提供抗体的试剂盒、储存抗体的贴片及使用其的免疫诊断方法和装置与流程

文档序号:16362687发布日期:2018-12-22 08:15阅读:156来源:国知局
提供抗体的试剂盒、储存抗体的贴片及使用其的免疫诊断方法和装置与流程

本公开涉及包含抗体的贴片、使用其进行免疫测定的方法和装置,并且更具体地,涉及包含抗体的贴片以及使用其进行免疫测定以利用免疫学特征从样品经济地进行诊断并迅速地获取结果的方法和装置。

背景技术

由于快速老龄化的社会以及对生活质量的增长的需求,针对早期诊断和早期治疗的诊断市场在全世界(包括韩国)逐年增长,并且快速简便的诊断正成为重要的议题。具体而言,诊断形式正在转变为在不使用大型诊断设备的情况下能够进行诊断的形式,例如在患者旁边立即进行的即时检测(poct)或体外诊断(ivd)。作为进行ivd的一个具体的诊断领域,免疫化学诊断是在ivd领域中占很大比例并且被广泛使用的一种诊断方法。

免疫化学诊断是通过临床免疫测定的诊断和通过化学分析的诊断的统称术语,其使用抗原-抗体反应,并且用于诊断各种疾病以及监测肿瘤标志物、变态反应等。由于可通过免疫化学诊断检测到多种疾病并且由此易于检测,免疫化学诊断被评估为特别适用于poct的诊断形式。这种免疫化学诊断的需求在全球范围内稳固增长,而且该增长趋势在中国尤为明显。

在传统的免疫测定方法中,在将抗体应用于样本以检测导致期望被诊断的疾病的抗原的过程中,洗涤过程是必然需要的,在该洗涤过程中,大量洗涤溶液被倾倒以漂洗板等用来去除未结合的抗体或干扰检测的其它因素。在这种情况下,存在浪费大量洗涤溶液的问题。此外,传统的免疫测定方法的缺点在于,需要单独的努力来设计施用抗体的区域以增加固定的抗体与施用的抗原之间的有效接触表面积,并且复杂设计的区域也影响反应的检测。

因此,需要用于有效地去除干扰检测的因素并同时最小化诊断所需的溶液量的手段。另外,需要提供有助于诊断性能并且允许容易地检测结果的反应空间。



技术实现要素:

技术问题

本公开的一个方面是提供能够储存物质的贴片。

本公开的一个方面是提供能够向物质提供反应空间的贴片。

本公开的一个方面是提供能够提供物质的贴片。

本公开的一个方面是提供能够吸收物质的贴片。

本公开的一个方面是提供能够提供环境的贴片。

本公开的一个方面是提供包含抗体的贴片。

本公开的一个方面是提供使用贴片的免疫测定方法。

技术方案

根据本公开的一个方面,提供了一种免疫测定装置,所述免疫测定方法用于通过使用贴片从待诊断的样品检测靶蛋白来进行诊断,所述贴片包括形成微腔的网状结构体并且被配置成在所述微腔中包含液体物质,所述免疫测定装置包括:板支撑部,所述板支撑部被配置成对板进行支撑,在所述板上置有反应区域,并且将待诊断的样品放置于所述反应区域中;贴片控制部,所述贴片控制部被配置成使用贴片(其被配置成包含与靶蛋白特异性反应的抗体)并且控制所述贴片相对于所述反应区域的位置,从而将所述抗体提供至所述反应区域;以及反应检测部,将所述反应检测部配置成检测抗体与靶蛋白之间的特异性反应以诊断靶疾病。

根据本公开的另一方面,提供了包含抗体的贴片,所述贴片包括抗体和网状结构体;所述抗体与靶蛋白特异性反应;所述网状结构体以形成微腔的网状结构被提供,在所述微腔中包含所述抗体;将所述网状结构体配置成与放置有靶蛋白的反应区域接触并且将所包含的抗体中的一些提供至所述反应区域。

与靶蛋白特异性反应的抗体可以是特异性地结合至靶抗原的一抗。

与靶蛋白特异性反应的抗体可以是与特异性地结合至靶抗原的抗体特异性结合的二抗。

靶蛋白可以是抗原,抗体可以是通过特异性地结合至抗原的一抗和特异性地结合至所述一抗的二抗之间的结合形成的抗体对,并且该抗体对可与抗原特异性反应。

可存在多个靶蛋白,多个靶蛋白可包括第一靶蛋白和第二靶蛋白,并且抗体可包括与第一靶蛋白特异性反应的第一抗体以及与第二靶蛋白特异性反应的第二抗体。

根据本公开的又一方面,提供了包括多个包含抗体的贴片的贴片簇,其中,包含抗体的贴片包括与靶蛋白特异性反应的抗体和形成微腔的网状结构体,在所述微腔中包含抗体。

多个包含抗体的贴片可包括包含第一抗体的贴片和包含第二抗体的贴片,并且与包含第一抗体的贴片中包含的第一抗体特异性反应的靶蛋白可不同于与包含第二抗体的贴片中包含的第二抗体特异性反应的靶蛋白。

根据本公开的又一方面,提供了包含底物的贴片,所述贴片包括底物和网状结构体;所述底物通过由附着于与靶蛋白特异性结合的抗体的酶催化的化学反应产生产物;所述网状结构体以形成微腔的网状结构被提供,在所述微腔中包含所述底物;将所述网状结构体配置成与放置有靶蛋白的反应区域接触并且将所包含的底物中的一些提供至所述反应区域。

根据本公开的又一方面,提供了一种免疫测定方法,所述免疫测定方法用于通过使用贴片从待诊断的样品检测靶蛋白来进行诊断,所述贴片包括形成微腔的网状结构体并且被配置成在所述微腔中包含液体物质,该免疫测定方法包括:将待诊断的样品放置于反应区域中,以及通过使用包含抗体的贴片将与靶蛋白特异性反应的抗体提供至反应区域。

该免疫测定方法可进一步包括通过使用包含底物的贴片向反应区域提供底物,所述底物通过由附着于抗体的酶催化的化学反应产生产物。

该免疫测定方法可进一步包括检测抗体和靶蛋白之间的特异性反应以诊断靶疾病。

在这种情况下,特异性反应的检测可包括通过测量由于特异性反应而发生的贴片的电特性的变化来检测特异性反应。

特异性反应的检测可通过如下中的至少任一种进行:测量由附着于与靶蛋白特异性结合的抗体的酶催化的化学反应产生的荧光、测量由于化学反应产生的冷发光、以及测量归因于化学反应的显色。

待诊断样品的放置可通过如下中的任一种进行:将样品固定至板的方法、将样品涂抹在板上的方法、以及将样品涂抹在板上并将该样品固定的方法。

通过使用贴片向反应区域提供抗体可包括:使贴片与反应区域接触从而使抗体可移动至反应区域,以及将贴片与反应区域分开,其中,当将贴片与反应区域分开时,可从反应区域移除抗体中未与靶蛋白特异性反应的抗体。

该免疫测定方法可进一步包括通过使用洗涤贴片从反应区域自所提供的抗体中吸收未与靶蛋白特异性反应的抗体。

通过使用贴片向反应区域提供抗体可包括使用第一贴片,所述第一贴片包含与靶蛋白特异性反应的第一抗体以向反应区域提供第一抗体,以及使用第二贴片,所述第二贴片包含与第一抗体特异性反应的第二抗体以向反应区域提供第二抗体。

在该免疫测定方法中,反应区域可位于板上,并且免疫测定方法可进一步包括在将待诊断的样品放置于反应区域中之前,提供在其上将底部抗体固定在所述反应区域的所述板,所述底部抗体是与所述靶蛋白特异性反应的抗体,并且将待诊断的样品放置于反应区域中可包括将待诊断样品置于将底部抗体进行固定的反应区域中。

在该免疫测定方法中,可存在多个靶蛋白,多个靶蛋白可包括第一靶蛋白和第二靶蛋白,并且贴片可包含与第一靶蛋白特异性反应的第一抗体以及与第二靶蛋白特异性反应的第一抗体。

在免疫测定方法中,可存在多个靶蛋白,可存在包含抗体的多个贴片,多个靶蛋白可包括第一靶蛋白和第二靶蛋白,并且多个贴片可包括第一贴片和第二贴片,所述第一贴片包含与第一靶蛋白特异性反应的第一抗体,所述第二贴片包含与第二靶蛋白特异性反应的第二抗体。

根据本公开的又一方面,提供了一种免疫测定方法,所述免疫测定方法用于通过使用贴片从待诊断的样品检测靶蛋白来进行诊断,所述贴片包括形成微腔的网状结构体并且被配置成在所述微腔中包含液体物质,免疫测定方法包括将待诊断的样品置于反应区域中;使用包含第一抗体的贴片以向反应区域提供第一抗体,所述第一抗体与第一靶蛋白特异性反应;以及使用包含第二抗体的贴片以向反应区域提供第二抗体,所述第二抗体与第二靶蛋白特异性反应。

在上述实施方式中,该免疫测定方法可进一步包括在提供第二抗体之后,检测第一靶蛋白和第二靶蛋白。

在这种情况下,第一靶蛋白的检测可包括检测第一荧光,所述第一荧光从附着于与第一靶蛋白特异性结合的第一抗体的荧光标记检测,并且第二靶蛋白的检测可包括检测第二荧光,所述第二荧光从附着于与第二靶蛋白特异性结合的第二抗体的荧光标记检测。本文中,检测到第一荧光的波段和检测到第二荧光的波段可彼此不同。

在上述实施方式中,该免疫测定方法可进一步包括在向反应区域提供第一抗体后,检测第一靶蛋白,以及在向反应区域提供第二抗体后,检测第二靶蛋白。

在这种情况下,第一靶蛋白的检测可包括检测第一荧光,该第一荧光从附着于与第一靶蛋白特异性结合的第一抗体的荧光标记检测,并且第二靶蛋白的检测可包括检测第二荧光,该第二荧光从附着于与第二靶蛋白特异性结合的第二抗体的荧光标记检测。

本文中,检测到第一荧光的波段可与检测到第二荧光的波段的至少一部分重叠,并且可通过比较在向反应区域提供第二抗体之后从样品检测到的荧光与在向反应区域提供第二抗体之前从样品检测到的荧光来进行第二荧光的检测。

根据本公开的又一方面,提供了一种提供抗体的试剂盒,所述试剂盒包括包含与靶蛋白特异性反应的抗体的介质,并且提供抗体的贴片,所述贴片包括形成微腔的网状结构体并且被配置成与介质接触以吸收介质中包含的抗体中的一些,并且与放置靶蛋白的反应区域接触以向反应区域提供至少一些被吸收的抗体。

根据本公开的又一方面,提供了一种免疫测定方法,所述免疫测定方法用于通过使用贴片从待诊断样品检测靶蛋白来进行诊断,所述贴片包括形成微腔的网状结构体并且被配置成在所述微腔中处理液体物质,该免疫测定方法包括使包含与靶蛋白特异性反应的抗体的介质与贴片接触,并使贴片与放置靶蛋白的反应区域接触,其中,当使介质与贴片接触时,介质中包含的抗体中的至少一些被吸收到贴片中。在这种情况下,当使贴片与反应区域接触时,吸收到贴片中的至少一些抗体可移动到反应区域。

介质与贴片的接触可包括使介质的表面与贴片接触,并且贴片与反应区域的接触可包括使贴片的未与介质接触的表面与反应区域接触。

用于解决本公开的技术问题的方案不限于上述方案,并且本公开所属领域的普通技术人员从本说明书和附图中应当清楚地理解其它未提及的方案。

有益效果

根据本公开,可容易地进行物质的容纳、提供和吸收。

根据本公开,可提供物质的反应区域或者可向靶区域提供预定的环境。

根据本公开,可更便利地进行免疫测定,并且可及时地获得诊断结果。

根据本公开,使用少量样品可获得具有足够有效性的诊断结果。

根据本公开,使用贴片可适当地调节物质的提供和吸收,并且可显著地减少诊断所需的溶液的量。

根据本公开,可通过同时检测多个靶标来进行诊断,并且因此可进行患者特异性诊断。

本公开的有益效果并不限于上述那些效果,并且本公开所属领域的普通技术人员应当从本说明书和附图清楚地理解未提及的有益效果。

附图说明

图1详细地示出了根据本申请的贴片的实例。

图2详细地示出了根据本申请的贴片的实例。

图3示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的反应空间的提供。

图4示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的反应空间的提供。

图5示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图6示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图7示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图8示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图9示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图10示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图11示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图12示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图13示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的提供。

图14示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图15示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图16示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图17示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图18示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图19示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图20示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图21示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图22示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的物质的吸收。

图23示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的环境的提供。

图24示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的环境的提供。

图25示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的环境的提供。

图26示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的物质的吸收和提供的实施。

图27示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的物质的吸收和提供的实施。

图28示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的物质的吸收和提供的实施。

图29示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的物质的吸收和提供的实施。

图30示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的物质的吸收和提供的实施。

图31示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的环境的提供以及物质的吸收和提供的实施。

图32示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的环境的提供以及物质的吸收和提供的实施。

图33示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的多个贴片的施用。

图34示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的具有多个靶区域的板和多个贴片的施用。

图35示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实例进行描述的流程图。

图36示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实例进行描述的流程图。

图37示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实例进行描述的流程图。

图38示出了用于对在根据本申请的实施方式的免疫测定方法中向反应区域提供抗体的实例进行描述的流程图。

图39示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实例进行描述的流程图。

图40示出了用于对在根据本申请的实施方式的免疫测定方法中向反应区域提供抗体的实例进行描述的流程图。

图41示出了用于对作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心酶联免疫吸附测定(elisa)的免疫测定方法进行描述的流程图。

图42示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实例进行描述的流程图。

图43示出了用于对作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用间接elisa的免疫测定方法进行描述的流程图。

图44示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实例进行描述的流程图。

图45示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图46示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图47示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图48示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图49示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图50示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图51示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图52示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图53示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法的一部分。

图54示出了使用根据本申请的实施方式的洗涤贴片进行洗涤。

图55示出了使用根据本申请的实施方式的洗涤贴片进行洗涤。

图56示出了使用根据本申请的实施方式的洗涤贴片进行洗涤。

图57示出了用于对作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用直接elisa的免疫测定方法进行描述的流程图。

图58示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用直接elisa的免疫测定方法的一部分。

图59示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用直接elisa的免疫测定方法的一部分。

图60示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用直接elisa的免疫测定方法的一部分。

图61示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用直接elisa的免疫测定方法的一部分。

图62示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实施方式的使用直接elisa的免疫测定方法的一部分。

图63示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的包含成对抗体的贴片。

图64示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的包含一抗和二抗的贴片。

图65示出了制造包含成对抗体的贴片(作为根据本申请的贴片的实施方式)的工艺的实例的一部分。

图66示出了制造包含成对抗体的贴片(作为根据本申请的贴片的实施方式)的工艺的实例的一部分。

图67示出了用于对作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心elisa的免疫测定方法进行描述的流程图。

图68示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。

图69示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。

图70示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。

图71示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。

图72示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。

图73示出了作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。

图74示出了在根据本申请的免疫测定方法中作为贴片的实例的吸收并包含抗体的贴片。

图75示出了作为根据本申请的贴片的实例的吸收并包含抗体的贴片。

图76示出了作为根据本申请的贴片的实例的吸收并包含抗体的贴片。

图77示出了作为根据本申请的贴片的实例的吸收、包含以及提供抗体的贴片。

图78示出了根据本申请的免疫测定装置的实施方式。

图79示出了根据本申请的免疫测定装置的实施方式中的贴片控制部的实例。

图80示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实例进行描述的流程图。

图81示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实施方式进行描述的流程图。

图82示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实施方式进行描述的流程图。

图83示出了在根据本申请的免疫测定方法中检测多个靶蛋白的情况的一部分。

图84示出了在根据本申请的免疫测定方法中检测多个靶蛋白的情况的一部分。

具体实施方式

由于本文所述的实施方式是为了向本公开所属领域的普通技术人员清楚地描述本公开的精神,因此本公开并不限于本文所述的实施方式,并且本公开的范围应当解释为包括不脱离本公开的精神的改进的实施例或修改的实施例。

考虑到本公开中的功能,本文使用的术语选择当前正在尽可能广泛地使用的通用术语,但是这些术语可根据本公开所属领域的普通技术人员的意图和实践或者根据新技术的出现等而变化。但是相反,当将特定的术语定义为某个含义并使用时,将单独描述该术语的含义。因此,本文使用的术语应当基于本申请文件的整个的内容和术语的实质含义来解释,而不是简单地基于术语的名称。

本文所附的附图是为了易于对本公开进行描述。由于可能为了有助于理解本公开而必要时对附图中所示的形状进行了过大的描绘,因此本公开并不限于所述附图。

在本申请文件中,当对本公开涉及的已知的配置或功能的详细描述被视为使本公开的主旨不清楚时,根据需要将省略该处涉及的详细描述。

1.贴片

1.1贴片的含义

在本申请中,公开了用于管理液体物质的贴片。

所述液体物质可意味着处于液体状态并且能够流动的物质。

所述液体物质可为具有流动性的由单一组分形成的物质。或者,所述液体物质可为混合物,所述混合物包括由多种组分形成的物质。

当所述液体物质为由单一组分形成的物质时,所述液体物质可为由单一化学元素形成的物质或者可为包含多种化学元素的化合物。

当所述液体物质为混合物时,由多种组分形成的物质的一部分可充当溶剂,而另一部分可充当溶质。即,所述混合物可为溶液。

构成混合物的多种组分可为均匀分布的,所述混合物形成所述物质。或者,所述混合物(包括由多种组分形成的所述物质)可为均匀混合的混合物。

由多种组分形成的所述物质可包括溶剂以及不溶于该溶剂中但均匀分布的物质。

由多种组分形成的所述物质的一部分可为非均匀分布的。所述非均匀分布的物质可包括处于溶剂中的非均匀分布的颗粒组分。在这种情况下,所述非均匀分布的颗粒组分可处于固相。

例如,可使用贴片管理的物质可处于以下状态:1)由单一组分形成的液体;2)溶液;或3)胶体;或者根据情况,可处于4)其中的固体颗粒在另一液体物质内非均匀地分布的状态。

下文中,将更详细地对根据本申请的贴片进行描述。

1.2贴片的一般性质

1.2.1构成

图1和图2为示出了根据本申请的贴片的实例的视图。下面将参考图1和图2对根据本申请的贴片进行描述。

参考图1,根据本申请的贴片pa可包括网状结构体ns和液体物质。

可分别考虑基础物质bs和添加物质as作为液体物质。

贴片pa可处于凝胶状态(凝胶型)。贴片pa可作为凝胶型结构体而得以施用,在所述结构体中结合了胶体分子并且形成了网状组织。

根据本申请的贴片pa为用于管理液体物质sb的结构,并且可包括三维网状(网样)结构体ns。所述网状结构体ns可为连续分布的固体结构。所述网状结构体ns可具有网状结构,在所述网状结构中多条微丝相互交织。然而,所述网状结构体ns并不限于其中的多条微丝相互交织的网状形式,并且也能够以任意的三维基体(matrix)的形式施用,所述三维基体通过连接多个微结构而形成。例如,所述网状结构体ns可为包括多个微腔的框架结构体。换句话说,所述网状结构体ns可形成多个微腔mc。

图2示出了根据本申请的实施方式的贴片的结构。参考图2,所述贴片pa的网状结构体可具有海绵结构ss。海绵结构ss的网状结构体可包括多个微孔mh。下文中,术语微孔mh和微腔mc可互换使用,并且除非另外特别提出,将术语微腔mc定义为包括微孔mh的概念。

网状结构体ns可具有规则或不规则的图案。另外,网状结构体ns可包括具有规则图案的区域以及具有不规则图案的区域。

网状结构体ns的密度可具有处于预定范围内的值。优选地,所述预定范围可设定在一个限度内,在该限度内将捕获在贴片pa中的液体物质sb的形式保持为处于与贴片pa相对应的形式。密度可被定义为网状结构体ns密集的程度或网状结构体ns占贴片的质量比或体积比等。

根据本申请的贴片可通过具有三维网状结构来管理液体物质sb。

根据本申请的贴片pa可包括液体物质sb,并且包括在该贴片pa中的液体物质sb的流动性可受限于贴片pa的网状结构体ns的形式。

液体物质sb可在网状结构体ns内自由流动。换句话说,将液体物质sb放置于由网状结构体ns形成的多个微腔中。在相邻的微腔之间可发生液体物质sb的交换。在这种情况下,液体物质sb能够以如下状态存在,其中,液体物质sb渗透至形成网状组织的框架结构体内。在此种情况下,在框架结构体中可形成纳米级孔隙,液体物质sb可渗透至所述纳米级孔隙中。

进一步地,液体物质sb是否填充至网状结构的框架结构体中可根据待捕获至贴片pa中的液体物质sb的颗粒尺寸或分子量来确定。具有相对大的分子量的物质可被捕获至微腔中,而具有相对小的分子量的物质可由框架结构体捕获并且填充进网状结构体ns的框架结构体和/或微腔中。

在本申请中,可将术语“捕获(capture)”定义为在其中将液体物质sb放置于由网状结构体ns形成的多个微腔和/或纳米级孔中的状态。如上所述,将液体物质sb捕获至贴片pa中的状态被定义为包括在其中液体物质sb可在微腔和/或纳米级孔之间流动的状态。

如下所述,可分别考虑基础物质bs和添加物质as作为液体物质sb。

所述基础物质bs可为具有流动性的液体物质sb。

所述添加物质as可为与基础物质bs混合并且具有流动性的物质。换句话说,所述基础物质bs可为溶剂。所述添加物质as可为溶解在所述溶剂中的溶质或者可为在所述溶剂中未溶化的颗粒。

所述基础物质bs可为能够在基体内部流动的物质,所述基体由网状结构体ns形成。所述基础物质bs可均匀分布在网状结构体ns中或者可仅分布在网状结构体ns的部分区域中。所述基础物质bs可为具有单一组分的液体。

所述添加物质as可为与基础物质bs混合或者溶解在基础物质bs中的物质。例如,所述添加物质as可充当溶质,同时基础物质bs为溶剂。添加物质as可均匀分布在基础物质bs中。

所述添加物质as可为在基础物质bs中不溶解的细颗粒。例如,添加物质as可包括胶体分子和细颗粒(例如微生物)。

添加物质as可包括比微腔大的颗粒,所述微腔由网状结构体ns形成。当微腔的尺寸小于包括在添加物质as中的颗粒的尺寸时,可能限制添加物质as的流动性。

根据实施方式,添加物质as可包括选择性地包含在贴片pa中的组分。

添加物质as不是必然指与上述的基础物质bs相比量较少或功能低劣的物质。

下文中,可将捕获至贴片pa中的液体物质sb的特性认为是贴片pa的特性。也就是说,贴片pa的特性可取决于贴片pa中捕获的物质的特性。

1.2.2特性

如上所述,根据本申请的贴片pa可包括网状结构体ns。贴片pa可通过网状结构体ns管理液体物质sb。贴片pa可允许捕获至贴片pa中的液体物质sb保持其至少部分独特的特性。

例如,物质的扩散可发生在其中分布液体物质sb的贴片pa的区域中,并且力(如表面张力)可发挥作用。

贴片pa可提供液体环境,在其中由于物质的热运动或物质的浓度或密度差而引起靶物质的扩散。一般而言,“扩散”是指由于浓度差,构成物质的颗粒从浓度高的一侧传播至浓度低的一侧的现象。此种扩散现象从根本上可理解为由于分子运动(液体或气体中的平移运动和固体中的振动运动等)而发生的现象。在本申请中,除了提到的由于密度差或浓度差而引起颗粒从浓度高的一侧传播至浓度低的一侧的现象之外,“扩散”还指在其中由于分子的不规则运动而颗粒移动的现象,该现象甚至在浓度均一时发生。除非另外特别提出,表述“不规则运动”也可具有与“扩散”相同的含义。扩散的物质可为溶解在液体物质sb中的溶质,而且扩散的物质能够以固体、液体或气体状态提供。

更特别地,在通过贴片pa捕获的液体物质sb中的非均匀分布的物质可在由贴片pa提供的空间中扩散。换句话说,添加物质as可在通过贴片pa限定的空间中扩散。

由贴片pa管理的液体物质sb中的添加物质as或非均匀分布的物质可在由贴片pa的网状结构体ns提供的微腔内扩散。非均匀分布的物质或添加物质as可在其中扩散的区域可通过与另一物质接触或连接的贴片pa来改变。

甚至,在所述物质或添加物质as的浓度变得均匀之后,作为在贴片pa内或在连接至贴片pa的外部区域内的非均匀分布的物质或添加物质as的扩散的结果,由于在贴片pa内部和/或在连接至贴片pa的外部区域内的分子的不规则运动,所述物质或添加物质as可连续地移动。

可施用贴片pa以表现出亲水性质或疏水性质。换句话说,贴片pa的网状结构体ns可具有亲水性质或疏水性质。

当网状结构体ns的性质与液体物质sb的性质相似时,网状结构体ns可能能够更有效地管理液体物质sb。

基础物质bs可为极性的亲水物质或非极性的疏水物质。添加物质as可表现出亲水性质或疏水性质。

液体物质sb的性质可与基础物质bs和/或添加物质as相关。例如,当基础物质bs和添加物质as都是亲水的,液体物质sb可能是亲水的;而当基础物质bs和添加物质as都是疏水的,液体物质sb可能是疏水的。当基础物质bs和添加物质as的极性不同时,液体物质sb可能是亲水的或疏水的。

当网状结构体ns和液体物质sb的极性均为亲水的或疏水的,吸引力可在网状结构体ns和液体物质sb之间发挥作用。当网状结构体ns与液体物质sb的极性相反(例如当网状结构体ns的极性是疏水的而液体物质sb的极性是亲水的)时,排斥力可在网状结构体ns和液体物质sb之间起作用。

基于上述性质,可单独使用贴片pa、可使用多个贴片pa、或者可与另一介质一起使用贴片pa来诱导期望的反应。在下文中,将对贴片pa的功能性方面进行描述。

然而,在下文中为了便于描述,将贴片pa假定为可包括亲水溶液的凝胶型。换句话说,除非另外特别提出,假定贴片pa的网状结构体ns具有亲水性质。

然而,不应当将本申请的范围解释为限于具有亲水性质的凝胶型贴片pa。除了包括表现出疏水性质的溶液的凝胶型贴片pa之外,从其中移除溶剂的凝胶型贴片pa以及甚至溶胶型贴片pa可属于本申请的范围,只要其能够实现根据本申请的功能。

2.贴片的功能

由于上述特性,根据本申请的贴片可具有一些有用的功能。换句话说,通过捕获液体物质sb,贴片可参与到液体物质sb的行为中。

因此,在下文中,根据物质相对于贴片pa的行为形式,将分别对储存器功能(reservoirfunction)和通道功能(channelingfunction)进行描述,所述储存器功能是指将物质限定在由贴片pa形成的预定区域内的状态,所述通道功能是指将物质限定在包括贴片pa的外部区域的区域内的状态。

2.1储存器

2.1.1含义

如上所述,根据本申请的贴片pa可捕获液体物质sb。换句话说,贴片pa可执行作为储存器的功能。

贴片pa使用网状结构体ns可将液体物质sb捕获至在网状结构体ns中形成的多个微腔中。液体物质sb可占据细小微腔的至少部分,所述微腔由贴片pa的三维网状结构体ns形成;或者可渗透进在网状结构体ns中形成的纳米级孔隙中。

即使液体物质sb分布在多个微腔中,贴片pa中放置的液体物质sb也没有失去液体的性质。也就是说,即使在贴片pa中,液体物质sb也具有流动性,并且于分布在贴片pa中的液体物质sb中可发生物质的扩散,以及适当的溶质可溶解在所述物质中。

下面将更详细地描述贴片pa的储存器功能。

2.1.2包含

在本申请中,由于上述特性,贴片pa可捕获靶物质。贴片pa可在预定范围内对外部环境的变化具有抵抗力。如此,贴片pa可保持将物质捕获在该贴片中的状态。液体物质sb(待捕获的靶标)可占据三维网状结构体ns。

在下文中,为了方便,将贴片pa的上述功能称为“包含”。

然而,将“包含液体物质的贴片pa”定义为涵盖以下情况,其中,将液体物质包含在由网状结构形成的空间中;和/或将液体物质包含在构成网状结构体ns的框架结构体中。

贴片pa可包含液体物质sb。例如,由于在贴片pa的网状结构体ns和液体物质sb之间起作用的吸引力,贴片pa可包含液体物质sb。液体物质sb能够以预定或更高强度的吸引力结合至网状结构体ns并被包含在贴片pa中。

贴片pa中包含的液体物质sb的性质可根据贴片pa的性质而被分类。更具体而言,当贴片pa表现出亲水性质时,贴片pa可结合至亲水的液体物质sb(通常是极性的)并且在三维微腔中包含所述亲水的液体物质sb。或者,当贴片pa表现出疏水性质时,在三维网状结构体ns的微腔中可包含疏水的液体物质sb。

可包含在贴片pa中的物质的量可与贴片pa的体积成比例。换句话说,包含在贴片pa中的物质的量可与三维网状结构体ns的量成比例,所述三维网状结构体ns充当有利于贴片pa的形成的支撑体。然而,在可包含于贴片pa中的物质的量与贴片pa的体积之间没有恒定的比例系数,因此,可包含在贴片pa中的物质的量与贴片pa的体积之间的关系可根据网状结构的制造方法或设计而变化。

包含在贴片pa中的物质的量可随着时间由于蒸发、脱落(loss)等而减少。可额外将物质注入贴片pa中以增加或维持包含在贴片pa中的物质的含量。例如,可向贴片pa添加用于抑制水分蒸发的保湿剂。

贴片pa能够以易于储存液体物质sb的形式被施用。这意味着当物质受到环境因素(如湿度水平、光量和温度)的影响时,可施用贴片pa以使物质的变性最小化。例如,为了防止贴片pa由于外界因素(如细菌)而引起的变性,可用细菌抑制剂处理贴片pa。

贴片pa中可包含具有多种组分的液体物质sb。在这种情况下,可在参考时间点之前将由多种组分形成的物质一起放置于贴片pa中;或者可首先将主要注入的物质包含在贴片pa中,然后在预定量的时间之后,可将次要物质包含在贴片pa中。例如,当将由两种组分形成的液体物质sb包含在贴片pa中时,可在制造贴片pa时将两种组分包含在贴片pa中;可在制造贴片pa时仅将一种组分包含在贴片pa中,并可晚些将另一组分包含在其中;或者可在制造贴片pa之后,依次将两种组分包含在贴片pa中。

如上所述,包含在贴片pa中的物质可表现出流动性,并且由于贴片pa中的分子运动,该物质可扩散或不规则移动。

2.1.3提供反应空间

图3和图4为示出了作为根据本申请的贴片的功能的实例的提供反应空间的视图。

如图3和图4所示,根据本申请的贴片pa可执行提供空间的功能。换句话说,贴片pa可提供空间,在该空间中液体物质sb可移动经过由网状结构体ns形成的空间和/或构成网状结构体ns的空间。

贴片pa可提供用于除了颗粒扩散和/或颗粒的不规则运动之外的活动(下文中称为除扩散以外的活动)的空间。除扩散以外的活动可指化学反应,但不限于此;并且还可指物理状态变化。更具体地,除扩散以外的活动可包括:在该活动之后其中的物质的化学组成变化的化学反应;包括在物质中的组分之间的特异性结合反应;包括在物质中并且在其中非均匀分布的颗粒或溶质的均化;包括在物质中的一些组分的缩合;或者部分物质的生物学活动。

当多种物质参与所述活动时,可在参考时间点之前将多种物质一起放置于贴片pa中。可依次将多种物质插入贴片pa中。

通过改变贴片pa的环境条件,可增强对贴片pa中的除扩散以外的活动提供空间的功能的效率。例如,通过改变贴片pa的温度条件或向其增添电学条件可促进活动或者诱导活动的开始。

根据图3和图4,贴片pa中放置的第一物质sb1和第二物质sb2可在贴片pa内部反应并且变形成第三物质sb3或生成第三物质sb3。

2.2通道

2.2.1含义

在贴片pa和外部区域之间可发生物质的移动。物质可从贴片pa移动至贴片pa的外部区域或者可从外部区域移动至贴片pa。

贴片pa可形成物质的移动路线或者参与物质的移动。更具体地,贴片pa可参与捕获至该贴片pa中的液体物质sb的移动或者通过捕获至该贴片pa中的液体物质sb参与外部物质的移动。可将基础物质bs或添加物质as从贴片pa中移出,或者可将外部物质从外部区域引入至贴片pa。

贴片pa可提供物质的移动路线。即,贴片pa可参与物质的移动并且提供物质的移动通道。贴片pa可基于液体物质sb的独特性质提供物质的移动通道。

根据贴片pa是否与外部区域相连,贴片pa可处于以下状态,其中,液体物质sb能够在贴片pa和外部区域之间移动;或者其中,液体物质sb不能在贴片pa和外部区域之间移动。当启动贴片pa和外部区域之间的通道作用时,贴片pa可具有独特的功能。

下文中,首先将描述物质能够移动的状态和物质不能移动的状态,然后结合贴片pa是否与外部区域相连,对贴片pa的独特功能进行详细地描述。

基本上,物质的扩散和/或不规则运动是液体物质sb在贴片pa和外部区域之间移动的根本性原因。然而,已经描述了控制外部环境因素(例如,控制温度条件或控制电学条件等)来控制物质在贴片pa和外部区域之间的移动。

2.2.2能够移动的状态

在物质能够移动的状态中,在捕获至贴片pa中的液体物质sb和/或放置在外部区域中的物质之间可发生流动。在物质能够移动的状态中,在捕获至贴片pa中的液体物质sb和外部区域之间可发生物质的移动。

例如,在物质能够移动的状态中,液体物质sb或液体物质sb的部分组分可由于不规则运动而移动或者扩散至外部区域。或者,在物质能够移动的状态中,放置在外部区域中的外部物质或外部物质的部分组分可由于不规则运动而移动或扩散至贴片pa中的液体物质sb。

物质能够移动的状态可通过接触产生。接触可指捕获至贴片pa中的液体物质sb与外部区域之间的连接。接触可指外部区域与液体物质sb的流动区域之间的至少部分重叠。接触可指外部物质与贴片pa的至少部分连接。可以理解的是,处于物质能够移动的状态扩大了在其中被捕获的液体物质sb可流动的范围。换句话说,在物质能够移动的状态中,在其中液体物质sb可流动的范围可扩大至包括被捕获的液体物质sb的外部区域的至少部分。例如,当液体物质sb与外部区域接触时,在其中被捕获的液体物质sb可流动的范围可扩大至包括接触的外部区域的至少部分。更具体地,当外部区域是外部板时,在其中液体物质sb可流动的范围可扩大至包括外部板与液体物质sb接触的区域。

2.2.3不能移动的状态

在物质不能移动的状态中,在捕获至贴片pa中的液体物质sb与外部区域之间不发生物质的移动。然而,可分别在捕获至贴片pa中的液体物质sb中和放置于外部区域中的外部物质中发生物质的移动。

物质不能移动的状态可为解除了接触的状态。换句话说,在解除了贴片pa与外部区域之间的接触的状态中,贴片pa中保留的液体物质sb与外部区域或外部物质之间不可能进行物质的移动。

更具体地,解除了接触的状态可指捕获在贴片pa中的液体物质sb未连接至外部区域的状态。解除了接触的状态可指在其中液体物质sb未连接至放置于外部区域中的外部物质的状态。例如,通过贴片pa与外部区域之间的分开可产生在其中不可能进行物质的移动的状态。

在本申请中,尽管“能够移动的状态”具有与“不能移动的状态”不同的含义,但由于时间的流逝、环境的变化等,在状态之间可发生转变。换句话说,贴片pa可在处于能够移动的状态之后处于不能移动的状态;在处于不能移动的状态之后处于能够移动的状态;或者在处于能够移动的状态之后又处于不能移动的状态之后,再次处于能够移动的状态。

2.2.4功能的区分

2.2.4.1递送

在本申请中,由于上述特性,贴片pa可将捕获在贴片pa中的液体物质sb的至少一部分递送至期望的外部区域。物质的递送可指在满足预定的条件时将捕获在贴片pa中的液体物质sb的一部分从贴片pa中分离。液体物质sb的一部分的分离可指从受贴片pa影响的区域中提取、排出或释放物质的一部分。这为从属于贴片pa的上述通道功能的概念,并且可理解为定义了将放置在贴片pa中的物质向贴片pa外部转移(递送)。

期望的外部区域可为另一贴片pa、干燥区域或液体区域。

用于发生递送的预定条件可设定为环境条件,例如温度变化、压力变化、电学特性方面的变化以及物理状态方面的变化。例如,当贴片pa与目标(该目标与液体物质sb结合的力大于与贴片pa的网状结构体ns结合的力)接触时,液体物质sb可与接触的目标在化学上结合,并且作为结果,可将该液体物质sb的至少一部分提供至所述目标。

在下文中,为了方便,将贴片pa的上述功能称为“递送”。

经由在贴片pa与外部区域之间液体物质sb能够移动的状态以及液体物质sb不能移动的状态,在贴片pa和外部区域之间可发生递送。

更具体地,当液体物质sb处于能够移动的状态,液体物质sb可在贴片pa与外部区域之间进行扩散或者可由于不规则运动而移动至外部区域。换句话说,包括在液体物质sb中的基础溶液和/或添加物质as可从贴片pa移动至外部区域。在液体物质sb不能移动的状态中,液体物质sb不能在贴片pa与外部区域之间移动。换句话说,从能够移动的状态向不能移动的状态转变时,由于液体物质sb的不规则运动和/或扩散而已经从贴片pa移动至外部区域的物质的一部分不能再移动回至贴片pa。因此,可将液体物质sb的一部分提供至外部区域。

递送可由于液体物质sb和网状结构体ns之间的吸引力与液体物质sb和外部区域或外部物质之间的吸引力之差而进行。吸引力可通过特异性结合关系或极性之间的相似性而产生。

更具体地,当液体物质sb是亲水的且外部区域或外部物质比网状结构体ns更亲水时,经由能够移动的状态和不能移动的状态可将捕获在贴片pa中的液体物质sb的至少一部分提供至外部区域。

液体物质sb的递送也可选择性地进行。例如,当在包括于液体物质sb中的一些组分与外部物质之间存在特异性结合关系时,经由物质能够移动的状态和物质不能移动的状态可选择性地对部分成分进行递送。

更具体地,当假定贴片pa向外部板pl(处于平板的形式)提供物质时,可将特异性地结合至捕获在贴片pa中的液体物质sb的一部分(例如,溶质的一部分)的物质施加在外部板pl上。在这种情况下,经由能够移动的状态和不能移动的状态,贴片pa可选择性地将溶质的一部分从贴片pa递送至板pl,所述溶质的一部分与施加在外部板pl上的物质特异性地结合。

下面将根据物质移动至不同的区域的一些实例来对递送(作为贴片pa的功能)进行描述。然而,在给出详细的描述中,对液体物质sb的“递送”和对液体物质sb的“释放”的概念可互换使用。

此处,将描述从贴片pa向单独的外部板pl提供液体物质sb的情况。例如,可在考虑之列的是将物质从贴片pa移动至板pl(例如载玻片)的情况。

随着贴片pa与板pl接触,被捕获在贴片pa中的液体物质sb的至少一部分扩散或由于不规则运动而移动至板pl。当解除贴片pa与板pl之间的接触时,已经从贴片pa移动至板pl的物质的一部分(即,液体物质sb的一部分)不能移动回至贴片pa。结果是,可将物质的一部分从贴片pa提供至板pl。在这种情况下,被提供的物质的一部分可为添加物质as。对于通过接触和分开而将被“提供”的贴片pa中的物质而言,应当存在在物质和板pl之间起作用的吸引力和/或结合力,并且所述吸引力和/或结合力应当大于在物质和贴片pa之间起作用的吸引力。因此,如果没有满足上述“递送条件”,则在贴片pa与板pl之间不发生物质的递送。

通过向贴片pa提供温度条件或电学条件可控制物质的递送。

物质从贴片pa至板pl的移动可取决于贴片pa与板pl之间的接触面积的范围。例如,根据贴片pa与板pl接触的面积的范围,可提高或降低贴片pa与板pl之间的物质移动的效率。

当贴片pa包括多种组分时,可以仅有部分组分选择性地移动至外部板pl。更具体地,可将特异性地结合至多种组分中的部分组分的物质固定至外部板pl。在这种情况下,固定至外部板pl的物质可处于液体状态或固体状态,或者可被固定至不同的区域。在这种情况下,由于贴片pa与不同的区域之间的接触,具有多种组分的物质的部分移动至板pl并且特异性地结合至板pl;并且当将贴片pa与板pl分开时,仅部分的组分可选择性地释放至板pl。

图5-图7示出了作为根据本申请的贴片pa的功能之中的递送物质的实例的从贴片pa向外部板pl递送物质。根据图5-图7,通过使贴片pa与外部板pl接触,可将包含在贴片pa中的物质的一部分提供至板pl。在这种情况下,通过使贴片pa与板接触从而使得物质能够移动,对物质的提供可成为可能。在这种情况下,在板和贴片pa接触的接触表面附近可形成水膜wf,并且物质能够经由所形成的水膜wf进行移动。

本文中,将描述在其中从贴片pa向具有流动性的物质sl提供液体物质sb的情况。具有流动性的物质sl可为保存在其它容纳空间或者正在流动的液体物质。

随着贴片pa与具有流动性的物质接触(例如,将贴片pa放入溶液中),被捕获在贴片pa中的液体物质sb的至少一部分可扩散或者由于不规则运动而移动至具有流动性的物质sl。当将贴片pa与具有流动性的物质sl分开时,已经从贴片pa移动至具有流动性的物质的液体物质sb的一部分不能移动回贴片pa中,从而使得可将贴片pa中的物质的一部分提供至具有流动性的物质。

贴片pa与具有流动性的物质sl之间的物质移动可取决于贴片pa与具有流动性的物质sl之间的接触面积的范围。例如,根据贴片pa与具有流动性的物质sl接触处的面积的范围(例如,将贴片pa浸入溶液中的深度等),可提高或降低贴片pa与具有流动性的物质sl之间的物质移动的效率。

通过贴片pa与具有流动性的物质之间的物理分开可控制贴片pa与具有流动性的物质sl之间的物质移动。

液体物质sb中的添加物质as的分布浓度可不同于具有流动性的物质中的添加物质as的分布浓度,并且可将添加物质as从贴片pa提供至具有流动性的物质。

然而,在贴片pa向具有流动性的物质sl提供液体物质sb中,贴片pa与具有流动性的物质sl之间的物理分开不是必要的。例如,当引起物质从贴片pa移动至具有流动性的液体的力(驱动力/诱使力(casualforce))消失或者降低至参考值以下时,物质的移动可停止。

在贴片pa与具有流动性的物质sl之间的“递送”中,可不需要贴片pa与具有流动性的物质sl之间的上述递送条件。可以理解的是,已经移动至具有流动性的物质sl的物质在具有流动性的物质sl中扩散和/或由于不规则运动而移动,并且当移动的物质与贴片pa之间的距离大于预定的距离时,该物质被提供至具有流动性的物质sl。因为在板pl的情况下,由于接触而扩大的能够移动的范围是非常有限的,并因此贴片pa与已经移动至板pl的物质之间的吸引力可能是重要的;在贴片pa与具有流动性的物质之间的关系中,由于贴片pa与板pl之间的接触而扩大的能够移动的范围相对宽得多,并因此贴片pa与已经移动至具有流动性的物质sl的物质之间的吸引力就无关紧要。

图8-图10示出了作为根据本申请的贴片pa的功能之中的物质递送的实例的从贴片pa向具有流动性的物质递送物质。根据图8-图10,贴片pa可向具有流动性的外部物质递送贴片pa中包含的物质的一部分。通过将贴片pa插入具有流动性的物质中或者与具有流动性的物质接触从而使得在捕获至贴片pa中的液体物质sb与具有流动性的物质之间的物质移动成为可能,可进行所包含的物质的一部分的递送。

本文中,假定将物质从贴片pa移动至另一贴片pa。在贴片pa与另一贴片pa接触的接触区域中,在贴片pa中提供的液体物质sb的至少一部分可移动至另一贴片pa。

在接触区域中,在每一贴片pa中提供的液体物质sb可扩散并且移动至另一贴片pa。在这种情况下,由于物质的移动,在每一贴片pa中提供的液体物质sb的浓度可变化。同样在本实施方式中,如上所述,贴片pa和另一贴片pa可分开,并且可将贴片pa中的液体物质sb的一部分提供至另一贴片pa。

贴片pa与另一贴片pa之间的物质移动可通过环境条件方面的变化(包括物理状态的变化)来进行。

贴片pa与另一贴片pa之间的物质移动可取决于贴片pa与另一贴片pa之间的接触面积的范围。例如,根据贴片pa与另一贴片pa接触处的面积的范围,可提高或降低贴片pa与另一贴片pa之间的物质移动的效率。

图11-图13示出了作为根据本申请的贴片pa的功能之中的物质递送的实例的从贴片pa1向另一贴片pa2递送物质。根据图11-图13,贴片pa1可将贴片pa1中包含的物质的一部分递送至另一贴片pa2。通过使贴片pa1与另一贴片pa2接触并且变为在其中捕获至贴片pa1中的液体物质sb和捕获至另一贴片pa2中的物质可相互交换的状态,可进行对物质的一部分的递送。

2.2.4.2吸收

在描述之前,应当指出的是,在一些实施方式中,根据本申请的贴片pa的功能之中的“吸收”能够以与上述“递送”类似的方式进行管理。例如,在由于物质之间的浓度差而物质移动的情况下,“吸收”可类似于“递送”,其中可改变液体物质sb的浓度、特别是添加物质as的浓度来控制物质移动的方向。在通过解除与贴片pa的物理接触来控制物质的移动和选择性吸收方面,“吸收”也可类似于“递送”,并且本申请所属领域普通技术人员可清楚地理解这一点。

由于上述特性,根据本申请的贴片pa可捕获外部物质。贴片pa可向受贴片pa影响的区域拉入外部物质,所述外部物质存在于由贴片pa限定的区域外部。受牵拉的外部物质可随着贴片pa的液体物质sb而被捕获。对外部物质的拉入可通过外部物质与已捕获在贴片pa中的液体物质sb之间的吸引力而产生。或者,对外部物质的拉入可通过外部物质与未被液体物质sb占据的网状结构体ns的区域之间的吸引力而产生。对外部物质的拉入可通过表面张力而产生。

在下文中,为了方便,将贴片pa的上述功能称为“吸收”。可将吸收理解为是从属于贴片pa的上述通道功能的概念(定义了外部物质向贴片pa的移动的概念)。

吸收可通过贴片pa经由物质能够移动的状态和物质不能移动的状态而发生。

可通过贴片pa吸收的物质可处于液体状态或固体状态。例如,当贴片pa与外部物质(包括固态物质)接触时,由于包括在外部物质中的固态物质与放置在贴片pa中的液体物质sb之间的吸引力,可进行对物质的吸收。作为另一实例,当贴片pa与液体外部物质接触时,由于液体外部物质与放置在贴片pa中的液体物质sb之间的结合可进行吸收。

吸收至贴片pa中的外部物质可通过形成贴片pa的网状结构体ns的微腔移动至贴片pa的内部或者可分布在贴片pa的表面。外部物质分布的位置可基于外部物质的颗粒尺寸或分子量来设定。

当进行吸收时,可改变贴片pa的形式。例如,可改变贴片pa的体积、颜色等。当进行向贴片pa中的吸收时,通过向贴片pa的吸收环境添加外部条件(例如温度变化和物理状态变化)可激活或延迟向贴片pa中的吸收。

根据外部区域的部分实例,下面将对吸收(作为贴片pa的功能)进行描述,所述外部区域在发生吸收时向贴片pa提供待吸收的物质。

下文中,将假定贴片pa从外部板pl吸收外部物质。外部板的实例可包括在其中可放置外部物质但不吸收该外部物质的板pl。

可将物质施加在外部板pl上。具体地,可将物质以粉末的形式施加在板pl上。施加在板pl上的物质可为单一组分或者多种组分的混合物。

所述板pl可具有平板的形状。可将板pl的形状变形以改善包含物质的能力等。例如,可形成孔以改善包含物质的能力;可通过雕刻或压印使板pl的表面变形;或者可使用有图案的板pl以改善与贴片pa的接触。

通过根据本申请的贴片pa从板pl吸收物质可通过板pl与贴片pa之间的接触进行。在这种情况下,在板pl与贴片pa之间的接触表面附近的接触区域中,由于捕获在贴片pa中的液体物质sb和/或施加在板pl上的物质,可形成水膜wf。当在接触区域中形成水膜(水滑(aquaplane)、水漂(hydroplane))wf时,通过水膜wf可捕获施加在板pl上的物质。捕获在水膜wf中的物质可在贴片pa内自由流动。

当贴片pa与板pl间隔预定的距离或更远并且分开时,水膜wf可随着贴片pa移动,并且施加在板pl上的物质可被吸收至贴片pa中。在贴片pa与板pl分开预定的距离或更远时,施加在板pl上的物质可被吸收至贴片pa中。当贴片pa与板pl间隔开并且分开时,向贴片pa提供的液体物质sb可不向板pl移动,或者仅微不足道的量可被吸收至贴片pa中。

施加在板pl上的物质的全部或一部分可特异性地与捕获在贴片pa中的物质的全部或一部分反应。就此而言,通过贴片pa从板pl吸收物质可选择性地进行。具体而言,关于捕获在贴片pa中的物质的一部分,当贴片pa比板pl具有更强的吸引力时,可选择性地进行吸收。

作为一个实例,物质的一部分可固定至板pl。换句话说,物质的一部分可固定至板pl,同时物质的另一部分具有流动性的施加或者不进行固定。在这种情况下,当贴片pa与板pl接触并且分开时,施加在板pl上的物质中,除了固定至板pl的物质的一部分之外的物质可被选择性地吸收至贴片pa中。相反,不管是否对物质进行固定,由于捕获在贴片pa中的物质和放置在板pl上的物质的极性,也可发生选择性吸收。

作为另一实例,当捕获在贴片pa中的液体物质sb特异性地结合至施加在板pl上的物质的至少一部分时,在贴片pa与施加在板pl上的物质接触并随后分开时,仅特异性地结合至液体物质sb的施加在板pl上的物质的一部分可被吸收至贴片pa中。

作为又一实例,施加在板pl上的物质的一部分可与预先固定至板pl的物质进行特异性反应。在这种情况下,施加至板pl的物质中,仅有除了与预先固定至板pl的物质特异性反应的物质之外的剩余物质可被吸收至贴片pa中。

图14-图16示出了作为根据本申请的贴片pa的功能之中的物质吸收的实例的通过贴片pa从外部板pl吸收物质。根据图14-图16,贴片pa可从外部板pl吸收放置在外部板pl上的物质的一部分。通过以下可进行物质的吸收:使贴片pa与外部板pl接触,在外部板pl与贴片pa之间的接触区域附近形成水膜wf,并通过水膜wf,物质能够移动至贴片pa。

本文中,将假定将物质从具有流动性的物质sl吸收至贴片pa中。具有流动性的物质sl可指保留在其它容纳空间或者流动的液体外部物质。更具体地,通过拥有使具有流动性的物质sl与捕获在贴片pa中的液体物质sb可相互流入和流出的环境,可将具有流动性的物质sl的全部或者一部分吸收至贴片pa中。在这种情况下,通过将贴片pa与具有流动性的物质sl的至少一部分接触可形成如下环境,其中,具有流动性的物质sl与液体物质sb可相互流入和流出。

当贴片pa与具有流动性的物质sl接触时,贴片pa可处于在其中物质能够从具有流动性的物质sl移动的状态。当将贴片pa与具有流动性的物质sl分开时,可将具有流动性的物质sl的至少一部分吸收入贴片pa中。

从具有流动性的物质sl将物质吸收至贴片pa中可取决于捕获在贴片pa中的物质与具有流动性的物质sl之间的浓度差。换句话说,当捕获在贴片pa中的液体物质sb关于预定的添加物质as的浓度低于具有流动性的物质sl关于预定的添加物质as的浓度时,可将预定的添加物质as吸收入贴片pa中。

当从具有流动性的物质sl将物质吸收入贴片pa中时,除了在如上所述的贴片pa与具有流动性的物质sl接触时取决于浓度差的吸收之外,向贴片pa中的吸收也可通过添加电学因素或改变物理条件来控制。进一步地,无需在捕获至贴片pa中的物质与待吸收的物质之间的直接接触,物质的吸收也可通过经由媒介的间接接触来进行。

图17-图19示出了作为根据本申请的贴片pa的功能之中的物质吸收的实例的通过贴片pa从具有流动性的物质sl吸收物质。根据图17-图19,贴片pa可吸收具有流动性的物质sl的一部分。物质的吸收可通过以下进行:使贴片pa浸入具有流动性的物质sl中或者与具有流动性的物质sl接触,从而使得捕获在贴片pa中的液体物质sb与具有流动性的物质sl能够相互移出和移入。

本文中,将假定贴片pa从另一贴片pa吸收外部物质。

通过贴片pa从另一贴片pa吸收外部物质可由于被吸收的外部物质与已经捕获在贴片pa中的物质之间以及被吸收的外部物质与没有吸收至贴片pa中的外部物质之间的结合力之差而进行。例如,当被吸收的物质表现出亲水性质时,贴片pa表现出亲水性质,并且被吸收的物质与贴片pa之间的吸引力比另一贴片pa与被吸收的物质之间的吸引力更强时(即,当贴片pa比另一贴片pa更亲水时),在贴片pa与另一贴片pa接触之后再分开时,外部物质的至少一部分可吸收入贴片pa中。

图20-图22示出了作为根据本申请的贴片pa的功能之中的物质吸收的实例的通过贴片pa3从另一贴片pa4吸收物质。根据图20-图22,贴片pa3可吸收放置在另一贴片pa4中的物质的一部分。物质吸收可通过以下进行:使贴片pa3与另一贴片pa4接触,从而使得捕获在贴片pa3中的液体物质sb和捕获在另一贴片pa4中的液体物质sb能够相互交换。

可根据构成贴片pa的三维网状结构体ns的框架结构体相对于贴片pa的总体积而言的比例来改变贴片pa与吸收至其中的外部物质的结合力。例如,当整个贴片pa中的由框架结构体占据的体积的比例增加时,捕获在结构体中的物质的量可减少。在这种情况下,由于如靶物质与捕获在贴片pa中的物质之间的接触面积减少的原因,可减少贴片pa与靶物质之间的结合力。

关于这一点,在贴片pa的制造工艺过程中可调节构成网状结构体ns的材料的比率,从而控制贴片pa的极性。例如,在使用琼脂糖制造贴片pa的情况下,可控制琼脂糖的浓度以调节吸收的程度。

当相对于从贴片pa提供的物质而言特定区域具有比贴片pa更弱的结合力,并且将贴片pa与另一贴片pa接触并随后分开时,被吸收的外部物质可随着贴片pa与另一贴片pa分开。

2.2.4.3提供环境

由于上述的特性,根据本申请的贴片pa可执行调节期望区域的环境条件的功能。贴片pa可向期望的区域提供归因于贴片pa的环境。

归因于贴片pa的环境条件可取决于捕获在贴片pa中的液体物质sb。基于贴片pa中容纳的物质的特性或者为了使环境对应于贴片pa中容纳的物质的特性的目的,贴片pa可在放置于外部区域中的物质中产生期望的环境。

可将对环境的调节理解为改变期望区域的环境条件。改变期望区域的环境条件能够以如下形式实施,其中,受贴片pa影响的区域扩大至包括期望区域的至少一部分;或者与期望区域共享贴片pa的环境。

下文中,为了方便,将贴片pa的上述功能称为“提供环境”。

通过贴片pa提供环境可在如下状态下进行,其中,物质能够在贴片pa与用于提供环境的外部区域之间移动。通过贴片pa提供环境可通过接触进行。例如,当贴片pa与期望的区域(例如,外部物质、板pl等)接触时,通过贴片pa可将特定的环境提供至期望的区域。

贴片pa可通过提供具有适当的ph、渗透压、湿度水平、浓度、温度等的环境来调节靶区域ta的环境。例如,贴片pa可向靶区域ta或靶物质提供流动性(流通性,liquidity)。此种对流动性的提供可由于捕获在贴片pa中的物质的一部分的移动而发生。通过捕获在贴片pa中的液体物质sb或基础物质bs可向靶区域ta提供潮湿的环境。

可根据目的不断地维持由贴片pa提供的环境因素。例如,贴片pa可向期望区域提供稳态。作为另一示例,作为提供环境的结果,捕获在贴片pa中的物质可适应于期望区域的环境条件。

通过贴片pa提供环境可产生自包括在贴片pa中的液体物质sb的扩散。也就是说,当贴片pa与期望区域接触时,物质能够经由接触区域而移动,所述接触区域由于贴片pa和期望区域之间的接触而形成。关于这一点,根据物质扩散的方向,可实施归因于渗透压的环境变化、归因于离子浓度变化的环境变化、对潮湿环境的提供以及ph水平的变化。

图23-图25示出了作为根据本申请的贴片pa的功能之中的提供环境的实例的通过贴片pa将预定的环境提供至外部板pl。根据图23-图25,贴片pa可将预定的环境提供至外部板pl,在所述外部板pl上放置有第四物质sb4和第五物质sb5。例如,贴片pa可向板pl提供预定的环境用于第四物质sb4与第五物质sb5反应并且形成第六物质sb6。通过使贴片pa与板pl接触从而使得在接触区域的附近形成水膜wf并且将第四物质sb4和第五物质sb5捕获入水膜wf中,可进行环境的提供。

3.贴片的应用

通过适当地应用贴片pa的上述功能,可施用根据本申请的贴片pa以执行各种功能。

下面将通过公开一些实施方式来描述本申请的技术思想。但是,应用本申请所公开的贴片pa的功能的技术范围可在本领域普通技术人员可以容易地得出的范围内进行广义的解释,并且不应当将本申请的范围解释为受到本文公开的实施方式的限制。

3.1贴片内(in-patch)

贴片pa可向物质提供反应区域。换句话说,物质的反应可发生在受贴片pa影响的空间区域的至少一部分内。在这种情况下,物质的反应可为捕获在贴片pa中的液体物质sb之间的反应和/或捕获的液体物质sb与从贴片pa外部提供的物质之间的反应。向物质提供反应区域可激活或促进物质的反应。

在这种情况下,捕获在贴片pa中的液体物质sb可包括以下中的至少一种:在制造贴片pa时添加的物质;在制造贴片pa之后向贴片pa中添加并且包含在贴片pa中的物质;以及暂时捕获在贴片pa中的物质。换句话说,不管是以何种形式将物质捕获进贴片pa中,在贴片pa中的反应被激活的时间点,被捕获在贴片pa中的任何物质可在贴片pa中反应。进一步地,在制造贴片pa后注入的物质也可作为反应引发剂。

就实施方式而言,对捕获在贴片pa中的液体物质sb相关的反应提供反应区域可为从属于上述第2.1.3节(即,提供反应空间)的概念。或者,对捕获在贴片pa中的液体物质sb相关的反应提供反应区域可由多个概念组成,所述多个概念执行上述第2.1.3节和第2.2.4.2节(即,吸收)的组合功能。对捕获在贴片pa中的液体物质sb相关的反应提供反应区域并不限于此并且能够以将两种以上的功能组合的形式来实施。

3.1.1第一实施方式

下文中,将通过假定由单个贴片pa来执行吸收到贴片pa中的功能和提供反应空间的功能(下文称为“提供功能”)来给出描述。在这种情况下,吸收功能和提供功能可为同时执行的功能、在不同时间点执行的功能、或者为执行另一功能依次执行的功能。除了吸收功能和提供功能之外,进一步包括其它功能的贴片pa也可被认为属于本实施方式。

如上所述,贴片pa可执行捕获物质的功能,并且即使当将物质捕获时,所述物质可具有流动性。当液体物质sb的一些组分是非均匀分布的,非均匀的组分可进行扩散。即使当液体物质sb的组分是均匀分布的,液体物质sb可由于颗粒的不规则运动而具有预定水平的移动性。在这种情况下,可在贴片pa内部发生物质之间的反应(例如物质之间的特异性结合)。

例如,在贴片pa中,除了捕获的物质之间的反应之外,处于以下形式的反应也是可能的,其中,新捕获在贴片pa中的具有流动性的物质与已经捕获在贴片pa中的物质彼此特异性地结合。

具有流动性的物质与已经捕获在贴片pa中的物质之间的反应也可发生在将贴片与已提供的空间分开之后。例如,在贴片pa从任意空间吸收具有流动性的物质之后,可将贴片pa与任意空间分开,并且在贴片pa中可发生被吸收的物质与已经捕获在贴片pa中的物质之间的反应。

此外,通过相对于具有流动性的物质执行吸收功能,贴片pa可允许捕获至其中的物质发生反应。换句话说,通过贴片pa吸收具有流动性的物质可触发被吸收的物质与已经捕获在贴片pa中的物质之间的反应。所述反应可发生在由贴片pa限定的空间的内部。

由于贴片pa内部发生的反应,可改变捕获在贴片pa中的液体物质sb的组成。具体而言,当贴片pa内部捕获的物质为化合物时,其化学组成可在反应之前和之后改变。或者,物质的组成分布可根据物质在贴片pa中的位置而改变。例如,这可能是由于扩散或者颗粒具有对于另一物质而言特异性的吸引力。

当由于贴片pa内部的反应而改变液体物质sb的组成时,由于贴片pa与贴片pa外部的物质(当存在与贴片pa接触的物质时,为相应的物质)之间的浓度差,物质的一部分可被吸收至贴片pa中,或者物质可从贴片pa释放至贴片pa外部的物质。

3.1.2第二实施方式

下文中,将描述一个实施方式,其中,将贴片pa的包含功能和向物质提供反应空间的功能一起进行至少预定量的时间。更具体地,贴片pa可执行向贴片pa中包含的液体物质sb的至少一部分提供空间的功能以进行反应。

贴片pa可包含物质并且向所包含的物质提供反应空间。在这种情况下,由贴片pa提供的反应空间可为由贴片pa的网状结构体ns形成的微腔或者贴片pa的表面区域。具体地,当贴片pa中包含的物质与施加在贴片pa表面上的物质反应时,反应空间可为贴片pa的表面区域。

由贴片pa提供的反应空间可用于提供特定的环境条件。当在放置于贴片pa中的液体物质sb中发生反应时,通过贴片pa可调节反应的环境条件。例如,贴片pa可充当缓冲溶液。

通过经由网状结构包含物质,贴片pa不需要单独的容器。当贴片pa的反应空间为贴片pa的表面时,通过贴片pa的表面可容易地观察到反应。对此,可将贴片pa的形状变形成有助于观察的形状。

贴片pa中包含的液体物质sb可变性或者与不同种类的物质反应。贴片pa中包含的液体物质sb的组成可随着时间而变化。

所述反应可指其中化学式改变的化学反应、物理状态变化或生物反应。在这种情况下,贴片pa中包含的液体物质sb可为由单一组分形成的物质或者包含多种组分的混合物。

3.2提供移动路线(通道)

下文中,将对执行提供物质移动路线功能的贴片pa进行描述。更具体地,如上所述,贴片pa可捕获、吸收、释放和/或包含具有流动性的物质。执行提供物质移动路线功能的贴片pa的各种实施方式可通过贴片pa的上述功能中的每一种或其组合来实施。但是,为了更好地理解,将公开数个实施方式。

3.2.1第三实施方式

可施用贴片pa以执行贴片pa的上述功能之中的第2.2.4.1节(即,涉及递送的章节)和第2.2.4.2节(即,涉及吸收的章节)中描述的功能。在这种情况下,可一起提供或依次提供吸收功能和递送功能。

贴片pa可一起执行吸收功能和递送功能以提供物质的移动路线。具体而言,贴片pa可吸收外部物质并且将吸收的外部物质提供至外部区域,由此向外部物质提供移动路线。

通过贴片pa提供外部物质的移动路线可通过吸收外部物质以及释放外部物质来进行。更具体地,贴片pa可与外部物质接触,吸收外部物质,与外部区域接触以及向外部区域递送外部物质。在这种情况下,通过贴片pa捕获外部物质并且将捕获的外部物质递送至外部区域可通过与上述吸收和递送类似的过程来进行。

被吸收入贴片pa中并且提供的外部物质可处于液相或固相中。

如此,贴片pa可允许将外部物质的一部分提供至另一外部物质。外部物质和另一外部物质可同时与贴片pa接触。外部物质和另一外部物质可在不同的时间点与贴片pa接触。

外部物质和另一外部物质可在不同的时间点与贴片pa接触。当外部物质与贴片pa在不同的时间点接触时,外部物质可首先与贴片pa接触,并在将外部物质与贴片pa分开之后,可将另一外部物质与贴片pa接触。在这种情况下,贴片pa可暂时地包含从外部物质捕获的物质。

贴片pa在提供物质的移动路线的同时可额外提供时间延迟。贴片pa可执行以下功能:适当地调节提供至另一外部物质的物质的量以及此种提供的速度。

如此一系列的过程可相对于贴片pa在一个方向上进行。作为具体的实例,可通过贴片pa的表面进行物质的吸收,可在贴片pa的内部空间提供环境,并且可通过面向表面的另一表面释放物质。

3.2.2第四实施方式

贴片pa可同时执行贴片pa的上述功能之中的物质的吸收和释放以及向物质提供反应空间。在这种情况下,物质的吸收和释放以及提供反应空间可同时或依次进行。

根据一个实施方式,在进行外部物质的吸收和释放的过程中,贴片pa可向被吸收的外部物质提供反应空间至少预定量的时间。贴片pa可向贴片pa中捕获的液体物质sb提供特定的环境至少一段时间,所述贴片pa包含被吸收的外部物质。

已经捕获在贴片pa中的液体物质sb和捕获在贴片pa中的外部物质可在贴片pa内部进行反应。吸收入贴片pa中的外部物质可受由贴片pa提供的环境的影响。从贴片pa释放的物质可包括经反应生成的物质的至少一部分。在外部物质的组成、特性等变化之后,外部物质可从贴片pa释放。

可从贴片pa释放被吸收的物质。吸收至贴片pa中并且从贴片pa释放的外部物质可理解为穿过贴片pa的外部物质。穿过贴片pa的外部物质可由于贴片pa内部的反应或贴片pa提供的环境的影响而失去完整性。

外部物质的吸收、物质的反应以及提供物质的上述过程能够以一个方向进行。换句话说,物质的吸收可在贴片pa的一个位置处进行,提供环境可在贴片pa的另一位置处进行,并且物质的释放可在贴片pa的又一位置处进行。

图26-图28示出了作为根据本申请的贴片pa的实施方式的在两个板pl之间提供物质移动路线。根据图26-图28,贴片pa可提供板pl1和板pl2之间的物质移动路线,在所述板pl1上施加有第七物质sb7以及在所述板pl2上施加有第八物质sb8。作为特定的实例,当第七物质sb7能够结合至第八物质并且第八物质固定至板pl2时,贴片pa可与板pl1和板pl2接触从而使得第七物质sb7移动通过贴片pa并且结合至第八物质sb8。第七物质sb7和第八物质sb8可通过水膜wf连接至贴片pa,所述水膜wf通过使贴片pa与板pl1和板pl2接触而形成。

图29和图30示出了作为根据本申请的贴片pa的实施方式的在两个贴片之间提供物质移动路线。根据图29和图30,贴片pa6可与贴片pa5和贴片pa7接触,将所述贴片pa6配置成提供移动路线,将所述贴片pa5配置成包含待移动的物质,将所述贴片pa7配置成接收待移动的物质。贴片pa6可与贴片pa5和贴片pa7接触,将所述贴片pa6配置成提供移动路线,将所述贴片pa5配置成包含待移动的物质,将所述贴片pa7配置成接收待移动的物质;以及待移动的物质可移动至贴片pa7,将所述贴片pa7配置成接收待移动的物质。物质在贴片之间的移动可通过水膜wf进行,所述水膜wf在贴片之间的接触区域附近形成。

图31和图32示出了作为根据本申请的贴片的实施方式的在两个贴片之间提供物质移动路线。根据图29和图30,贴片pa9可与贴片pa8和贴片pa10接触,将贴片pa9配置成提供移动路线,将贴片pa8配置成包含第九物质sb9,将贴片pa10配置成接收物质。提供移动路线的贴片pa9可与贴片pa8(将其配置成包含第九物质sb9)接触以吸收第九物质sb9。被吸收的第九物质sb9可与包含在贴片pa9中的第十物质sb10反应并且生成第十一物质,将所述贴片pa9配置成提供移动路线。第十一物质sb11可从贴片pa9提供至贴片pa10,将所述贴片pa9配置成提供移动路线,将所述贴片pa10配置成接收所述物质。物质在贴片pa之间的移动可通过水膜wf进行,所述水膜wf在贴片pa之间的接触区域附近形成。

3.3多贴片(multi-patch)

可单独使用贴片pa或者可一起使用多个贴片pa。在这种情况下,能够一起使用的多个贴片pa包括将多个贴片pa依次使用的情况以及将多个贴片pa同时使用的情况。

当同时使用多个贴片pa时,贴片pa可执行不同的功能。尽管多个贴片pa的各个贴片pa可包含相同的物质,但是所述多个贴片pa也可包含不同的物质。

当同时使用多个贴片pa时,贴片pa可彼此不接触从而使得在贴片pa之间不发生物质的移动,或者可在贴片pa中包含的物质可相互交换的状态下执行期望的功能。

尽管一起使用的多个贴片pa能够以彼此相似的形状或相同的尺寸制造,但是即使当多个贴片pa具有不同的形状时,也能一起使用多个贴片pa。可制造构成多个贴片pa的各个贴片pa,从而使得网状结构体ns的密度不同或者构成网状结构体ns的组分不同。

3.3.1与多个贴片接触

当使用多个贴片pa时,多个贴片pa可与单个靶区域ta接触。多个贴片pa可与单个靶区域ta接触并且执行期望的功能。

当存在多个靶区域ta时,多个贴片pa可与不同的靶区域ta接触。当存在多个靶区域ta时,多个贴片pa可分别与相应的靶区域ta接触并且执行期望的功能。

多个贴片pa可与施加在靶区域ta上的物质接触。在这种情况下,施加在靶区域ta上的物质可为固定的或者具有流动性。

期望的功能可为提供或吸收物质的功能。但是,各个贴片pa不是必然地提供相同的物质或者吸收相同的物质,并且贴片pa可向靶区域ta提供不同的物质或者从放置在靶区域ta中的物质吸收不同的组分。

对于构成多个贴片pa的各个贴片pa而言,期望的功能可是不同的。例如,一个贴片pa可执行向靶区域ta提供物质的功能,而另一贴片pa可执行从靶区域ta吸收物质的功能。

多个贴片pa可包括不同的物质,并且可将所述不同的物质提供至单个靶区域ta并且用于诱导期望的反应。当需要物质的多个组分用于发生期望的反应时,可分别将多个组分包含在多个贴片pa中并且提供至靶区域ta。当由于例如被包含在单个贴片pa中的原因对反应所需的物质进行混合时,丧失或者改变了期望反应所需的物质的性质,这时多个贴片pa的此种用法可能是特别有用的。

根据一个实施方式,当多个贴片pa包括由不同的组分形成的物质并且所述由不同组分形成的物质具有不同的特异性结合关系时,可将由不同组分形成的所述物质提供至靶区域ta。通过提供包括不同组分的物质,多个贴片pa可用于检测来自施加在靶区域ta上的物质的多个特异性结合。

根据另一实施方式,多个贴片pa可包括由相同的组分形成的物质,但是各个贴片pa相对于由相同的组分形成的物质可具有不同的浓度。多个贴片pa可与靶区域ta接触并且被用于确定根据包括在多个贴片pa中的物质的浓度的影响,所述多个贴片pa包括由相同的组分形成的物质。

当如上所述使用多个贴片pa时,可将贴片pa分组成更有效的形式并且使用。换句话说,每次使用多个贴片pa时,可改变使用的多个贴片pa的配置。多个贴片pa能够以卡盒(cartridge)的形式制造并且使用。在这种情况下,所使用的各个贴片pa的形式可适当地标准化和制造。

当制造贴片pa(被配置成包含多个种类的物质)以根据需要选择使用时,处于卡盒形式的多个贴片pa可能是合适的。

具体而言,当尝试使用多个种类的物质检测来自靶区域ta的各个物质的特定反应时,每次进行检测时可改变待检测的特定反应的组合。

图33示出了作为根据本申请的贴片pa的实施方式的一起使用多个贴片pa的情况。根据图33,根据本申请的实施方式的多个贴片pa可同时与放置在板pl上的靶区域ta接触。构成多个贴片pa的贴片pa可具有标准化形式。所述多个贴片pa可包括第一贴片和第二贴片,而且第一贴片中包含的物质可不同于第二贴片中包含的物质。

图34示出了在其中使用多个贴片pa并且板pl包括多个靶区域ta的情况。根据图34,根据本申请的实施方式的多个贴片pa可同时与放置在板pl上的多个靶区域ta接触。所述多个贴片pa可包括第一贴片pa和第二贴片pa;所述多个靶区域ta可包括第一靶区域和第二靶区域;并且第一贴片可与第一靶区域接触而第二贴片可与第二靶区域接触。

3.3.2第五实施方式

多个贴片pa可执行多种功能。如上所述,贴片pa可同时执行多种功能,并且贴片pa还可同时执行不同的功能。但是,实施方式并不限于上述实施方式,而且所述功能也可在多个贴片pa中进行组合和执行。

首先,在贴片pa同时执行多种功能的情况下,贴片pa可执行物质的包含和释放。例如贴片pa可包含不同的物质并且将所包含的物质释放至靶区域ta。在这种情况下,可同时或依次释放所包含的物质。

接着,在贴片pa同时执行不同的功能的情况中,贴片pa可分别执行物质的包含和释放。在这种情况下,仅一些贴片pa可与靶区域ta接触并且向靶区域ta释放物质。

3.3.3第六实施方式

如上所述,当使用多个贴片pa时,多个贴片pa可执行多种功能。首先,贴片pa可同时执行物质的包含、释放和吸收。或者,贴片pa也可分别执行物质的包含、释放以及吸收。但是,实施方式并不限于此,并且所述功能也可在多个贴片pa中进行组合和执行。

例如,多个贴片pa的至少一些可包含物质并且将所包含的物质释放至靶区域ta。在这种情况下,多个贴片pa的至少剩余部分可从靶区域ta吸收物质。多个贴片pa的一些可释放物质,所述物质特异性地结合至放置在靶区域ta中的物质。在这种情况下,可使用另一贴片pa从放置在靶区域ta中的物质中吸收没有形成特异性结合的物质来检测特异性结合。

3.3.4第七实施方式

当使用多个贴片pa时,贴片pa可同时执行物质的包含和释放以及环境的提供。或者,贴片pa可分别执行物质的包含和释放以及环境的提供。然而,实施方式并不限于此,并且所述功能也可在多个贴片pa中组合执行。

例如,多个贴片pa之中的一个贴片pa可将其中包含的物质释放至靶区域ta。在这种情况下,另一贴片pa可向所述靶区域ta提供环境。本文中,能够以如下形式实施环境的提供,其中,向靶区域ta提供包含在另一贴片pa中的物质的环境条件。更具体地,通过贴片pa可将反应物质提供至靶区域ta,而另一贴片pa可与靶区域ta接触并且提供缓冲环境。

作为另一实例,多个贴片pa可彼此接触。在这种情况下,至少一个贴片pa可包含物质并且将其中包含的物质释放至另一贴片pa,所述另一贴片pa被配置成提供环境。在本实施方式中,被配置成提供环境的贴片pa可释放物质、与至少又一贴片pa接触(所述至少又一贴片pa彼此不接触)以及从贴片pa中吸收物质。

4.免疫测定

4.1含义

本申请的免疫贴片可用于免疫测定中。免疫测定是指根据通过免疫学技术获得的测试结果进行诊断。作为免疫测定的实例,主要使用酶联免疫吸附测定(下文称为“elisa”)。

在下文中,除非另外特别描述,否则将假设本文的描述是关于用于诊断目的的免疫分析。然而,显而易见的是,除了应用于诊断目的的实践之外,本文所述的公开和实施方式的技术精神可应用于使用抗原-抗体反应的整个分析领域(即免疫分析)。

在将本申请的贴片应用至免疫测定中,根据贴片应用的部位可适当地改变上述基础物质bs和添加物质as。

在检查具体实施方式之前,将检查免疫测定的类型和进行免疫测定的方法。

4.1.1免疫测定的分类

免疫测定可根据各种标准分类。

根据进行免疫测定的方法,可将免疫测定分类为:1)直接技术(或直接elisa),在所述直接技术中,抗原固定在板pl上,并且酶直接结合到与抗原反应的抗体,从而检测抗原的量;2)间接技术(或间接elisa),在所述间接技术中,抗原固定在板上,并且与抗原反应的一抗以及与一抗结合并具有与其结合的酶的二抗用于检测抗原的量;3)夹心技术(或夹心elisa),在所述夹心技术中,与抗原有关的抗体首先固定在板pl上,抗原与抗体结合,并且将直接技术或间接技术用于检测抗原;以及4)竞争性定量技术(或竞争性elisa),在所述竞争性定量技术中,将竞争抗体的相同结合部分的两种抗原用于测量抗原浓度。

免疫测定也可根据靶样品分类。当靶样品是体液时,免疫测定可被归类为免疫化学技术;当样品是细胞时,被归类为免疫细胞化学技术;以及当样品是组织时,被归类为免疫组织化学技术。对体液的免疫测定可通过检测靶蛋白(例如漂浮的抗原)用于诊断。对细胞的免疫测定可用于检测靶蛋白,例如存在于细胞表面上或细胞内的抗原。对组织的免疫测定可通过检测存在于细胞表面上或细胞内的靶蛋白或确定组织中的靶蛋白的分布来进行。

免疫测定也可根据检测方法分类。存在观察由于酶-底物反应的产物引起的显色(比色的)的方法、检测由于化学反应引起的冷发光的方法(化学冷发光),以及检测荧光的方法(化学荧光)。当测量显色时,主要使用分光光度计。当测量荧光时,主要使用安装有滤光器的荧光计,并且当测量冷发光时,主要使用光度计。

4.1.2elisa

elisa是免疫测定的实例,并且是指用于检测物质(特别是抗原)的诊断方法。更具体地,elisa是指抗体或抗原附着于酶并测量酶的活性以定量测量抗原-抗体反应的强度及其量的方法。由于抗体或抗原可附着在固相物上,并且根据elisa可通过洗涤移除游离的、未结合的抗原或抗体,因此elisa有助于检测所需结果。在下文中,除非另外特别提及,否则假定免疫测定是指使用elisa的免疫测定。

4.2免疫测定的进行

4.2.1样品制备

4.2.1.1样品类型

免疫测定中使用的样品可主要分类为体液、细胞和组织,每种样品可能需要适当处理以使用的过程。

用于免疫测定的体液样品可包括血液、尿液、唾液等。特别地,对于血液,尽管可使用全血,但是血液也可分离成血清、血浆、血细胞等,并且血液的每种成分可用于检测。

用于免疫测定中的细胞样品可包括全血、培养细胞、细胞悬浮液等。

在下文中,除非另外特别提及,否则将假定样品是根据本申请的免疫测定中的组织。

4.2.1.2每种样品的制备

将描述用在免疫测定中的样品的制备。制备用于诊断中的样品的方法可根据进行诊断的方法而不同。在下文中,将描述使用本申请的贴片pa并对位于板pl上的样品进行诊断的情况。

本文中,“板pl”可指一般的载玻片或固体板(例如用聚苯乙烯、聚丙烯等制造的板)。板pl的底部的形式或透明度可根据检测方法而不同。例如,在期望检测光的情况下,可使用白色板或黑色板作为板pl。另外,例如,在期望检测显色的情况下,可使用具有平底的透明板作为板pl。板pl可包括与贴片pa接触或可发生期望反应的反应区域。

当对体液进行免疫测定时,体液可在该体液被固定在板pl上的状态下用于诊断。换句话说,体液可在体液被涂抹在板pl上并固定至其的状态下使用。或者,体液可在体液被涂抹在板pl上的状态下使用。例如,可将体液涂抹在固定有抗体的板pl上。

当对细胞进行免疫测定时,可将细胞的悬浮液或血液涂抹在板pl上并干燥以进行诊断。或者,可将血液或细胞的悬浮液涂抹在板pl上并使用。例如,可将血液或细胞的悬浮液涂抹在固定有抗体的板pl上,并且可进行诊断。当对细胞进行免疫测定时,可对经细胞裂解后的细胞或未经细胞裂解的细胞进行诊断。

当对组织进行免疫测定时,可将组织的切片或薄片放置在板pl上,并且可进行诊断。组织切片可以是填充有石蜡的组织切片或组织的冰冻切片。

4.2.2贴片的制备

在本申请中进行免疫测定中,可使用上述贴片pa。

贴片pa可包含抗原并将抗原提供至板pl。贴片pa还可包含活检标本(即样品),并将活检标本提供给板pl,所述活检标本包括抗原。

贴片pa可包含抗体ab并将抗体ab递送至板pl。当使用间接技术时,贴片pa中包含的抗体ab可以是一抗ab或二抗ab。换句话说,贴片pa可包含一抗ab或二抗ab。此外,贴片pa还可同时包含一抗ab和二抗ab,并将一抗ab和二抗ab提供至板pl。抗体ab也能够以附着于颗粒的状态包含在贴片中。

贴片pa可包含执行酶催化的反应的底物su并将底物su提供至板pl。使用的底物su可根据使用的酶和检测方法而变化。底物su可以是2,2'-连氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)(abts)、3,3',5,5'-四甲基联苯胺(tmb)等。

贴片pa可包含洗涤溶液并从板pl吸收残留物。通过使包含洗涤溶液的贴片pa与贴片pa接触并随后与其分开,板pl上的杂质或未特异性结合的抗体ab可通过贴片pa从板pl吸收并除去。上面使用的洗涤溶液可以是tris缓冲盐水(tbs)或具有吐温20的磷酸盐缓冲盐水(pbs)。

贴片pa可包含缓冲溶液并向板pl提供环境。在这种情况下,缓冲溶液可用于促进免疫测定的每个步骤。因此,每个步骤中使用的缓冲溶液可包含不同的组分。作为缓冲溶液的实例,当检测化学冷发光时可使用过氧化物缓冲液。

贴片pa可包含用于中断底物su-酶反应的中断溶液。也就是说,可制造反应中断贴片(interruptionpatch)pa,并且可使用反应中断贴片pa将中断溶液提供至板pl,以在适当的时间点中断底物su-酶反应。

使用贴片pa进行免疫测定将在下面详细描述。

4.2.3免疫测定的方法

将描述使用如上所述的本申请的贴片pa和板pl进行免疫测定的方法的一些典型实例。

然而,本公开的免疫测定方法不限于下面将描述的实例,并且由于可存在多种改良的检测方法,因此使用贴片pa进行的任何免疫测定方法可用作本公开的免疫测定方法。

4.2.3.1直接的情况

可使用本申请的贴片pa和板pl进行根据直接技术的免疫测定。

根据使用贴片pa和板pl的直接技术的免疫测定可理解为通过如下进行:将样品(抗原)固定到板pl,施加与期望检测的抗原特异性结合并且附着有作为识别标记的酶的抗体ab,除去未特异性结合的抗体ab,以及检测由酶催化的底物su的反应。在这种情况下,根据本申请的贴片pa可用于施加抗体ab和去除未特异性结合的抗体ab。

以上检测方法将在下面的“免疫测定的检测方法”部分中详细描述。

4.2.3.2间接的情况

可使用本申请的贴片pa和板pl进行根据间接技术的免疫测定。

根据使用贴片pa和板pl的间接技术的免疫测定可理解为通过如下进行:将样品(或抗原)固定到板pl,施加与期望检测的抗原特异性结合的抗体ab(即,一抗ab),除去未特异性结合的一抗ab,施加与一抗ab特异性结合并附着有酶作为识别标记的抗体ab(即二抗),除去未与一抗ab特异性结合的二抗ab,并检测由板pl上的酶催化的反应。在这种情况下,根据本申请的贴片pa可用于施加抗体ab和除去未特异性结合的抗体ab。

以上检测方法将在下面的“免疫测定的检测方法”部分中详细描述

4.2.3.3夹心的情况

可使用本申请的贴片pa和板pl进行根据夹心技术的免疫测定。

根据使用贴片pa和板pl的夹心技术的免疫测定可通过如下进行:将抗体ab固定到板pl,在板pl上施加样品(或抗原),施加与期望检测的抗原特异性结合的抗体ab,以及除去未特异性结合的抗原或抗体ab。在这种情况下,可通过上述直接技术或间接技术进行特异性地结合至抗原的抗体ab的施加。换句话说,可通过施加与抗原特异性结合并且具有附着于其的酶的抗体ab来进行特异性地结合至抗原的抗体ab的施加。或者,施加与抗原特异性结合的抗体ab可包括施加与抗原特异性结合的一抗ab,以及施加与一抗ab特异性反应并具有附着于其的酶作为识别标记的抗体ab。根据本申请的贴片pa可用于施加抗体ab。

以上检测方法将在下面的“免疫测定的检测方法”部分中详细描述。

4.2.4免疫测定的检测方法

使用本申请的贴片pa和板pl检测免疫测定的诊断结果可使用各种检测方法进行。

可根据由酶和底物su之间的反应产生的产物选择性地使用检测方法。换句话说,酶可作为标记附着于直接技术中的抗体ab或间接技术中的二抗ab,附着于抗体ab的酶可催化底物su的化学反应并产生产物,并且可根据在这种情况下产生的产物来确定待使用的检测方法。

当检测到由于产生的产物引起的显色时,可测量显色以定量测量特异性结合。可通过检测从光源发出并已经通过板pl的光来进行显色的测量。换句话说,可通过测量光吸收来进行显色的测量。在测量显色时可使用分光光度计。在这种情况下,优选地,可使用平的、透明的板作为板pl。

在期望检测由于产生的产物引起的冷发光的情况下,可测量冷发光以定量测量特异性结合。可通过检测从板pl的底部或其上方的溶液发射的光来进行冷发光的测量。当测量冷发光时,可使用光度计。当测量冷发光时,可使用不透明的黑色板或不透明的白色板作为板pl。

在期望检测由于产生的产物引起的荧光的情况下,可测量荧光以定量测量特异性结合。可通过使光入射到板pl上并测量从板pl发射的荧光来进行荧光的测量。当测量荧光时,可使用附有滤光器的荧光计。当测量荧光时,可使用不透明的黑色板或不透明的白色板作为板pl。

可获取显色图像、冷发光图像或荧光图像。可分别获取图像的部分图像,并且可将获取的部分图像组合成单个图像。可从获取的图像获得靶抗原/抗体ab分布的位置、细胞的形状、组织中的靶蛋白的分布等。此外,通过分析获取的图像,可获取靶蛋白、靶抗原/抗体ab等的位置以及靶标的部分图像。

也可使用电化学方法进行免疫测定的诊断结果的检测。例如,可使用与已经固定在板pl上的样品特异性结合的抗体ab来测量在板pl上发生的电化学特性的变化。或者,还可测量由于贴片pa将抗体ab转移至板pl而发生的贴片pa的电化学特性的变化。

4.3免疫化学的实施方式

图35示出了用于对根据本申请的免疫测定方法的实例进行描述的流程图。根据本申请的实施方式的免疫测定方法可包括将待诊断的样品放置在反应区域中(s200),并使用贴片pa向反应区域提供抗体ab,所述贴片pa包含与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab(s300)。

待诊断样品的放置可通过如下中的任一种来进行:将样品固定到板pl的方法、在板pl上涂抹样品的方法,以及在板上涂抹样品并固定样品的方法。

除了放置样品(s200)以及向反应区域提供抗体ab(s300)之外,免疫测定方法可进一步包括使用包含底物su的贴片pa将底物su提供到反应区域,所述底物su通过附着于抗体ab的酶催化的化学反应产生产物(s400)(参见图36)。

除了放置样品(s200)以及向反应区域提供抗体ab(s300)之外,免疫测定方法可进一步包括检测抗体ab和靶蛋白tp之间的特异性反应以诊断靶疾病(s500)(参见图37)。

在这种情况下,特异性反应的检测可包括测量由于特异性反应而发生的贴片pa的电特性的变化。或者,特异性反应的检测可通过如下中的任一种来进行:测量由附着于与靶蛋白tp特异性结合的抗体ab的酶催化的化学反应而发生的荧光、测量由于化学反应而发生的冷发光,以及测量归因于化学反应的显色。

向反应区域提供抗体ab(s300)可包括使贴片pa与反应区域接触,从而使抗体ab可移动至反应区域(s310),以及将贴片pa与反应区域分开(s330),并且当贴片pa与反应区域分开时,可从反应区域除去抗体ab中的未与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab(参见图38)。

除了放置样品(s200)以及向反应区域提供抗体ab(s300)之外,免疫测定方法可进一步包括通过使用洗涤贴片pa从反应区域从所提供的抗体ab中吸收未与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab(s600)(参见图39)。

在免疫测定方法中,向反应区域提供抗体ab(s300)可包括使用第一贴片pa向反应区域提供第一抗体ab(s320)以及使用第二贴片pa向反应区域提供第二抗体ab(s340);所述第一贴片pa包含与靶蛋白tp特异性反应的第一抗体ab;所述第二贴片pa包含与第一抗体ab特异性反应的第二抗体ab(参见图40)。

在将待诊断的样品放置在反应区域中(s200)之前,免疫测定方法可进一步包括提供板pl,在所述板pl上底部抗体bab被固定于反应区域中(s100),所述底部抗体bab是与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab;并且将待诊断样品放置在反应区域中可包括将待诊断的样品放置于反应区域中,在所述反应区域中固定有底部抗体bab(参见图41)。

除了放置样品(s200)、向反应区域提供抗体ab(s300)、以及向反应区域提供底物su(s400)之外,免疫测定方法可进一步包括中断底物su的化学反应(s700)(参见图42)。

下面将描述使用贴片pa和板pl进行免疫测定的具体方式的一些实施方式。

4.3.1参考实施方式1-间接elisa

图43示出了用于对作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用间接elisa的免疫测定方法进行描述的流程图。

根据本申请的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法可包括将样品sa置于反应区域中(s200),向反应区域提供第一抗体ab(s320),向反应区域提供第二抗体ab(s340),向反应区域提供底物su(s400),以及检测抗体ab和靶蛋白tp之间的特异性反应(s500)。

根据本申请的实施方式的使用间接elisa的免疫测定方法可包括将样品sa置于反应区域中(s200),向反应区域提供第一抗体ab(s320),从反应区域吸收未与靶蛋白tp特异性反应的第一抗体ab(s610),向反应区域提供第二抗体ab(s340),从反应区域吸收未与第一抗体ab特异性反应的第二抗体ab(s630),以及向反应区域提供底物su(s400)(参见图44)。

根据本申请的实施方式的免疫测定可使用板pl和贴片pa,并通过间接elisa进行。

根据本公开的实施方式的免疫测定方法可包括将样品sa固定到板pl,通过使用第一贴片pa向板pl提供一抗ab,以及通过使用第二贴片向板pl提供二抗ab。

将样品sa固定在板pl上可包括将待诊断的样品sa固定在板pl上。将样品sa固定在板pl上可包括在板pl上干燥待诊断的体液样品sa并将体液样品sa固定在板pl上。将待诊断的样品sa固定在板pl上可包括固定组织切片。

通过使用贴片pa向板pl提供一抗ab可包括使包含一抗ab的第一贴片pa与板pl接触并将一抗ab提供至板pl。第一贴片pa与板pl的接触可包括使第一贴片pa与固定在板pl上的样品sa接触。第一贴片pa与板pl的接触可包括使第一贴片pa与板pl的区域接触,在所述板上固定有样品sa。可根据期望检测的抗原改变一抗ab。一抗ab可以是与期望检测的抗原特异性结合的抗体ab。

通过使用第一贴片pa提供一抗ab可包括使第一贴片pa与板pl接触并使第一贴片pa与板pl分开。使第一贴片pa与板pl接触,然后使第一贴片pa与板pl分开,可允许一抗ab选择性地转移。换句话说,当特异性地结合一抗ab的抗原被固定在板pl上时,可从第一贴片pa选择性地转移一抗ab。本文中,已经向板pl移动但未特异性结合的一抗ab(下文称为“残留的一抗”)可被吸收到第一贴片pa中并随着第一贴片pa与板pl分开而从板pl中除去。

残留的一抗ab吸收到贴片pa中可通过将残留的一抗ab溶解在水膜wf中来进行,所述水膜wf由于第一贴片pa和板pl之间的接触而形成,并且当第一贴片pa与板pl分开时,水膜wf随着第一贴片pa一起移动。贯穿本申请,由于贴片和样品等之间的接触而产生的水膜可指在接触区域附近的薄的液体膜。在这种情况下,形成的膜不一定具有扁平形状。然而,水膜不限于此,并且在本申请中,水膜可理解为指由于贴片和样品等之间的接触而使物质可能运动的区域,或者在贴片与样品等连接后物质具有移动性的区域。

如上所述,由于仅通过分开第一贴片pa从板pl中除去残留的一抗ab,因此可省略在进行传统的elisa中必需的洗涤过程。换句话说,通过使用本申请的第一贴片pa结合一抗ab的手段,可省略使用洗涤溶液以从板pl除去未特异性结合的一抗ab的过程。

图45-图47示出了在通过间接elisa进行免疫测定中使用贴片pa提供一抗ab1。根据图45和图46,贴片pa可包含一抗ab1,并将一抗ab1提供至位于板pl上的样品sa或样品sa所处的反应区域。通过贴片pa向板pl提供一抗ab1可通过如下进行:使贴片pa与板pl接触,从而通过在接触区域附近形成的水膜wf,允许一抗ab1向板pl或板pl上的反应区域移动。向板pl提供一抗ab1可能归因于一抗ab1和样品sa(并且特别是样品sa中包含的靶蛋白tp)之间的特异性结合。

使用贴片pa向板pl提供二抗ab可包括使包含二抗ab的第二贴片pa与板pl接触并将二抗ab提供至板pl。第二贴片pa与板pl的接触可包括使第二贴片pa与固定在板pl上的样品sa接触。第二贴片pa与板pl的接触可包括使第二贴片pa与在其上固定有样品sa的板pl的区域接触。二抗ab可以是与一抗ab特异性结合的抗体ab。可根据使用的一抗ab改变二抗ab。在这种情况下,二抗ab可以是附着有酶的抗体ab。附着于抗体的酶可以是辣根过氧化物酶(hrp)或碱性磷酸酶(ap)。

通过使用第二贴片pa提供二抗ab可包括使第二贴片pa与板pl接触并使第二贴片pa与板pl分开。使第二贴片pa与板pl接触,随后使第二贴片pa与板pl分开,可允许二抗ab选择性地转移至板pl。换句话说,当一抗ab特异性结合的抗原被固定在板pl上并且存在与固定的抗原结合的一抗ab时,可选择性地向板pl递送与一抗ab特异性结合的二抗ab。本文中,已移动至板pl但未特异性结合的二抗ab(下文称为“残留的二抗”)可被吸附到第二贴片pa中并随着第二贴片pa与板pl分开而从板pl中移除。因此,可省略使用洗涤溶液以从板pl除去未特异性结合的抗体ab的过程。将残留的二抗ab吸收到第二贴片pa中可通过将残留的二抗ab溶解在由于第二贴片pa和板pl之间的接触而形成的水膜wf中来进行,并且当第二贴片pa与板pl分开时,水膜wf与第一贴片pa一起移动。

与上述使用第一贴片pa除去残留的一抗ab类似,可仅通过分开第二贴片pa从板pl中除去残留的二抗ab。因此,可省略使用洗涤溶液以从板pl除去未特异性结合的二抗ab的过程,所述过程在进行传统elisa时是必需的过程。

图48-图50示出了使用贴片pa在通过间接elisa进行免疫测定中提供二抗ab2。根据图48-图50,贴片pa可包含二抗ab3,并将二抗ab4提供至位于板pl上的样品sa或样品sa所处的反应区域。通过贴片pa向板pl提供二抗ab4可通过如下进行:使贴片pa与板pl接触,从而通过在接触区域附近形成的水膜wf,允许二抗ab2移动到板pl或板pl上的反应区域。向板pl提供二抗ab2可能是由于二抗ab2和样品sa(特别是与样品sa中包含的靶蛋白tp结合的第一抗体ab1)之间的特异性结合。

根据本实施方式的免疫测定方法可进一步包括通过使用贴片pa提供底物su。使用贴片pa向板pl提供底物su可包括使包含底物su的第三贴片pa与板pl接触并在板pl上提供底物su。底物su可以是abts或tmb。底物su可被酶催化并产生产物pd,并且产物pd可用作期望检测的特异性结合的标记。

此外,上述使用第三贴片pa提供底物su可包括使第三贴片pa与板pl接触并使第三贴片pa与板pl分开。第三贴片pa与板pl的接触以及随后第三贴片pa与板pl的分开可允许控制维持第三贴片pa和板pl之间的接触的持续时间。换句话说,第三贴片pa可在最佳时间点与板pl分开。

免疫测定可通过检测由酶催化的底物su的化学反应产生的产物pd来进行。在这种情况下,当反应未在最佳时间点终止时,可能产生过量的产物pd,并且可能难以进行产物pd的定量测量。在这种情况下,根据本申请的实施方式,由于如上所述分离底物su贴片pa时可在最佳时间点中断反应,因此可解决由于过度反应导致的上述测量误差问题。如上所述,当在最佳时间点移除底物su贴片pa时,可通过测量产物pd直到移除底物su贴片pa的时间点来检测特异性结合。

图51-图53示出了在通过间接elisa进行免疫测定中使用贴片pa提供底物su。根据图51-图53,贴片pa可包含底物su并将底物su提供至位于板pl上的样品sa或样品sa所处的反应区域。通过贴片pa向板pl提供底物su可通过如下进行:使贴片pa与板pl接触,从而通过在接触区域附近形成的水膜wf,允许底物su移动至板pl或板pl上的反应区域。由于附着于位于板pl上的二抗ab的酶催化的化学反应,底物su可产生产物pd或转化为产物pd。

根据本实施方式的免疫测定方法可进一步包括使用洗涤贴片pa吸收残留物。使用洗涤贴片pa吸收残留物可包括使洗涤贴片pa与板pl接触以吸收残留物。使用洗涤贴片pa吸收残留物可包括使洗涤贴片pa与板pl接触以吸收未与固定的样品sa的至少一部分特异性结合的第一抗体ab。使用洗涤贴片pa吸收残留物可包括使洗涤贴片pa与板pl接触以吸收未与至少一些第一抗体ab特异性结合的第二抗体ab。

使用洗涤贴片pa吸收残留物可在通过使用第一贴片pa向板pl提供一抗ab之后且在通过使用第二贴片pa向板pl提供二抗ab之前进行。或者,使用洗涤贴片pa吸收残留物可在通过使用第二贴片pa向板pl提供二抗ab之后且在通过使用贴片pa向板pl提供底物su之前进行。

使用洗涤贴片pa吸收残留物可代替传统的免疫测定方法中使用洗涤溶液进行洗涤。由于传统的洗涤方法主要通过将洗涤溶液倒在板pl上冲洗板pl以除去位于板pl上的未特异性结合的物质来进行,因此在传统洗涤方法中消耗过量的溶液。然而,与传统方法相比,当如本申请中使用贴片pa从板pl吸收残留物时,消耗的洗涤溶液的量显著减少,因此提高了经济可行性。

图54-图56示出了在根据本申请的免疫测定的实施方式中进行洗涤。根据图54-图56,贴片pa可从板pl吸收残留物质。残留物质可以是未与靶蛋白tp特异性结合的抗体ab4。在这种情况下,靶蛋白tp特异性结合的抗体ab3可不被吸收到贴片中。贴片pa可以是包含洗涤溶液的洗涤贴片pa。

根据本实施方式的免疫测定方法可包括清除干扰特异性结合的检测的物质。具体地,在进行本申请的免疫测定方法中,可使用用于容易地从板pl除去干扰特异性结合的检测的物质的清洁剂贴片(detergentpatch)pa。

根据本实施方式的免疫测定方法可进一步包括向板pl提供预定环境。可使用缓冲贴片pa来进行预定环境的提供。提供预定环境可包括通过使用缓冲贴片pa来提供环境,所述缓冲贴片pa包含促进免疫测定的每个步骤的缓冲溶液。例如,当检测化学冷发光时,可使用包含过氧化物缓冲液的缓冲贴片pa。

根据本实施方式的免疫测定方法可包括中断板pl上的反应。可使用中断贴片pa进行反应的中断。中断反应可包括中断由酶催化的底物su的化学反应,即产生产物pd的反应。中断反应可包括终止反应。

根据本实施方式的免疫测定方法可进一步包括检测特异性反应,并且这可包括检测底物su的产生产物pd的反应。检测产生反应可包括检测一抗ab特异性结合的抗原。检测一抗ab特异性结合的抗原可包括检测由附着于与一抗ab结合的二抗ab的酶催化的底物su的反应而产生的产物pd。在这种情况下,产物pd的检测可通过如下执行:测量归因于反应的显色、测量归因于反应的冷发光或测量归因于反应的荧光。

可通过使包含底物su的贴片pa与板pl接触并实时检测底物su的化学反应来进行产生反应的检测。可通过使包含底物su的贴片pa与板pl接触并在预定量的时间后检测反应结果来进行产生反应的检测。在这种情况下,可分开包含底物su的贴片pa,并且可在预定时间点之后检测反应结果。

检测产生反应可包括使包含中断溶液的贴片pa与板pl接触并在包含中断溶液的贴片pa与板pl接触时检测反应结果,或在包含中断溶液的贴片pa与板pl分开后检测反应结果。

在本实施方式中,可不必使用贴片pa进行底物su的提供或一抗ab或二抗ab的提供。可通过向板pl提供处于液体或溶液状态的底物su、一抗ab或二抗ab来代替底物su的提供或者一抗ab或二抗ab的提供中的一种。

下面将描述可用于根据本实施方式的免疫测定中的贴片pa的实施方式。每个贴片pa将被描述为包含几种组分,并且每种组分可被理解为上述基础物质bs或添加物质as。然而,下面描述的能够包含在每个贴片pa中的组分可不是每个贴片pa中包含的所有组分,并且每个贴片pa还可包含其它未指明的组分。

4.3.1.1一抗贴片

可使用包含一抗的贴片pa进行本申请的免疫测定。换句话说,贴片pa可包含一抗并将一抗ab提供至板pl。

一抗ab可以是贴片pa中包含的添加物质as。换句话说,贴片pa可包含含有一抗ab的溶液。此外,除了一抗ab或一抗ab的溶液之外,包含一抗ab的贴片pa还可包含允许一抗ab容易地与待检测的抗原结合的另一基础物质bs或添加物质as。

一抗ab可以是与靶蛋白tp特异性结合的抗体ab。换句话说,一抗ab可以是与期望检测的靶抗原特异性结合的抗体ab。

包含一抗ab的贴片pa能够以溶液的形式包含与期望检测的抗原特异性结合的一抗ab。一抗ab可均匀地分布在贴片pa中。一抗ab可被从单独的介质吸收到贴片pa中并包含在贴片pa中。一抗ab能够以一抗ab附着于微颗粒的状态包含在贴片pa中。

如在本实施方式中,当一抗ab被包含在贴片pa中并提供至板pl时,未与固定在板pl上的物质的一部分特异性结合的一抗ab可被再吸收至贴片pa中。因此,可省略洗涤一抗ab的过程,在一些情况下贴片pa可以是可重复使用的,并且可实现迅速和有效的诊断。

根据本申请的实施方式的贴片pa可以是包含抗体ab的贴片pa,所述贴片pa包括与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab和以形成微腔的网状结构的形式提供的网状结构体ns,并被配置成与靶蛋白tp所处的反应区域接触,从而向反应区域提供一些所包含的抗体ab,在所述微腔中包含抗体ab。在这种情况下,与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab可以是特异性地结合至靶抗原的一抗ab。

4.3.1.2二抗贴片

可使用包含二抗ab的贴片pa进行本申请的免疫测定。换句话说,贴片pa可包含二抗并将二抗ab提供至板pl。

二抗ab可以是贴片pa中包含的添加物质as。贴片pa可包含含有二抗ab的溶液。此外,除了二抗ab或二抗ab的溶液之外,包含二抗ab的贴片pa还可包含允许二抗ab容易地与靶一抗ab结合的单独的基础物质bs或添加物质as。二抗ab可以是与一抗ab特异性结合的抗体ab。在这种情况下,一抗ab和二抗ab之间的特异性结合可以是物种特异性的结合而不是表位特异性结合。当使用物种特异性地结合至一抗ab的二抗ab时,即使当使用旨在检测不同蛋白质的一抗ab时,只要一抗ab起源于相同物种,附着有识别标记的二抗ab可以是通用的。

酶可附着于二抗ab。附着于二抗ab的酶可用作检测特异性结合的标识物。具体地,酶可附着于抗体ab并且用作检测与抗体ab特异性结合的抗原或者与特异性地结合至抗体ab的抗体ab特异性结合的抗原(在间接技术的情况下)的标记或报告分子。可通过结合使用酶,从而使得抗体ab与分子的片段可结晶(fc)区域结合。

通常,主要将ap或hrp用作酶。

即使当如上所述使用包含二抗ab的贴片pa时,由于未与固定在板pl上的物质的一部分特异性结合的二抗ab可被再吸收到贴片pa中,因此可进行及时且有效的免疫测定。

根据本申请的实施方式的贴片pa可以是包含抗体的贴片pa,所述贴片pa包括与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab和网状结构体ns,并且被配置成与靶蛋白tp所处的反应区域接触,从而向反应区域提供所包含的抗体ab中的一些;所述网状结构体ns以形成微腔的网状结构提供,在所述微腔中包含抗体ab。在这种情况下,与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab可以是特异性地结合至靶抗原的二抗ab。

4.3.1.3底物贴片

可使用包含底物su的贴片pa进行本申请的免疫测定。换句话说,贴片pa可包含底物su并将底物su提供至板pl。

底物su可以是贴片pa中包含的添加物质as。贴片pa可包含含有底物su的溶液。此外,包含底物su的贴片pa还可包含有助于底物su产生产物pd的反应的基础物质bs或添加物质as。

具体地,附着于二抗ab的酶可催化底物su的化学反应。可从由酶催化的反应产生的产物pd检测上述特异性结合。换句话说,底物su可被酶催化并产生产物pd,并且可检测产物pd以检测特异性结合。

底物su可以是abts、tmb等。使用的底物su可根据使用的酶和检测方法而改变。例如,当使用的酶是ap时,可通过使用对硝基苯磷酸酯(pnpp)作为底物su来检测显色。作为另一实例,当使用的酶是hrp时,可通过使用tmb等作为底物su来检测显色。

与将底物su溶液倒入用于检测反应的板pl的反应溶液中的传统elisa方法相比,当通过使用上述底物su贴片pa将底物su提供至板pl时,消耗的底物su溶液的量显著减少。因此,可经济地进行诊断。另外,由于可在适当的时间点分开底物su贴片pa以防止过度反应,因此可获得更精确的检测结果。

4.3.1.4洗涤贴片

可使用吸收残留物的洗涤贴片pa进行根据本实施方式的免疫测定方法。换句话说,在根据本实施方式的免疫测定方法中,可通过使洗涤贴片pa与板pl接触然后将洗涤贴片pa与板pl分开来吸收残留物。当上述一抗ab贴片pa、二抗ab贴片pa或底物su贴片pa与板pl接触并随后与其分开时,残留物可指未被吸收到每个贴片pa中并且未被除去的残留物。

洗涤贴片pa可包含洗涤溶液。洗涤溶液可包括具有添加到其一部分的吐温20的pbs或tbs。洗涤溶液可作为溶液提供,在所述溶液中残留物可根据待吸收的残留物溶解。包含洗涤溶液的贴片pa可进一步包含有助于洗涤的基础物质bs或添加物质as。

通过包含洗涤溶液并与板pl接触且随后与其分开的贴片pa,可将板pl上的杂质或残留物(例如,未结合的抗体ab等)吸收到贴片pa中并除去。残留物可包括未与样品sa中包含的待检测抗原特异性结合的第一抗体ab或未与第一抗体ab特异性结合的第二抗体ab。

在残留物吸收到洗涤贴片pa中,洗涤贴片pa可与板pl(即,在其上定位有样品sa的板pl区域)接触,从而可形成水膜wf,并且残留物可溶解在水膜wf中。当将洗涤贴片pa与板pl分开时,通过水膜wf与洗涤贴片pa一起移动,溶解在水膜wf中的残留物可被吸收到洗涤贴片pa中。

与传统elisa方法相比,当通过使用上述洗涤贴片pa除去板pl上的残留物时,消耗的洗涤溶液的量显著减少。因此,可经济地进行诊断。另外,由于可在适当的时间点分开底物su贴片pa以防止过度反应,因此可获得更精确的检测结果。

4.3.1.5清洁剂贴片

可使用进行清洁的清洁剂贴片pa进行根据本实施方式的免疫测定方法。换句话说,清洁剂贴片pa可含有清洁剂溶液并将清洁剂溶液提供至贴片pa。

具体地,在进行本申请的免疫测定方法中,可使用用于从板pl简单地去除干扰特异性结合的检测的物质的清洁剂贴片pa。具体地,清洁剂贴片pa可包含允许干扰特异性结合的检测的物质(例如未与样品sa中包含的待检测抗原特异性结合的第一抗体ab或未与第一抗体ab特异性结合的第二抗体ab)被容易地去除的清洁剂物质,并且可用于去除物质。

在这种情况下,清洁剂贴片pa可包含至少一些用于容易地除去干扰物质的清洁剂物质。清洁剂物质可以是吐温20、tritonx-100和chaps中的至少一种。

4.3.1.6缓冲贴片

可使用缓冲贴片pa进行根据本实施方式的免疫测定方法。换句话说,缓冲贴片pa可包含缓冲溶液并向板pl提供预定的环境。缓冲贴片pa可包含促进免疫测定的每个步骤的缓冲溶液。作为缓冲溶液的实例,当检测化学冷发光时,可使用过氧化物缓冲溶液。

4.3.1.7中断贴片

可使用反应中断贴片pa进行根据本实施方式的免疫测定方法。换句话说,反应中断贴片pa可包含中断由酶催化的底物su的反应的中断溶液,并将中断溶液提供至板pl。

贴片pa可包含用于中断底物su的反应的中断溶液。也就是说,可制造反应中断贴片pa,并且反应中断贴片pa可用于向板pl提供中断溶液并在适当的时间点中断底物su的反应。

中断溶液可包含用于中断底物su的反应的中断物质的至少一部分。中断物质可以是硫酸。

在进行根据本实施方式的免疫测定方法中,可实施选自使用中断贴片pa和将上述底物su贴片pa与板pl分开中的任一种。例如,为了中断底物su的反应,可实施选自如下中的任一种:使中断贴片pa与板pl接触、使中断贴片pa与底物su贴片pa(与板pl接触)接触(例如,使中断贴片pa与底物su贴片(与板pl接触)的上表面接触)以及将底物su贴片与板pl分开。

4.3.1.8ab对贴片

图63示出了作为根据本申请的贴片pa的实施方式的包含成对抗体ab的贴片pa。根据图63,贴片pa可包含成对的抗体ab,各自通过一抗ab和二抗ab或抗体ab复合物之间的结合形成。

在根据本实施方式的免疫测定方法中,可将一抗ab6和二抗ab7一起提供至板pl。换句话说,贴片pa可同时包含并提供一抗ab6和二抗ab7(参见图64)。由于一抗pa6和二抗ab7包含在单个贴片pa中并一起提供至板pl,因此用于进行诊断的程序可变得更加迅速和方便。

可制造包含一抗ab和二抗ab的贴片pa以包括一抗ab和二抗ab。或者,可通过使包含一抗ab的贴片pa与包含二抗ab的贴片pa接触来制造包含一抗ab和二抗ab的贴片pa。

在这种情况下,在根据本实施方式的免疫测定方法中,通过使用第一贴片pa向板pl提供一抗ab以及通过使用第二贴片向板pl提供二抗ab可通过经由使用第一贴片pa向板提供一抗ab和二抗ab代替。

换句话说,根据本申请的实施方式的免疫测定方法可通过如下实施,包括:将样品sa固定在板pl上以及通过使用贴片pa将一抗ab和二抗ab提供给板pl。在这种情况下,二抗ab可特异性地结合至一抗ab。二抗ab和一抗ab可被包含在贴片pa中并以彼此结合的状态提供至板pl。

根据上述实施方式,由上述洗涤贴片pa吸收的物质可以是未与待检测的蛋白质或抗原结合的一抗ab和二抗ab的复合物。同样,根据上述实施方式,通过清洁剂贴片pa促进除去的物质可以是未与待检测的蛋白质或抗原结合的一抗ab和二抗ab的复合物。而且,根据上述实施方式,当将贴片pa与板pl分开时,从板pl中除去的物质可以是未与待检测的蛋白质或抗原结合的一抗ab和二抗ab的复合物。

作为根据本申请的贴片pa的实施方式,图65和图66示出了制造包含成对抗体的贴片pa的实例。根据图65和图66,可通过使包含一抗ab6的贴片pa和包含二抗ab7的贴片pa接触然后将两者分开来获取包含成对抗体ab的贴片pa。包含成对抗体ab的贴片pa的获取可通过如下进行:使包含一抗ab6的贴片pa和包含二抗ab7的贴片pa接触,从而使所包含的物质可被交换,引起扩散发生,以便一抗ab6和二抗ab7定位于每个贴片pa中,并使一抗ab6和二抗ab7彼此结合。

根据本申请的实施方式的贴片pa可以是包含抗体ab的贴片pa,所述贴片pa包含与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab以及包含抗体ab并与反应区域接触的网状结构体ns,靶蛋白tp定位于所述反应区域中,以便向反应区提供所包含的抗体ab中的一些。在这种情况下,靶蛋白tp可以是抗原,抗体ab可以是通过特异性地结合至抗原的一抗ab和特异性地结合至一抗ab的二抗ab之间的结合形成的成对抗体ab,并且该成对抗体ab可与抗原特异性反应。

4.3.1.9吸收和包含贴片

如上所述,根据本申请的贴片pa可包含抗体ab、底物su、洗涤溶液和免疫测定所需的其它物质,例如基础物质bs和添加物质as。上述物质(特别是添加物质as)可从制造贴片pa的步骤中被包含在贴片pa中,或者可保持在不同的介质中并随后在进行诊断时被吸收到贴片pa中并包含在其中。换句话说,贴片pa可从单独的介质中吸收诸如抗体ab和底物su的物质并且在其中包含物质。

在这种情况下,不同的介质可以是板pl或纸。保持在不同介质中可指施加在板pl的表面上、施加在板pl的表面上并干燥、被吸收到纸中、或被吸收到纸中并干燥。

这可特别有用地应用于包含抗体ab的贴片pa。当抗体ab如上所述被保持在不同的介质中时,包含抗体ab的能力显著提高,并且对于在进行诊断时使用的抗体ab,可保证预定水平或更高水平的质量。

作为根据本申请的贴片pa的实施方式,图74-图76示出了从介质吸收物质并在其中包含物质的贴片pa的实例。根据图74-图76,根据本申请的贴片pa可吸收施加在板pl上的抗体ab并且在该贴片中包含抗体ab。施加在板pl上的抗体ab的吸收可通过在水膜wf中捕获的抗体ab来进行,所述水膜wf由于贴片pa和板pl之间的接触而形成,并且贴片pa与板pl分开,使得水膜wf与贴片pa一起移动。

作为根据本申请的贴片pa的实施方式,图77示出了贴片pa将抗体ab提供至板pl的情况,所述贴片pa从单独的介质吸收抗体ab并在该贴片中包含抗体ab。根据图77,根据本申请的贴片pa可从板pl3吸收抗体ab,并将吸收的抗体ab提供至板pl4,在所述板pl3上施加有抗体ab,在所述板pl4上施有加样品sa。这可通过如下进行:在板pl3与贴片pa的上表面接触的状态下,使贴片pa的下表面与板pl4接触,在所述板pl3上施加有抗体ab,在所述板pl4上施加有样品sa。

4.3.1.10转移贴片

根据本申请的贴片pa可将介质(即,介质)中包含的物质(即,待转移的物质)提供至板或另一外部区域。例如,贴片pa可将诸如抗体ab的物质和保持在介质中的底物su提供至单独提供的板。

贴片可包含液体物质,所述液体物质可溶解包含在介质中的待转移物质。例如,当待转移的物质是水溶性的时,贴片可包含水或水性溶液。在这种情况下,贴片可向介质提供水或水性溶液。随着提供水性溶液等时,可将包含在介质中的物质提供至板。可理解的是,通过这种机制,提供贴片向介质和板提供湿润的环境。

在本实施方式中,贴片pa的表面可与外部介质接触,在所述外部介质中包含物质。同与贴片接触的表面相对着的介质表面可与板或另一外部区域接触。在这种情况下,贴片可将介质中包含的物质转移到板。

在本实施方式中,介质可以是具有吸收能力或传递能力的物质。介质可以是纸。介质可以是网状形式的包含物质的介质。

作为本申请的实施方式,可提供使用转移贴片的免疫测定方法。具体地,可提供免疫测定方法,所述免疫测定方法用于通过使用贴片从待诊断的样品中检测靶蛋白来进行诊断,所述贴片包括形成微腔的网状结构体并且被配置成在微腔中包含液体物质,该免疫测定方法包括使包含与靶蛋白特异性反应的抗体的介质与贴片接触,并使贴片与其中放置有靶蛋白的反应区接触,其中,当介质与贴片接触时,介质中包含的至少一部分抗体被吸收到贴片中。在这种情况下,当贴片与反应区域接触时,吸收到贴片中的至少一部分抗体可移动至反应区域。

在上述实施方式中,使介质与贴片接触可包括使介质的表面与贴片接触,并且贴片与反应区域的接触可包括使贴片的表面与反应区域接触,所述贴片的表面不与介质接触。

根据本申请的实施方式,可提供使用转移贴片的提供抗体的试剂盒。具体地,提供抗体的试剂盒可被提供,所述提供抗体的试剂盒包含介质和抗体递送贴片,所述介质包含与靶蛋白特异性反应的抗体,所述抗体递送贴片包括形成微腔的网状结构体并被配置成与介质接触以吸收包含在介质中的抗体的一部分且与反应区域接触以向反应区域提供吸收的抗体的至少一部分,在所述反应区域中放置有靶蛋白。

4.3.2参考实施方式2-直接elisa

图57示出了用于对作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用直接elisa的免疫测定方法进行描述的流程图。

根据本申请的实施方式的使用直接elisa的免疫测定方法可包括:将样品sa置于反应区域中(s200)、向反应区域提供抗体ab(s300)、向反应区域提供底物su(s400)、以及检测抗体ab和靶蛋白tp之间的特异性反应(s500)。

根据本实施方式的免疫测定可使用板pl和贴片pa,并且可通过直接elisa进行。

根据本实施方式的免疫测定方法可包括将样品sa固定在板pl上,并通过使用贴片pa将抗体ab提供至板pl。

将样品sa固定在板pl上可包括在板pl上干燥待诊断的样品sa并将样品sa固定在板pl上。在板pl上固定待诊断的样品sa可包括将体液样品sa或待诊断的组织切片固定在板pl上。

通过使用贴片pa向板pl提供抗体ab可包括使包含抗体ab的贴片pa与板pl接触以向板pl提供抗体ab。关于间接elisa,上文已经描述了贴片pa与板pl的接触以及与抗原和抗体ab相关的细节。由于本实施方式通过直接elisa进行,因此酶可附着于抗体ab。附着于抗体ab的酶可以是hrp或ap。

通过使用贴片pa提供抗体ab可包括提供贴片pa与板pl接触并将贴片pa与板pl分开。提供贴片pa与板pl接触并随后将贴片pa与板pl分开可允许选择性地提供抗体ab。换句话说,当将抗体特异性结合的抗原固定在板pl上时,可从贴片pa向板pl选择性地提供抗体ab。本文中,已经向板pl移动但未特异性结合的抗体ab(下文称为“残留的抗体”)可被吸收到贴片pa中并随着贴片pa与板pl分开而从板pl移除。可通过将残留的抗体ab溶解在水膜wf中,且当贴片pa与板pl分开时水膜wf与贴片pa一起移动,来进行残留的抗体ab向贴片pa中的吸收,所述水膜wf通过贴片pa和板pl之间的接触形成。

如上所述,由于仅通过分开贴片pa可从板pl除去残留的抗体ab,因此可省略在进行传统elisa时必需的残留物质(例如,残留的抗体ab)的洗涤过程。在传统进行的残留物洗涤过程中,必须将大量洗涤溶液倒在板pl上以冲洗板pl,从而从板pl中除去未参与特异性结合的残留物质。然而,由于本申请的贴片pa可仅通过与板pl接触并随后与其分开来捕获和分离残留物质,因此洗涤过程是不必要的。因此,可更有效地使用试剂,并且可简单地进行elisa。

图58-图60示出了在根据本申请的免疫测定的实施方式中使用直接elisa的免疫测定方法的一部分。根据图58-图60,贴片pa可将抗体ab5提供至反应区域。诸如酶的鉴定标记可能已附着于抗体ab5。可通过使板pl与贴片pa接触来进行通过贴片pa向板pl提供抗体ab5,以便使抗体ab5可通过在接触区域附近形成的水膜wf移动至板pl或板pl上的反应区域。向板pl提供抗体ab5可能归因于抗体ab5和样品sa(特别是样品sa中包含的靶蛋白tp)之间的特异性结合。

根据本实施方式的免疫测定方法还可包括通过使用贴片pa将底物su提供至板pl。通过使用贴片pa提供底物su可包括使包含底物su的贴片pa与板pl接触以向板pl提供底物su。底物su可以是abts或tmb。底物su可被酶催化并产生产物pd,并且产物pd可用作期望被检测的特异性结合的标记。

此外,通过使用包含底物su的贴片pa将底物su提供至板pl可包括使包含底物su的贴片pa与板pl接触并将包含底物su的贴片pa与板pl分开。使包含底物su的贴片pa与板pl接触并随后使包含底物su的贴片pa与板pl分开,可允许控制保持包含底物su的贴片pa与板pl之间的接触的持续时间。换句话说,包含底物su的贴片pa可在最佳时间点与板pl分开。

免疫测定可通过检测产物pd来进行,所述产物pd是由酶催化的底物su的化学反应产生。在这种情况下,当反应在最佳时间点没有中断时,可能产生过量的产物pd,并且可能难以进行产物pd的定量测量。根据使用本申请的贴片pa的免疫测定方法,如上所述,由于当包含底物su的贴片pa与板pl分开时,反应可在最佳时间点终止,因此可解决由于过度反应的上述测量误差问题。如上所述,当在最佳时间点从板pl移除包含底物su的贴片pa时,可通过测量产物pd直到最佳时间点来定量检测特异性结合。

图61和图62示出了在通过直接elisa进行免疫测定中使用贴片pa提供底物su。根据图61和图62,贴片pa可包含底物su并将底物su提供至位于板pl上的样品sa或样品sa所处的反应区域。通过贴片pa向板pl提供底物su可通过如下进行:使贴片pa与板pl接触,从而通过在接触区域附近形成的水膜wf,允许底物su移动到板pl或板pl上的反应区域。由于附着于位于板pl上的抗体ab的酶催化的化学反应,底物su可产生产物pd或转化为产物pd。

根据本实施方式的免疫测定方法可进一步包括使用洗涤贴片pa吸收残留物。使用洗涤贴片pa吸收残留物可包括使洗涤贴片pa与板pl接触以吸收残留物。使用洗涤贴片pa吸收残留物可包括使吸收贴片pa与板pl接触以吸收未与固定的样品sa的至少一部分特异性结合的抗体ab。换句话说,在检测靶特异性结合时,洗涤贴片pa可吸收未参与特异性结合的残留物质。

使用洗涤贴片pa吸收残留物可在通过使用贴片pa向板pl提供抗体ab之后且在通过使用贴片pa向板pl提供底物su之前进行。

使用洗涤贴片pa吸收残留物可代替在传统的免疫测定过程中使用洗涤溶液进行洗涤。传统的洗涤过程由人直接使用大量洗涤溶液进行以除去残留物质,因此存在浪费溶液、需要人力以及还可能影响已形成的特异性结合的问题。然而,当使用如本申请中的贴片pa进行洗涤时,由于不通过流动溶液进行洗涤,因此优点在于已形成的特异性结合受到的影响较小,并且洗涤溶液的消耗显著降低。

根据本实施方式的免疫测定方法可包括清除干扰特异性结合的检测的物质。

根据本实施方式的免疫测定方法可进一步包括向板pl提供预定环境。

根据本实施方式的免疫测定方法可包括中断板pl上的反应。

清洁、提供环境和中断反应的细节可类似于上面参考间接elisa描述的那些。

根据本实施方式的免疫测定方法可进一步包括检测与所提供的抗体ab特异性结合的抗原。检测与抗体ab特异性结合的抗原可包括检测由于底物su和结合至抗体ab的酶之间的反应而产生的产物pd。在这种情况下,产物pd的检测可通过如下实施:测量归因于反应的显色、测量归因于反应的冷发光或测量归因于反应的荧光。

另外,除非另外特别提及,否则在间接elisa中使用的上述贴片pa、进行诊断的方法等也可类似地应用于通过直接elisa进行的免疫测定。

在本实施方式中,可不必需使用贴片pa进行底物su的提供或者一抗ab或二抗ab的提供。提供底物su或者提供一抗ab或二抗ab中的一种可被替换为向板pl提供处于液体或溶液状态的底物su、一抗ab或二抗ab。

4.3.3参考实施方式3-夹心elisa

图67示出了用于对作为根据本申请的免疫测定方法的实例的使用夹心elisa的免疫测定方法进行描述的流程图。

根据本申请的实施方式的使用夹心elisa的免疫测定方法可包括:将底部抗体bab置于反应区域中(s100)、将样品sa置于反应区域中(s200)、向反应区域提供抗体ab(s300)、向反应区域提供底物su(s400)、以及检测抗体ab和靶蛋白tp之间的特异性反应(s500)。

根据本实施方式的免疫测定可使用板pl和贴片pa,并通过夹心elisa进行。

根据本实施方式的免疫测定方法可包括将抗体ab固定在板pl上、在板pl上施加样品sa、以及通过使用贴片pa将抗体ab提供至板pl。

在板pl上固定抗体ab可包括固定经干燥的抗体ab。在板pl上固定抗体ab可使用包被缓冲溶液进行。在板pl上固定抗体ab可包括在板pl上形成薄膜。该薄膜可通过附着到板pl而预先制造和固定。抗体ab的固定可包括固定抗体ab,从而使抗体ab的fc区与板pl接触。经固定的抗体ab可以是与待检测的靶抗原特异性结合的抗体ab。

在板pl上施加样品sa可包括施加液相体液。例如,在板pl上施加样品sa可包括施加血液、尿液和细胞悬浮液中的任一种。

图68和图69示出了根据本申请的实施方式的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。根据图68和图69,通过夹心elisa的免疫测定可包括固定与板pl上的靶蛋白tp特异性结合的抗体(即,底部抗体bab),以及施加样品sa。底部抗体bab的固定可包括固定底部抗体bab,从而使抗体ab的fc区与板pl接触。通过在板pl上施加样品sa,样品sa中包含的靶蛋白tp可与底部抗体bab结合。在本申请的每个附图中,表示靶蛋白等的形状并不意味着靶蛋白等的某些特性。

通过使用贴片pa向板pl提供抗体ab可使用直接技术或间接技术进行。换句话说,通过使用贴片pa向板pl提供抗体ab可包括提供与期望检测的抗原特异性结合并且具有与其连接的酶的抗体ab。通过使用贴片pa向板pl提供抗体ab可包括通过使用贴片pa向板pl提供一抗ab以及通过使用贴片pa向板pl提供二抗ab。

因此,在向本实施方式的板pl提供抗体ab中,可应用上文参考间接elisa描述的通过使用第一贴片pa向板pl提供一抗ab并通过使用第二贴片pa向板pl提供二抗ab,或上文参考直接elisa描述的通过使用贴片pa提供抗体ab。

图70和图71示出了根据本申请的实施方式的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。根据图70和图71,通过夹心elisa的免疫测定可包括通过使用包含抗体ab8的贴片pa向板pl提供抗体ab8,所述抗体ab8附着有诸如酶的鉴定标记。向板pl提供抗体ab8可通过使贴片pa与板pl接触并随后将贴片pa与板pl分开来进行。在这种情况下,通过使贴片pa与板pl接触,然后将贴片pa与板pl分开,样品sa中包含的非靶蛋白(ntp)可被吸收到贴片pa中。将非靶蛋白ntp吸收到贴片pa中可通过如下进行:使贴片pa与板pl或样品sa接触,从而在接触区域附近形成水膜wf,并引起非靶蛋白ntp被捕获至水膜wf中。

根据本实施方式的免疫测定方法可包括如下中的至少一些:通过使用贴片pa向板pl提供底物su、使用洗涤贴片pa吸收残留物、清洁干扰特异性结合的检测的物质、向板pl提供预定环境、中断板pl上的反应、以及检测与所提供的抗体ab特异性结合的抗原。每个步骤的细节可类似于上面参考间接elisa描述的那些。

图72和图73示出了根据本申请的实施方式的使用夹心elisa的免疫测定方法的一部分。根据图72和73,通过夹心elisa的免疫测定可包括通过使用底物su贴片pa向板pl提供底物su。底物su的提供可通过如下进行:使包含底物su的贴片pa与板pl接触,从而通过在接触区域附近形成的水膜wf,允许底物su移动到板pl。底物su可通过由附着于位于板pl上的抗体ab的酶催化的化学反应产生产物pd或转化为产物pd。

4.3.4多靶标

可进行本申请的免疫测定以同时检测多个靶标。换句话说,可同时检测引起单一疾病的多个靶标,或者可同时检测引起多种疾病的多个靶标。例如,在白血病的诊断中,可同时检测参与白血病的多个抗原。而且,例如,可同时检测引起多种不同疾病(如白血病和寨卡病毒)的靶蛋白tp。

本文中,同时检测可指从单个板pl检测多个靶标,以及在部分重叠的时间段中检测每个靶标。

可根据执行上述免疫测定方法的手段不同地执行多个靶标的同时检测。下面将描述根据执行上述免疫测定方法的手段检测多个靶标的方法。将省略以上的参考上述实施方式描述的内容的描述。

4.3.4.1间接+多靶标

根据本申请的实施方式的免疫测定方法可包括将样品sa置于反应区域中(s200)以及将抗体ab提供至反应区域(s300)。在这种情况下,可存在多个靶蛋白tp,多个蛋白tp可包括第一靶蛋白tp和第二靶蛋白tp,并且贴片pa可包含与第一靶蛋白tp特异性反应的第一抗体ab以及与第二靶蛋白tp特异性反应的第一抗体ab。

或者,靶蛋白tp的类型可以是一个或多个,包含抗体ab的贴片pa可以是一个或多个,多个的靶蛋白tp可包括第一靶蛋白tp和第二靶蛋白tp,并且多个的贴片pa可包括包含与第一靶蛋白tp特异性反应的第一抗体ab的第一贴片pa以及包含与第二靶蛋白tp特异性反应的第二抗体ab的第二贴片pa。

根据本申请的实施方式,如上所述的使用间接elisa检测多个靶标的免疫测定方法可包括将样品sa固定在板pl上、向板pl提供多种类型的一抗ab、以及通过使用贴片pa向板pl提供二抗ab。

在板pl上固定样品sa可以和使用间接elisa的免疫测定方法的上述实施方式中的类似。然而,当如本实施方式中通过间接elisa进行用于检测多个靶的免疫测定时,样品sa可分布在板pl上的单个区域中或分布在多个分开的区域中。

向板pl提供多种类型的一抗ab可包括向板pl提供特异性地结合至多种不同类型的抗原的多种类型的一抗ab。

向板pl提供多种类型的一抗ab可包括向板pl提供包含在单个贴片pa中的多种类型的一抗ab。向板pl提供多种类型的一抗ab可包括通过使用多个贴片pa向板pl提供多种类型的一抗ab。提供多种类型的一抗ab可包括使用包含第一一抗ab的第一贴片pa和包含第二一抗ab的第二贴片pa向板pl提供第一一抗ab和第二一抗ab。换句话说,提供多种类型的一抗ab可包括使用包含多种类型的一抗ab的多个贴片pa来提供一抗ab。

通过使用贴片pa向板pl提供一抗ab可包括用单个贴片pa将一抗ab提供至板pl的多个分开的区域。多个区域可包括第一区域和第二区域,并且将一抗ab提供给多个区域可包括将第一一抗ab提供至第一区域并将第二一抗ab提供至第二区域。换句话说,向多个区域提供一抗ab可包括通过多个贴片pa向多个区域中的每一个提供不同的一抗ab。

通过使用多个贴片pa向板pl提供多种类型的一抗ab可包括使多个贴片pa与板pl同时接触至少一定量的时间,从而使包含在每个贴片pa中的第一抗体ab被提供至板pl。通过使用多个贴片pa向板pl提供多种类型的一抗ab可包括顺序地使多个贴片pa与板pl接触,从而使与多个贴片pa顺序地接触的板pl的区域至少部分重叠,并且将每个贴片pa中包含的一抗ab提供至板pl。

通过使用贴片pa向板pl提供二抗ab可包括通过使用贴片pa向板pl提供特异性地结合至第一类型的一抗ab的第一二抗ab和特异性地结合至第二类型的一抗ab的第二二抗ab。例如,通过使用贴片pa向板pl提供二抗ab可包括向板pl提供具有与多种不同类型的一抗ab特异性结合的性质的多种类型的二抗ab。通过使用贴片pa向板pl提供二抗ab可包括向板pl提供单一类型的二抗ab,所述二抗具有通常特异性地结合至多种类型的一抗ab的性质。换句话说,二抗ab可以是多种类型的二抗ab,所述多种类型的二抗ab具有与诊断中使用的多种类型的一抗ab中的每一种特异性结合的性质;或者可以是单一类型的二抗ab,所述单一类型的二抗ab具有通常种属特异性地结合至诊断中使用的多种类型的一抗ab的性质。

通过使用贴片pa向板pl提供二抗ab可包括向板pl提供包含在单个贴片pa中的单一类型的二抗ab或多种类型的二抗ab。通过使用贴片pa向板pl提供二抗ab可包括向板pl提供包含在多个贴片pa中的单一类型的二抗ab或多种类型的二抗ab。

通过使用贴片pa向板pl提供二抗ab可包括用单个贴片pa将二抗ab提供至板pl的多个分开的区域。向多个区域提供二抗ab可包括向多个区域中的每一个提供多种类型的二抗ab。

通过使用多个贴片pa向板pl提供二抗ab可包括使多个贴片pa与板pl同时接触至少预定量的时间,从而将在每个贴片pa中包含的二抗ab提供至板pl。通过使用多个贴片pa向板pl提供二抗ab可包括顺序地使多个贴片pa与板pl接触,从而使与多个贴片pa顺序地接触的板pl的区域至少部分重叠,并且将每个贴片pa中包含的二抗ab提供至板pl。

根据本实施方式的进行用于检测多个靶标的免疫测定的方法可包括通过使用贴片pa来提供底物su。通过使用贴片pa提供底物su的细节与上文参考使用间接elisa的免疫测定方法的实施方式描述的细节相同。然而,可使用多于一种类型的底物su。换句话说,当使用单一类型的二抗ab时,可使用单一类型的底物su,并且当使用多种类型的二抗ab时,可使用单一类型的底物su或多种类型的底物su。

根据本实施方式的进行用于检测多个靶标的免疫测定的方法可包括从板pl确定多个靶标中的每一个的存在。细节与上面参考使用间接elisa的免疫测定方法的实施方式描述的细节相同。

下面将描述根据本实施方式进行用于检测多个靶标的免疫测定的一些实施方式。

作为进行用于检测多个靶标的免疫测定的方法的具体实例,当通过多个贴片pa向板pl的每个区域提供不同的一抗ab时,二抗ab的提供可包括通过单个贴片pa同时向每个区域提供二抗ab。当向板pl的多个分开的区域提供多种类型的一抗ab时,可向多个区域提供单一类型的二抗ab。在这种情况下,可使用对应于各自区域的单个贴片pa或多个小贴片pa进行向多个区域提供二抗ab。虽然当使用单个贴片pa时简化了诊断的实施,但当使用多个小贴片pa时,由于没有通过贴片pa的不期望地转移物质的风险,并且对每个区域进行检测是足够的,因此可进行更准确的检测。

作为另一具体实例,当顺序地与多个贴片pa接触的单个板pl的区域至少部分地重叠从而将包含在贴片pa中的多种类型的一抗ab提供至板pl时,二抗ab的提供可包括通过单个贴片pa向板pl提供多种类型的二抗ab,所述二抗ab具有与多种类型的一抗ab特异性结合的性质。在这种情况下,可根据不同的识别标记检测具有与多种类型的一抗ab特异性结合的性质的多种类型的二抗ab。

或者,提供二抗ab可包括通过单个贴片pa向板pl提供单一类型的二抗ab,所述二抗ab具有与多种类型的一抗ab特异性结合的特性。当与多种类型的一抗ab特异性反应的抗原是相应疾病的诱因时,此类方法可用于确定疾病的存在。

或者,二抗ab可包括第一二抗ab和第二二抗ab,所述第一二抗ab具有与第一类型的一抗ab特异性结合的特性,所述第二二抗ab具有与第二类型的一抗ab特异性结合的特性;并且,二抗ab的提供可包括将第一二抗ab提供至位于板pl上的第一区域,并将第二二抗ab提供至位于板pl上的第二区域。例如,二抗ab的提供可包括向位于板pl上的多个分开的区域提供多种类型的二抗ab,所述二抗ab具有分别与多种类型的一抗ab特异性结合的性质。在这种情况下,可根据分开的区域改变待检测的靶标,并且可便于获取结果。

4.3.4.2直接+多靶标

根据本申请的实施方式,使用上述的直接elisa检测多个靶标的免疫测定方法可包括通过使用贴片pa将样品sa固定在板pl上并向板pl提供多种类型的抗体ab。

样品sa在板pl上的固定可类似于通过直接elisa进行免疫测定的上述方法中的样品。然而,当如在本实施方式中通过直接elisa进行用于检测多个靶标的免疫测定时,样品sa可分布在板pl上的单个区域中或分布在多个分开的区域中。

当通过使用贴片pa向板pl提供多种类型的抗体ab时,多种类型的抗体ab可包括第一抗体ab和第二抗体ab,所述第一抗体ab具有与第一抗原特异性结合的性质;所述第二抗体ab具有与第二抗原特异性结合的性质。附着于第一抗体ab的第一酶和附着于第二抗体ab的第二酶可以是不同类型的酶。

通过使用贴片pa向板pl提供多种类型的抗体ab可包括通过使用贴片pa向板pl提供多种类型的抗体ab。提供多种类型的抗体ab可包括提供具有与第一抗原特异性结合的性质的第一抗体ab和具有与第二抗原特异性结合的性质的第二抗体ab。此外,提供多种类型的抗体ab可包括提供具有分别特异性地结合至多种不同抗原(即,多个待检测的靶标)的性质的多种类型的抗体ab。不同类型的识别元件可附着于多种类型的抗体ab。多种类型的酶可分别附着于多种类型的抗体ab。

提供多种类型的抗体ab可包括向板pl提供包含在单个贴片pa中的多种类型的抗体ab。提供多种类型的抗体ab可包括通过使用多个贴片pa向板pl提供多种类型的抗体ab。多个贴片pa可包括第一贴片pa和第二贴片pa,并且通过使用多个贴片pa提供多种类型的抗体ab可包括通过使用第一贴片pa提供第一抗体ab以及通过使用第二贴片pa提供第二抗体ab。在这种情况下,第一抗体ab和第二抗体ab可彼此不同。通过使用多个贴片pa提供多种类型的抗体ab可使用分别包含多种类型的抗体ab的多个贴片pa来进行。

通过使用贴片pa向板pl提供抗体ab可包括用单个贴片pa将抗体ab提供至板pl的多个分开的区域。多个区域可包括第一区域和第二区域,并且向多个区域提供抗体ab可包括通过使用包含第一抗体ab的第一贴片pa向第一区域提供第一抗体ab以及通过使用包含第二抗体ab的第二贴片pa向第二区域提供第二抗体ab。向多个区域提供抗体ab可包括用多个贴片pa向多个区域提供不同的抗体ab。

通过使用多个贴片pa向板pl提供多种类型的抗体ab可包括使多个贴片pa与板pl同时接触至少一定量的时间,从而将每个贴片pa中包含的抗体ab提供至板pl。通过使用多个贴片pa向板pl提供多种类型的抗体ab可包括使多个贴片pa与板pl顺序接触,从而使与多个贴片pa顺序地接触的板pl的区域至少部分重叠,并且将每个贴片pa中包含的抗体ab提供至板pl。

通过直接elisa进行用于检测多个靶标的免疫测定的方法可包括通过使用贴片pa提供底物su或者从板pl确定多个靶标中的每一个的存在。每个步骤的细节可与上述参考使用直接elisa的免疫测定方法的实施方式所描述的类似。

4.3.4.3夹心+多靶标

根据本申请的实施方式,使用上述夹心elisa检测多个靶标的免疫测定方法可包括将抗体ab固定在板pl上、在板pl上施加样品sa、以及通过使用贴片pa将抗体ab提供至板pl。

抗体ab在板pl上的固定可包括在板pl上固定多种类型的抗体ab。多种类型的抗体ab可包括第一抗体ab和第二抗体ab;所述第一抗体ab具有与待检测的第一抗原特异性结合的性质;所述第二抗体ab具有与待检测的第二抗原特异性结合的性质。多种类型的抗体ab可以是具有分别与待检测的多种类型抗原特异性结合的性质的多种类型的抗体ab。

第一抗体ab可以固定在位于板pl上的第一区域上,并且第二抗体ab可以固定在位于板pl上的第二区域上。多种类型的抗体ab可以分别固定在位于板pl上的多个分开的区域上。多种类型的抗体ab可固定在位于板pl上的单个区域上。

在板pl上施加样品sa可包括将样品sa施加在板pl的区域上,在所述板pl的区域上固定有抗体ab。施加样品sa可包括施加液相样品sa。在这种情况下,可在施加液相样品sa的同时进行免疫测定,或者在施加和固定液相样品sa之后进行免疫测定。

在板pl上施加样品sa可包括将样品sa施加在位于板pl上的单个区域上或者将样品sa施加在位于板pl上的第一区域和第二区域上。在板pl上施加样品sa可包括将样品sa施加在位于板pl上的单个区域上或者将样品sa施加在位于板pl上的多个分开的区域中的每一个上。

通过使用贴片在板pl上施加抗体ab可与上述通过使用直接elisa检测多个靶标的免疫测定方法和通过使用间接elisa检测多个靶标的免疫测定方法中的类似。换句话说,通过使用贴片pa在板pl上施加抗体ab可以与通过在上述使用直接elisa用于检测多个靶标的免疫测定方法中经由使用贴片pa向板pl提供多种类型的抗体ab类似。或者,通过使用贴片pa向板pl施加抗体ab可与在上述使用间接elisa检测多个靶标的免疫测定方法中通过使用贴片pa向板pl提供多种类型的一抗ab以及向板pl提供二抗ab类似。

通过夹心elisa进行用于检测多个靶标的免疫测定的方法可进一步包括通过使用贴片pa提供底物su或者从板pl确定多个靶标中的每一个的存在。每个步骤的细节可与上述参考使用夹心elisa的免疫测定方法的实施方式或者通过间接elisa或直接elisa检测多个靶标的免疫测定方法的实施方式类似。

如上所述,按照根据本申请进行免疫测定的方法,可一次检测多个靶标。在这种情况下,待检测的多个靶标可构成预定的靶标组,或者可在每次进行诊断时选择性地配置。当多个靶标构成预定的组时,诊断可以变得迅速,并且可以获取各种对照组。当每次进行诊断时选择性地配置多个靶标时,预期可进行患者特异性诊断,并且可进一步扩大随着一次诊断而检查的疾病范围。

4.3.4.4板:多个区域

可使用具有多个单元区域的板pl进行根据本实施方式的实施免疫测定的方法。换句话说,板pl可具有多个单元区域并且通过每个单元区域区域从贴片pa接收物质。

板pl可包括多个分开的区域,即多个单元区域。单元区域能够以棋盘形式布置在板pl上。单元区域可在板pl上沿一个方向平行安置。单元区域能够以对应于多个贴片pa或贴片pa簇的形式安置。

可以划分多个单元区域。单元区域可包括第一区域和第二区域。在这种情况下,第一区域和第二区域可具有相似的极性,并且第一区域的极性可与除第一区域或第二区域之外的第三区域的极性不同。因此,第一区域和第二区域可彼此分开。第一区域和第二区域从板pl的下表面起的高度可与第三区域从板pl的下表面起的高度不同,并因此,第一区域和第二区域可以彼此分开。

可在不同的单元区域上施加或固定不同的物质。单元区域可包括第一单元区域和第二单元区域;可将与第一抗原特异性结合的抗体ab固定在第一单元区域上;并且可将与第二抗原特异性结合的抗体ab固定在第二单元区域上。第一抗原和第二抗原可彼此不同。与不同抗原特异性结合的抗体ab可固定在单元区域上。与不同抗体ab结合的单元区域可用于以夹心elisa检测不同抗原。

当使用多个贴片pa或贴片pa簇进行免疫测定时,单元区域可包括第一单元区域和第二单元区域;第一贴片可以与第一单元区域接触;并且第二贴片pa可以与第二单元区域接触。第一贴片pa和第二贴片pa可以彼此不同。不同的贴片pa可以与单元区域接触。换句话说,构成贴片pa簇的单元贴片pa的布置、形式等和位于板pl上的单元区域可以彼此对应。贴片pa和单元区域可以适当地匹配,以便获得期望的结果。

4.3.4.5贴片:簇

可使用多个贴片pa进行根据本实施方式的实施免疫测定的方法。多个贴片pa可包含物质并将物质提供至板pl。

多个贴片pa可包含不同的物质并将其中包含的物质提供至板pl。例如,多个贴片pa可包含与不同抗原特异性结合的抗体ab。作为另一实例,多个贴片pa可包含与不同的一抗ab特异性结合的二抗ab。作为又一实例,多个贴片pa可包含底物su,所述底物su的反应由不同的酶诱导。

多个贴片pa可形成贴片pa簇。例如,多个贴片pa可以是包含不同物质的单元贴片pa的簇。该簇可用于同时向板pl提供物质。构成贴片pa簇的多个单元贴片pa能够以标准化的形式制造。

贴片pa簇能够以卡盒的形式制造。换句话说,可以根据目的改变构成贴片pa簇的多个单元贴片pa的配置。当期望实施个体化诊断时,贴片卡盒可能格外有用,在所述个体化诊断中,针对每个个体改变待诊断的靶疾病。

构成贴片pa簇的单元贴片pa能够以棋盘形式布置。构成贴片pa簇的单元贴片pa可在一个方向上平行安置。

根据本申请的实施方式,可提供包括多个贴片pa的贴片pa簇。特别地,可提供包括多个包含抗体ab的贴片pa的贴片pa簇。

在包括多个包含抗体ab的贴片pa的贴片pa簇中,包含抗体ab的贴片pa可包括与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab和形成微腔的网状结构体ns,在所述微腔中包含抗体ab。

在这种情况下,多个包含抗体ab的贴片pa可包括包含第一抗体ab的贴片pa和包含第二抗体ab的贴片pa,并且与第一抗体ab特异性反应的靶蛋白tp可以和与第二抗体ab特异性反应的靶蛋白tp不同,所述第一抗体ab被包含于包含第一抗体ab的贴片中,所述第二抗体ab被包含于包含第二抗体ab的贴片pa中。

4.3.4.6贴片:混合贴片

可使用包含多种类型的物质的贴片pa进行根据本实施方式的实施免疫测定的方法。贴片pa可包含多种类型的物质并向板pl提供多种类型的物质。

贴片pa可包含与第一抗原特异性结合的第一抗体ab和与第二抗原特异性结合的第二抗体ab。此外,贴片pa可包括与第一一抗ab特异性结合的第一抗体ab和与第二一抗ab特异性结合的第二抗体ab。例如,贴片pa可包含多种类型的抗体ab,所述多种类型的抗体ab分别特异性地结合至多种类型的抗原。另外,例如,贴片pa可包含多种类型的抗体ab,所述多种类型的抗体ab分别特异性地结合至多种类型的一抗ab。

根据本申请的实施方式的包含抗体ab的贴片pa可包括与靶蛋白tp特异性反应的抗体ab和作为网状结构体ns被提供的网状结构体ns,所述网状结构体ns被配置成与靶蛋白tp所处的反应区域接触以便向反应区域提供所包含的抗体ab中的一些。在这种情况下,可以存在多种靶蛋白tp;多种靶蛋白tp可包括第一靶蛋白tp和第二靶蛋白tp;并且抗体ab可包括与第一靶蛋白tp特异性反应的第一抗体ab和与第二靶蛋白tp特异性反应的第二抗体ab。

4.3.5涂抹

进行本申请的免疫测定的方法可包括将样品sa施加在板pl上或者将样品sa施加并固定在板pl上。

在板pl上施加样品sa可包括以单层或与单层类似的薄膜形式涂抹样品sa。在板pl上施加和固定样品sa可以包括以单层或以相当于单层的薄膜形式涂抹样品sa并固定样品sa。

当用如上所述以相当于单层的形式涂抹的样品sa进行诊断时,涂抹在板pl上的样品sa和与板pl接触的贴片pa之间的有效表面积可以最大化。换句话说,通过涂抹样品sa并使贴片pa与样品sa接触以进行靶标检测,即使用少量样品sa也可获得有效结果。与传统的免疫测定方法相比,可以非常简单地使反应区域得以实现,在所述传统的免疫测定方法中,为了扩大有效表面积而对样品sa分布的区域进行复杂地设计。

4.3.6反应检测

根据本申请的免疫测定方法可包括从样品sa检测靶蛋白tp的存在。根据本申请的免疫测定方法可包括从样品sa检测靶抗原的存在。检测靶蛋白tp或靶抗原的存在可指定量测量样品sa中包含的靶蛋白tp或靶抗原的量。

根据本申请的免疫测定方法可包括检测抗体ab特异性结合的抗原(即靶抗原);并且抗原的检测可包括检测由附着于抗体ab或者特异性地结合至该抗体ab的其它抗体ab的酶催化的底物su的化学反应,或归因于化学反应的产物pd。

4.3.6.1比色测量

在本申请的免疫测定方法中,可通过进行比色测量的方法来检测由附着于抗体ab的酶催化的底物su的化学反应。

具体地,通过比色技术检测产物pd可被理解如下。附着于抗体ab的酶(在间接技术中,附着于二抗ab的酶)可将底物su转化为呈现颜色的沉淀。当沉淀积累时,可以形成色斑,并且可以测量所形成的色斑的颜色以检测产物pd。

当酶是hrp并且将3,3'-二氨基联苯胺(dab)用作底物su时,dab可由于hrp而产生棕色沉淀。此外,当酶是hrp并且底物su是4-氯-1-萘酚(4cn)时,4cn可由于hcn而产生紫色沉淀。当酶是ap并且底物su是5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯(bcip)时,bcip可由于ap而产生紫色沉淀。在这种情况下,可以通过检测棕色或紫色沉淀来进行产物pd的检测。

可通过使用分光光度计并定量测量显色来进行颜色的测量。可通过检测从光源发出并已经通过板pl的光来进行颜色的测量。可通过测量光吸收来进行颜色的测量。在这种情况下,优选地,可使用透明且具有平的底部的板pl。

4.3.6.2冷发光检测

在本申请的免疫测定方法中,可通过检测冷发光来检测由附着于抗体ab的酶催化的底物su的化学反应。

检测冷发光可包括检测归因于底物su的化学反应的冷发光。当酶是hrp时,冷发光的检测可包括使用鲁米诺(luminol)作为底物su来检测所产生的光。

可使用x射线胶片、互补金属氧化物半导体(cmos)相机或电荷耦合器件(ccd)相机来进行冷发光的检测。可通过检测从板pl的底部或者在板pl的底部上方的溶液发射的光来进行冷发光的测量。可使用光度计进行冷发光的测量。当测量冷发光时,优选地,可使用不透明的黑色板或不透明的白色板作为板pl。

4.3.6.3荧光检测

在本申请的免疫测定方法中,可通过检测荧光来进行归因于由附着于抗体ab的酶催化的底物su的化学反应的产物pd的检测。

荧光的检测可包括检测从附着于抗体ab(在间接技术中,二抗ab)的荧光团发射的荧光。荧光的检测可包括检测从产物pd发射的荧光,所述产物pd由于酶催化的底物su的化学反应而产生。更具体地,酶可从底物su切割磷酸基团并催化底物su以产生荧光产物pd,并且可以通过检测所产生的荧光来进行免疫测定。

可通过使光入射到板pl上并测量从板pl发射的荧光来进行荧光的检测。可使用附着有滤光器的荧光计来进行荧光的测量。当测量荧光时,优选地,可使用不透明的黑色板或不透明的白色板作为板pl。

4.3.6.4电化学(ec)传感器

本申请的免疫测定中的结果检测也可使用电化学方法进行。例如,可测量由于与固定在板pl上的样品sa特异性结合的抗体ab而在板pl上发生的电化学特性的变化。或者,还可以测量由于向板pl提供抗体ab的贴片pa而发生的贴片pa的电化学特性的变化。当使用如上所述的电化学方法检测结果时,可在板pl上选择性地提供底物su。

4.3.6.5图像分析

可使用图像采集来进行根据本申请的免疫测定中的结果检测。换句话说,可获取比色(或显色)图像、冷发光图像或荧光图像并用于诊断。对于图像,可获取整个区域的单个图像,或者可以分别获取整个区域的局部图像,并且可将获取的局部图像的图像组合成单个图像。可从获取的图像检查靶抗原/抗体ab分布的位置、细胞的形状、组织中的靶蛋白tp的分布等。此外,通过分析所获取的图像,可获取靶蛋白tp、靶抗原/抗体ab等的位置以及靶标的局部图像。

4.3.7细胞计数

根据本申请的免疫测定中的结果检测可以通过测量样品sa中包含的特异性蛋白的量来进行。换句话说,本申请的免疫测定可包括通过使用抗原-抗体反应来测量包含在待诊断的样品sa中的靶蛋白tp的量。例如,根据本申请的免疫测定中的结果检测可包括对待诊断的样品sa中包含的特异性细胞(即,靶细胞)的数目进行计数。

可以进行根据本申请的实施方式的免疫测定以通过使用本申请的贴片来检测多个靶蛋白tp。在这种情况下,根据本申请的实施方式的免疫测定方法可包括将待诊断的样品sa置于反应区域中(s20)、向反应区域提供第一抗体(s30)、以及向反应区域提供第二抗体(s40)(参见图46)。

待诊断的样品sa在反应区域中的放置(s20)可与上述其它实施方式中的类似。此外,向反应区域提供第一抗体或第二抗体的细节可与本申请的上述的其它实施方式中的细节类似。

向反应区域提供第一抗体(s30)可包括使用包含第一抗体的贴片,从而向反应区域提供第一抗体,所述第一抗体与第一靶蛋白特异性反应。

向反应区域提供第二抗体(s40)可包括使用包含第二抗体的贴片,从而向反应区域提供第二抗体,所述第二抗体与第二靶蛋白特异性反应。

根据本实施方式的免疫测定方法可进一步包括检测第一靶蛋白tp和第二靶蛋白tp(s50)(参见图81)。

在第一靶蛋白tp和第二靶蛋白tp的检测中(s50),第一靶蛋白的检测可包括检测第一荧光,该第一荧光从附着于第一抗体的荧光标记检测,所述第一抗体与第一靶蛋白tp特异性结合;并且第二靶蛋白tp的检测可包括检测第二荧光,该第二荧光从附着于第二抗体的荧光标记检测,所述第二抗体与第二靶蛋白tp特异性结合。

在这种情况下,检测到第一荧光的波段可以与检测到第二荧光的波段不同。

根据本实施方式的免疫测定方法可包括将待诊断的样品sa置于反应区域中(s20)、向反应区域提供第一抗体(s30)、检测第一靶蛋白tp(s51)、向反应区域提供第二抗体(s40)、以及检测第二靶蛋白tp(s52)(参见图82)。

换句话说,根据本申请的免疫测定方法可进一步包括,在向反应区域提供第一抗体后(s30),检测第一靶蛋白(s51);并且还包括在向反应区域提供第二抗体后(s40),检测第二靶蛋白(s53)。

在这种情况下,第一靶蛋白tp的检测可包括检测第一荧光,该第一荧光从附着于特异性地结合至第一靶蛋白tp的第一抗体的荧光标记检测;并且第二靶蛋白tp的检测可包括检测第二荧光,该第二荧光从附着于特异性地结合至第二靶蛋白tp的第二抗体的荧光标记检测。

本文中,检测到第一荧光的波段可至少部分地与检测到第二荧光的波段重叠;并且荧光的检测可以通过如下进行:比较在向反应区域提供第二抗体之后从样品sa检测到的荧光和在向反应区域提供第二抗体之前从样品sa检测到的荧光。

图83和图84示意性地示出了在根据本申请的免疫测定方法中检测到多个靶蛋白tp的情况的一部分。下面将给出参考图81中的流程图的描述。

在根据本申请的实施方式的免疫测定中,样品中包含的靶蛋白tp可包括第一靶蛋白tp1和第二靶蛋白tp2。在这种情况下,如上所述参考图82,在向反应区域提供第一抗体后(s30),检测第一靶蛋白tp1(s51);可从附着于特异性地结合至第一靶蛋白tp1的第一抗体的荧光标记检测第一荧光(参见图83)。

另外,如图82中所示,当提供第二抗体(s40)并检测第二靶蛋白tp2(s52)时,可从附着于与第二靶蛋白tp2结合的第二抗体的荧光标记检测第二荧光。在这种情况下,当检测到第一荧光的波段和检测到第二荧光的波段部分重叠时,可在检测第二荧光期间以重叠方式检测第一荧光,并且这可能导致第二靶蛋白tp2的检测是困难的。在这种情况下,第二荧光的检测可包括比较在向反应区域提供第二抗体之后从样品检测到的荧光和在向反应区域提供第二抗体之前从样品检测到的荧光,以及进行第二靶蛋白tp2的检测。

通过使用如上所述的从重叠波段检测的荧光物质(即,相同类型的荧光物质)连续检测多个靶蛋白tp,以及通过使用从不同波段检测的荧光物质(即,不同类型的荧光物质)同时检测多个靶蛋白tp可不必独立地进行。因此,可组合上述实施方式,并且可在单个过程中检测多个靶蛋白tp,并且这可有效地应用于迅速诊断各种疾病。

在下文中,作为根据本申请的免疫测定中的结果检测的实施方式,将描述对待诊断的样品sa中包含的靶细胞的数目进行计数的方法。

按照根据本实施方式的对细胞进行计数的方法,可对施加在具有表面型反应区域的物体(例如板pl)上的样品sa进行细胞计数,或者对于施加并固定在该物体上的样品sa进行细胞计数。根据本实施方式,常规依赖于高性能设备进行的细胞计数也可以使用具有减小尺寸的简化设备来进行,所述高性能设备主要以流体动力学设计。

4.3.7.1基本的实施方式

作为根据本申请的免疫测定的实例,细胞计数方法可包括将样品sa固定在板pl上、通过使用包含与靶细胞特异性反应的抗体ab的贴片pa向板pl提供抗体ab、以及获取样品sa中包含的靶细胞的数目。

样品sa在板pl上的固定可以与上述免疫测定方法中的类似。

通过使用包含与靶细胞特异性反应的抗体ab的贴片pa向板pl提供抗体ab可包括通过使用包含抗体ab的贴片pa将抗体ab提供至板pl,所述抗体ab具有与靶细胞中包含的一些蛋白特异性结合的特性。换句话说,可通过贴片pa向板pl提供与形成靶细胞的一些蛋白特异性结合的抗体ab。

可通过检测抗体ab上标记的荧光的方法来进行样品sa中包含的靶细胞的数目的获取。获得靶细胞的数目可通过检测由附着于抗体ab的酶催化的底物su的化学反应或由于化学反应产生的产物pd的方法来进行。

可通过获取靶细胞分布的板pl上的区域的图像来进行样品sa中包含的靶细胞的数目的获取。可通过获取样品sa分布的区域的图像并从图像检测靶细胞来进行靶细胞的数目的获取。换句话说,获取样品sa中包含的靶细胞的数目可包括仅从测量的信号强度等获取细胞的数字信息,或者获取靶细胞分布的区域的图像或者靶细胞的图像。

4.3.7.2多个靶标的检测

在根据实施方式的细胞计数方法中,可对多个靶细胞同时进行细胞数的计数。本文中,同时进行可指可使用单个板pl对多个靶细胞的数目进行计数。或者,同时进行可指可在位于单个反应区域中的样品sa上进行。

贴片pa可包含与第一靶细胞特异性反应的第一抗体ab和与第二靶细胞特异性反应的第二抗体ab。可以在第一抗体ab上标记第一荧光物质,并且可以在第二抗体ab上标记第二荧光物质。在这种情况下,可从不同的波段检测从第一荧光物质发射的荧光和从第二荧光物质发射的荧光。

4.3.7.3使用多个贴片的方法

可通过使用多个贴片pa对多个靶细胞进行上述的细胞计数方法。

使用多个贴片pa的细胞计数方法可包括将样品sa固定在板pl上、使用包含与第一靶细胞特异性反应的第一抗体ab的第一贴片pa向板pl提供第一抗体ab、以及使用包含与第二靶细胞特异性反应的第一抗体ab的第二贴片pa向板pl提供第二抗体ab。

细胞计数方法可包括在向板pl提供第一抗体ab之后和在向板pl提供第二抗体ab之前,获得样品sa中包含的第一靶细胞的数目。

细胞计数方法可包括在向板pl提供第二抗体ab之后,获得样品sa中包含的第二靶细胞的数目。换句话说,在向板pl提供第一抗体ab之后,可以获得第一靶细胞的数目,并且在向板pl提供第二抗体ab之后,可以获得第二靶细胞的数目。

细胞计数方法可包括在向板pl提供第二抗体ab之后,获得样品sa中包含的第一靶细胞的数目和第二靶细胞的数目。换句话说,可在向板pl提供第一抗体ab和第二抗体ab之后获得第一靶细胞和第二靶细胞的数目。

获得第一靶细胞的数目或第二靶细胞的数目可与在上述细胞计数方法的实施方式中获得样品sa中包含的靶细胞的数目类似。

然而,当如本实施方式中通过使用多个贴片pa对多个靶细胞进行细胞计数时,标记到第一靶细胞的荧光物质和标记到第二靶细胞的荧光物质可以是相同的类型。换句话说,被检测到的标记到第一靶细胞的荧光物质的波段和被检测到的标记到第二靶细胞的荧光物质的波段可以部分重叠。在这种情况下,在向板pl提供第一抗体ab之后获得第一靶细胞的数目以及在向板pl提供第二抗体ab之后获得第二靶细胞的数目的同时,可通过比较为获得第一靶细胞的数目而检测的荧光和为获得第二靶细胞的数目而检测的荧光来获得第二靶细胞的数目。

4.3.7.4多个贴片

可使用多个贴片pa来进行根据实施方式的对于多个靶细胞的细胞计数方法。

换句话说,多个靶细胞可包括第一靶细胞和第二靶细胞,并且多个贴片pa可包括包含第一抗体ab的第一贴片pa和包含第二抗体ab的第二贴片pa。在这种情况下,第一抗体ab可以特异性地结合至在第一靶细胞中特异性表达的蛋白,并且第二抗体ab可以特异性地结合至在第二靶细胞中特异性表达的蛋白。

4.3.8免疫测定装置

可使用免疫测定方法进行本申请的免疫测定。

图78示出了根据本申请的实施方式的免疫测定装置10。

根据本申请的实施方式的免疫测定装置可包括板pl支撑部200、贴片控制部300和反应检测部400。根据本实施方式的免疫测定装置可通过通过使用贴片从待诊断的样品sa检测靶蛋白tp来进行诊断,所述贴片包括形成微腔的网状结构体ns,并且被配置成在微腔中包含液体物质sb。

免疫测定装置的板pl支撑部200可支撑板,反应区域位于所述板上并且待诊断的样品sa位于所述反应区域中。

贴片控制部300可使用包含抗体ab的贴片pa并控制贴片pa相对于反应区域的位置,从而将抗体ab提供至反应区域,所述抗体ab与靶蛋白tp特异性反应。

反应检测部400可检测抗体ab和靶蛋白tp之间的特异性反应以诊断靶疾病。

此外,免疫测定装置还可包括控制部100。

免疫测定装置可包括形成微腔的网状结构体ns,并且使用贴片pa从待诊断的样品sa检测靶蛋白tp并进行诊断,所述贴片pa能够在微腔中包含液体物质sb。

免疫测定装置可包括板pl支撑部,所述板支撑部被配置成支撑板pl,反应区域位于所述板pl上并且待诊断的样品sa位于所述反应区域中;贴片控制部,所述贴片控制部被配置成使用包含抗体ab的贴片pa并控制贴片pa相对于反应区域的位置,从而向反应区域提供抗体ab,所述抗体ab与靶蛋白tp特异性反应;以及反应检测部,所述反应检测部被配置成检测抗体ab与靶蛋白tp之间的特异性反应以诊断靶疾病。

图79示出了根据本申请的免疫测定装置10的实施方式中的贴片控制部300的实例。

在根据本申请的实施方式的免疫测定装置10中,贴片控制部300可包括贴片选择模块310和接触控制模块330。

贴片选择模块310可选择待控制的贴片pa。通过贴片选择部的待控制的贴片pa的选择可包括选择包含一抗ab的贴片pa、包含二抗ab的贴片pa、包含底物su的贴片pa、洗涤贴片或贴片簇中的至少一种。

接触控制模块330可控制所选择的贴片pa和反应区域之间的接触状态。控制接触状态可包括控制贴片pa相对于反应区域的位置。

反应检测部400可以是光学检测器和电化学检测器中的任一种。

反应检测部可包括图像采集模块。反应检测部可包括相机模块。反应检测部可获取反应区域的局部图像。反应检测部可组合所获取的局部图像。反应检测部可获取反应区域的单个图像。反应检测部可获取反应区域的局部图像或反应区域的单个图像,并且局部图像的组合可由图像处理模块进行。

5.临床化学

5.1含义

5.1.1临床化学

尽管免疫测定是指使用抗原-抗体结合的诊断,但贴片pa的应用不限于此,并且贴片pa也可应用于使用特异性相互作用进行诊断的类似领域。

特别地,贴片pa的应用可以向类似于临床化学诊断领域进行扩展,在所述临床化学诊断领域中通过使用特异性反应对作为样品sa的体液进行诊断。临床化学是实验室医学的一个特定领域,并且特别涉及对体液进行诊断。体液是指从人体收集的液体成分,例如血液、尿液、脑脊髓液(csf)、眼泪和鼻粘液,并且还包括脓液和渗出物。

诊断中使用的特异性相互作用包括各种形式的化学和生物化学反应。例如,可使用诊断试剂检测指示疾病存在的因子,或者可测量血液中特定成分的浓度以确定正常性。此外,例如,可使用酶-底物反应,或者可测量酶的活性。

可通过检测特异性相互作用来获取诊断结果。在检测特异性相互作用中,可有效地利用比色测量、显色检测、荧光检测和电化学检测。

5.1.2与免疫测定的关系

使用贴片pa进行免疫测定的上述方法也可在临床化学诊断中类似地进行。换句话说,由于临床化学诊断也可在板pl上进行并且使用贴片pa进行,因此可以预期与免疫测定相同的有益效果。

例如,在进行临床化学诊断中,还可通过在板pl上施加或涂抹样品sa来进行诊断。因此,由于有效接触表面积最大化,即使用少量样品sa,也可以预期具有足够有效性的诊断结果。另外,由于可使用贴片pa进行临床化学诊断,因此极易将参与靶标检测的试剂倒在进行了靶标检测过程的板pl上,并从板pl除去试剂。因此,可以节省检测中使用的试剂量和诊断花费的时间。

5.2临床化学的实施方式

5.2.1激素检测

根据本申请的实施方式的临床化学诊断可以用于激素检测。

根据本申请的实施方式的临床化学诊断可通过如下进行:在板pl上施加样品sa;通过使用贴片pa向板pl提供试剂;以及从样品sa检测靶激素。

施加在板pl上的样品sa可以是血液或尿液。在板pl上施加样品sa可包括将样品sa施加在板pl上并固定样品sa。参与激素检测的一些试剂可被预先放置在板pl上。

检测靶激素可包括根据porter-silber技术检测皮质醇。检测靶激素可包括检测促卵泡激素(fsh)、肾上腺皮质激素(acth)、生长激素(gh)、促甲状腺激素(tsh)以及甲状腺激素(t4)中的任一种。

检测靶激素可包括检测样品sa中存在的靶激素和提供至样品sa的试剂之间的反应。可以使用比色技术、荧光检测、冷发光检测和电化学传感器中的任一种来进行反应的检测。

5.2.2胆固醇

根据本申请的实施方式的临床化学诊断可用于测量血液中的胆固醇。在这种情况下,可以使用酶技术。

根据本申请的实施方式的临床化学诊断可通过如下进行:在板pl上施加样品sa;通过使用贴片pa向板pl提供试剂;以及从样品sa测量胆固醇含量。

施加在板pl上的样品sa可以是血清。在板pl上施加样品sa可以包括将样品sa施加在板pl上并固定样品sa。用于胆固醇检测中的一些试剂可以预先放置在板pl上。

通过使用贴片pa向板pl提供的试剂可以是酶试剂。酶试剂可包括4-氨基安替比林(4aa)、过氧化物酶、胆固醇酯酶和胆固醇氧化酶中的至少一些。

检测胆固醇含量可包括测量光吸收的水平。

根据本申请的另一实施方式的临床化学诊断可以在测量血液中的甘油三酯中使用酶技术进行。

可将样品sa施加在板pl上;可通过使用贴片pa向板pl提供试剂;并且可以从样品sa测量甘油三酯含量。

施加在板pl上的样品sa可以是血清。通过使用贴片pa向板pl提供的试剂可以是酶试剂。酶试剂可包括甘油激酶、脂肪酶、苯酚、4-氨基安替比林、过氧化物酶和丙酮酸激酶中的至少一些。

检测胆固醇含量可包括测量光吸收的水平。

5.2.3血糖测量

根据本申请的实施方式的临床化学诊断可用于测量样品sa中包含的特定组分的浓度。浓度待测量的特定成分可以是血糖。

根据本申请的实施方式的临床化学诊断可通过如下进行:在板pl上施加样品sa;通过使用贴片pa向板pl提供试剂;以及从归因于试剂的反应测量血液中包含的葡萄糖(即,血糖)的量。在这种情况下,可使用酶技术。

施加在板pl上的样品sa可以是全血、血浆、血清、尿液、csf和胸腔积液中的任一种。提供至板pl的试剂可包括葡萄糖氧化酶和己糖激酶中的任一种。

可以通过测量归因于试剂的反应的色素反应的结果来进行血糖的测量。可使用反射光强度测量技术或电化学测量仪来进行血糖的测量。

以上描述仅仅是对本公开的技术思想的说明,并且本公开所属领域的普通技术人员应当能够在不脱离本公开的实质特征的范围内进行各种修改和变化。因此,本公开的上述实施方式也可单独或组合实施。

本文中公开的实施方式是用于对本公开的技术思想进行描述,而不是对本公开的技术思想进行限制,并且本公开的技术思想的范围不限于这些实施方式。本公开的范围应当基于所附权利要求来进行解释,并且等同范围内的所有技术思想均应该被解释为属于本公开的范围。

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