一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器的制备方法及应用与流程

文档序号:11860528阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器的制备方法,其特征在于,步骤如下:

(1)ITO 电极的预处理:将ITO导电玻璃切割至1.0 cm × 2.5 cm大小,依次用洗洁精、丙酮、乙醇和超纯水超声清洗30 min,用氮气吹干;

(2)滴加5~7 µL、2~5 mg/mL CdS@SnS2@MWCNTs溶液于电极表面,室温条件下晾干;

(3)将电极于3 mmol/L 巯基乙酸溶液中浸润0.5~1.5 h,室温条件下晾干,超纯水冲洗;

(4)滴加2~4 µL、含0.01 mol/L 1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐溶液EDC、0.002 mol/L N-羟基琥珀酰亚胺溶液的混合溶液于电极表面,继续滴加5~7 µL、1~3 µg/mL的胰岛素捕获抗体,4℃冰箱中晾干,超纯水冲洗;

(5)滴加5~7 µL、质量分数为0.5~2.0 %的牛血清白蛋白溶液于电极表面,以封闭电极表面上非特异性活性位点,4℃冰箱中晾干;

(6)用超纯水清洗,晾至湿润状态,将5~7 µL、0.1 pg/mL ~ 5 ng/mL不同浓度的胰岛素抗原溶液滴涂于电极表面,使其与胰岛素捕获抗体发生特异性免疫反应,4℃冰箱中孵化1 h,用超纯水冲洗以除去未结合的胰岛素抗原,室温下晾干,制得一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器。

2.如权利要求1所述的一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器的制备方法,其特征在于,所述CdS@SnS2@MWCNTs的制备,步骤如下:

(1)SnS2@MWCNTs的制备

将30~50 mg MWCNTs 溶解于30 mL超纯水中,超声4 h,3~6 mmol SnCl4·5H2O加入到上述溶液中,搅拌4 h后,10~15 mmol 硫代乙酰胺加入到上述溶液中,搅拌30 min,将此混合溶液转移至50 mL的聚四氟乙烯反应釜中,160℃条件下保持8~12 h,冷却至室温,离心分离,用超纯水和无水乙醇洗涤3次,于真空干燥箱中50℃干燥12 h,制得SnS2@MWCNTs复合材料;

(2)CdS@SnS2@MWCNTs的制备

向30~70 mL 1.0 ×10-2 mol/L CdCl2溶液中通氮气30 min,去除溶液中的氧气,随后,60 mg SnS2@MWCNTs粉末加入到上述溶液中,氮气氛围下,100℃回流30 min,冷却至室温,离心分离,用超纯水洗涤3次,于真空干燥箱中50℃干燥12 h,制得CdS@SnS2@MWCNTs复合材料。

3.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于CdS@SnS2@MWCNTs无标记型胰岛素光电免疫传感器,用于胰岛素抗原的检测,检测步骤如下:

(1)采用三电极体系进行测定,所制备的光电免疫传感器为工作电极,饱和甘汞电极为参比电极,铂丝电极为对电极,利用光电化学工作站进行检测,光电检测采用i-t测试手段,偏压设置为0 V,光源为430 nm,每隔20 s进行开关灯;

(2)在15 mL、pH 7.0的含0.2 mol/L抗坏血酸的磷酸盐缓冲溶液中,通过光电化学工作站检测0.1 pg/mL ~ 5 ng/mL一系列不同浓度的胰岛素抗原标准溶液,通过记录开关灯前后产生的不同光电流信号,绘制工作曲线;

(3)将待测样品溶液代替胰岛素抗原标准溶液进行检测,检测的结果可通过工作曲线的查得。

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