本发明涉及一种甘蔗蔗汁中锌含量的检测方法。
背景技术：
微量元素对人体的发育和健康成长具有重要的作用和影响。锌是人体不可缺少的微量元素，一是可以促进儿童身体及智力发育；二是对人体的免疫功能起着调节作用，三是能维持男性的正常生理机能。红糖是我国重要的传统养生品，广受消费者欢迎，通过食用红糖来补锌，更加绿色和健康。甘蔗是加工红糖的主要原料，研究表明，甘蔗品种间的锌含量存在显著差异，换言之，通过甘蔗杂交育种，即品质育种，可选择锌含量高的甘蔗新品种用于加工红糖。
但是，材料数多、工作量大是甘蔗杂交育种的显著特点。如何建立一种准确的、简单易行且适合大批量检测甘蔗蔗汁中锌含量的方法，是筛选和培育高锌含量甘蔗新品种的关键。
目前，测定样品zn含量的方法主要有分光光度计法、原子吸收光谱法和原子荧光光谱法。
技术实现要素：
本发明的目的在于针对上述现有技术中存在的不足，提供一种甘蔗蔗汁中锌含量的检测方法，主要用于甘蔗杂交育种中微量元素锌含量的检测，用以开展“富锌甘蔗”品种选育过程中，反复实验形成的、用于大批量、精确检测甘蔗汁样锌含量的检测方法。
本发明通过如下技术方案予以实现：一种甘蔗蔗汁中锌含量的检测方法，步骤如下：
（1）酸的选择和比例控制：量取5ml的甘蔗蔗汁样品，选择体积比硝酸：高氯酸=7:2的混合酸20ml作为消化液，硝酸和高氯酸均为色谱纯级，其中硝酸含量为69.0-70.0%，高氯酸含量为70.0-72.0%，静置过夜，第二天进行消解；
（2）消化温度及条件控制：样品加入20ml混合酸后静置过夜后，第二天置于电热消解仪加热消化，温度控制150℃，加热6小时，补加3ml硝酸，继续加热，直至消化液无色透明为止；
（3）去酸条件控制及定容：待消化液无色透明时，加3ml超纯水，温度升至180℃继续加热，以除去多余的硝酸，待烧杯中的液体接近1ml-2ml时，取下冷却；用去离子水淋洗并转移于刻度管中，定容至20ml，上机检测；
（4）计算锌含量：以0.5mol/l硝酸溶液作为空白液，用原子吸收光谱仪检测测定用试样液中锌的含量c1、以及空白液中锌的含量c2，试样中锌含量按下式进行计算：x=（c1-c2）×4。
本发明方法基于原子吸收光谱法，经改进消化处理条件，形成了一种湿化-原子吸收光谱法检测甘蔗蔗汁锌含量，具有测量精确度高、适合大批量样品同时检测、重复性好、操作简单、条件容易控制的特点，可有效降低检测成本和节约了时间，为甘蔗品质育种提供了一种方便、高效、低成本、真实可靠的数据支持。
具体实施方式
下面结合本发明的具体实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是对本发明一部分实例，而不是全部的实例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有付出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
一种甘蔗蔗汁中锌含量的检测方法，步骤如下：
1、所检测甘蔗材料，剥叶，砍去根部和顶端，保留甘蔗顶端第一节至根部第一节，清洗干净，压榨成汁，取汁原液，用滤纸过滤，收集并编号。
2、准确称取5g甘蔗汁样，加入20ml混合酸，硝酸（v）：高氯酸（v）=7:2，硝酸和高氯酸均为色谱纯级，其中硝酸含量为69.0-70.0%，高氯酸含量为70.0-72.0%，盖上表面皿，静置过夜；第二天置于电热消解仪加热消化，温度150℃，加热6小时；补加3ml硝酸，继续加热，直至消化液无色透明为止；加3ml超纯水，加热（温度升至180℃）以除去多余的硝酸，待烧杯中的液体接近1ml-2ml时，取下冷却；用去离子水淋洗并转移于刻度管中，定容至20ml，待上机检测。准备甘蔗汁样的同时设置0.5mol/l硝酸溶液作空白组。
3、以0.5mol/l硝酸溶液为溶剂，配制100μg/mlzn标准液为母液，稀释并配制0.5μg/ml，1μg/ml，2μg/ml，3μg/ml，4μg/ml，5μg/ml六个梯度的zn标准液，准备上样。
4、取2个消煮管，每个消煮管准确称取5ml0.5mol/l硝酸溶液，分别添加5μg/ml锌标准液，并编号，按前述方法进行消化处理，并上机测定，进行添加回收率实验。
5、开机，用原子吸收光谱仪按zn标准溶液组、空白液、添加回收率样品、甘蔗汁样测定液顺序上样、检测；为避免各个检测组之间残留干扰实验结果，检测过程中，每个样品组检测用洗液穿插，所述洗液为超纯水。
6、结果计算
试样中锌含量按下式进行计算。
式中：
x—试样中锌的含量，单位为毫克每千克或毫克每升（mg/kg或mg/l）
c1—经检测的各样品组测定用试样液中锌的含量，单位为微克每毫升（μg/ml）
c2—试剂空白液中锌的含量，单位为微克每毫升（μg/ml）
v—试样消化液定容体积，单位为毫升（ml）
m—试样质量或体积，单位为克或毫升（g或ml）
应用实例
1.样品的消化处理及上样检测
以测定新台糖22号，粤糖93-1595，云蔗05-51，德蔗09-78和云蔗12-12025个甘蔗样品锌检测为例，准确称取5ml甘蔗汁样（同时设置空白组），按以上具体实施方式处理。
2.标准液的配制及标准曲线的制定
2.1标准液的配制（见下表1）
表1标准液的配制
2.2标准曲线制定及相关系数
以0.5mol/l硝酸溶液作为空白液，100μg/mlzn标准液为母液，配制0.5，1，2，3，4，5μg/ml的zn标准溶液并测定其吸光度（y），以其吸光度相对应的浓度（x，μg/ml）作图得zn的标准工作曲线y=0.1073x+0.0131,线性相关系数r2=0.9988。
3.检出限和精密度
将空白液平行测定10次，测得zn元素其标准偏差sd为0.003，以其标准偏差的3倍所对应的浓度为检出限为0.084μg/ml，本实验方法zn的检出限为0.042(μg/kg)；准确称取待测样品，进行10次平行测定，得到zn标准偏差sd=0.018，吸光度的平均值为0.458，相对标准偏差rsd为3.93%。由此可见，实验方法的检出限和精密度都比较高。
4.回收率测定
取2个消煮管，每个消煮管准确称取5ml0.5mol/l硝酸溶液，分别添加5μg/ml锌标准液，并编号，按前述方法进行消化处理并测定，作添加回收率试验。通过该平行试验，看结果重复性，结果如下表。所测锌含量的回收率在90%-110%之间，回收率好，说明该方法可行性好，具体如表2。
其中下表2中，加标量5μg，实为加入1ml5μg/ml于空白对照组中；原含量：是指经过消化处理后空白对照组中检测到的zn含量，加标后含量，指空白组加入1ml5μg/ml后消化处理检测到含量。
表2：锌的回收率测定
5.部分样品蔗汁zn含量及标准物质样品的测定结果
五个样品甘蔗蔗汁锌含量测量结果具体如下表3，可知，不同甘蔗汁zn含量存在差异，整体含量较高。
表3甘蔗汁中zn含量和标准物质样品测定结果
有益效果
1、本方法样品检出限和精确度高，确保微量元素检测的准确性，为甘蔗品质育种提供真实有效的数据支持；
2、本方法适合大批量样品同时检测，提高了试验效率；
3、本方法重复性好，确保了在相同实验条件下，实验的的重演性和数据的真实可靠性；
4、本方法操作简单，条件容易控制，所需试剂量小，不但提高了检测效率，同时也可减少实验成本。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。