一种检测食品中高氯酸根离子的试剂盒及其测定方法
【专利摘要】本发明提供了一种检测食品中高氯酸根离子的试剂盒，包括高氯酸盐标准溶液、18O标记高氯酸根溶液、乙酸溶液、乙腈、乙酸铵溶液和固相萃取C18柱。本发明还提供了一种检测食品中高氯酸根离子的方法：（1）样品提取；（2）净化；（3）采用反相高分离能力、高信噪比的分析方法进行准确定性与定量。本试剂盒采用乙酸溶液作为样品提取溶剂；采用固相萃取柱净化，具有较好的回收率及净化效果；采用软电离技术进行测定，内标法定量，达到高选择性、高灵敏度、应用范围广的效果，具有极强的专属性，广泛应用于食品中高氯酸根离子的测定。
【专利说明】一种检测食品中高氯酸根离子的试剂盒及其测定方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及化学物质的理化分析领域，具体涉及一种检测食品中高氯酸根离子的试剂盒及其测定方法。
【背景技术】
[0002]高氯酸盐是指含有高氯酸根([ClO4D的盐类，既有天然存在，也有人工合成。高氯酸根离子具有与碘离子相似的电荷和离子半径，对碘离子的转运蛋白具有比碘更高的亲和力，因而能够抑制碘的吸收，削弱甲状腺功能，导致人类新陈代谢功能絮乱、影响胎儿和婴儿神经中枢的正常生长和发育，孕妇严重的甲状腺功能不足会导致胎儿的呆小症。由于高氯酸盐的高溶解低吸附性，容易通过水源灌溉，植物吸收、累积，最终传递给人类。其污染问题已引起了环境学家和卫生学家的极大重视。国外已有研究人员对饮用水、水源、奶类、蔬菜以及营养补充剂等中的高氯酸盐含量进行了调查，我国也有研究人员对北京市饮用水及水源高氯酸盐污染情况进行了检测。2009年4月，美国疾病控制与预防中心研究人员报道婴儿奶粉受到高氯酸盐污染的问题，引起了人们极大的关注。因此，建立快速准确测定食品中高氯酸盐含量的方法已迫在眉睫。
[0003]目前对高氯酸盐的的测定方法可以概括地划分为离子色谱法、表面增强拉曼散射法、离子色谱-质谱联用技术和高效液相色谱-质谱/质谱法等。虽然离子色谱-电导检测法可以用来测定水中痕量的高氯酸根离子，但是色谱的保留时间并不是唯一离子的特征，还需要进一步的实验才能够完全确定。而且电导检测器缺乏选择性，当样品中含有其他离子时，此方法容易出现假阳性。表面增强拉曼散射法是以一种可实现水环境中高氯酸根的原位、实时及高灵敏度的检测而发展起来的分析方法。但该技术的重现性较差导致定量分析困难。国内外有关食品中高氯酸根离子的液相色谱-质谱/质谱检测方法文献报道极少，检测对象主要为单一的瓶装水、牛奶或奶粉基质，尚未见到可以检测包括瓶装水、牛奶、奶粉、谷物、水产品、动物组织等食品中高氯酸根离子的液相色谱-质谱/质谱检测方法和系统。
【发明内容】
[0004]本发明的目的是针对上述现有技术的缺陷，提供一种检测食品中高氯酸根离子的试剂盒及其测定方法，该方法适用于瓶装水、水果、牛奶、奶粉、谷物、水产品、动物组织等食品，且方法科学合理，灵敏度高、选择性高、应用范围广和具有极强的专属性，完全满足国内外检测限量的需要。
[0005]为了实现上述目的，本发明的技术方案如下:
[0006]本发明的一种检测食品中高氯酸根离子的试剂盒，包括高氯酸盐标准溶液、18O标记高氯酸根溶液、乙酸溶液、乙腈、乙酸铵溶液和固相萃取C18柱。
[0007]优选的，所述高氯酸盐标准溶液的CAS No为7601-89-0，纯度为100%，浓度为1000mg/L。[0008]优选的，所述18O标记高氯酸根溶液为含Cl18CV的溶液，所述18O标记高氯酸根溶液的纯度为90%、浓度为100 μ g/L。
[0009]优选的，所述乙酸溶液由乙酸和水组成，所述乙酸与所述水的体积比为1:100。
[0010]优选的，所述乙酸铵溶液包含乙酸铵和水，所述乙酸铵溶液的摩尔浓度为0.1mol/L。称取7.708g乙酸铵，用水定容至IOOOmL即可或相同配比配制的溶液。
[0011]优选的,所述固相萃取C18柱的型号为waters,填料量为200mg, 3mL或相当者。
[0012]本发明还提供了一种高分离能力、高灵敏度、高选择性，采用质量数进行定性与定量的分析方法测定食品中的高氯酸根离子，按如下步骤进行:
[0013](I)样品制备与保存；
[0014](2)将步骤(I)中所制备得到的样品加入所述18O标记高氯酸根溶液，
[0015]若所述食品为瓶装水，则直接进行液相色谱-质谱/质谱仪测定；
[0016]若所述食品为非瓶装水，则再加入所述乙酸溶液进行提取；
[0017](3)净化:吸取1.0mL步骤(2)中得到的提取上清液过固相萃取C18柱，弃去流出液，吸取1.5mL上清液过固相萃取C18柱，收集流出液，涡旋振荡30s，供液相色谱-质谱/质谱仪测定；
[0018](4)检测:
[0019]液相色谱条件:
[0020]a)色谱柱:IC_Pak? Anion HR 柱,6 μ m, 4.6mmX 75mm(内径)或相当者；
[0021]b)流动相:乙腈 +0.lmol/L 乙酸铵溶液=(60+40，V1A2)；
[0022]c)流速:700 μ L/min ；
[0023]d)柱温:40°C ;
[0024]e)进样量:IOyL ;
[0025]质谱条件:
[0026]a)离子源:电喷雾离子源(ESI);
[0027]b)扫描方式:负离子扫描；
[0028]c)监测模式:多反应监测(MRM);
[0029]d)气帘气(CUR):209kPa ；
[0030]e)雾化气(GSl):414kPa ；
[0031]f)辅助加热气(GS2):483kPa ；
[0032]g)碰撞气(CAD):高；
[0033]h)电喷雾电压(IS):-1000V ;
[0034]i)离子源温度(TEM):5500C ；
[0035]j)监测离子对、碰撞能量、去簇电压、采集时间和保留时间见下表:
[0036]
【权利要求】
1.一种检测食品中高氯酸根离子的试剂盒，其特征在于，包括高氯酸盐标准溶液、18O标记高氯酸根溶液、乙酸溶液、乙腈、乙酸铵溶液和固相萃取C18柱。
2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述高氯酸盐标准溶液的CASNo为7601-89-0，纯度为 100%，浓度为 1000mg/L。
3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述18O标记高氯酸根溶液为含Cl18O4-的溶液，所述18O标记高氯酸根溶液的纯度为90%、浓度为100 μ g/L。
4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述乙酸溶液由乙酸和水组成，所述乙酸与所述水的体积比为1:100。
5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述乙酸铵溶液包含乙酸铵和水，所述乙酸铵溶液的摩尔浓度为0.lmol/L。
6.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述固相萃取C18柱的型号为waters，填料量为200mg，3mL。
7.权利要求1-6之一所述试剂盒用于检测食品中高氯酸根离子的测定方法，其特征在于，包括如下步骤: (1)样品制备与保 存； (2)将步骤(1)中所制备得到的样品加入所述18O标记高氯酸根溶液， 若所述食品为瓶装水，则直接进行液相色谱-质谱/质谱仪测定； 若所述食品为非瓶装水，则再加入所述乙酸溶液进行提取； (3)净化:吸取1.0mL步骤(2)中得到的提取上清液过所述固相萃取C18柱，弃去流出液，吸取1.5mL上清液过所述固相萃取C18柱，收集流出液，涡旋振荡30s ； (4)液相色谱-质谱/质谱仪测定: 液相色谱条件: a)色谱柱:IC_Pak?Anion HR 柱，6 μ m, 4.6mmX 75mm(内径)； b)流动相:乙腈+0.lmol/L乙酸铵溶液=(60+40，V1A2)；
c)流速:700μ L/min ； d)柱温:40°C； e)进样量:10yL; 质谱条件: a)离子源:电喷雾离子源(ESI)； b)扫描方式:负离子扫描； c)监测模式:多反应监测(MRM); d)气帘气(CUR):209kPa ； e)雾化气(GSl):414kPa ； f)辅助加热气(GS2):483kPa ； g)碰撞气(CAD):高； h)电喷雾电压(IS):-1000V ； i)离子源温度(TEM):5500C ； j)监测离子对、碰撞能量、去簇电压、采集时间和保留时间见下表:
8.根据权利要求7所述的测定方法，其特征在于，步骤(5)所述的定性判断按如下方法进行:相对离子丰度的最大允许偏差不超过以下规定范围，则可判断样品中存在对应的待测物: 若相对离子丰度为> 50%，则允许的相对偏差为±20% ; 若相对离子丰度为> 20%~50%，则允许的相对偏差为±25% ； 若相对离子丰度为> 10%~20%，则允许的相对偏差为±30% ； 若相对离子丰度为≥10%，则允许的相对偏差为±50%。
9.根据权利要求7所述的测定方法，其特征在于，步骤(5)所述的定量结果按如下方法计算: 用质谱数据处理机或按式(I)计算试样中药物的含量，计算结果需扣除空白值:
10.根据权利要求7所述的测定方法，其特征在于，所述食品包括瓶装水、水果、牛奶、奶粉、谷物、水产品和动物组织中的一种或多种。
【文档编号】G01N30/02GK104007189SQ201410040386
【公开日】2014年8月27日 申请日期:2014年1月27日 优先权日:2014年1月27日
【发明者】吴映璇, 林峰, 邵琳智, 欧阳少伦, 姚仰勋, 谢敏玲 申请人:广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心