专利名称：血液锌原卟啉全血质控品及其制备方法与应用的制作方法
技术领域：
本发明属于生物制品技术领域，具体涉及一种血液锌原卟啉全血质控品及其制备方法与应用。
背景技术：
近年来，职业健康监护越来越受到重视，铅中毒是职业健康监护的一大难点，职业性慢性铅中毒诊断标准的主要依据是血铅和血液锌原卟啉(ZPP)等实验室检测指标。血铅检测需要的仪器设备条件比较高，不能用于大面积筛查和推广；荧光测定技术检测血液锌原卟啉，具有快速、准确、价廉等优点，已被广泛应用于缺铁性贫血和铅中毒诊断。研究表明，血液锌原卟啉与血铅和尿铅作为职业铅危害监测指标没有差异，因此，血液锌原卟啉检测受到职业危害评价工作者的高度重视。准确精密的职业病实验室检测数据是职业病诊断鉴定的主要依据之一，其获得需要经过严格的室内质控。室内质控是由实验室的工作人员采用一系列统计学的方法，连续地评价本实验室测定工作的可靠程度，判断检验报告是否可发出的过程。室内质控的目的是检测、控制本实验室测定工作的精密度，并检测其准确度的改变，提高常规测定工作的批间、批内标本检测结果的一致性。质控品是专门用于室内质控的、稳定的与待测标本近似的材料，是保证质控工作的重要物质基础。目前，血液锌原卟啉检测尚无商品化的室内质控品,研制一种血液锌原卟啉室内质控品非常必要。
发明内容
本发明的目的是提供一种血液锌原卟啉全血质控品，所述质控品是以含锌原卟啉的抗凝全血为溶剂，其中叠氮钠的终浓度为0.15—0.25μ g/mL，如0.15—0.20 μ g/mL或
0.20—0.25 μ g/mL。在上述质控品中，所述抗凝全血可为EDTA-2K (乙二胺四乙酸二钾)终浓度为Img/mL的全血。在上述质控品中，所述含锌原卟啉的抗凝全血为不添加锌原卟啉的抗凝全血,具体可为离体的正常人(非铅中毒)的抗凝全血或离体的铅中毒患者的抗凝全血。本发明还提供了一种血液锌原卟啉全血质控品的制备方法，包括将含锌原卟啉的全血进行抗凝处理，获得抗凝全血；再按500:1的体积比向所述抗凝全血中加入浓度为
0.075—0.125g/L (如0.075—0.lg/L或0.1—0.125g/L)的叠氮钠水溶液，获得所述血液锌原卟啉全血质控品。在上述方法中，所述抗凝处理是按照IOmL:1Omg的比例将所述含锌原卟啉的全血与EDTA-2K混合。在上述方法中，所述含锌原卟啉的抗凝全血为不添加锌原卟啉的抗凝全血，具体可为离体的正常人(非铅中毒)的全血或离体的铅中毒患者的全血。
本发明保护上述产品和方法中的任一所述血液锌原卟啉全血质控品在制备血液锌原卟啉定量检测试剂盒中的应用。所述定量检测的方法具体可为表面荧光法。所述表面荧光法定量检测血液锌原卟啉的原理如下:锌原卟啉具有特征性荧光光谱，即在425nm入射光的激发下，锌原卟啉发射波长为594nm的荧光，且该荧光强度与待测样品中锌原卟啉的含量呈一定比例关系，通过测定该荧光强度，即可推算出待测样品中锌原卟啉的含量。本发明分别以锌原卟啉的含量较高的铅中毒患者全血和锌原卟啉的含量较低的正常人的全血为主要材料，用lmg/mL的EDTA-2K进行抗凝处理后，再添加0.15-0.25 μ g/mL的叠氮钠制备得到两个水平的质控品，其在2—8°C下保存30天，经表面荧光法检测锌原卟啉的含量，变异系数均小于5%，完全能满足实验室精密度的通用要求，按照常用质控规则I3s和22S判断，30日内未出现失控现象。说明全血中添加0.15-0.25μ g/mL叠氮钠，可以有效抑制细菌对红细胞造成的破坏。本发明所提供的质控品可同时监测仪器对正常水平和高水平样本检测的精密度检。本发明所提供的质控品可排除基质效应，来源容易、制作简便、添加物少、成本低、保存期间稳定性很好，便于短期内的实验室制备和使用，适用于血液锌原卟啉测定仪的准确性和精密度监控。
图1为正常值组血液锌原卟啉全血质控品的稳定时间观察结果。其中，横坐标为检测日期，纵坐标为检测结果(单位:μ mol/L)。图2为高值组血液锌原卟啉全血质控品的稳定时间观察结果。其中，横坐标为检测日期，纵坐标为检测结果(单位:μ mol/L)。
具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中的锌原卟啉含量测定所使用的仪器为广东省康达发展公司的ZPP3800型血液锌原卟啉测定仪，其测定方法为表面荧光法。下述实施例中经2 — 8°C保存的质控品在进行锌原卟啉含量测定前，先放置30分钟平衡至室温并充分混匀。下述实施例中所涉及的实验用血液为血常规检验后剩余血液并经过深圳市职业病防治院伦理学委员会批准。实施例1、血液锌原卟啉全血质控品的制备及稳定性评价一、血液锌原卟啉全血质控品的制备1、高值组血液锌原卟啉全血质控品的制备采集临床无溶血、无脂浊、无黄疸、无细菌污染及其它传染性指标的慢性铅中毒患者(经血铅检测的结果为5.67 μ mol/L)的全血10ml，用含有10.0mg EDTA-2K的试管收集，充分混匀后，加入20 μ L的浓度为0.lg/L的叠氮钠水溶液，分装后2 — 8°C保存，得到高值组血液锌原卟啉全血质控品。
2、正常值组血液锌原卟啉全血质控品的制备采集临床无溶血、无脂浊、无黄疸、无细菌污染及其它传染性指标的正常人(经血铅检测的结果为0.32 μ mol/L)的全血10ml，用含有10.0mg的EDTA-2K试管收集，充分混匀后，加入20 μ L的浓度为0.lg/L的叠氮钠水溶液，分装后2 — 8°C保存，得到正常值组血液锌原卟啉全血质控品。3、对照全血质控品的制备采集临床无溶血、无脂浊、无黄疸、无细菌污染及其它传染性指标的正常人(经血铅检测的结果为0.32 μ mol/L,与步骤2为同一人)的全血10ml，用含有10.0mg的EDTA-2K试管收集，充分混匀后，不分装、直接2 — 8°C保存，得到对照全血质控品。 二、检测叠氮钠对质控品中血液锌原卟啉含量的影响将步骤一同时制备的、2 — 8°C保存I天的正常值组血液锌原卟啉全血质控品(L)和对照全血质控品(CK)各取出I支，每支质控品连续取样10次，分别测定样品中的锌原卟啉含量，结果如表I所示。分析表I中CK和L两组数据的相关性，得出相关系数r=0.955。结果表明，血液锌原卟啉全血质控品中添加的0.lg/L叠氮钠对全血中的血液锌原卟啉含
量无影响。表1、CK和L的血液锌原卟啉含量检测结果(单位:μ mol/L)
权利要求
1.一种血液锌原卟啉全血质控品，其特征在于:所述质控品是以含锌原卟啉的抗凝全血为溶剂，其中叠氮钠的终浓度为0.15—0.25μ g/mL。
2.根据权利要求1所述的质控品，其特征在于:所述抗凝全血为EDTA-2K终浓度为lmg/mL的全血。
3.根据权利要求1或2所述的质控品，其特征在于:所述含锌原卟啉的抗凝全血为不添加锌原卟啉的抗凝全血。
4.根据权利要求1一3中任一所述的质控品，其特征在于:所述含锌原卟啉的抗凝全血为离体的正常人的抗凝全血或离体的铅中毒患者的抗凝全血。
5.一种血液锌原卟啉全血质控品的制备方法，包括将离体的含锌原卟啉的全血进行抗凝处理，获得抗凝全血；再按500:1的体积比向所述抗凝全血中加入浓度为0.075—0.125g/L的叠氮钠水溶液，获得所述血液锌原卟啉全血质控品。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于:所述抗凝处理是按照IOmL:1Omg的比例将所述离体的含锌原卟啉的全血与EDTA-2K混合。
7.根据权利要求5或6所述的方法，其特征在于:所述含锌原卟啉的全血为不添加锌原卟啉的全血。
8.根据权利要求4一7中任一所述的方法，其特征在于:所述含锌原卟啉的全血为离体的正常人的全血或离体的铅中毒患者的全血。
9.权利要求1一4或5—8中的任一所述血液锌原卟啉全血质控品在制备血液锌原卟啉定量检测试剂盒中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于:所述定量检测的方法为表面荧光法。
全文摘要
本发明公开了一种血液锌原卟啉全血质控品及其制备方法与应用。本发明所提供的质控品是以离体的非铅中毒的正常人或铅中毒患者的抗凝全血为溶剂，其中叠氮钠的终浓度为0.15—0.25μg/mL。所述抗凝全血为EDTA-2K(乙二胺四乙酸二钾)终浓度为1mg/mL的全血。本发明所提供的质控品可同时监测仪器对正常水平和高水平样本检测的精密度检。本发明所提供的血液锌原卟啉全血质控品可排除基质效应，来源容易、制作简便、添加物少、成本低、保存期间稳定性很好，便于短期内的实验室制备和使用，适用于血液锌原卟啉测定仪的准确性和精密度监控。
文档编号G01N21/64GK103196727SQ20131012065
公开日2013年7月10日 申请日期2013年4月9日 优先权日2013年4月9日
发明者王佃鹏, 汤海燕, 高燕华, 罗斌, 张艳芳, 李培茂, 王金林, 杨祥丽, 高朝贤 申请人:深圳市职业病防治院