一种控制生脉注射液中间体质量的方法
【专利摘要】本发明提供了一种控制生脉注射液中间体质量的方法。本发明还提供了生脉注射液中间体的检测方法。本发明发现，通过对上述各中间体进行质量控制后，只要中间体在其控制范围内，所得成品均能够符合注射液质量标准；因此，在生产过程中，按照本发明方法进行质量控制，能够在前期及时排除生产中遇到的技术问题，避免了到成品才发现不合格而返工的缺陷，为注射液的顺利生产提供了保障。
【专利说明】一种控制生脉注射液中间体质量的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种控制生脉注射液中间体质量的方法。
【背景技术】
[0002]生脉注射液，是由红参100g、麦冬312g、五味子156g经提取纯化制备得到的注射液，可益气养阴，复脉固脱。用于气阴两亏，脉虚欲脱的心悸、气短，四肢厥冷、汗出、脉欲绝及心肌梗塞、心源性休克、感染性休克等具有上述证候者。
[0003]上述注射液制备方法如下:以上三味，将红参切薄片或粉碎成，用90%以上乙醇浸溃后加热回流提取4?5次，每次2小时；或连续回流提取6.5小时，合并提取液，冷藏，滤过，回收乙醇至每Iml含生药0.3?0.4g，加适量活性炭，搅拌，滤液调pH值至近中性，静置，滤液浓缩至稠膏状，加入注射用水至200ml，搅匀，冷藏，滤过，加适当活性炭煮沸，滤过，滤液供配液用；五味子，必要时粉碎，用水蒸气蒸馏法收集馏液150ml，冷藏，供配液用，药渣加水煎煮两次,每次40分钟，合并煎液，滤过，滤液浓缩至稠膏状,加入乙醇进行两次醇沉，第一次使含醇量达80 %，第二次使含醇量达85 %，调节pH值至近中性，冷藏，滤过，回收乙醇并浓缩至稠膏状，加入注射用水至150ml，搅匀，冷藏，滤过，加适量活性碳煮沸30分钟，稍冷，过滤至澄明，供配液用；麦冬照五味子水液制备方法制成澄明的麦冬水溶液约200ml,供配液用。将上述红参水液、五味子蒸馏液、五味子水液和麦冬水液，混合，加热，静置，滤过，即得生脉水沉精滤液，再加入3?5g聚山梨酯80，混合均匀，滤过，滤液加注射用水至1000ml，调节药液pH值至7.5，滤过，灌封，灭菌，即得。
[0004]目前已有对生脉注射液成品的质量控制方法，如《生脉注射液修订标准(草案)》，它要求对生脉注射液成品中的指纹图谱、人参皂苷含量、五味子醇甲含量等进行了检测及限量。为了使得注射液成品能够满足其限定标准，在注射液的制备过程中进行中间体的检测及质量控制也十分必要。然而，由上述制备工艺可知，生脉注射液制备过程中涉及多个操作环节，若对每个中间体都进行检测，则较为耗费资金和时间；但若是仅对部分中间体进行检测，那么为了保证成品质量，应该检测哪些中间体？待检中间体的质量限定又该如何选择？
【发明内容】
[0005]基于上述问题，本发明的目的在于提供一种控制生脉注射液中间体质量的方法。本发明的另一目的在于提供生脉注射液中间体的检测方法。
[0006]本发明提供了一种控制生脉注射液中间体质量的方法，其特征在于:所述生脉注射液的中间体包括红参醇提液、红参水沉液、麦冬一次醇沉液、麦冬二次醇沉液、麦冬水沉过活性炭精制液、五味子一次醇沉液、五味子二次醇沉液、五味子水沉液、五味子水沉过活性炭精制液、五味子馏液、生脉水沉精滤液；
[0007]红参醇提液中，总固体含量以生药计应为12?28.5%，人参皂苷Rgl含量应为
1.5?2.5mg/lg生药，人参皂苷Re含量应为0.9?1.5mg/lg生药，人参皂苷Rbl含量应为2.6 ~3.9mg/lg 生药；
[0008]红参水沉液中，总固体含量以生药计应为10~25% ；
[0009]麦冬一次醇沉液总固体含量以生药计应为7.5~14.5%，麦冬二次醇沉液总固体含量以生药计应为3~10.5%，麦冬水沉过活性炭精制液总固体含量以生药计应为1.8~
9.5%。
[0010]五味子一次醇沉液中，总固体含量以生药计应为5.5~12.5%，五味子醇甲含量应为 0.65 ~1.6mg/lg 生药；
[0011]五味子二次醇沉液，总固体含量以生药计应为3~8.5%，五味子醇甲含量应为
0.35 ~lmg/Ig 生药；
[0012]五味子水沉液，总固体含量以生药计应为2~6%,五味子醇甲含量应为0.25~
0.6mg/lg 生药；
[0013]五味子水沉过活性炭精制液中，总固体含量以生药计应为3~8%，五味子醇甲含量应为0.05~0.2mg/lg生药；
[0014]五味子馏液的微生物限度< 50CFU/lml ；
[0015]生脉水沉精滤液中，总固体含量以生药计为5~10%，五味子醇含量为0.05~`0.2mg/lg生药，人参皂苷Rgl含量为1.3~2mg/lg生药，人参皂苷Re含量为0.7~
1.2mg/lg生药，人参皂苷Rbl含量为2~3.5mg/lg生药，内毒素< 5EU/ml，细菌总数(80CFU/lml
[0016]进一步地,所述红参醇提液或红参水沉液的指纹图谱与参麦注射液成品对照指纹图谱的相似度不得低于0.90 ;所述参麦注射液成品对照指纹图谱如图2所示。
[0017]进一步地，所述生脉水沉精滤液的指纹图谱与生脉注射液成品指纹图谱的相似度不得低于0.85 ;所述生脉注射液成品指纹图谱如图4所示。
[0018]其中，红参醇提液、红参水沉液或生脉水沉精滤液中人参皂苷含量和指纹图谱均采用HPLC进行检测，其色谱条件如下:
[0019]色谱柱:十八烷基硅胶键合相色谱柱；
[0020]检测波长为203nm ；
[0021]流动相:以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱，
[0022]
【权利要求】
1.一种控制生脉注射液中间体质量的方法，其特征在于:所述生脉注射液的中间体包括红参醇提液、红参水沉液、麦冬一次醇沉液、麦冬二次醇沉液、麦冬水沉过活性炭精制液、五味子一次醇沉液、五味子二次醇沉液、五味子水沉液、五味子水沉过活性炭精制液、五味子馏液、生脉水沉精滤液； 红参醇提液中，总固体含量以生药计应为12~28.5%，人参皂苷Rgl含量应为1.5~2.5mg/lg生药，人参皂苷Re含量应为0.9~1.5mg/lg生药，人参皂苷Rbl含量应为2.6~3.9mg/lg 生药； 红参水沉液中，总固体含量以生药计应为10~25% ； 麦冬一次醇沉液总固体含量以生药计应为7.5~14.5%，麦冬二次醇沉液总固体含量以生药计应为3~10.5%，麦冬水沉过活性炭精制液总固体含量以生药计应为1.8~9.5%。 五味子一次醇沉液中，总固体含量以生药计应为5.5~12.5%，五味子醇甲含量应为0.65 ~1.6mg/lg 生药； 五味子二次醇沉液,总固体含量以生药计应为3~8.5%,五味子醇甲含量应为0.35~lmg/Ig 生药； 五味子水沉液，总固体含量以生药计应为2~6%,五味子醇甲含量应为0.25~0.6mg/lg 生药； 五味子水沉过活性炭精制液中，总固体含量以生药计应为3~8%，五味子醇甲含量应为 0.05 ~0.2mg/lg 生药； 五味子馏液的微生物限度< 50CFU/lml ； 生脉水沉精滤液中，总固体含量以生药计为5~10%，五味子醇含量为0.05~0.2mg/lg生药，人参皂苷Rgl含量为1.3~2mg/lg生药，人参皂苷Re含量为0.7~1.2mg/lg生药，人参皂苷Rbl含量为2~3.5mg/lg生药，内毒素< 5EU/ml，细菌总数(80CFU/lml。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述红参醇提液或红参水沉液的指纹图谱与参麦注射液成品对照指纹图谱的相似度不得低于0.90 ;所述参麦注射液成品对照指纹图谱如图2所示。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:所述生脉水沉精滤液的指纹图谱与生脉注射液成品指纹图谱的相似度不得低于0.85 ;所述生脉注射液成品指纹图谱如图4所示。
4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于:红参醇提液、红参水沉液或生脉水沉精滤液中人参皂苷含量和指纹图谱均采用HPLC进行检测，其色谱条件如下: 色谱柱:十八烷基硅胶键合相色谱柱； 检测波长为203nm ； 流动相:以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱，
5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于:色谱柱为Waterssymmetry shield?RP18，4.6mmX 250mm, 5.0 μ m。
6.根据权利要求4或5所述的方法，其特征在于:所述红参醇提液的HPLC检测过程中，对照品溶液和供试品溶液的制备方法如下: 对照品溶液的制备:精密量取人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1对照品适量，加20%乙腈制成每Iml分别含0.lmg、0.08mg和0.2mg的混合溶液，即得； 供试品溶液的制备:精密吸取待测中间体适量，蒸干，残渣加水溶解制成每Iml相当于0.1g药材的溶液，摇匀，即得。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:总固体含量的检测方法如下: 精密量取待检液10ml，置已恒重的蒸发皿中，于水浴上蒸干后，在105°C干燥3小时，移置干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算即得。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于:五味子醇甲的含量是通过HPLC检测的，色谱条件如下: 色谱柱:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 流动相:甲醇:水=65:35 ； 检测波长为250nm。
9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于:所述五味子醇甲的HPLC检测方法中，对照品溶液和供试品溶液的制备方法如下: 对照品溶液的制备；取五味子醇甲对照品5mg，精密称定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得，浓度为每Iml含五味子甲醇0.1mg ； 供试品溶液的制备:精密吸取待测中间体适量，蒸干，残渣加水溶解制成每Iml相当于0.15g药材的溶液，摇匀，即得。
10.生脉注射液中间体的检测方法，其特征在于:它包括如下操作步骤: (I)人参皂苷的含量检测采用HPLC进行，其色谱条件如下: 色谱柱:十八烷基硅胶键合相色谱柱； 检测波长为203nm ； 流动相:以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按下表进行梯度洗脱，
【文档编号】G01N30/88GK103529154SQ201310450336
【公开日】2014年1月22日 申请日期:2013年9月27日 优先权日:2013年9月27日
【发明者】刘娅, 姚喆, 毛洁, 詹祥静, 郜宁 申请人:四川川大华西药业股份有限公司