本发明涉及化学检验领域和药物分析领域技术，特别是一种医用交联透明质酸钠凝胶游离透明质酸钠含量的检测方法。
背景技术：
现有一些交联透明质酸钠产品都需检测其游离透明质酸钠含量，它是产品的重要考察指标，为了更好的控制产品，故应严格控制产品中的游离透明质酸钠含量。目前yy/t0962-2014整形手术用医用交联透明质酸钠凝胶，附录g：游离透明质酸钠含量测定步骤复杂，操作繁琐，且现有行业标准yy/t0962-2014所使用的方法不能很好地分离样品中的游离的透明质酸钠和交联的透明质酸钠，导致测量结果不准确。中国发明专利公开号cn106053369a公开的一种医用交联透明质酸钠凝胶游离透明质酸钠含量检测方法，该方法样品需求量较多，相对平均偏差比较大，对操作人员的水平要求较高，检测成本也比较高。技术实现要素：本发明所要解决的技术问题在于针对现有yy/t0962-2014整形手术用医用交联透明质酸钠凝胶，附录g：游离透明质酸钠含量测定所存在的不足而提供一种医用交联透明质酸钠凝胶游离透明质酸钠含量的检测方法，该检测方法更加易于操作，测定指标更准确。本发明所要解决的技术问题可以通过以下技术方案来实现：一种医用交联透明质酸钠凝胶游离透明质酸钠含量的检测方法，包括如下步骤：(1)供试品溶液制备步骤称取医用交联透明质酸钠凝胶若干份，每份各0.125g，置50ml容量瓶中，加水使溶解，再加水稀释至含透明质酸钠约50ug/ml，充分振荡混匀，称得容量瓶中的溶液质量，从中吸取1ml置试管中得到供试品试管；(2)空白溶液制备步骤空白溶液：1ml水溶液；(3)按下表制备葡萄糖醛酸标准溶液系列试管号012345ga标准溶液/ml00.20.40.60.81.0水/ml1.00.80.60.40.20ga含量/ug/ml01020304050(4)将步骤(3)的葡萄糖醛酸标准溶液系列各试管和步骤(1)的样品各试管一起置于冰水浴中，用酸式滴定管缓慢地向每管中加入0.025mol/l四硼酸钠硫酸溶液5ml边加边摇匀；加毕后混匀并置沸水浴中煮沸10min后取出，冰水浴中冷却；向各试管内加入0.125％的咔唑乙醇溶液0.2ml，充分摇匀后，沸水浴中加热15min，冷却至室温。用0号管作对照，依法测定《药典四部通则0401紫外-可见分光光度法》，于波长530nm处测定每管吸光度，用标准管绘制浓度吸光度线性回归曲线并得到线性回归方程，从而用样品溶液的吸光度计算其葡萄糖醛酸含量，从而计算得出游离透明质酸钠含量。在本发明的一个优选实施中，步骤(4)中，四硼酸钠硫酸溶液使用之前在4℃冰箱内贮存至少2h。本发明是在yy/t0962-2014整形手术用医用交联透明质酸钠凝胶，附录g：游离透明质酸钠含量测定基础上改进了分析方法，实现了方法操作简便、快捷，检验仪器简单常见，并且结果准确、可靠、稳定性良好。本发明与发明cn106053369a公开的一种医用交联透明质酸钠凝胶游离透明质酸钠含量检测方法相比，本发明所需的样品需求显著减少，且不需要使用到微孔滤膜，相对平均偏差更小，对于操作人员的水平要求更低、检测成本也更低。附图说明图1为葡萄糖醛酸标准溶液浓度-吸光度线性回归曲线及方程示意图。图2为医用交联透明质酸钠凝胶游离透明质酸钠浓度-吸光度线性回归曲线及方程示意图。具体实施方式本发明提供一种能测定医用交联透明质酸钠凝胶游离透明质酸钠含量的分析方法：按照yy/t0962-2014整形手术用医用交联透明质酸钠凝胶，附录g：游离透明质酸钠含量测定实验方法与过程：1.仪器与试剂分析天平：bsa224s型(厂家：赛多利斯)供试品：医用交联透明质酸钠凝胶。2.供试品溶液制备步骤称取医用交联透明质酸钠凝胶两份各约0.125g(精确到0.1mg)，置50ml容量瓶中，加水使溶解，再加水稀释至含透明质酸钠约50ug/ml，充分振荡混匀，称得容量瓶中的溶液质量，从中吸取1ml置试管中。3.空白溶液制备步骤取纯化水1ml；4.按下表1制备葡萄糖醛酸标准溶液系列。表1试管号012345ga标准溶液/ml00.20.40.60.81.0水/ml1.00.80.60.40.20ga含量/ug/ml010203040505.测定方法将标准溶液系列各试管和样品试管一起置于冰水浴中，用酸式滴定管缓慢地向每管中加入0.025mol/l四硼酸钠硫酸溶液5ml(使用之前在4℃冰箱内贮存至少2h)，边加边摇匀。加毕后混匀并置沸水浴中煮沸10min后取出，冰水浴中冷却。向各试管内加入0.125％的咔唑乙醇溶液0.2ml，充分摇匀后，沸水浴中加热15min，冷却至室温。用0号管作对照，依法测定《药典四部通则0401紫外-可见分光光度法》，于波长530nm处测定每管吸光度。用标准管绘制浓度吸光度线性回归曲线并得到线性回归方程，从而用样品溶液的吸光度计算其葡萄糖醛酸含量，从而计算得出游离透明质酸钠含量。实验结果见图1、图2和表2、表3、表4表2葡萄糖醛酸标准溶液浓度-吸光度数值标准曲线：浓度(μg/ml)吸光度a10.000.149320.000.317030.000.489240.000.665050.000.8543表3样品溶液实验结果表4上述说明并非对发明的限制，本发明也并不限于上述举例，本
技术领域：
的普通技术人员，在本发明的实质范围内作出的变化、改型、添加或替换，也应属于本发明的保护范围。当前第1页12