带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条；所述试纸条包括依次重叠设置的带测试孔、对照孔的加样基板，带有掩蔽剂的玻璃纤维层，带有镉显色剂的反应基板以及带有两个观察孔的支持基板；所述两个观察孔分别与测试孔、对照孔相对应。所述掩蔽剂为以下五种配方中的两种或两种以上的组合：配方1：盐酸羟胺、氨基乙酸，配方2：硫代硫酸钠、柠檬酸钠，配方3：硫脲、焦磷酸钠，配方4：酒石酸钾钠、硫脲，配方5：二乙基二硫代氨基甲酸钠、邻菲啰啉。本发明的试纸条便于携带、操作简单、成本低廉、检测灵敏度高且特异性强、应用范围广，可实现中草药中重金属镉的现场快速检测。
【专利说明】带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条
【技术领域】
[0001]本发明涉及快速检测中草药中镉元素含量【技术领域】，具体涉及一种带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条。
【背景技术】
[0002]中药材中重金属含量超标问题已经在一定程度上制约了我国中药的出口及进入国际市场，损害了我国中药的形象，造成极大的经济损失，同时也严重危协着我国人民的体质健康。中国贸易报曾报道，我国某中药集团出口到德国的中药饮片中，30余种不合格药材中，重金属含量超标的不合格药材占34%。2008年中国中药杂志第18期曾发表了有关我国中药材重金属污染状况的统计学分析。结果表明，中草药材中铜、镉、铅、砷、汞等元素超标仍是当前最为普遍的重金属污染问题，涉及被污染中药材有山药、龙骨、细辛、半枝莲、黄芪、三七等30多种。另外，单样本或同一批次药材中多项重金属同时污染的现象也非常见。在被调查的169项铜含量超标的样本中，铺、铅等兀素同时超标的样本有30多项。铺中毒可使人或动物的肌肉萎缩关节变形，骨胳疼痛难忍，不能入睡，发生病理性骨折，严重时导致死亡。镉长期摄入可显著提高女性乳腺癌疾病的发病率。同时，镉元素长期时间的摄入直接导致肾损害和其它系统的疾病。因此，为保证中草药质量和控制重金属元素超标，必须从中药生产的源头开始，系统监测中草药原产地水土生态链及加工过程中重金属含量。建立快速、灵敏及实现现场检测的分析技术和产品显得非常迫切。
[0003]当前检测中草药中汞的传统仪器测试方法有原子吸收法、电感耦合等离子体发射光谱法、基于镉试剂的分光光度法及电化学分析法。原子吸收法、电感耦合等离子体发射光谱法及电化学分析法是较为理想的测试中草药重金属元素残留的方法，但仍需要大型昂贵的仪器及专业操作人员，检测周期长，操作复杂，无法实现现场快速检测。分光光度法由于测试过程相当复杂、稳定性及重复性差而受到极大的限制。
[0004]经对现有技术文献检索发现，专利申请号为200510048467.4的中国专利，名称为“镉测定液及比色测定管”，该专利利用对硝基苯重氮氨基偶氮苯为显色剂，将其和表面活性剂溴化十六烷基甲酰胺及缓冲液混合后，密封保存在经特殊设计的玻璃管中。在测定时，折断玻璃测试管的毛细管部分，自动吸入水样，发生显色后，对比标准色阶可实现对水质的快速检测。该检测管设计简单，携带方便，易于操作。但其缺点是该发明检测镉含量的特异性差，其它在水质中存在的二价金属离子如铜离子、锌离子、铅离子、汞离子、铁离子、钴离子、镍离子等会对测试造成严重的干扰，从而产生假阳性检测结果而无法对镉进行定性及定量检测。
[0005]目前国内有关镉的检测试纸条方面的发明专利几乎为空白。主要原因是用常规浸泡法制备的试纸条很容易氧化失效，无法常时间贮存。在进行重金属镉或铅测定的显色反应时，一些文献应用了一些常规的掩蔽剂以消除其它金属离子的干扰，但没有应用到试纸条上，原因在于常规的掩蔽剂不适用试纸条检测的精度要求；正因如此，有关应用了固化掩蔽剂的试剂条的发明专利或文献报道几乎为空白。另外，同常规显色法来比较，常规显色法中所配制的试剂也不能长期存放，需要在测试时现用现配。
【发明内容】
[0006]本发明的目的在于针对当前检测中草药中镉元素技术的不足，提供了一种带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条；具有特异性好、灵敏度高、操作简便、检测时间短、重复性及稳定性好、检测试剂存放稳定、不需要贵重仪器的优点，可实现中草药中镉残留的现场灵敏检测。与常规浸泡法制备的试纸条相比，利用本发明制作的试纸条使用了底物保护剂较易长时间存放；稳定性达半年以上，在现场测试时直接能够应用。
[0007]本发明的目的是通过以下技术方案实现的。
[0008]本发明涉及一种带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条，所述试纸条包括依次重叠设置的带测试孔、对照孔的加样基板，带有掩蔽剂的玻璃纤维层，带有镉显色剂的反应基板以及带有两个观察孔的支持基板；所述两个观察孔分别与测试孔、对照孔相对应。
[0009]优选的，所述掩蔽剂为以下五种配方中的两种或两种以上的组合:配方1:盐酸羟胺、氨基乙酸，配方2:硫代硫酸钠、柠檬酸钠，配方3:硫脲、焦磷酸钠，配方4:酒石酸钾钠、硫脲，配方5:二乙基二硫代氨基甲酸钠、邻菲啰啉。
[0010]更优选的，所述掩蔽剂为盐酸羟胺、氨基乙酸、二乙基二硫代氨基甲酸钠和邻菲啰啉。
[0011]更优选的，所述带有掩蔽剂的玻璃纤维层的制备包括:分别取所述掩蔽剂中各组分溶解于去离子水中形成掩蔽剂溶液，将玻璃纤维膜浸溃所述掩蔽剂溶液中5?15分钟，取出，真空干燥后截成比所述支持基板观察孔径稍大的方形小片，即可；每100毫升去离子水中所述掩蔽剂中各组分的用量分别为0.5?1.5克。
[0012]优选的，所述反应基板的反应涂层中含有镉显色剂、底物保护剂、赋形剂、增敏剂和缓冲剂；所述镉显色剂为对硝基苯重氮氨基偶氮苯、二苯基硫代二氨基脲、5-氯-2-羟基重氮基偶氮苯或4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯。
[0013]更优选的，所述增敏剂为曲拉通X-100、吐温-20、十二烷基磺酸钠或聚乙二醇辛
基苯基醚。
[0014]更优选的，所述带有镉显色剂的反应基板的制备包括:称取0.2?0.5克壳聚糖放入烧杯中，加入3%?6%的冰乙酸10?50毫升，低温静置形成溶化好的壳聚糖乙酸液；力口入镉显色剂0.02?0.10克、底物保护剂1.0?3.0克、赋形剂1.5?3.0克、增敏剂0.5?2毫升、缓冲剂2.85?6.747克，研磨混匀，真空干燥，取出后在反应基板上涂布形成80?200微米的湿膜，冷冻干燥，截成比所述支持基板观察孔径稍大的方形小片，即可。
[0015]本发明还涉及一种上述的带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条在检测中草药镉含量中的用途。
[0016]优选的，所述检测中草药镉含量包括如下步骤:
[0017]A、对中草药样品进行消化前处理，将其中的重金属转化为无机态离子，形成样品液；
[0018]B、取50微升样品液滴加测试孔中，另取50微升pH为8.0的0.1M磷酸盐缓冲液滴加在对照孔中；
[0019]C、对照实际显色程度与比色卡，即可检测得出中草药中镉元素含量。[0020]更优选的，所述消化前处理包括如下步骤:
[0021]A、称取中草药样品药粉，置于不锈钢高压消解罐专用的四氟乙烯内管中；
[0022]B、加入硝酸过夜；次日加入30%过氧化氢，盖紧消解罐内盖，再旋紧消解罐外套，置干便携式消毒罐中，120°C高压2小时；每克所述中草药样品药粉中加入硝酸10毫升，所述硝酸与过氧化氢的体积比为5: 3 ；
[0023]C、用二蒸水定容至所述硝酸体积的5倍，在测试前用lmmol/L的氢氧化钠将pH调节到8.0，即可。
[0024]国家标准方法中的检测中草药重金属的前处理方法是湿法消化法，需要专用的消化炉、消化管及通风厨，且消化温度不易控制，通常超过150°C，使一些其它重金属元素如汞、砷、硒等挥发而无法实现准确测试。另外，现有的国家标准方法的消化过程中使用高氯酸等氧化剂而易发生爆炸，造成对测试人员的危害。本发明中所用的前处理方法中只用到浓硝酸及过氧化氢，一次性在密闭的空间里高压消化而成，简单易行，消化效果好，无危险性，一次性消化后可测试包括汞、砷在内的十几种甚至几十种元素的检测。
[0025]本发明利用涂布有镉显色剂的反应基板和带有重金属掩蔽剂的玻璃纤维层组装而成检测中草药中镉含量的快速试纸条，建立了检测中草药中镉残留的快速现场检测新方法及手段，与现有技术相比较，本发明具有如下有益效果:
[0026]1、本发明首次提出了镉显色试纸条的涂布式制作方法；首次将带有掩蔽剂结构层引入重金属检测试纸条；带有保护剂的试纸条存放时间较长，稳定性达半年以上。
[0027]2、便于携带、操作简单。本发明的试纸条轻巧微小，包装在铝箔袋中，在常温化可常时间保存，便于携带。在实际样品检测时，只需将消化好的中草药材样品PH调节到7.5?
9.0左右，取样品待测液2?3滴，加入到试纸条上的测试孔中，并在对照孔中加入相同pH的磷酸盐缓冲液，显色5?10分钟后，与标准色阶卡进行比较，直接读出样品中镉的浓度。在此过程中，不需要特殊的仪器及专业化的操作程序。
[0028]3、成本低廉。本发明采取了微形化的试纸条，结构简单，设计新颖。所用的主要检测试剂均固化在试纸条上，与传统的比色法比较，极大地减少了试剂的浪费。同原子吸收分光光度法及电感耦合离子发射光谱法相比较，这些仪器测试法对一个样品的检测成本平均在150?250元。而采用本发明的技术可使检测成本降为2?3元。
[0029]4、检测灵敏度高且特异性强。在利用本发明的快速试纸条检测中草药中镉元素含量时，其检测下限达到0.lOppm，检测准确度及精确度基本与原子吸收分光光度法相当。由于在本发明的试纸条中应用了带有重金属掩蔽剂的玻璃纤维层，其它重金属离子如铜离子、铅离子、锌离子、镁离子、铁离子、镉离子、铬离子等均不会产生显著干扰，大大提高了检测的特异性。
[0030]5、应用范围广。本发明所建立的检测技术及装置可以应用到:①中草药；②土壤；③粮食作物；④水质；⑤饲料；⑥加工食品；⑦化妆品等物质中汞含量的检测。需要说明的是，上述样品在测试前必须经过消化处理，使镉元素从有机态中释放出来，转化成无机态的镉离子后进行测试。
【专利附图】
【附图说明】
[0031]通过阅读参照以下附图对非限制性实施例所作的详细描述，本发明的其它特征、目的和优点将会变得更明显:
[0032]图1为带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条模式图；
[0033]其中，I为测试加样孔，2为对照加样孔，3为加样基板，4为带有掩蔽剂的玻璃纤维层，5为隔离基板，6为带有镉显色剂的反应基板，7为测试观察孔，8为对照观察孔，9为支持基板；所示箭头为试纸条各部分组装顺序。
【具体实施方式】
[0034]下面结合具体实施例和附图对本发明进行详细说明。以下实施例将有助于本领域的技术人员进一步理解本发明，但不以任何形式限制本发明。应当指出的是，对本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进。这些都属于本发明的保护范围。
[0035]本发明的镉检测试纸条，是一种利用涂布有镉显色剂的反应基板与带有重金属掩蔽剂的玻璃纤维层组装而成的重叠式片状结构。如图1所示，这种组装式片状结构主要由四层组成，第一层为带有两个加样孔的加样基板3，其中一孔为测试加样孔1，另一孔为对照加样孔2 ;第二层为带有重金属掩蔽剂的玻璃纤维层4，是经浸泡一定剂量的重金属掩蔽齐U，冷冻干燥后制成，该层具有清除镉元素以外的重金属干扰并能有效清除样品中的固态杂质的作用；第三层为带有镉显色剂的反应基板6，是将含有镉显色剂、底物保护剂、赋形齐U、增敏剂和缓冲剂等混合物配制成胶状物均匀地涂布于无色透明的塑料胶片上而制成。第四层为带有两个观察孔(测试观察孔7、对照观察孔8)的支持基板9，这两个孔的位置与第一层的测试孔及对照孔精确对应。将以上四层按次序粘帖后，组装成检测中草药中镉元素的试纸条，并密封于铝箔袋中，常温保存待用。需要说明的是，在装配带有观察孔的支持基板9、带有镉显色剂的反应基板6后，需要在支持基板9上的带有镉显色剂的反应基板6周围地方粘贴隔离基板5，其大小与带有观察孔的支持基板9相一致，只是留出带有镉显色剂的反应基板部分，其材料与加样基板3材质相同。
[0036]在检测时，只需将消化好的中草药样品分别滴加到测试孔及对照孔中，在10分钟内与标准显色卡比较，直接读出中草药中镉的含量。
[0037]本发明试纸条的制备包括如下步骤:
[0038]第I步:加样塑料基板的制备。所述的加样塑料基板，其材料为聚氯乙烯、聚对苯二甲酸乙二酯、丙烯晴-丁二烯-苯乙烯共聚物等，优选地是商品化的聚氯乙烯板，厚度为75?180nm,宽度为8?12mm,长度为25?40mm。用冲压的方式在塑料基板打开两圆形孔，孔径为4?6mm。两孔中心相距为12?20mm。
[0039]第2步:带有重金属掩蔽剂的玻璃纤维层的制备。所述的玻璃纤维膜是由100%硼硅酸玻璃纤维制压制而成的商品化玻璃纤维滤膜，厚度为0.25?0.52mm，型号有GFA、GFB、GFC、GFD、GFF、GF6、GF8、GF9、GF10等，优先地选用GFD。所述的重金属掩蔽剂配方有以下类型:
[0040]掩蔽剂配方1:盐酸轻胺0.5?1.5克、氨基乙酸0.5?1.5克。主要用于掩蔽铜离子、钴离子、镍离子、铁离子及锌离子等的干扰。
[0041]掩蔽剂配方2:硫代硫酸钠0.2?1.0克、柠檬酸钠0.2?1.0克。主要用于掩蔽
钙离子、镁离子、汞离子、铅离子等的干扰。[0042]掩蔽剂配方3:硫脲0.5?1.5克、焦磷酸钠0.5?1.5克。主要用于掩蔽锌离子、铁离子、汞离子、铜离子、锰离子、铅离子等的干扰。
[0043]掩蔽剂配方4:酒石酸钾钠0.5?1.5克、硫脲0.5?1.5克。主要用于掩蔽银离子、汞离子、铜离子、铅离子等的干扰。
[0044]掩蔽剂配方5:二乙基二硫代氨基甲酸钠0.5?1.5克、邻菲啰啉0.5?1.5克。主要用于掩蔽银离子、汞离子、铜离子、铅离子等的干扰。
[0045]在制备重金属掩蔽剂的玻璃纤维层的过程中，对掩蔽剂配方可根据检测样品的不同而进行两种或两种以上的组合，以便达到最显著的掩蔽效果而不显著降低检测镉的灵敏度。优选地，在本发明中选用配方I及配方5的组合。
[0046]重金属掩蔽剂的玻璃纤维的制备(以选用配方I及配方5的组合为例):称取盐酸羟胺0.5?1.5克、氨基乙酸0.5?1.5克、二乙基二硫代氨基甲酸钠0.5?1.5克、邻菲啰啉0.5?1.5克，溶解到100毫升去离子水中，将其倾倒在一方形盘中，然后在其中浸入玻璃纤维膜，5?15分钟后捞出，放入真空干燥器中干燥后截成与第四层支持基板观察孔径稍大的方形小片。
[0047]第3步:带有镉显色剂反应基板的制备。镉显色剂反应基板是无色透明的塑料膜片，其材料由聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚四氟乙烯、聚碳酸酯等组成，优选地是聚苯乙烯，厚度为75?180nm。镉显色剂反应基板上的反应涂层中含有镉显色剂、底物保护剂、赋形剂、增敏剂和缓冲剂。所述的镉显色剂有对硝基苯重氮氨基偶氮苯、二苯基硫代二氨基脲、5-氯-2-羟基重氮基偶氮苯、4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯等，优选地是二苯基硫代二氨基脲。所述的底物保护剂有海藻糖、蔗糖、抗坏血酸等，优选地选用价廉的蔗糖。所述的赋形剂是层析用硅胶、三氧化二铝纳米粉、二氧化钛纳米粉等，优选地采用层析用硅胶。所述的增敏剂为表面活性剂类物质，如曲拉通X-100、吐温-20、十二烷基磺酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚等，优先地选用聚乙二醇辛基苯基醚。所述的缓冲剂有磷酸盐缓冲剂、碳酸盐缓冲剂、三羟甲基氨基甲烷-甘氨酸缓冲剂等，优选地选用磷酸盐缓冲剂。
[0048]镉显色剂反应基板的制备的方法举例如下:称取0.2?0.5克壳聚糖放入烧杯中，加入3%?6%的冰乙酸10?50毫升，放入冰箱中过夜。次日将溶化好的壳聚糖乙酸液加入白瓷研钵中，并加入二苯基硫代二氨基脲0.02?0.10克、蔗糖1.0?3.0克、层析硅胶1.5?3.0克、聚乙二醇辛基苯基醚0.5?2毫升、二水磷酸氢二钠2.7?3.4克、一水磷酸二氢钠0.15?3.347克。将上述试剂在研钵中研磨混匀25?35分钟。放入真空干燥器抽真空15?25分钟。取出后将上述显色剂混合物倒在反应基板上，用涂布器涂敷成80?200微米的湿膜，并进行冷冻干燥，截成与第四层支持基板观察孔径稍大的方形小片。
[0049]第4步:带有观察孔的支持基板的制备:所述的带有观察孔的支持基板，其材料与第I步所述的第一层的加样塑料基板的材料相同，其大小尺寸也等同于第I步所述的第一层的加样塑料基板。用冲压的方式在支持基板打开两圆形孔，孔径为4?6mm。两孔中心相距为12?20mm，位置与第I步所述的第一层的加样塑料基板上的加样孔准确对应。
[0050]第5步:试纸条的组装:将带有观察孔的支持基板、镉显色剂反应透明基板、带有重金属掩蔽剂的玻璃纤维层及加样塑料基板依次用双面胶粘合于一体，组装成检测中草药中镉含量的快速检测试纸条。
[0051]第6步:模拟检测色阶比色卡的制作:将制备好的镉标准试剂加入到上述对照孔与测试孔中，等待2~10分钟后，用数码相机拍摄显色情况，然后在计算机上用Photoshop7.0软件设计出比色卡,并标注好相应的检测浓度范围。
[0052]具体见以下各实施例:
[0053]实施例1、三七粉中镉元素含暈的检测
[0054]1、带有重金属掩蔽剂的试纸的制作
[0055]带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条模式图如图1所示；
[0056]在本实施例中，加样塑料基板采用聚氯乙烯聚氯乙烯板，厚度为75nm，宽度为8mm,长度为25mm。用冲压的方式在塑料基板打开两圆形孔,孔径为4mm。两孔中心相距为12mm。
[0057]在制作重金属掩蔽剂的玻璃纤维层时，选用型号为GFD的商品化玻璃纤维滤膜，厚度为0.25mm。掩蔽剂配方组合了配方I及配方5。制备过程如下:称取盐酸羟胺0.5克、氨基乙酸0.5克、二乙基二硫代氨基甲酸钠0.5克、邻菲啰啉0.5克，溶解到100毫升去离子水中，将其倾倒在一方形盘中，然后在其中浸入玻璃纤维膜，5分钟后捞出，放入真空干燥器中干燥后截成与第四层支持基板观察孔径稍大的方形小片。
[0058]在制备镉显色剂反应透明基板时，选用厚度为75nm的聚苯乙烯,镉显色剂基板上的反应涂层中镉显色剂、底物保护剂、赋形剂、增敏剂和缓冲剂分别选用二苯基硫代二氨基脲、蔗糖、层析用硅胶、聚乙二醇辛基苯基醚及磷酸盐缓冲剂。镉显色剂反应基板的制备过程式如下:称取0.2克壳聚糖放入烧杯中，加入3%的冰乙酸10毫升，放入冰箱中过夜。次日将溶化好的壳聚糖乙酸液加入白瓷研钵中，并加入二苯基硫代二氨基脲0.02克、蔗糖
1.0克、层析硅胶1.5克、聚`乙二醇辛基苯基醚0.5毫升、二水磷酸氢二钠2.7克、一水磷酸二氢钠0.15克。将上述试剂在研钵中研磨混匀25分钟。放入真空干燥器抽真空15分钟。取出后将上述显色剂混合物倒在镉显色剂反应基板上，用涂布器涂敷成80微米的湿膜，并进行冷冻干燥，截成与第四层支持基板观察孔径稍大的方形小片。
[0059]在制备带有观察孔的支持基板时，所选用的材料同加样塑料基板，其大小尺寸也等同于第I步所述的第一层的加样塑料基板。用冲压的方式在支持基板打开两圆形孔，孔径为4mm。两孔中心相距为12mm，位置与第I步所述的第一层的加样塑料基板上的加样孔准确对应。
[0060]试纸条的组装同前述的第5步。将组装好的试纸条装入规格为8.3cmX 11.8cm的铝箔袋中，放入一小包干燥剂和50微升一次性塑料小滴管2个，用封口机密封后常温存放。
[0061]在制作模拟检测色阶比色卡时，将制备好的镉标准试剂加入到上述试纸条的对照孔与测试孔中，等待2分钟后，用数码相机拍摄显色情况，然后在计算机上用Photoshop?.0软件设计出比色卡，并标注好相应的检测浓度范围，本实施例的检测镉的范围为 0.03ppm ~lOOppm。
[0062]2、样品的消化前处理
[0063]在本实施例中，首先将5份三七粉中药样品进行消化前处理。对于含有重金属的样品的前处理，国家标准方法均要求样品经高温、强酸及强氧化剂消化处理，使金属从有机态转为无机态离子。考虑到现场测试中草药中重金属含量的需求，本专利采用高压消解方法，应用了便于携带的小型手提式常用消毒罐、25毫升高压消解罐及简易式定容管。本发明所应用的消化过程具体如下:①准确称取待检样品三七粉中药粉0.500克，置于消解罐专用的四氟乙烯内管中；②加入硝酸5毫升过夜；次日加入30%过氧化氢3毫升；③盖紧消解内盖，再旋紧不锈钢高压消解罐外套，置干便携式消毒罐中，120°C高压2小时；④用二蒸水定容成25毫升，在测试前用lmmol/L的氢氧化钠将pH调节到8.0。
[0064]3、实际样品的测试
[0065]从铝箔袋中取出试剂条，平放于桌面上，用50微升一次性塑料小滴管吸取上述处理好的三七粉样品液，小心地在滴加在镉试纸条测试加样孔中；用另外一个50微升一次性塑料小滴管吸取pH为8.0的0.1M磷酸盐缓冲液小心地在滴加在镉试纸条对照加样孔中。放置2分钟后，从观察孔观察试纸条颜色的变化来判定结果。对照实际显色程度与比色卡来半定量三七粉中镉含量，检测结果表明，5份三七粉样品中，有4份检出镉残留，其含量分别为0.2ppm、0.30ppm、0.4ppm、0.60ppm,另外一个样品中镉未检出。对上述检测结果应用电感耦合等离子体发射光谱法进行确证性测试，检测结果表明，5份三七粉样品中，有4份相对应样品检出镉残留，其含量分别为0.2327ppm、0.1788ppm、0.3584ppm、0.4081ppm，另外一个样品中镉未检出，说明此实验实验数据基合吻合本发明的检测结果。
[0066]实施例2、茯苓粉中镉元素含暈的检测
[0067]1、带有重金属掩蔽剂的试纸条的制作
[0068]在本实施例中，加样塑料基板采用聚对苯二甲酸乙二酯塑料板，厚度为120nm，宽度为IOmm,长度为30mm。用冲压的方式在塑料基板打开两圆形孔,孔径为5mm。两孔中心相距为16臟。
[0069]在制作重金属掩蔽剂的玻璃纤维层时，选用型号为6FA的商品化玻璃纤维滤膜，厚度为0.35mm。掩蔽剂配方组合了配方2及配方4。制备过程如下:称取硫代硫酸钠0.5克、柠檬酸钠0.5克、酒石酸钾钠1.0克、硫脲1.0克，其它制作过程同实施例1。
[0070]在制备镉显色剂反应透明基板时，选用厚度为IOOnm的聚乙烯，镉显色剂基板上的反应涂层中镉显色剂、底物保护剂、赋形剂、增敏剂和缓冲剂分别选用对硝基苯重氮氨基偶氮苯、海藻糖、三氧化二铝纳米粉、吐温-20及碳酸盐缓冲剂缓冲剂。镉显色剂反应基板的制备过程式如下:称取0.3克壳聚糖放入烧杯中，加入4%的冰乙酸30毫升，放入冰箱中过夜。次日将溶化好的壳聚糖乙酸液加入白瓷研钵中，并加入对硝基苯重氮氨基偶氮苯
0.05克、海藻糖2.0克、三氧化二铝纳米粉2.0克、吐温-201.0毫升、碳酸氢钠1.5克、碳酸钠0.2克。将上述试剂在研钵中研磨混匀30分钟。放入真空干燥器抽真空20分钟。取出后将上述显色剂混合物倒在镉显色剂反应基板上，用涂布器涂敷成100微米的湿膜，并进行冷冻干燥，截成与第四层支持基板观察孔径稍大的方形小片。
[0071]在制备带有观察孔的支持基板时，其制作过程中实施例1，不同之处是孔径为5mm。两孔中心相距为16mm，位置与第I步所述的第一层的加样塑料基板上的加样孔准确对应。
[0072]试纸条的组装同实施例1。
[0073]在制作模拟检测色阶比色卡时，基本制作过程同实施例1，不同之处是将制备好的镉标准试剂加入到上述试纸条的对照孔与测试孔中，等待5分钟后，本实施例的检测镉的范围为 0.1Oppm ?50ppm。
[0074]2、样品的消化前处理
[0075]在本实施例中，选用5份茯苓粉中药样品进行消化前处理。对样品的高压消化处理过程同实施例1。
[0076]3、实际样品的测试
[0077]样品测试基本步骤同实施例1。检测结果表明，5份茯苓粉中药样品中，有3份检出镉残留，其含量分别为0.8ppm、0.60ppm及0.2ppm，另外两个样品中镉未检出。对上述检测结果应用电感耦合等离子体发射光谱法进行确证性测试，检测结果表明，5份三七粉样品中，有3份相对应样品检出镉残留，其含量分别为0.7578ppm、0.5658ppm及0.1784ppm，另外两份样品中镉未检出，说明此实验数据基合吻合本发明的检测结果。
[0078]实施例3、芦根提取物中镉元素含暈的检测
[0079]1、带有重金属掩蔽剂的试纸条的制作
[0080]在本实施例中，加样塑料基板采用丙烯晴-丁二烯-苯乙烯共聚物板，厚度为180nm,宽度为12mm,长度为40mm。用冲压的方式在塑料基板打开两圆形孔,孔径为6mm。两孔中心相距为20mm。
[0081]在制作重金属掩蔽剂的玻璃纤维层时，选用型号为GF6的商品化玻璃纤维滤膜，厚度为0.52_。掩蔽剂配方组合了配方3及配方5。制备过程如下:称取硫脲1.5克、焦磷酸钠1.5克、二乙基二硫代氨基甲酸钠1.5克、邻菲啰啉1.5克，其它制作过程同实施例1。
[0082]在制备铺显色剂反应透明基板时，选用厚度为180nm的聚四氣乙稀,铺显色剂基板上的反应涂层中镉显色剂、底物保护剂、赋形剂、增敏剂和缓冲剂分别选用对4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯、抗坏血酸、二氧化钛纳米粉、曲拉通X-100及三羟甲基氨基甲烷-甘氨酸缓冲剂。镉显色剂反应基板的制备过程式如下:称取0.5克壳聚糖放入烧杯中，加入6%的冰乙酸50毫升，放入冰箱中过夜。次日将溶化好的壳聚糖乙酸液加入白瓷研钵中，并加入4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯0.10克、抗坏血酸3.0克、二氧化钛纳米粉3.0克、曲拉通X-1002.0毫升、三羟甲基氨基甲烷2.5克、甘氨酸2.0克。将上述试剂在研钵中研磨混匀35分钟。放入真空干燥器抽真空25分钟。取出后将上述显色剂混合物倒在镉显色剂反应基板上，用涂布器涂敷成200微米的湿膜，并进行冷冻干燥，截成与第四层支持基板观察孔径稍大的方形小片。
[0083]在制备带有观察孔的支持基板时，其制作过程中实施例1，不同之处是孔径为6mm。两孔中心相距为20mm，位置与第I步所述的第一层的加样塑料基板上的加样孔准确对应。
[0084]试纸条的组装同实施例1。
[0085]在制作模拟检测色阶比色卡时，基本制作过程同实施例1，不同之处是将制备好的镉标准试剂加入到上述试纸条的对照孔与测试孔中，等待10分钟后，本实施例的检测镉的范围为 0.1Oppm ?lOOppm。
[0086]2、样品的消化前处理
[0087]在本实施例中，选用5份芦根提取物中药样品进行消化前处理。对样品的高压消化处理过程同实施例1。
[0088]3、实际样品的测试
[0089]样品测试基本步骤同实施例1。检测结果表明，5份5份芦根提取物样品中，有4份检出镉残留，其含量分别为1.0ppm,2.0ppm、0.5ppm及0.2ppm，另外I个样品中镉未检出。对上述检测结果应用电感耦合等离子体发射光谱法进行确证性测试，检测结果表明，5份三七粉样品中，有3份相对应样品检出镉残留，其含量分别为0.9126ppm、l.7849ppm、0.4683ppm及0.2537ppm，另外I个样品中镉未检出，说明此实验数据基合吻合本发明的检测结果。
[0090]以上对本发明的具体实施例进行了描述。需要理解的是，本发明并不局限于上述特定实施方式，本领域技术人员可以在权利要求的范围内做出各种变形或修改，这并不影响本发明的实质内容。
【权利要求】
1.一种带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条，其特征在于，所述试纸条包括依次重叠设置的带测试孔、对照孔的加样基板，带有掩蔽剂的玻璃纤维层，带有镉显色剂的反应基板以及带有两个观察孔的支持基板；所述两个观察孔分别与测试孔、对照孔相对应。
2.如权利要求1所述的带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条，其特征在于，所述掩蔽剂为以下五种配方中的两种或两种以上的组合:配方1:盐酸羟胺、氨基乙酸，配方2:硫代硫酸钠、柠檬酸钠，配方3:硫脲、焦磷酸钠，配方4:酒石酸钾钠、硫脲，配方5:二乙基二硫代氨基甲酸钠、邻菲啰啉。
3.如权利要求2所述的带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条，其特征在于，所述掩蔽剂为盐酸羟胺、氨基乙酸、二乙基二硫代氨基甲酸钠和邻菲啰啉。
4.如权利要求2所述的带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条，其特征在于，所述带有掩蔽剂的玻璃纤维层的制备包括:分别取所述掩蔽剂中各组分溶解于去离子水中形成掩蔽剂溶液，将玻璃纤维膜浸溃所述掩蔽剂溶液中5~15分钟，取出，真空干燥后截成比所述支持基板观察孔径稍大的方形小片，即可；每100毫升去离子水中所述掩蔽剂中各组分的用量分别为0.5~1.5克。
5.如权利要求1所述的带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条，其特征在于，所述反应基板的反应涂层中含有镉显色剂、底物保护剂、赋形剂、增敏剂和缓冲剂；所述镉显色剂为对硝基苯重氮氨基偶氮苯、二苯基硫代二氨基脲、5-氯-2-羟基重氮基偶氮苯或4-溴-2-磺酸基苯基重氮氨基偶氮苯。
6.如权利要求5所述的带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条，其特征在于，所述增敏剂为曲拉通X-100、吐温-20、十二烷基磺酸钠或聚乙二醇辛基苯基醚。
7.如权利要求5所述的带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条，其特征在于，所述带有镉显色剂的反应基板的制备包括:称取0.2~0.5克壳聚糖放入烧杯中，加入3%~6%的冰乙酸10~50毫升，低温静置形成溶化好的壳聚糖乙酸液；加入镉显色剂0.02~0.10克、底物保护剂1.0~3.0克、赋形剂1.5~3.0克、增敏剂0.5~2毫升、缓冲剂2.85~6.747克，研磨混匀，真空干燥，取出后在反应基板上涂布形成80~200微米的湿膜，冷冻干燥，截成比所述支持基板观察孔径稍大的方形小片，即可。
8.—种如权利要求1~7中任一项所述的带有掩蔽剂的检测中草药镉含量的试纸条在检测中草药镉含量中的用途。
9.如权利要求8所述的用途，其特征在于，所述检测中草药镉含量包括如下步骤: A、对中草药样品进行消化前处理，将其中的重金属转化为无机态离子，形成样品液； B、取50微升样品液滴加测试孔中，另取50微升pH为8.0的0.1M磷酸盐缓冲液滴加在对照孔中； C、对照实际显色程度与比色卡，即可检测得出中草药中镉元素含量。
10.如权利要求9所述的用途，其特征在于，所述消化前处理包括如下步骤: A、称取中草药样品药粉，置于不锈钢高压消解罐专用的四氟乙烯内管中； B、加入硝酸过夜；次日加入30%过氧化氢，盖紧消解内盖，再旋紧消解罐外套，置干便携式消毒罐中，120°C高压2小时；每克所述中草药样品药粉中加入硝酸10毫升，所述硝酸与过氧化氢的体积比为5: 3 ； C、用二蒸水定容至所述硝酸体积的5倍，在测试前用lmmol/L的氢氧化钠将pH调节到.8.0，即可。
【文档编号】G01N21/78GK103776826SQ201410021261
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2014年1月16日 优先权日:2014年1月16日
【发明者】黄生权, 付萌, 柴春彦, 刘国艳, 唐青涛, 赵娜, 秦垂新 申请人:无限极（中国）有限公司