检测方法及其系统与流程

本发明实施例是关于一种检测方法及检测系统，特别是一种检测尿液成份的方法及系统。

背景技术：

近年来随着饮食习惯及生活方式的改变，肾脏病的发生率在各国有逐年升高的趋势。慢性肾脏病(chronickidneydiseases,ckd)，是指肾功能有异常的情形出现并且持续一段时间。大致来说，肾功能异常的病程持续超过约三个月时，即可判定为慢性肾脏病，并且依照病情严重程度归类为第一期至第五期。

在某些情况下，肾功能异常会造成尿液中的蛋白质或一些成分含量异常，故于检测方法中得以利用这些异常的成分含量作为肾脏病变判断指标。举例来说，肾脏病第二期病人有明显的白蛋白尿(albuminuria)情形发生，而肾脏病第三期病人有明显的蛋白尿(proteinuria)情形发生。然而，目前的检测流程中，无法有效地同时判断肾脏病第二期及第三期病程的方法。发展具有新的检测方法及其系统为当前急迫的需求。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种能够检测尿液蛋白/肌酸酐比值的检测方法。

本发明的一方面为一种检测方法，包含提供尿液样本；将尿液样本分流为第一尿液样本及第二尿液样本；侦测第一尿液样本中的总蛋白质浓度；侦测第二尿液样本中的肌酸酐浓度及白蛋白浓度；将总蛋白质浓度除以肌酸酐浓度以获得尿液蛋白/肌酸酐比值(urineproteinandcreatinineratio,upcr)，以及将白蛋白浓度除以肌酸酐浓度以获得尿液白蛋白/肌酸酐比值(urinealbuminandcreatinineratio,uacr)。

根据本发明的一些实施方式，将尿液样本分流为第一尿液样本及第二尿液样本包含分流体积百分比为约33％至约80％的尿液样本做为第一尿液样本，以及分流体积百分比为约20％至约67％的尿液样本做为第二尿液样本。

根据本发明的一些实施方式，侦测第一尿液样本中的总蛋白质浓度包含利用布拉德福(bradford)蛋白质定量法、酵素(酶)法、bca法(bicinchoninicacid)、双缩脲法(biuretmethod)、洛瑞法(lowrymethod)、紫外线吸收法(uvabsorbancemethod)或五倍子酚红(pyrogallolred)法分析第一尿液样本中的总蛋白质浓度。

根据本发明的一些实施方式，侦测第二尿液样本中的肌酸酐浓度及白蛋白浓度包含将第二尿液样本在混合槽中与稀释液混合后分流为第一稀释后尿液样本及第二稀释后尿液样本；侦测第一稀释后尿液样本中的肌酸酐浓度；以及侦测第二稀释后尿液样本中的白蛋白浓度。

根据本发明的一些实施方式，将第二尿液样本在混合槽中与稀释液混合后分流为第一稀释后尿液样本及第二稀释后尿液样本包含：在混合槽中，混合第二尿液样本与稀释液以形成稀释后的尿液样本；分流稀释后的尿液样本做为第一稀释后尿液样本；以及分流稀释的尿液样本做为第二稀释后尿液样本。

根据本发明的一些实施方式，侦测第一稀释后尿液样本中的肌酸酐浓度包含采用jaffereaction(alkalinepicrate)或酵素(酶)法分析第一稀释后尿液样本中的肌酸酐浓度。

根据本发明的一些实施方式，侦测第二稀释后尿液样本中的白蛋白浓度包含采用免疫比浊法、水杨酸(salicylicacid)法、三氯醋酸(trichloroaceticacid)法、染料结合法(dye-bindingmethod)、溴甲酚绿(bromcresolgreen)法或氯化苯铵松宁(benzethoniumchloride)法分析第二稀释后尿液样本中的白蛋白浓度。

本发明的另一方面为一种检测系统，包含样本槽、稀释液槽、混合槽、总蛋白质侦测槽、肌酸酐侦测槽、白蛋白侦测槽、侦测装置以及处理器。样本槽，被配置成用以接收尿液样本，尿液样本包含第一尿液样本及第二尿液样本。稀释液槽，被配置成用以存放稀释液。混合槽，被配置成用以接收稀释液与第二尿液样本，及用以混合稀释液与第二尿液样本以形成第一稀释后尿液样本及第二稀释后尿液样本。肌酸酐侦测槽，连通混合槽用以接收第二尿液样本与稀释液混合后的第一稀释后尿液样本。白蛋白侦测槽，连通混合槽，用以接收第二尿液样本与稀释液混合后的第二稀释后尿液样本，其中混合槽连通样本槽、稀释液槽、肌酸酐侦测槽和白蛋白侦测槽，且混合槽被配置成让样本槽分流出的第二尿液样本与稀释液混合后流动至肌酸酐侦测槽及白蛋白侦测槽。总蛋白质侦测槽，连通样本槽，并且总蛋白质侦测槽用以接收第一尿液样本。侦测装置，被配置成量测第一尿液样本的总蛋白质浓度、第一稀释后尿液样本的肌酸酐浓度和第二稀释后尿液样本的微白蛋白浓度。处理器，被配置成对总蛋白质浓度、肌酸酐浓度及白蛋白浓度进行运算，借此获得总蛋白质浓度除以肌酸酐浓度的尿液总蛋白/肌酸酐比值(urineproteinandcreatinineratio,upcr)，以及白蛋白浓度除以肌酸酐浓度的尿液白蛋白/肌酸酐比值(urinealbuminandcreatinineratio,uacr)。

根据本发明的一些实施方式，第一尿液样本占约33％至约80％体积百分比的尿液样本、第一稀释后尿液样本占约13.3％至约44.7％体积百分比的尿液样本以及第二稀释后尿液样本占约6.7％至约22.3％体积百分比的尿液样本。

与现有技术相比，本发明的检测方法能够同时检测uacr及upcr，且其检测系统体积小，可随身携带。

附图说明

当结合附图阅读以下详细描述时将更好地理解本发明的方面。但须注意依照本产业的标准做法，各种特征未按照比例绘制。事实上，各种特征的尺寸为了清楚的讨论而可被任意放大或缩小。

图1是根据本发明一些实施方式，绘示一种检测方法的流程图。

图2是根据本发明一些实施方式，绘示一种检测系统的示意图。

具体实施方式

为了使本发明内容的叙述更加详尽与完备，下文针对了本发明的实施方面与具体实施例提出了说明性的描述；但这并非实施或运用本发明具体实施例的唯一形式。以下所公开的各实施例，在有益的情形下可相互组合或取代，也可在一实施例中附加其他的实施例，而无须进一步的记载或说明。在以下描述中，将详细叙述许多特定细节以使读者能够充分理解以下的实施例。然而，可在无此等特定细节的情况下实践本发明的实施例。

图1是根据本发明一些实施方式，绘示一种检测方法100的流程图。检测方法100可包含下列步骤：提供尿液样本(步骤105)；将尿液样本分流为第一尿液样本及第二尿液样本(步骤110)；侦测第一尿液样本中的总蛋白质浓度(步骤115)；侦测第二尿液样本中的肌酸酐浓度及白蛋白浓度(步骤120)；将总蛋白质浓度除以肌酸酐浓度以获得尿液蛋白/肌酸酐比值(urineproteinandcreatinineratio,upcr)，以及将白蛋白浓度除以肌酸酐浓度以获得尿液白蛋白/肌酸酐比值(urinealbuminandcreatinineratio,uacr)(步骤125)。

在步骤105中，提供尿液样本。此处所述的尿液样本，是指个体的尿液排泄物。在一些实施方式中，个体包含人及其他动物，意即尿液样本的来源可不限于人类。在一些实施方式中，尿液样本为24小时尿液。24小时尿液系指个体在24小时内所收集的所有尿液。举例来说，若个体在夜晚入眠后并于隔日早上八点起床，而起床后排解的第一次尿液弃却不收集。接着，以此时做为开始收集尿液样本的起点，于24小时内收集个体每次所排解的尿液。24小时尿液可显示尿液样本一天内的整体变化，可提升后续检验时的准确度。

在步骤110中，将尿液样本分流为第一尿液样本及第二尿液样本。基于后续检测项目的需求，尿液样本可被分为多份。在一些实施方式中，尿液样本的总体积百分比以100％计，而将尿液样本分流为第一尿液样本及第二尿液样本的步骤包含分流体积百分比为约33％至约80％的尿液样本做为第一尿液样本，以及分流体积百分比为约20％至约67％的尿液样本做为第二尿液样本。在一些情况下，所欲检测的项目为特定成份时，检体(例如:尿液样本)若采用原始浓度的话，检体中的杂质或成份可能会干扰检测结果，所以检体会经过稀释再进行后续试验。也就是说，检测这些单一成份时，若后续会对检体进行稀释的动作，一开始所需的检体量即可调整为较少。应注意的是，尽管单一成份在本实施方式的检测方法中已有极佳的灵敏度，但为了获得更好的检测结果，在体积占比上仍可进行上述调整。举例来说，在一些实施方式中，第一尿液样本是用于检测尿液的总蛋白量，而第二尿液样本则是用于检测尿液中的肌酸酐及白蛋白，所以第一尿液样本所占的体积百分比可大于第二尿液样本所占的体积百分比。故在一些实施方式中，将尿液样本分流为第一尿液样本及第二尿液样本的步骤包含分流体积百分比例如为约60％、70％或80％的尿液样本做为第一尿液样本，以及分流体积百分比为约20％、30％或40％或的尿液样本做为第二尿液样本。

将尿液样本依后续检测项目不同而分成多份之后，遂针对各份进行各种不同的检测方法。故在步骤115中，侦测第一尿液样本中的总蛋白质浓度。在一些实施方式中，侦测第一尿液样本中的总蛋白质浓度包含利用布拉德福(bradford)蛋白质定量法、酵素(酶)法、bca法(bicinchoninicacid)、双缩脲法(biuretmethod)、洛瑞法(lowrymethod)、紫外线吸收法(uvabsorbancemethod)或五倍子酚红(pyrogallolred)法分析第一尿液样本中的总蛋白质浓度。

而在步骤120中，侦测第二尿液样本中的肌酸酐浓度及白蛋白浓度。在一些实施方式中，侦测第二尿液样本中的肌酸酐浓度包含采用jaffereaction(alkalinepicrate)或酵素(酶)法分析第二尿液样本中的肌酸酐浓度。在一些实施方式中，侦测第二尿液样本中的白蛋白浓度包含采用免疫比浊法、水杨酸(salicylicacid)法、三氯醋酸(trichloroaceticacid)法、染料结合法(dye-bindingmethod)、溴甲酚绿(bromcresolgreen)法或氯化苯铵松宁(benzethoniumchloride)法分析第二尿液样本中的白蛋白浓度。

此外，承前所述，在一些情况下，可对第二尿液样本进行稀释后再行检测。在一些实施方式中，侦测第二尿液样本中的肌酸酐浓度及白蛋白浓度包含将第二尿液样本在混合槽中与稀释液混合后分流为第一稀释后尿液样本及第二稀释后尿液样本。举例来说，可在混合槽中，混合第二尿液样本与稀释液以形成稀释后的尿液样本。接着，分流此稀释后的尿液样本做为该第一稀释后尿液样本，以及分流该稀释的尿液样本做为该第二稀释后尿液样本。换言之，将稀释后的尿液样本分流为两部分，分别为第一稀释后尿液样本以及第二稀释后尿液样本。

最后，侦测第一稀释后尿液样本中的肌酸酐浓度以及侦测第二稀释后尿液样本中的白蛋白浓度。在一些实施方式中，侦测第一稀释后尿液样本中的肌酸酐浓度的方法可与上述侦测第二尿液样本中的肌酸酐浓度的方法相同，而侦测第二稀释后尿液样本中的白蛋白浓度的方法可与上述侦测第二尿液样本中的白蛋白浓度的方法相同。

至此，根据前述所得的总蛋白质浓度、肌酸酐浓度以及白蛋白浓度，可进一步对这三者的浓度进行分析。故在步骤125中，将总蛋白质浓度除以肌酸酐浓度以获得尿液蛋白/肌酸酐比值(upcr)，以及将白蛋白浓度除以肌酸酐浓度以获得尿液白蛋白/肌酸酐比值(uacr)。据此，利用前文所述的实施方式，在采集到尿液样本后，可在同一检测流程中立即测得尿液样本的三种浓度数值，分别为总蛋白质浓度、肌酸酐浓度以及白蛋白浓度。通过这三种数值，进而计算出尿液蛋白/肌酸酐比值(upcr)及尿液白蛋白/肌酸酐比值(uacr)。利用上述的比值可判断个体是否患有肾病及肾病的期数。若尿液白蛋白/肌酸酐比值(uacr)高于正常水平，代表个体可能有白蛋白尿(albuminuria)的情形，常发生于肾病第二期。若尿液蛋白/肌酸酐比值(upcr)高于正常水平，代表个体可能有蛋白尿(proteinuria)的情形，常发生于肾病第三期。在同一检测流程中同时得知uacr及upcr两种比值可更加确立个体的肾脏健康状态。

继续参照图2，图2是根据本发明一些实施方式，绘示一种检测系统200的示意图。检测系统200包含样本槽205、稀释液槽210、混合槽215、总蛋白质侦测槽220、肌酸酐侦测槽225、白蛋白侦测槽230、侦测装置(未绘示)以及处理器235。样本槽205，被配置成用以接收尿液样本，并将尿液样本的一部分分流到总蛋白质侦测槽220，分流到总蛋白质侦测槽220的尿液下文称为“第一尿液样本”。此外，样本槽205也将尿液样本的其余部分分流到混合槽215，分流到混合槽215的尿液下文称为“第二尿液样本”。在一些实施方式中，尿液样本的来源可如前文所提，于此不再多赞述。在一些实施方式中，第一尿液样本及第二尿液样本的占比亦可视需求进行调整，例如第一尿液样本可占约33％至约80％体积百分比的尿液样本，而第二尿液样本可占约20％至约67％体积百分比的尿液样本。

稀释液槽210被配置成用以存放稀释液。在一些实施方式中，稀释剂有助于调整尿液样本的浓度、某些特定成份的溶解度或任何其他有助于增加检测准确度或便利性的性质。

混合槽215被配置成用以接收稀释液与第二尿液样本，并且用以混合稀释液与第二尿液样本以形成稀释后尿液样本。具体来说，稀释液槽210会分流出稀释液至混合槽215，故第二尿液样本及稀释液可在混合槽215中充分进行混合以获得稀释后尿液样本。部分的稀释后尿液样本后续将被分流到肌酸酐侦测槽225(此部分的样品下文称为“第一稀释后尿液样本”)，而另一部分的稀释后尿液样本将被分流到白蛋白侦测槽230(此部分的样品下文称为“第二稀释后尿液样本”)。

肌酸酐侦测槽225及白蛋白侦测槽230连通混合槽215，肌酸酐侦测槽225被配置成接收第一稀释后尿液样本，白蛋白侦测槽230被配置成接收第二稀释后尿液样本。换言之，透过检测系统200，尿液样本最终会形成三份检体，分别为第一尿液样本(在总蛋白侦测槽220中)、第一稀释后尿液样本(在肌酸酐侦测槽225中)以及第二稀释后尿液样本(在白蛋白侦测槽230中)。在一些实施方式中，第一尿液样本占约33％至约80％体积百分比的原始尿液样本、第一稀释后尿液样本占约13.3％至约44.7％体积百分比的原始尿液样本以及第二稀释后尿液样本占约6.7％至约22.3％体积百分比的原始尿液样本。综上所述，混合槽215会连通样本槽205、稀释液槽210、肌酸酐侦测槽225和白蛋白侦测槽230。

如前文所述，总蛋白质侦测槽220连通样本槽205，并被配置成接收第一尿液样本。请注意，总蛋白质侦测槽220并未连通混合槽215，故第一尿液样本自样本槽205分流出来后并未经稀释即送至总蛋白质侦测槽220。

检测系统200可还包含一个或多个浓度侦测装置(未绘示)，用以量测第一尿液样本的总蛋白质浓度、第一稀释后尿液样本的肌酸酐浓度和第二稀释后尿液样本的微白蛋白浓度。在此检测系统200内有设置侦测装置，当第一尿液样本、第一稀释后尿液样本及第二稀释后尿液样本分别分流至总蛋白质侦测槽220、肌酸酐侦测槽225及白蛋白侦测槽230时，检测系统200可同时进行如前文所述的各种试验以分别测得总蛋白质浓度、肌酸酐浓度及白蛋白浓度。

处理器235，被配置成对总蛋白质浓度、肌酸酐浓度及白蛋白浓度进行运算，借此获得总蛋白质浓度除以肌酸酐浓度的尿液总蛋白/肌酸酐比值(urineproteinandcreatinineratio,upcr)，以及白蛋白浓度除以肌酸酐浓度的尿液白蛋白/肌酸酐比值(urinealbuminandcreatinineratio,uacr)。举体来说，在侦测装置测得各槽体的浓度后，便将量测结果传输至处理器235。故可在检测系统200中同时运算出uacr及upcr两种比值，对于早期肾病的预防及治疗有极佳的益处。此外，应说明的是，无论是前述本实施方式的检测方法或系统，在便利性上亦获得极佳的改善。举例来说，检测系统200可应用于小型检测盘，故具有体积小及随身携带的优点，适用于临床上的快速诊断。

前文概述多个实施例的特征以使得所属领域的技术人员可更好地理解本公开的方面。所属领域的技术人员应了解，可容易地将本发明用作设计或修改用于实现相同目的及/或达到本文引入的实施例的相同优点的其他工艺及结构的基础。所属领域的技术人员亦应认识到，此类等效物构造不违背本发明的精神及范畴，且可在不违背本发明的精神及范畴的情况下于此作出各种变化、替代以及变更。