Egfr结合肽的制作方法
【专利摘要】本发明提供特异地且高亲和性地结合于EGFR的物质以及含有其的药物。该物质为一种氨基酸数为12至50的肽，其至少具有下式(1)、(2)或(3)表示的氨基酸序列。X1-His-X2-X3-Asp-X4-X5-X6-X7-X8-Trp-His(1)(式(1)中，X1表示Trp或Phe，X2表示Leu、Met、Ile或Val，X3表示Ser、Ala、Thr、Gly、Asn、Asp、Glu、Arg或Lys，X4表示Leu、Met、Ile、Val、Ala、Phe、Tyr、Trp、His或Cys，X5表示Trp、Phe或Tyr，X6表示Gln、Asn、Asp、Glu、Ala、Ser、Thr、Leu、Met、Lys或Arg，X7表示Asn、Gln、Asp、Glu、Ser、Thr、Ala、Gly、Lys或Arg，X8表示Ala、Gly、Ser、Thr、Asn、Val或者Cys。)Phe-His-Asp-Trp-X11-Pro-X12-X13-X14-X15-X16-X17(2)(式(2)中、X11表示Leu、Met、Ile、Val、Ala、Phe、Tyr、Trp、His或Cys，X12表示Glu、Asp、Gln、Asn、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg或His，X3表示Val、Ala、Leu、Ile、Met、Thr、Cys或Asn，X14表示Ser、Ala、Thr、Gly、Asn、Asp、Glu、Arg或Lys，X5表示Pro、Val、Ile、Lys、Ala、Met、Trp、Tyr、Ser、Thr、Cys或Phe，X16表示Pro、Val、Ile、Lys、Ala、Met、Trp、Tyr、Ser、Thr、Cys或Phe，X17表示Asp、Glu、Asn、Gln、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg或His。)Leu-His-X21-Ser-X22-Trp-Met-X23-X24-X25-X26-X27(3)(式(3)中、X21表示Gln、Asn、Asp、Glu、Ala、Ser、Thr、Leu、Met、Lys或Arg，X22表示Glu、Asp、Gln、Asn、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg或His，X23表示Tyr、Phe、Trp、His、Leu、Met、Ile、Val、Cys或Ala，X24表示Val、Ala、Leu、Ile、Met、Thr、Cys或Asn，X25表示Asp、Glu、Asn、Gln、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg或His，X26表示Ile、Val、Leu、Met、Ala、Phe、Tyr、Trp或Gly，X27表示His、Tyr、Phe、Lys、Arg、Leu、Met或Ala)。
【专利说明】EGFR结合肽
【技术领域】
[0001] 本发明涉及表皮生长因子受体（Epidermal Growth Factor Receptor :EGFR)特异 性结合肽以及含有其的药物。
【背景技术】
[0002] EGFR为识别调控细胞增殖和生长的表皮生长因子，进行信号传导的受体，其在细 胞增殖、分化、移动等细胞功能中具有重要的作用。EGFR的信号传导促进细胞增殖，抑制细 胞凋亡，增加肿瘤细胞的运动性和血管新生。EGFR是肿瘤特异性的，在包括非小细胞肺癌 (NSCLC)、乳癌、头颈部癌（SCCHN)、胃癌、大肠癌、食道癌、前列腺癌、膀胱癌、肾癌、脾脏、卵 巢癌的人上皮组织肿瘤中广泛的范围内观察到其强烈的表达。
[0003] 根据这些发现，EGFR被定位为癌症治疗中对于经由药物和基因受体的递送系统的 重要靶标。但是，作为EGFR配体的EGF具有很强的有丝分裂和血管新生能力，因此，寻找 EGF样的基质是重要的。具有如容易扩散的优点和低免疫原性，并具有容易地并入基因递送 载体能力的配体肽，已被研究作为用于选择性递送放射性核素、细胞因子、化学药物、抗肿 瘤治疗基因的目的物。最近已经报道了利用噬菌体文库筛选得到的肽配体的研究结果（非 专利文献1)。
[0004] 另一方面，受体蛋白EGFR家族成员是癌细胞最好地表征的靶标之一。包括已知为 HERl、ErbBl 的 EGFR、已知为 ErbB2 或 neu 的 HER2、HER3 (ErbB3)、HER4 (ErbB4)的 EGF 家族 在细胞存活、分化、增殖中是重要的。特别是，EGFR信号增加与致癌性转化相关，导致诱导 自发的细胞存活、肿瘤侵袭、血管新生、转移。EGFR的表达和强烈表达报道在各种肿瘤类型 中，已知在三分之一的上皮癌中EGFR表达水平高，EGFR的强烈表达常常与预后不良相关。 此外，由于已知EGFR与癌症的发生和发展有关，因此已经进行了以EGFR为靶标的化疗药物 的开发。EGFR抑制剂之一的西妥昔单抗（MC-C225,爱必妥）是FDA批准作为转移性大肠 癌的治疗药物的单克隆抗体。西妥昔单抗是嵌合的人-鼠抗体，其以EGFR的细胞外结构域 作为靶标。西妥昔单抗比作为天然配体的EGF或TGF-a以更强的亲和力结合EGFR，竞争性 抑制EGFR的结合，抑制活性（非专利文献2、专利文献1)。作为其他的人类抗EGFR单克隆 抗体，有帕尼单抗（维克替比（注册商标））（专利文献2)。
[0005] 现有技术
[0006] 专利文献
[0007] 专利文献1 :国际公开第1996/040210号小册子
[0008] 专利文献2 :专利第4808412号公报 [0009] 非专利文献
[0010] 非专利文献 I :The FASEB Journal, 2005 ; 19, 1978-1985
[0011] 非专利文献 2 :Journal of the National Cancer Institute, 2005 ; 97(22)，1663-1670
【发明内容】
[0012] 发明所要解决的问题
[0013] 然而，已经报道的EGFR肽配体对EGFR的结合力不足，并且抗EGFR的抗体分子量 大，存在施用方法有限，产生副作用等问题。
[0014] 因此，本发明的课题是提供特异地且高亲和性地结合于EGFR的新物质以及含有 其的药物。
[0015] 解决问题的方法
[0016] 因此，本发明人使用噬菌体展示方法搜索展示特异地结合于EGFR的肽的噬菌体 时，发现了具有特定氨基酸序列的肽特异地结合于重组人EGFR蛋白，和使用该肽或其标记 体能够特异地检测出表达EGFR的细胞或组织。此外，由于该肽或其标记体竞争性地抑制 EGFR与EGF的结合，所以发现该肽或其标记体作为癌症治疗剂是有用的，从而完成了本发 明。
[0017] SP，本发明提供了以下（1)至（19)。
[0018] (1) 一种氨基酸数为12至50的肽，其至少具有下式（1)、（2)或（3)表示的氨基 酸序列。
[0019] X1-His-X2-X3-Asp-X 4-X5-X6-X7-X8-Trp-His(I)
[0020] (式（1)中，X1 表示 Trp 或者 Phe，
[0021] X2 表示 Leu、Met、Ile 或者 Val，
[0022] X3 表不 Ser、Ala、Thr、Gly、Asn、Asp、Glu、Arg 或者 Lys，
[0023] X4 表不 Leu、Met、lie、Val、Ala、Phe、Tyr、Trp、His 或者 Cys，
[0024] X5 表示 Trp、Phe 或者 Tyr，
[0025] X6 表不 Gin、Asn、Asp、Glu、Ala、Ser、Thr、Leu、Met、Lys 或者 Arg，
[0026] X7 表不 Asn、Gin、Asp、Glu、Ser、Thr、Ala、Gly、Lys 或者 Arg，
[0027] X8 表不 Ala、Gly、Ser、Thr、Asn、Val 或者 Cys)
[0028] Phe-His-Asp-Trp-Xll-Pro-X12-X 13-X14-X15-X16-X17 (2)
[0029] (式（2)中、X11 表不 Leu、Met、lie、Val、Ala、Phe、Tyr、Trp、His 或 Cys，
[0030] X12 表不 Glu、Asp、Gin、Asn、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg 或 His，
[0031] X13 表不 Val、Ala、Leu、lie、Met、Thr、Cys 或 Asn，
[0032] X14 表不 Ser、Ala、Thr、Gly、Asn、Asp、Glu、Arg 或 Lys，
[0033] X15 表不 Pro、Val、lie、Lys、Ala、Met、Trp、Tyr、Ser、Thr、Cys 或 Phe，
[0034] X16 表不 Pro、Val、lie、Lys、Ala、Met、Trp、Tyr、Ser、Thr、Cys 或 Phe，
[0035] X17 表不 Asp、Glu、Asn、Gin、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg 或 His〇)
[0036] Leu-His-X21-Ser-X22-Trp-Met-X 23-X24-X25-X26-X27 (S)
[0037] (式（3)中、X21 表不 Gin、Asn、Asp、Glu、Ala、Ser、Thr、Leu、Met、Lys 或 Arg，
[0038] X22 表不 Glu、Asp、Gin、Asn、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg 或 His，
[0039] X23 表不 Tyr、Phe、Trp、His、Leu、Met、lie、Val、Cys 或 Ala，
[0040] X24 表不 Val、Ala、Leu、lie、Met、Thr、Cys 或 Asn，
[0041] X25 表不 Asp、Glu、Asn、Gin、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg 或 His，
[0042] X26 表不 lie、Val、Leu、Met、Ala、Phe、Tyr、Trp 或 Gly，
[0043] X27 表不 His、Tyr、Phe、Lys、Arg、Leu、Met 或 Ala。）
[0044] (2)根据⑴所述的肽，其中，式⑴中X1是Trp或Phe，X2是Leu、Met、lie或 Val，X3 是 Ser、Ala、Thr、Gly 或 Asn，X4 是 Leu、Met、lie、Val 或 Ala，X5 是 Trp 或 Phe，X6 是 Gin、Asn 或 Ala，X7 是 Asn、Gln 或 Ala，X8 是 Ala、Gly、Ser 或 Thr。
[0045] (3)根据（1)所述的肽，其中，式（1)中 X1 是 Trp 或 Phe，X2 是 Leu、Met、Ile 或 Val， X3 是 Ser 或 Ala，X4 是 Leu 或 Ala，X5 是 Trp，X6 是 Gln 或 Ala，X7 是 Asn 或 Ala，X8 是 Ala。
[0046] (4)根据⑴所述的肽，其中，式⑵中X11是Leu、Met、Ile、Val或Ala，X 12是Glu、 Asp、Gin、Asn 或 Ala，X13 是 Val、Ala、Leu 或 lie，X14 是 Ser、Ala、Thr、Gly 或 Asn，X15 是 Pro、Val、lie 或 Ala，X16 是 Pro、Val、lie 或 Ala，X17 是 Asp、Glu、Asn、Gln 或 Ala。
[0047] (5)根据⑴所述的肽，其中，式⑵中X11是Leu或Ala，X12是Glu或Ala，X 13是 Val 或 Ala，X14 是 Ser 或 Ala，X15 是 Pro 或 Ala，X16 是 Pro 或 Ala，X17 是 Asp 或 Ala。
[0048] (6)根据（1)所述的肽，其中，式（3)中X21是GlruAsn或△1 &，俨是6111、六8?、6111 或 Ala，X23 是 Tyr、Phe、Trp、His 或 Ala，Xm 是 Val、Ala、Leu 或 lie，X25 是 Asp、Glu、Asru Gln 或 Ala，X26 是 lie、Val、Leu、Met 或 Ala，X27 是 His、Tyr、Phe、Lys、Arg 或 Ala。
[0049] (7)根据⑴所述的肽，其中，式⑶中X21是Gln或Ala，X22是Glu或Ala，X 23是 Tyr 或 Ala，Xm 是 Val 或 Ala，X25 是 Asp 或 Ala，X26 是 Ile 或 Ala，X27 是 His 或 Ala。
[0050] (8)根据⑴至（7)任一项所述的肽，其中氨基酸数的上限是30。
[0051] (9)根据⑴至⑶任一项所述的肽，其具有EGFR结合性。
[0052] (10)含有根据⑴至（9)任一项所述的肽或其标记体的药物。
[0053] (11)含有根据（1)至（9)任一项所述的肽或其标记体的癌细胞或癌组织检测剂。
[0054] (12)含有根据（1)至（9)任一项所述的肽或其标记体的癌症诊断剂。
[0055] (13)含有根据（1)至（9)任一项所述的肽或其标记体的癌症治疗剂。
[0056] (14)根据（1)至（9)任一项所述的肽或其标记体，其用于检测癌细胞或癌组织。
[0057] (15)根据（1)至（9)任一项所述的肽或其标记体，其用于癌症诊断或癌症治疗。
[0058] (16)根据（1)至（9)任一项所述的肽或其标记体在制备癌细胞或癌组织检测剂中 的用途。
[0059] (17)根据（1)至（9)任一项所述的肽或其标记体在制备癌症诊断剂或癌症治疗剂 中的用途。
[0060] (18) -种癌细胞或癌组织的检测方法，其特征在于使用根据（1)至（9)任一项所 述的肽或其标记体。
[0061] (19) 一种癌症的诊断或治疗方法，其特征在于使用根据（1)至（9)任一项所述的 肽或其标记体。
[0062] 发明的效果
[0063] 由于本发明的肽具有对EGFR特异的和强的结合性，因此该肽或其标记体作为表 达EGFR的细胞或组织，特别是各种癌细胞或癌组织的检测剂，即癌症的诊断剂是有用的。 另外，由于本发明的肽竞争性地抑制EGFR与EGF的结合，因此其作为表达EGFR的癌症治疗 剂是有用的。
【专利附图】
【附图说明】
[0064] 图1显示D12文库中筛选（パ二 > 夕'' )实验的输出滴度/输入滴度比。
[0065] 图2显示C7C文库中筛选实验的输出滴度/输入滴度比。
[0066] 图3显示经3轮EGFR靶标筛选回收的噬菌体展示的肽序列。
[0067] 图4显示1-1010、1-1012和1-1015噬菌体对固定的蛋白的结合试验结果。
[0068] 图5显示1-1010、1-1012和1-1015噬菌体对固定的蛋白的结合试验结果。
[0069] 图6显示1-1010噬菌体与肽P印055或肽P印018的竞争试验的结果。
[0070] 图7显示1-1012噬菌体与肽P印056或肽P印018的竞争试验的结果。
[0071] 图8显示1-1015噬菌体与肽P印057或肽P印018的竞争试验的结果。
[0072] 图9显示丙氨酸取代的1-1010噬菌体展示的肽序列。
[0073] 图10显示丙氨酸取代的1-1012噬菌体展示的肽序列。
[0074] 图11显示丙氨酸取代的1-1015噬菌体展示的肽序列。
[0075] 图12显示丙氨酸取代的1-1010噬菌体对rhEGFR的结合试验结果。
[0076] 图13显示丙氨酸取代的1-1012噬菌体对rhEGFR的结合试验结果。
[0077] 图14显示丙氨酸取代的1-1015噬菌体对rhEGFR的结合试验结果。
[0078] 图15显示氨基酸取代的1-1010噬菌体展示的肽序列。
[0079] 图16显示一个氨基酸取代的1-1010噬菌体对rhEGFR的结合试验结果。
[0080] 图17显示两个氨基酸取代的1-1001噬菌体对rhEGFR的结合试验结果。
[0081] 图18显示A-431细胞和MCF7细胞的EGFR表达水平（Western印迹）。
[0082] 图19显示1-1010噬菌体对A-431细胞的结合试验结果。
[0083] 图20显示P印055-F对A-431细胞的染色。
[0084] 图21显示P印032-F对A-431细胞的染色。
[0085] 图22显示p055-F对MCF7细胞的染色。
[0086] 图23显示P印032-F对MCF7细胞的染色。
[0087] 图24显示rhEGF与1-1010噬菌体的竞争试验结果。
【具体实施方式】
[0088] 本发明的肽是至少具有以下式（1)、（2)或（3)表示的氨基酸序列的氨基酸数为 12-50的肽。
[0089] X1-Hi S-X2-X3-Asp-X4-X5-X 6-X7-X8-Trp-Hi s (1)
[0090] Phe-Hi S-Asp-Trp-Xll-Pro-X12-X13-X14-X 15-X16-X17 (2)
[0091] Leu-His-X21-Ser-X22-Trp-Met-X23-X 24-X25-X26-X27 (3)
[0092] 在上式（1)中，X1 表示 Trp 或 Phe。X2 表示 Leu、Met、Ile 或 Val。X3 表示 Ser、Ala、 Thr、Gly、Asn、Asp、Glu、Arg 或 Lys，优选 Ser、Ala、Thr、Gly 或 Asn、更优选 Ser 或 Ala。X4表不 Leu、Met、lie、Val、Ala、Phe、Tyr、Trp、His 或 Cys，优选 Leu、Met、lie、Val 或 Ala，更 优选Leu或Ala。X5表示Trp、Phe或Tyr，优选Trp或Phe，更优选Trp。X6表示Gln、Asn、 Asp、Glu、Ala、Ser、Thr、Leu、Met、Lys 或 Arg，优选 Gin、Asn 或 Ala，更优选 Gln 或 Ala。X7表不 Asn、Gin、Asp、Glu、Ser、Thr、Ala、Gly、Lys 或 Arg,优选 Asn、Gln 或 Ala,更优选 Asn 或 Ala。X8 表不 Ala、Gly、Ser、Thr、Asn、Val 或 Cys，优选 Ala、Gly、Ser 或 Thr，更优选 Ala。
[0093] 优选，式（I)的肽中，X1 是 Trp 或 Phe、X2 是 Leu、Met、lie 或 Val、X3 是 Ser、Ala、 Thr、Gly 或 Asn、X4 是 Leu、Met、lie、Val 或 Ala、X5 是 Trp 或 Phe、X6 是 Gin、Asn 或 Ala、X7是 Asn、Gln 或 Ala、X8 是 Ala、Gly、Ser 或 ThiN氨基酸数是 12-50 的肽。
[0094] 并且，更优选，在式（1)的肽中，X1是Trp或Phe、X2是Leu、Met、Ile或Val、X 3是 Ser 或 Ala、X4 是 Leu 或 Ala、X5 是 Trp、X6 是 Gln 或 Ala、X7 是 Asn 或 Ala、X8 是 Ala、氨基酸 数是12-50的肽。
[0095] 在上式（2)中，X11 表示 Leu、Met、lie、Val、Ala、Phe、Tyr、Trp、His 或 Cys，优选 Leu、Met、lie、Val 或 Ala，更优选 Leu 或 Ala。X12 表不 Glu、Asp、Gin、Asn、Ala、Ser、Thr、 Lys、Arg 或 His，优选 Glu、Asp、Gin、Asn 或 Ala，更优选 Glu 或 Ala。X13 表不 Val、Ala、Leu、 IIe、Met、Thr、Cys 或 Asn，优选 Val、Ala、Leu 或 lie，更优选 Val 或 Ala。X14 表不 Ser、Ala、 Thr、Gly、Asn、Asp、Glu、Arg 或 Lys，优选 Ser、Ala、Thr、Gly 或 Asn，更优选 Ser 或 Ala? X15表不 Pro、Val、lie、Lys、Ala、Met、Trp、Tyr、Ser、Thr、Cys 或 Phe，优选 Pro、Val、Ile 或 Ala， 更优选 Pro 或 Ala。X16 表不 Pro、Val、lie、Lys、Ala、Met、Trp、Tyr、Ser、Thr、Cys 或 Phe， 优选 Pro、Val、lie 或 Ala，更优选 Pro 或 Ala。X17 表不 Asp、Glu、Asn、Gin、Ala、Ser、Thr、 Lys、Arg 或 His，优选 Asp、Glu、Asn、Gln 或 Ala，更优选 Asp 或 Ala。
[0096] 优选，在式（2)的肽中，X11 是 Leu、Met、lie、Val 或 Ala、X12 是 Glu、Asp、Gln、Asn 或 Ala、X13 是 Val、Ala、Leu 或 lie、X14 是 Ser、Ala、Thr、Gly 或 Asn、X15 是 Pro、Val、lie 或 Ala、X16 是 Pro、Val、lie 或 Ala、X17 是 Asp、Glu、Asn、Gln 或 Ala，氨基酸数为 12-50 的肽。
[0097] 更优选，在式⑵的肽中，X11是Leu或Ala、X12是Glu或Ala、X 13是Val或Ala、X14是Ser或Ala、X15是Pro或Ala、X16是Pro或Ala、X17是Asp或Ala、氨基酸数为12-50的 肽。
[0098] 在上述式（3)中，X21 表不 Gin、Asn、Asp、Glu、Ala、Ser、Thr、Leu、Met、Lys 或 Arg， 优选 Gin、Asn 或 Ala，更优选 Gln 或 Ala。X22 表不 Glu、Asp、Gin、Asn、Ala、Ser、Thr、Lys、 Arg 或 His，优选 Glu、Asp、Gln 或 Ala，更优选 Glu 或 Ala。X23 表示 Tyr、Phe、Trp、His、Leu、 Met、lie、Val、Cys 或 Ala，优选 Tyr、Phe、Trp、His 或 Ala，更优选 Tyr 或 Ala。X24 表示 Val、 Ala、Leu、lie、Met、Thr、Cys 或 Asn，优选 Val、Ala、Leu 或 lie，更优选 Val 或 Ala。X25 表 不 Asp、Glu、Asn、Gin、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg 或 His，优选 Asp、Glu、Asn、Gln 或 Ala，更优 选 Asp 或 Ala。X26 表不 lie、Val、Leu、Met、Ala、Phe、Tyr、Trp 或 Gly，优选 lie、Val、Leu、 Met 或 Ala，更优选 lie 或 Ala。X27 表不 His、Tyr、Phe、Lys、Arg、Leu、Met 或 Ala，优选 His、 Tyr、Phe、Lys、Arg 或 Ala，更优选 His 或 Ala。
[0099] 在式（3)的肽中，X21 是 Gin、Asn 或 Ala、X22 是 Glu、Asp、Gln 或 Ala、X23 是 Tyr、 Phe、Trp、His 或 Ala、X24 是 Val、Ala、Leu 或 lie、X25 是 Asp、Glu、Asn、Gln 或 Ala、X26 是 lie、Val、Leu、Met 或 Ala、X27 是 His、Tyr、Phe、Lys、Arg 或 Ala、氨基酸数为 12-50 的肽。
[0100] 更优选，在式⑶的肽中，X21是Gln或Ala、X22是Glu或Ala、X 23是Tyr或Ala、X24是Val或Ala、X25是Asp或Ala、X26是Ile或Ala、X27是His或Ala、氨基酸数为12-50的 肽。
[0101] 并且，尽管本发明肽的氨基酸数是12-50,但优选该氨基酸数的上限是40、更优选 是30、进一步优选是20、最优选是18。此外，在式（1)、式（2)或式（3)的N末端或C末端 的任一侧可以添加任意的氨基酸。
[0102] 本发明肽的X1U1-X17以及X21-X 27的取代是基于下述实施例记载的结合试验结 果所表明的只要是保守取代或半保守取代，均显示出同样的活性进行的。在本文的表1中 显示表明了典型的保守取代和半保守取代。
[0103] [表 1]
[0104]
【权利要求】
1.一种氨基酸数为12至50的肽，其至少具有下式（1)、（2)或（3)表示的氨基酸序列：X'-His-X2-X3-Asp-X4-X5-X6-X7-X8-Trp-His(1) (式⑴中，X1表示Trp或者Phe， X2 表示Leu、Met、lie或者Val， X3 表不Ser、Ala、Thr、Gly、Asn、Asp、Glu、Arg或者Lys， X4 表不Leu、Met、lie、Val、Ala、Phe、Tyr、Trp、His或者Cys， X5 表示Trp、Phe或者Tyr， X6 表不Gin、Asn、Asp、Glu、Ala、Ser、Thr、Leu、Met、Lys或者Arg， X7 表不Asn、Gin、Asp、Glu、Ser、Thr、Ala、Gly、Lys或者Arg， X8表不Ala、Gly、Ser、Thr、Asn、Val或者Cys。）Phe-His-Asp-Trp-Xn-Pr〇-X12-X 13-X14-X15-X16-X17 (2) (式（2)中、X11 表不 1^11、]^七、116、/81、八1&、？116、丁71'、1'印、1118或〇78， X12 表不Glu、Asp、Gin、Asn、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg或His， X3 表不Val、Ala、Leu、lie、Met、Thr、Cys或Asn， X14 表不Ser、Ala、Thr、Gly、Asn、Asp、Glu、Arg或Lys， X5 表不Pro、Val、lie、Lys、Ala、Met、Trp、Tyr、Ser、Thr、Cys或Phe， X16 表不Pro、Val、lie、Lys、Ala、Met、Trp、Tyr、Ser、Thr、Cys或Phe， X17 表不Asp、Glu、Asn、Gin、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg或His〇 )Leu-His-X21-Ser-X22-Trp-Met-X23-X24-X25-X26-X27 (3) (式⑶中、X21 表不 6111、八811、八8卩、6111、八1&、361'、1'111'、1^11、]^七、1^8或八作， X22 表不Glu、Asp、Gin、Asn、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg或His， X23 表不Tyr、Phe、Trp、His、Leu、Met、lie、Val、Cys或Ala， X24 表不Val、Ala、Leu、lie、Met、Thr、Cys或Asn， X25 表不Asp、Glu、Asn、Gin、Ala、Ser、Thr、Lys、Arg或His， X26 表不lie、Val、Leu、Met、Ala、Phe、Tyr、Trp或Gly， X27 表不His、Tyr、Phe、Lys、Arg、Leu、Met或Ala〇 ) 〇
2. 根据权利要求1所述的肽，其中，式（1)中X1是Trp或Phe，X2是Leu、Met、lie或Val，X3 是Ser、Ala、Thr、Gly或Asn，X4 是Leu、Met、lie、Val或Ala，X5 是Trp或Phe，X6 是 Gin、Asn或Ala，X7 是Asn、Gin或Ala，X8 是Ala、Gly、Ser或Thr。
3. 根据权利要求1所述的肽，其中，式（1)中X1是Trp或Phe，X2是Leu、Met、lie或Val，X3 是Ser或Ala，X4 是Leu或Ala，X5 是Trp，X6 是Gin或Ala，X7 是Asn或Ala，X8 是 Ala。
4. 根据权利要求1所述的肽，其中，式⑵中X11是Leu、Met、lie、Val或Ala，X12是 Glu、Asp、Gin、Asn或Ala，X13 是Val、Ala、Leu或lie，X14 是Ser、Ala、Thr、Gly或Asn，X15 是Pro、Val、lie或Ala，X16 是Pro、Val、lie或Ala，X17 是Asp、Glu、Asn、Gin或Ala。
5. 根据权利要求1所述的肽，其中，式⑵中X11是Leu或Ala，X12是Glu或Ala，X13是 Val或Ala，X14 是Ser或Ala，X15 是Pro或Ala，X16 是Pro或Ala，X17 是Asp或Ala。
6. 根据权利要求1所述的肽，其中，式（3)中X21是Gln、Asn或Ala，X22是Glu、Asp、Gln 或Ala，X23 是Tyr、Phe、Trp、His或Ala，X24 是Val、Ala、Leu或lie，X25 是Asp、Glu、Asn、 Gin或Ala，X26 是lie、Val、Leu、Met或Ala，X27 是His、Tyr、Phe、Lys、Arg或Ala。
7. 根据权利要求1所述的肽，其中，式⑶中X21是Gin或Ala，X22是Glu或Ala，X23是 Tyr或Ala，X24 是Val或Ala，X25 是Asp或Ala，X26 是lie或Ala，X27 是His或Ala。
8. 根据权利要求1至7任一项所述的肽，其中氨基酸数的上限是30。
9. 根据权利要求1至8任一项所述的肽，其具有EGFR结合性。
10. 含有根据权利要求1至9任一项所述的肽或其标记体的药物。
11. 含有根据权利要求1至9任一项所述的肽或其标记体的癌细胞或癌组织检测剂。
12. 含有根据权利要求1至9任一项所述的肽或其标记体的癌症诊断剂。
13. 含有根据权利要求1至9任一项所述的肽或其标记体的癌症治疗剂。
14. 根据权利要求1至9任一项所述的肽或其标记体，其用于检测癌细胞或癌组织。
15. 根据权利要求1至9任一项所述的肽或其标记体，其用于癌症诊断或癌症治疗。
16. 根据权利要求1至9任一项所述的肽或其标记体在制备癌细胞或癌组织检测剂中 的用途。
17. 根据权利要求1至9任一项所述的肽或其标记体在制备癌症诊断剂或癌症治疗剂 中的用途。
18. -种癌细胞或癌组织的检测方法，其特征在于使用根据权利要求1至9任一项所述 的肽或其标记体。
19. 一种癌症的诊断或治疗方法，其特征在于使用根据权利要求1至9任一项所述的肽 或其标记体。
【文档编号】G01N33/574GK104379595SQ201380031904
【公开日】2015年2月25日 申请日期:2013年6月18日 优先权日:2012年6月25日
【发明者】饭森祐介, 山形瑞惠, 塩野智隆 申请人:Hoya株式会社