一种通过主成分和聚类分析实现葛根质量评价的方法与流程

本发明属于质量评价技术领域，具体涉及一种通过主成分和聚类分析实现葛根质量评价的方法。

背景技术：

低温储罐为了保证隔热保温效果设置有内层和外层，并且在内层和外层之间的夹层填充珍珠盐，并且填充珍珠盐和抽真空是同时进行的，通过抽真空管结构进行抽真空操作，并且为了避免珍珠盐通过抽吸管直接吸入到抽风风机内在抽吸管内设置过滤网板，而珍珠盐等填充物容易堵塞过滤网板的网孔，阻碍抽吸管内部的气流，造成抽真空效率降低，抽风风机抽风阻力较大，容易造成抽风风机损坏，所以需要更新设计解决上述问题。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种通过主成分和聚类分析实现葛根质量评价的方法投入使用，以解决上述背景技术中提出的问题。为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种通过主成分和聚类分析实现葛根质量评价的方法，包括以下步骤，

s1、收集采收的新鲜葛根除去表面泥土洗净，趁鲜将葛根样品切成0.6×0.6×0.6、0.8×0.8×0.8、1.0×1.0×1.0的丁规格、0.6、0.8、1.0的片规格以及0.6×0.4×0.4、0.8×0.4×0.4、1.0×0.4×0.4的丁片规格。

s2、分别称取各种规格的葛根制作供试品浸泡液；

s3、分别称取各种规格的葛根制作供试品煎出液；

s4、分别称取各种规格的葛根制作不同浓度的对照品溶液；

s5、取s4步骤中制得的不同浓度的对照品溶液，通过高效液相色谱仪检测，导出色谱图，定结果显示各峰面积的rsd值<3%符合要求,表明仪器的精密度良好；

s6、取同一供试品溶液,分别于溶液制备后的0、2、4、8、12、24、48h通过高效液相色谱仪进行测定,记录色谱图。以2号峰（葛根素）的保留时间和峰面积为参照,测得各共有峰的相对峰面积和相对保留时间rsd值，从而验证该供试品溶液在48h内主要成分的稳定性；

s7、取s2和s3步骤制取的供试液浸泡液和供试品煎出液,精密吸取各供试品溶液10μl,通过高效液相色谱仪进行检测，测定对照成分峰面积,计算含量,测的供试液浸泡液各试样的溶出率，以及供试品煎出液各式样的煎出率；

s8、通过对于色谱图中有效成分对应峰面积的对比，直观得出各种规格的有效成分的量，从而评价各规格葛根的质量。

优选的，所述s2步骤中供试品浸泡液的制作方法如下，

a)分别精密称取s1中各个规格药材20.0g，置于1000ml烧杯中，精密加入10倍量（200ml）的水，保鲜膜密封烧杯口，静置30分钟；

b)摇匀后滤过0.22μm微孔滤膜,即得供试品浸泡液。

优选的，所述s3步骤中供试品煎出液的制备方法如下，

a)分别精密称取s1中各个规格药材20.0g，置于1000ml烧杯中，精密加入10倍量（200ml）的水，保鲜膜密封烧杯口，静置30分钟；

b)对药材进行两次煎煮，每次30分钟；

c)浓缩至200ml后摇匀滤过0.22μm微孔滤膜，得到供试品煎出液。

优选的，所述s4步骤中对照品溶液的制作方法如下，

a)精密吸取3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷、大豆苷、芒柄花苷、大豆苷元、染料木苷对照品储备液适量，

b)精密称定，分别加入甲醇制成质量浓度分别为2.19、1.775、2.055、2.17、1.545、2.035、1.925、2.36mg/ml的对照品储备液。

c)取步骤b中8种对照品储备液适量,加甲醇稀释成一定质量浓度的混合对照品溶液。

优选的，所述高效液相色谱仪的进样量为10μ，柱温30℃，且检测波段为250nm。

本发明的技术效果和优点：该通过主成分和聚类分析实现葛根质量评价的方法，该方法，通过对葛根主要成分的检测，测得各种规格试样在实际使用中得有效成分的量，从而得出葛根在不同规格下的质量情况，对葛根饮片规格标准的制定具有指导意义和参考价值，推动中药标准化、一体化的发展。

附图说明

图1为供试品溶液色谱图；

图2为对照品溶液色谱图。

具体实施方式

本案中所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明提供一种通过主成分和聚类分析实现葛根质量评价的方法，包括以下步骤，

s1、收集采收的新鲜葛根除去表面泥土洗净，趁鲜将葛根样品切成0.6×0.6×0.6、0.8×0.8×0.8、1.0×1.0×1.0的丁规格、0.6、0.8、1.0的片规格以及0.6×0.4×0.4、0.8×0.4×0.4、1.0×0.4×0.4的丁片规格。

s2、分别称取各种规格的葛根制作供试品浸泡液；

s3、分别称取各种规格的葛根制作供试品煎出液；

s4、分别称取各种规格的葛根制作不同浓度的对照品溶液；

s5、取s4步骤中制得的不同浓度的对照品溶液，通过高效液相色谱仪检测，导出色谱图，定结果显示各峰面积的rsd值<3%符合要求,表明仪器的精密度良好；

s6、取同一供试品溶液,分别于溶液制备后的0、2、4、8、12、24、48h通过高效液相色谱仪进行测定,记录色谱图。以2号峰（葛根素）的保留时间和峰面积为参照,测得各共有峰的相对峰面积和相对保留时间rsd值，从而验证该供试品溶液在48h内主要成分的稳定性；

s7、取s2和s3步骤制取的供试液浸泡液和供试品煎出液,精密吸取各供试品溶液10μl,通过高效液相色谱仪进行检测，测定对照成分峰面积,计算含量,测的供试液浸泡液各试样的溶出率，以及供试品煎出液各式样的煎出率；

s8、通过对于色谱图中有效成分对应峰面积的对比，直观得出各种规格的有效成分的量，从而评价各规格葛根的质量。通过供试液浸泡液和供试品煎出液在高效液相色谱仪检测后导出的色谱图如图1所示，再对照品溶液色谱图如图2所示，比对得出色谱图中各峰对应成分，从而可以通过峰面积直观看出含量，从而得出对应规格葛根的质量。

所述s2步骤中供试品浸泡液的制作方法如下，

a)分别精密称取s1中各个规格药材20.0g，置于1000ml烧杯中，精密加入10倍量（200ml）的水，保鲜膜密封烧杯口，静置30分钟；

b)摇匀后滤过0.22μm微孔滤膜,即得供试品浸泡液。

所述s3步骤中供试品煎出液的制备方法如下，

a)分别精密称取s1中各个规格药材20.0g，置于1000ml烧杯中，精密加入10倍量（200ml）的水，保鲜膜密封烧杯口，静置30分钟；

b)对药材进行两次煎煮，每次30分钟；

c)浓缩至200ml后摇匀滤过0.22μm微孔滤膜，得到供试品煎出液。

所述s4步骤中对照品溶液的制作方法如下，

a)精密吸取3'-羟基葛根素、葛根素、3'-甲氧基葛根素、葛根素芹菜糖苷、大豆苷、芒柄花苷、大豆苷元、染料木苷对照品储备液适量，

b)精密称定，分别加入甲醇制成质量浓度分别为2.19、1.775、2.055、2.17、1.545、2.035、1.925、2.36mg/ml的对照品储备液。

c)取步骤b中8种对照品储备液适量,加甲醇稀释成一定质量浓度的混合对照品溶液。

所述高效液相色谱仪的进样量为10μ，柱温30℃，且检测波段为250nm，在该条件下的葛根有效成分的分离效果更好，效率更高。

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换,凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。