童危害更明显。甜蜜素在美国是一种消费量很大的人工甜味剂，是公认的安全物质，这种情况一直持续到1969年，当年美国国家科学院研究委员会收到有关甜蜜素为致癌物的实验证据，美国食品与药品管理局为此立即发布规定严格限制使用，并于1970年8月发出了全面禁止食用甜蜜素的命令。1982年9月，Abbott实验室和能量控制委员会在大量实验事实的基础上，以最新的研究事实证明甜蜜素的使用安全性，许多国际组织也相继发表大量评论明确表示甜蜜素为安全物质，但美国食品与药品管理局至今没有最终解决这个问题。尽管如此，仍有许多国家(包括中国)继续承认甜蜜素的甜味剂地位，允许甜蜜素的使用。对于食品中甜蜜素的检测，最新的国标(GB5009.97-2003)采用气象色谱法，也有文献报道比色法、薄层色谱法等，这些方法的主要缺点是操作步骤过于繁琐、费时，不利于快速分析测定。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术中的不足，提供一种操作简单、灵敏快速、成本低廉的甜蜜素检测方法。为实现上述目的，本发明采用的技术方案为:一种甜蜜素检测方法，包括下列步骤:(I)使用次氯酸钠对甜蜜素标准品进行衍生化；(2)采用液相色谱配紫外检测器对衍生化后的甜蜜素标准品进行检测；(3)根据步骤(2)的检测结果绘制甜蜜素标准曲线；(4)待测样品进行衍生化；(5)采用步骤(2)的方法对待测样品中甜蜜素进行检测，根据标准曲线计算得出待测样品中甜蜜素含量。本发明的甜蜜素检测方法操作简单、灵敏快速、成本低廉，整个检测过程仅耗时3小时左右。
图1 图5分别为实施例1中不同浓度甜蜜素标准品的液相色谱配紫外检测器响应值谱图；图6是甜蜜素标准曲线；图7是实施例1中样品的的液相色谱配紫外检测器响应值谱图；图8是实施例2中空白对照的液相色谱配紫外检测器响应值谱图；图9 图11分别是实施例2中样品加标量为25μ g、125y g、250l.! g时液相色谱配紫外检测器响应值谱具体实施例方式实施例1本实施例的甜蜜素检测方法，包括以下步骤:(I)使用次氯酸钠对甜蜜素标准品进行衍生化分别量取500mg/L的甜蜜素标准工作液lmL、0.6mL、0.4mL、0.2mL、0.05mL(分别对应于终浓度:100mg/L、60mg/L、40mg/L、20mg/L、5mg/L)于 50ml 离心管中，加水 20ml,正己烧5ml, I: I硫酸溶液(浓硫酸和水体积比1:1) 2ml，I: 2次氯酸钠溶液(次氯酸钠和水体积比1: 2) lml，漩涡震荡3min ;转移全部正己烷层于IOml离心管中，加入质量浓度为10%的碳酸氢钠溶液10ml ，漩涡震荡3min，正己烷层过0.45μπι有机相滤膜，备用；(2)采用液相色谱配紫外检测器对衍生化后的甜蜜素标准品进行检测；液相色谱配紫外检测器检测条件为:安捷伦1260液相色谱配VWD检测器；色谱柱:C18150mmX4.6mm, 5.0 μ m ;流动相，乙腈:水=70: 30 ;流速:1.0mL/min ;柱温:25°C ；进样量10 μ L ;检测波长:314_ ;运行时间13min ;不同浓度标准品的响应值谱图分别见图1、图2、图3、图4、图5 ；(3)绘制甜蜜素标准曲线；以步骤(2)的仪器和检测条件对甜蜜素标准品进行检测后，以浓度为纵坐标，检测器响应值为横坐标绘制标准曲线，如图6所示；(4)待测样品衍生化处理准确称取2.5g样品于50ml离心管中，加入:水20ml，正己烷5ml，I: I硫酸溶液(浓硫酸和水体积比1:1) 2ml，I: 2次氯酸钠溶液(次氯酸钠和水体积比1: 2) lml，漩涡震荡3min ;转移全部正己烷层于IOml离心管中，加入质量浓度为10%的碳酸氢钠溶液10ml，漩涡震荡3min，正己烷层过0.45 μ m有机相滤膜，待测；(5)采用步骤(2)的方法对待测样品中甜蜜素检测，仪器响应值谱图如图7所示，根据标准曲线计算得出待测样品中甜蜜素含量。实施例2本实施例对本发明方法的加标回收率的检测步骤如下:采用样品加标回收率试验，分别在样品中加入浓度为500mg/L的标准溶液
0.05ml、0.25ml、0.5ml，分别对应加标量25 μ g、125 μ g、250 μ g ;以不加标准溶液的样品为空白对照；每个样品分别检测3次，检测方法同实施例1，响应值谱图分别见图8、图9、图10、图11 ;根据分析结果计算本发明的方法甜蜜素的加标回收率，如表I所示:表I甜蜜素回收率统计表
权利要求
1.一种甜蜜素检测方法，其特征在于:包括下列步骤: (1)使用次氯酸钠对甜蜜素标准品进行衍生化； (2)采用液相色谱配紫外检测器对衍生化后的甜蜜素标准品进行检测； (3)根据步骤(2)的检测结果绘制甜蜜素标准曲线； (4)待测样品进行衍生化； (5)采用步骤(2)的方法对待测样品中甜蜜素进行检测，根据标准曲线计算得出待测样品中甜蜜素含量。
2.根据权利要求1所述的甜蜜素检测方法，其特征在于:所述的液相色谱配紫外检测器的检测条件是:安捷伦1260液相色谱配VWD检测器；色谱柱:C18 150mmX4.6mm,μπι;流动相:乙腈:水=70:30 ;流速:1.0mL/min ;柱温:25°C ;进样量IOyL ;检测波长:314mm ;运行时间13min。
全文摘要
本发明涉及食品添加剂的检测方法，特别是涉及饮料食品中甜蜜素的检测方法。一种甜蜜素检测方法，其特征在于包括下列步骤(1)使用次氯酸钠对甜蜜素标准品进行衍生化；(2)采用液相色谱配紫外检测器对衍生化后的甜蜜素标准品进行检测；(3)根据步骤(2)的检测结果绘制甜蜜素标准曲线；(4)待测样品进行衍生化；(5)采用步骤(2)的方法对待测样品中甜蜜素进行检测，根据标准曲线计算得出待测样品中甜蜜素含量。本发明的甜蜜素检测方法操作简单、灵敏快速、成本低廉，重复性好。
文档编号G01N30/02GK103105445SQ20131003170
公开日2013年5月15日 申请日期2013年1月18日 优先权日2013年1月18日
发明者傅鹏, 刘刚 申请人:润德(山东)检测技术有限公司