全自动精子细胞检测仪的制作方法

本发明涉及新型医疗级临床检测技术领域，尤其涉及一种全自动精子细胞检测仪。

背景技术：

精子质量评价是诊断雄性(男性)生育能力的核心关键，检测项目包括精子密度、活动率、畸形率、核完整性、线粒体膜电位、顶体反应等精子个体或群体指标。目前，主要检测设备有显微镜、荧光显微镜、通用型流式细胞仪等，主要检测方法有显微镜人工镜检、计算机辅助精子分析系统(casa)辅助分析和流式细胞仪标配细胞分析系统的计算机辅助人工分析。

显微镜人工镜检是目前最主流应用技术，主要采用制备精液细胞涂片后用显微镜进行人工肉眼计数、分辨活力以及形态学观察，也有计算机辅助系统辅助分析显微镜所得图像。主要缺点是需要耗费大量人力，如果加上计算机辅助分析系统，检测成本也会大幅增加，最主要是只能检测精子数量、活力、形态等少量指标，其他重要指标如精子细胞核完整性、线粒体功能、顶体膜等指标需要制备细胞图片后进行荧光探针标记，然后采用荧光显微镜进行镜下分析，且目前并无通过临床认证的自动分析辅助软件，因而成本高昂且需要耗费大量人力进行人工肉眼观察判别并计数。

通用型流式细胞仪检测并分析的方法已经开始应用于精子临床指标检测，流式细胞仪在快速大量检测细胞方面有极大的技术优势，可实现高通量样本的精准检测，且极大的扩展了临床精子质量可检测的指标参数，得到临床工作者的广泛关注。但流式细胞仪主要为进口设备，价格昂贵，且目前世界上并无专用于精子细胞检测的仪器，实际使用过程中需要进行长时间的专人培训，并在检测过程中需要人工调节电压、补偿、流速等各种指标，设置各个相关区域或者门，难以符合临床检测要求的客观、可重复性及可参比性，检测完成在分析结果时也需要手动进行区域及门的甄别划分，难以符合临床检测要求的日间重复性和室间参比性。

流式细胞仪大多为通用型检测平台或科研用多激光多通道多参数的仪器，在具体应用场景中，样本处理通常与检测分开，国际上也并无实现自动样本处理、反应染色与进样检测一体自动化完成的仪器，通用临床型流式细胞仪更适用于科研使用，或少量检测要求较高的血细胞指标检测使用。

目前，国内外临床精液检测上缺乏专用于精子细胞专用分析的全自动一体化高通量低成本检测仪器，现有仪器带来的样本处理、仪器检测、结果分析全部必须分项进行且均需要人工手动操作，从而带来的检测操作复杂，人工样本处理步骤繁琐，需要专人培训进行设备维护及操作问题。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题在于，针对现有技术的上述缺陷，提供一种全自动精子细胞检测仪。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：根据本发明的一方面，提供一种全自动精子细胞检测仪，包括检测台架，设置在检测台架上的控制系统，与控制系统均连接的样本处理系统、液流系统、激光光学系统以及光电检测系统；具体的，所述样本处理系统用于对待处理的精液样本中的精子细胞进行计数统计、以及将精液样本中的精子细胞进行染色反应处理得到染色精子样本；所述液流系统与样本处理系统连接，用于将样本处理系统输出的染色精子样本与鞘液进行混合反应、流动、检测及回收处理；所述控制系统，用于控制样本处理系统、液流系统、激光光学系统及光电检测系统，进而对精液样本进行全自动检测、分析并生成分析结果。

优选的，所述样本处理系统包括精液样本池、样本计数装置、样本进样针、鞘液池、清洗液池、反应染色装置、多根传输管、多个电磁阀、第一鞘液蠕动泵、第一缓冲过滤装置、样本注射泵、染色反应池以及自动温控装置；

所述精液样本池依次通过样本计数装置、样本进样针、电磁阀及样本注射泵与染色反应池连接，精液样本池用于存放待检测的精液样本，精液样本包括大量的精子细胞；

所述样本计数装置，与精液样本池及样本进样针连接，用于对从其通过的精液样本中的每个精子细胞进行计数及大小测量；

所述鞘液池用于存放待混合的鞘液，清洗液池用于存放清洗液；所述鞘液池和清洗液池均通过传输管连接至反应染色装置，鞘液池中的鞘液与清洗液池中的清洗液用于对完成染色反应后的反应染色装置及液流系统进行清洗；

所述反应染色装置通过电磁阀、第一鞘液蠕动泵与染色反应池连接，第一缓冲过滤装置用于对鞘液池输出的鞘液进行脉冲过滤及杂质滤除；反应染色装置，用于提供至少一种反应试剂和/或染色试剂；

所述自动温控装置设置在染色反应池下面，用于按照反应温度要求对染色反应池进行加热；

所述反应染色装置中的反应试剂和/或染色试剂被第一鞘液蠕动泵吸出并进入染色反应池；精液样本池中的精液样本通过样本注射泵进入染色反应池，精液样本与至少一种反应试剂和/或染色试剂在染色反应池进行染色反应形成染色精子样本。

优选的，所述样本计数装置包括阴性电极、阳性电极、电压脉冲测量装置，电压脉冲测量装置与阴性电极及阳性电极均电性连接；

所述阴性电极及阳性电极共同形成了供精子细胞穿过的微孔通道，微孔通道一侧设置在精液样本池、另一侧设置在样本进样针；

当精液样本中不同的精子细胞穿过微孔通道时会产生不同的电压脉冲信号，电压脉冲测量装置会测量到不同的电压脉冲信号，电压脉冲信号包括精液样本中的精子细胞的个数及大小信息。

优选的，所述反应染色装置包括试剂混合器，试剂混合器上设置有至少一个用于放置至少一种反应试剂和/或染色试剂的试剂盒。

优选的，所述液流系统包括第二鞘液蠕动泵、第二缓冲过滤装置、反应检测室、废液池以及多个液位传感器；所述反应检测室包括依次固定连通的鞘液反应室和激光检测室；

所述染色反应池通过电磁阀及传输管与鞘液反应室连接，鞘液池依次通过第二鞘液蠕动泵及第二缓冲过滤装置与鞘液反应室连接，激光检测室通过传输管与废液池连接；

多个液位传感器分别设置在精液样本池、鞘液池、清洗液池、染色反应池及废液池中用于测量其液位；

所述染色反应池的染色精子样本经传输管进入鞘液反应室，鞘液池的鞘液经第二鞘液蠕动泵及第二缓冲过滤装置进入鞘液反应室，染色精子样本及鞘液在鞘液反应室内反应形成鞘液精子样本，鞘液精子样本的内层染色精子样本呈现单细胞线性排列通过激光检测室，并经传输管传输至废液池进行回收处理；鞘液精子样本为外层鞘液、内层染色精子样本的流体聚焦液流，染色精子样本中的每个精子细胞均被特定的荧光探针标记染色处理，被相应激光激发后可发射出特定波长的荧光。

优选的，所述激光光学系统包括激光发射装置、光纤管、聚焦透镜、第一分光反光镜、前向光通路装置、侧向光通路装置、荧光通路装置；

所述激光发射装置、光纤管、聚焦透镜、激光检测室、第一分光反光镜成光路设置，所述聚焦透镜设置在激光检测室一侧，前向光通路装置设置在激光检测室对侧，所述第一分光反光镜设置在激光检测室另一侧，侧向光通路装置与第一分光反光镜成角度设置；

所述激光发射装置发射的激光经光纤管引导至聚焦透镜，聚焦透镜将聚焦后的激光直接照射到激光检测室内流动的每个精子细胞上，激光照射每个精子细胞后会形成前向光信号，前向光信号被前向光通路装置接收；

焦后的所述激光照射每个精子细胞后会在精子细胞背后因其大小不同而形成阴影，从而形成前向光信号，所述前向光信号被所述前向光通路装置接收；所述激光照射每个精子细胞后会在精子细胞侧向因细胞密度不同形成不同光强的侧向折射光，从而形成侧向光信号，所述侧向光信号经第一分光反光镜折射后被侧向光通路装置接收，所述侧向光信号为低于anm的光信号；

焦后的所述激光照射每个精子细胞的荧光后会折射出不同的荧光信号，所述激光照射到每个精子细胞上的荧光探针后，不同的标记探针可被不同的特征波长的激光激发后，会发射出不同特征波长的荧光信号；

所述荧光信号穿过在第一分光反光镜后形成第一荧光信号，第一荧光信号被荧光通路装置接收；第一荧光信号为超过anm的荧光信号。

优选的，所述荧光通路装置包括第二分光反光镜、第一荧光接收装置、第三分光反光镜、第二荧光接收装置以及第三荧光接收装置；

所述第一荧光信号照射到第二分光反光镜穿过其后形成第二荧光信号，所述第二荧光信号被第一荧光接收装置接收；第一荧光信号照射到第二分光反光镜经其折射后形成第三荧光信号，所述第三荧光信号被第三分光反光镜接收；所述第二荧光信号为低于bnm的第一荧光信号，所述第三荧光信号为高于bnm的第一荧光信号；

所述第三荧光信号照射到第三分光反光镜经其折射后形成第四荧光信号，所述第四荧光信号被第二荧光接收装置接收；所述第三荧光信号照射到第三分光反光镜穿过其后形成第五荧光信号，所述第五荧光信号被第三荧光接收装置接收；所述第四荧光信号为低于cnm的第三荧光信号，所述第五荧光信号为高于cnm的第三荧光信号。

优选的，所述前向光通路装置为前向光带通滤光片，所述侧向光通路装置为侧向光带通滤光片；

所述a的数值范围为490-510nm，所述b的数值范围为550-600nm，所述c的数值范围为600-640nm；

所述第一荧光接收装置为第一荧光带通滤光片，所述第一荧光带通滤光片可通过500nm-550nm的第二荧光信号；

所述第二荧光接收装置为第二荧光带通滤光片，所述第二荧光带通滤光片可通过550nm-600nm的第四荧光信号；

所述第三荧光接收装置为第三荧光带通滤光片，所述第三荧光带通滤光片可通过600nm-680nm的第五荧光信号。

优选的，所述光电检测系统包括前向光光电转换器、侧向光光电转换器、第一荧光光电转换器、第二荧光光电转换器和第三荧光光电转换器；

所述前向光光电转换器，设置在前向光通路装置后面，用于将前向光信号转换为前向电信号；

所述侧向光光电转换器，设置在侧向光通路装置后面，用于将侧向光信号转换为侧向电信号；

所述第一荧光光电转换器，设置在第一荧光接收装置后面，用于将第二荧光信号转换为第二电信号；

所述第二荧光光电转换器，设置在第二荧光接收装置后面，用于将第四荧光信号转换为第四电信号；

所述第三荧光光电转换器，设置在第三荧光接收装置后面，用于将第五荧光信号转换为第五电信号；

优选的，所述控制系统包括用于控制的控制装置，与控制装置均相连的模数转换器、数据分析装置、数据存储装置以及数据输出装置。

所述光电检测系统将接收到的多个光信号分别转换为电信号并发送至模数转换器，模数转换器将多个电信号转换为数字信号并存储于数据存储装置中，数据分析装置将数字信号解码为相应的各个参数的数值进行统计分析并生成分析结果，所述数据输出装置用于输出分析结果。

实施本发明全自动精子细胞检测仪的上述技术方案，具有如下优点或有益效果：本发明全自动精子细胞检测仪的精液样本在样本处理系统中经过样本吸取、试剂添加、混合染色反应后进入液流系统，在液流系统驱动下将染色反应后的精液样本传递至检测部位，经过激光光学系统发射的激光激发检测，并由光电检测系统收集激发后的光信号，由控制系统转换成数字信号后进行数据分析，根据数据特征和聚群分析算法计算出待检测的精液样本中的精子总数、密度、核完整性、线粒体膜电位、顶体反应等精子质量参数结果。实现了对精液样本的全自动化高通量快速分析，用户只要将精液样本放置在样本缓冲池内，就能进行全自动操作，并输出检测分析结果，可与医院lis/his系统直接对接，适用于各级医疗机构及第三方检验机构，也可对接微信服务号、网站等后台数据库，实现数据管理的无缝连接，操作简便，一键智能，成本低，适应性广。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍，显而易见，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图，附图中：

图1是本发明全自动精子细胞检测仪实施例的外观结构示意图；

图2是本发明全自动精子细胞检测仪实施例的第一分解结构示意图；

图3是本发明全自动精子细胞检测仪实施例的第一内部结构示意图；

图4是本发明全自动精子细胞检测仪实施例的第二内部结构示意图；

图5是本发明全自动精子细胞检测仪实施例的第三内部结构示意图；

图6是本发明全自动精子细胞检测仪实施例的样本计数装置示意图；

图7是本发明全自动精子细胞检测仪实施例的样本处理系统示意图；

图8是本发明全自动精子细胞检测仪实施例的激光光学系统示意图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下文将要描述的各种示例性实施例将要参考相应的附图，这些附图构成了示例性实施例的一部分，其中描述了实现本发明可能采用的各种示例性实施例，除非另有表示，不同附图中的相同数字表示相同或相似的要素。以下示例性实施例中所描述的实施方式并不代表与本公开相一致的所有实施方式。应明白，它们仅是与如所附权利要求书中所详述的、本发明公开的一些方面相一致的装置和方法的例子，还可使用其他的实施例，或者对本文列举的实施例进行结构和功能上的修改，而不会脱离本发明的范围和实质。在其他情况中，省略对众所周知的系统、装置、电路以及方法的详细说明，以免不必要的细节妨碍本实用新型的描述。

为了说明本发明所述的技术方案，下面通过具体实施例来进行说明。

如图1-8示出了本发明实施例提供的结构示意图，为了便于说明，仅示出了与本发明实施例相关的部分。提供一种全自动精子细胞检测仪实施例，包括检测台架10，设置在检测台架10上的控制系统60，与控制系统60均连接的样本处理系统20、液流系统30、激光光学系统40以及光电检测系统50；其中，所述样本处理系统20用于对待处理的精液样本中的精子细胞进行计数统计、以及将精液样本中的精子细胞进行染色反应处理得到染色精子样本；所述液流系统30与样本处理系统20连接，用于将样本处理系统20输出的染色精子样本与鞘液进行混合反应、流动、检测及回收处理，具体的，混合液为鞘液与至少一种反应试剂和/或染色试剂进行混合而成；所述控制系统60，用于控制样本处理系统20、液流系统30、激光光学系统40及光电检测系统50，进而对精液样本进行全自动检测、分析并生成分析结果。

在本发明全自动精子细胞检测仪中，精液样本在样本处理系统中经过样本制备、吸取、试剂添加、混合染色反应后进入液流系统，在液流系统驱动下将精液样本传递至反应检测室，经过激光光学系统发射的激光激发检测，并由光电检测系统收集激发后的光信号，由控制系统转换成数字信号后进行数据统计分析，根据数据特征和独特的聚群分析算法计算出待检测的精液样本中的精子总数、密度、核完整性、线粒体膜电位、顶体反应等分析结果。精子质量分析方法是对检测收集的数据进行全自动分析处理并出具结果的核心依据。实现了对精液样本的全自动化高通量快速分析，用户只要将精液样本放置在样本池内，就能进行全自动操作，并输出检测分析结果，可与医院lis/his系统直接对接，适用于各级医疗机构及第三方检验机构，也可对接微信服务号、网站等后台数据库，实现数据管理的无缝连接，无需繁琐复杂的操作，选择相应的检测指标后，一键全自动进行，从样本处理到结果出具全部自动完成，从样本的吸取处理，试剂混合反应以及荧光标记等繁琐步骤，全部实现标准自动化成。实现了精子质量分析的全自动、多功能、高通量、简便、快速、低成本临床检测分析。

在本实施例中，所述样本处理系统20包括精液样本池201、样本计数装置202、样本进样针203、鞘液池204、清洗液池205、反应染色装置206、多根传输管207、多个电磁阀301、第一鞘液蠕动泵302、第一缓冲过滤装置303、样本注射泵304、染色反应池305以及自动温控装置306；具体的，所述精液样本池201依次通过所述样本计数装置202、样本进样针203、电磁阀301及样本注射泵304与染色反应池305连接，所述精液样本池201用于存放待检测的精液样本，精液样本包括大量的精子细胞，具体数量在此不作具体限制。

具体的，鞘液池204用于存放待混合的鞘液，清洗液池205用于存放清洗液，具体的，清洗液可以是专用清洗液，也可以是用于清洗整个检测仪的清水等；所述鞘液池204和清洗液池205均通过传输管207连接至反应染色装置206，鞘液池204中的鞘液与清洗液池205中的清洗液用于对完成染色反应后的反应染色装置206及液流系统30进行清洗。所述反应染色装置206通过电磁阀301、第一鞘液蠕动泵302与染色反应池305连接，第一缓冲过滤装置303用于对鞘液池204输出的鞘液进行脉冲过滤及杂质滤除；所述反应染色装置206，用于提供至少一种反应试剂和/或染色试剂。

具体的，所述自动温控装置306设置在染色反应池305下面，用于按照反应温度要求对染色反应池305进行加热；反应染色装置206中的反应试剂和/或染色试剂被第一鞘液蠕动泵302吸出并进入染色反应池305；精液样本池201中的精液样本通过样本注射泵304进入染色反应池305，精液样本与至少一种反应试剂和/或染色试剂在染色反应池305进行染色反应形成染色精子样本。具体由自动温控装置306自动控制染色反应池305的反应及染色时的温度及反应染色时间，完成后由注射泵将反应染色完全的反应液(精液样本)推入液流系统并进入反应检测室。

如图6所示，所述样本计数装置202，与精液样本池201及样本进样针203连接，用于对从其通过的精液样本中的每个精子细胞进行计数及大小测量；具体的，所述样本计数装置202包括阴性电极221、阳性电极222、电压脉冲测量装置223，电压脉冲测量装置223与阴性电极221及阳性电极222均电性连接；具体的，所述阴性电极221及阳性电极222共同形成了供精子细胞穿过的微孔通道224，微孔通道224一侧设置在精液样本池201、另一侧设置在样本进样针203；当精液样本中不同的精子细胞穿过微孔通道224时会产生不同的电压脉冲信号，电压脉冲测量装置223会测量到不同的电压脉冲信号，电压脉冲信号包括精液样本中的精子细胞的个数及大小信息。

本发明在样本处理系统中的样本进样针203处设置了样本计数装置202(即液流阻抗计数装置，采用阻抗技术进行计数)，精液样本(精子细胞)在磷酸盐缓冲液充满的低频为5mhz以下频率的电场中呈现为非导电性。样本计数装置202的微孔通道224为20-50um，根据库尔特细胞计数原理，测量样本进样针203吸取的精液样本中的每个精子细胞大小及个数。当精子细胞通过微孔通道224时，此时阻抗将升高，这一变化导致微孔通道处生成电压脉冲信号，电压脉冲测量装置223会测量到不同的电压脉冲信号，根据电压脉冲信号出现的次数和脉冲变化进而记录吸取的精子细胞个数和大小信息。

在本实施例中，如图7所示，所述反应染色装置206包括试剂混合器261，试剂混合器261上设置有至少一个用于放置至少一种反应试剂和/或染色试剂的试剂盒262。所述鞘液池204和清洗液池205均通过传输管207连接至反应染色装置206的反应染色装置206，鞘液池204中的鞘液与清洗液池205中的清洗液用于清洗完成染色反应后的试剂混合器261及染色反应池305进行清洗。其中，反应试剂及染色试剂装载及自动混合的混匀装置可为单一固定检测项目的装置，也可为与多检测项目所配合的矩阵型或圆形的多试剂装载的混匀装置。染色反应池305可为单一装置，也可为与多检测项目所配合的矩阵型或圆形的多反应池集成装置。具体的，染色反应池305也可是圆形或方形高通量多染色反应池的集合体，并将精液样本和混合液连接，可进行高通量大量样本连续或同时进行检测，并由自动温控装置306具体控制温度。更为具体的，所述鞘液池204和清洗液池205的传输管207上均设置有电磁阀301，用于分别控制鞘液池204和清洗液池205的开关导通。更为具体的，试剂混合器261、鞘液池204和清洗液池205均通过传输管207与染色反应池305连接。

在本实施例中，所述液流系统30包括第二鞘液蠕动泵309、第二缓冲过滤装置310、反应检测室307、废液池308以及多个液位传感器(图未示出)；其中，所述反应检测室307包括依次固定连通的鞘液反应室371和激光检测室372；所述染色反应池305通过电磁阀301及传输管207与鞘液反应室371连接，鞘液池204依次通过第二鞘液蠕动泵309、第二缓冲过滤装置310与鞘液反应室371连接，激光检测室372通过传输管207与废液池308连接。

具体的，精液样本池201通过电磁阀301及样本注射泵304与染色反应池305连接；反应染色装置206通过电磁阀301、第一鞘液蠕动泵302及第一缓冲过滤装置303与染色反应池305连接，第一缓冲过滤装置303用于对鞘液池204经第一鞘液蠕动泵302传输过来的鞘液进行脉冲过滤及杂质滤除。

具体的，所述染色反应池305通过电磁阀301及传输管207与鞘液反应室371连接，所述鞘液池204依次通过第二鞘液蠕动泵309、第二缓冲过滤装置310与鞘液反应室371连接，激光检测室372通过传输管207与废液池308连接，废液池308将检测后的反应液进行回收处理。本发明所述具体实施例，但不应限于此装置设计所述方案。

本发明同时解决了精液样本反应染色的一体自动化的需求，在样本处理系统中，精液样本计数后进入染色反应池，具体操作流程为：首先，清洗液池205的清洗液冲洗整个系统(传输管、染色反应池、反应检测室等)，自动温控装置306将染色反应池控温到要求温度，精液样本按设计量进入染色反应池，同时，试剂混合器自动控制反应试剂和/或染色试剂进入染色反应池，经过程序制定的混合及反应时间后，染色反应池控制染色精子样本由传输管导入反应检测室307的鞘液反应室371。

在本实施例中，多个液位传感器(图未示出)分别设置在精液样本池201、鞘液池204、清洗液池205、染色反应池305及废液池308中用于测量其液位，并实时发出相应的提醒信息；所述反应染色装置206中的反应试剂和/或染色试剂被第一鞘液蠕动泵302吸出并经过第一缓冲过滤装置303进入染色反应池305；精液样本池201中的精液样本通过样本注射泵304进入染色反应池305，精液样本与至少一种反应试剂和/或染色试剂在染色反应池305进行混合形成染色精子样本。

在本实施例中，所述染色反应池305的染色精子样本经传输管207进入鞘液反应室371，鞘液池204的鞘液经第二鞘液蠕动泵309及第二缓冲过滤装置310进入鞘液反应室371，根据液体聚焦原理，染色精子样本及鞘液在鞘液反应室371内反应形成鞘液精子样本，该鞘液精子样本外层鞘液包裹内层精子细胞的鞘液精子样本，且染色精子样本居于液流中间，鞘液精子样本的内层染色精子样本呈现单细胞线性排列通过激光检测室372，并经传输管207传输至废液池308进行回收处理；鞘液精子样本为外层鞘液、内层染色精子样本的流体聚焦液流，染色精子样本中的每个精子细胞均被特定的荧光探针标记染色，荧光探针被相应激光激发后可发射特定波长的荧光。

具体的，鞘液由鞘液池中被第二鞘液蠕动泵吸出并经过第二缓冲过滤装置进入鞘液反应室371，与染色反应池输出的染色精子样本混合形成外内层流，鞘液在外，样本液在内，外层鞘液的快速流动对内层慢速的精子细胞形成内向压力从而形成内层样本检测流的聚焦线性，其中，待检测的染色精子细胞呈单线性排列通过激光检测室372，接受激光检测。

在本实施例中，如图8所示，所述激光光学系统40包括激光发射装置401、光纤管402、聚焦透镜403、第一分光反光镜404、前向光通路装置405、侧向光通路装置406、荧光通路装置407；所述激光发射装置401、光纤管402、聚焦透镜403、激光检测室372、第一分光反光镜404成光路设置，所述聚焦透镜403设置在激光检测室372一侧，前向光通路装置405设置在激光检测室372对侧，第一分光反光镜404设置在激光检测室372另一侧，侧向光通路装置406与第一分光反光镜404成角度设置。

在本实施例中，所述激光发射装置401发射的激光经光纤管402引导至聚焦透镜403，聚焦透镜403将聚焦后的激光直接照射到激光检测室372内流动的每个精子细胞上，激光照射每个精子细胞后在精子细胞背后因其大小不同会形成阴影，从而形成前向光信号，该前向光信号被前向光通路装置405接收；所述激光照射每个精子细胞后会在精子细胞侧向因精子细胞密度不同形成不同光强的侧向折射光，从而形成侧向光信号，侧向光信号经第一分光反光镜404折射后被侧向光通路装置406接收，侧向光信号为低于anm的光信号。

同时，所述激光照射每个精子细胞的荧光后会折射出不同的荧光信号，激光照射到每个精子细胞上的荧光探针后，不同的荧光探针可被不同特征波长的激光激发后，会发射出不同特征波长的荧光信号；即激光照射到每个精子细胞上标记的荧光探针后，荧光探针会被激光激发，从而发射出相应特征波长的荧光信号；具体的，所述激光照射每个所述精子细胞的荧光探针后，荧光探针被激发从而会发射出出不同特征波长的荧光信号；所述荧光信号穿过第一分光反光镜404后形成第一荧光信号，第一荧光信号被荧光通路装置407接收；第一荧光信号为(波长)超过anm的荧光信号。

在本实施例中，激光发射装置401具体为一半导体蓝光488纳米光纤激光发射器，激光发射装置401为半导体固体激光发射器，本发明在激光光路系统中利用半导体固体激光发射器作为光源，并由激光光纤作为光路传输媒介，加上光纤管及聚焦透镜组成光路。激光射出后经光纤引导经聚焦透镜后照射至激光检测室侧方处，穿过激光检测室侧壁，直接照射在通过激光检测室内的每个精子细胞上，激光光路前向路径穿过激光检测室设有前向光通路装置406。其中，本发明涉及的激光光学系统可为光纤密闭传导光路，可使激光器、滤镜、以及光信号收集通路装载更加灵活紧凑，且避免外来光干扰，相对传统光路极大减少光路中光线的损失。

在本实施例中，所述荧光通路装置407包括第二分光反光镜471、第一荧光接收装置472、第三分光反光镜473、第二荧光接收装置474以及第三荧光接收装置475；所述第一荧光信号照射到第二分光反光镜471穿过其后形成第二荧光信号，第二荧光信号被第一荧光接收装置472接收；第一荧光信号照射到第二分光反光镜471经其折射后形成第三荧光信号，第三荧光信号被第三分光反光镜473接收；所述第二荧光信号为(波长)低于bnm的第一荧光信号，所述第三荧光信号为(波长)高于bnm的第一荧光信号；所述第三荧光信号照射到第三分光反光镜473经其折射后形成第四荧光信号，第四荧光信号被第二荧光接收装置474接收；第三荧光信号照射到第三分光反光镜473穿过其后形成第五荧光信号，第五荧光信号被第三荧光接收装置475接收；所述第四荧光信号为(波长)低于cnm的第三荧光信号，所述第五荧光信号为(波长)高于cnm的第三荧光信号。具体的，所述a的(波长)数值范围为490-510nm，所述b的(波长)数值范围为550-600nm，所述c的(波长)数值范围为600-640nm。

在本实施例中，前向散射光：激光照射精子细胞后在光路正前方因精子细胞大小不同而形成的特征性的光信号；侧向散射光：激光照射精子细胞后在光路侧方因精子细胞密度不同而形成的特征性的光信号；荧光：激光照射精子细胞后，精子细胞上标记的荧光探针被激发，从而发射出具有不同特征波长的荧光信号。流式光通道：流式激光检测后各个光信号的通道，可接收该种光信号，不同仪器设备设置有不同，本发明检测仪设置有fs通道(前向散射光通道，用于接收前向光信号)、ss通道(侧向散射光通道，用于接收侧向光信号)、fitc通道(fitc荧光通道，用于接收fitc荧光信号)、jc1通道(jc1荧光通道，用于接收jc1荧光信号)、ao通道(ao荧光通道，用于接收ao荧光信号)/pi通道(pi荧光通道，用于接收pi荧光信号)。

在本实施例中，所述前向光通路装置405为前向光带通滤光片，即为fs通道带通滤光片，所述侧向光通路装置406为侧向光带通滤光片，即为ss通道带通滤光片；所述第一荧光接收装置472为第一荧光带通滤光片，即为fitc荧光通道带通滤光片，所述第一荧光带通滤光片可通过(波长)500nm-550nm的第二荧光信号，即fitc荧光信号；所述第二荧光接收装置474为第二荧光带通滤光片，即为jc1荧光通道带通滤光片，所述第二荧光带通滤光片可通过(波长)550nm-600nm的第四荧光信号，即jc1荧光信号；所述第三荧光接收装置475为第三荧光带通滤光片，即为ao荧光通道带通滤光片或pi荧光通道带通滤光片，所述第三荧光带通滤光片可通过(波长)600nm-680nm的第五荧光信号，即为ao荧光信号或者pi荧光信号。

在本实施例中，所述光电检测系统50包括前向光光电转换器501、侧向光光电转换器502、第一荧光光电转换器503、第二荧光光电转换器504和第三荧光光电转换器505；所述前向光光电转换器501，设置在前向光通路装置405后面，用于将前向光信号转换为前向电信号；所述侧向光光电转换器511，设置在侧向光通路装置406后面，用于将侧向光信号转换为侧向电信号；所述第一荧光光电转换器512，设置在第一荧光接收装置472后面，用于将第二荧光信号转换为第二电信号；所述第二荧光光电转换器513，设置在第二荧光接收装置474后面，用于将第四荧光信号转换为第四电信号；所述第三荧光光电转换器514，设置在第三荧光接收装置475后面，用于将第五荧光信号转换为第五电信号；所述控制系统60包括用于控制的控制装置601，与控制装置601均相连的模数转换器602、数据分析装置603、数据存储装置604以及数据输出装置605。

所述光电检测系统50将接收到的多个光信号(前向电信号、侧向电信号、第二荧光信号(fitc荧光信号)、第四荧光信号(jc1荧光信号)、第五荧光信号(ao荧光信号或者pi荧光信号))分别转换为电信号(前向电信号、侧向电信号、第二电信号(fitc电信号)、第四电信号(jc1电信号)、第五电信号(ao电信号或者pi电信号))并发送至控制系统60的模数转换器602，模数转换器602将多个电信号转换为数字信号并存储于数据存储装置604中，数据分析装置603对多个数字信号解码为相应的各个参数的数值进行统计分析并生成分析结果，数据输出装置605用于输出分析结果。具体的，光电转换器接受到光信号，并根据强弱反应成电信号，然后由模数转换器转换成数字，并由数据存储装置604存储。具体的，检测仪检测的光电信号全部按2⁰-2¹⁰(1-1024)范围转换成数字信号并进行存储。其中，控制系统60采用美国德州仪器(ti)的单片机msp430为系统架构核心控制，模数转换器602采用基于ads5560模数转换芯片的6通道高速高精度同步采集光信号，数据存储装置采用27c512存储芯片，再由msp430主控系统进行数据分析与计算，当然也可以其他公司、其他系列具体相同或类似功能的芯片或元器件，具体在此不做一一限制。

在本实施例中，控制系统60对数据进行分析识别，具体包括：标准数据读取、数据判定识别方法、标准格式数据存储；涉及一种检测所得数据结果的标准格式转换，仪器、样本检测信息的标准数据格式及代码，以及格式代码识别转换的方法，全部信息的标准格式数据存储形式及提取方法。

在本实施例中，多参数聚群分析包括：精子形状特征聚群模型分析、精子细胞核结构特征聚群模型分析、精子线粒体膜电位特征聚群模型分析、精子顶体膜结构特征聚群模型分析、精子顶体反应特征聚群模型分析、抗精子抗体特征聚群模型分析、精液白细胞形状特征聚群模型分析、精液白细胞过氧化物酶特征聚群模型分析、精子细胞内过氧化物酶特征聚群模型分析；具体为根据不同质量参数的数据特征，建立相应参数的数学分析模型，进行样本参数聚群分析时，根据不同参数取相应的变量数据，首先根据数据矩阵特点对各变量数据进行标准化校正，然后以相应的数学模型进行聚群参比分析。

在本实施例中，单细胞特征分析包括：根据不同参数模型的有效细胞数据读取、不同质量参数模型的单细胞参数分析、单细胞不同质量参数数据记录存储；具体为根据不同参数聚群参比分析的结果，判定识别各参数的有效细胞数据，对每个有效细胞的变量数据及进行相应计算，并记录相应结果。

在本实施例中，精子群体特征统计包括：不同质量参数的全部单细胞特征判定及统计、不同质量参数的细胞群体特征统计分析、细胞群不同质量参数数据记录存储。具体为各项质量参数下的针对全部单细胞特征计算结果的逐项判定和统计，并进行相应质量参数的全部有效细胞群体的统计学特征计算和描述，并记录相应结果。

在本实施例中，计算结果及分析报告包括：精液样本中的单细胞参数结果计算、精液样本中的细胞群体参数结果计算、精液样本质量分析数据记录及存储、精液样本质量分析报告，具体为所得到的全部精液样本各参数结果的记录及存储、以及分析报告模板完成并出具报告。

在本实施例中，控制系统主要为仪器中的电路集成系统完成，由电路中的芯片所含存储、分析及计算程序，自动完成检测后数据的自动处理、存储、分析及计算，并根据模板保存或输出符合lis/his系统的电子表格式报告文件，或其他数据库、图形、图片格式的结果文件以供传输给多种媒介需要，如网站后台、微信后台等，也可直接发送网络上可用的打印机进行直接打印结果报告。

本发明全自动精子细胞检测仪为新型医疗级临床检测仪器设备，涉及流式细胞技术、微量自动化细胞化学反应处理技术、聚群数学模型智能比对自动计算技术，利用库尔特细胞计数原理、流式聚焦技术、荧光标记技术快速获取精子细胞群中每个精子细胞的各项参数，并根据不同的算法计算精子细胞的总数、密度、核完整性、线粒体膜电位、顶体膜完整性、诱发顶体反应、精子活细胞率、精子细胞凋亡率、精液白细胞数、白细胞活性氧、精子活性氧等反应精子细胞质量的各种参数。每次检测均可以自动对样本中多达上万个精子细胞逐一分析，显著提高了检测结果的精度、准度并非常稳定，应用在精子质量检测分析领域中，非常适用于人类各级医疗机构的临床检测需求，也可用于畜牧养殖业中的动物精子质量检测分析。

以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，本领域技术人员在考虑说明书及实践这里公开的发明后，将容易想到本公开的其它实施方案。本领域技术人员知悉，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以对这些特征和实施例进行各种改变或等同替换。另外，在本发明的教导下，可以对这些特征和实施例进行任何变型、用途或者适应性变化，这些变型、用途或者适应性变化遵循本公开的一般性原理并包括本公开未公开的本技术领域中的公知常识或惯用技术手段，不会脱离本发明的精神和范围。因此，说明书和实施例仅被视为示例性的，本发明不受此处所公开的具体实施例的限制，所有落入本申请的权利要求范围内的实施例都属于本发明的保护范围。