本发明属于纸张中食品添加剂的检测分析技术领域，具体涉及一种评价干性食品包装纸中功能性添加剂表面分布率的方法。
背景技术：
近年来，随着消费和认识水平的提高，人们对食品安全问题日益关注，食品中各种添加剂特别是功能性添加剂的使用情况越来越受到人们的重视。食品添加剂在规定的剂量范围内使用对人无害，若超量使用，则可能引起各种形式的毒性表现。因此，必须对其使用量进行严格管理，发挥其有利作用，防止其不利影响。目前，各国对功能性添加剂采取了严格限制使用的政策，均制定了大量的标准，已成为国际贸易和国内标准中考察的重点。
功能性添加剂（酸味剂、着色剂、甜味剂等）是一类重要的食品添加剂，用以改善食品口感和风味。我国国家标准gb2760《食品添加剂使用标准》中对可用于食品加工的功能性添加剂（酸味剂、着色剂、甜味剂）的适用范围和添加限量都有明确规定。随着食品安全要求的不断增强，食品包装材料领域一个重要的研究集中在食品包装材料中的添加剂是否会从食品包装材料上迁移到食品中以及分布量的多少，为客观评价添加剂（功能性添加剂）的摄入量提供科学的评判依据和方法。
当前，常见人工合成食品功能性添加剂的检测技术主要有液相色谱法（质谱）、离子色谱法、气相色谱法、分光光度法，以及薄层色谱法、电化学方法、毛细管电泳等。现有相关文献主要集中于对样品（纸张）中功能性添加剂全含量进行检测，该检测方法难以准确地客观评价功能性添加剂的摄入量。
技术实现要素：
为解决上述问题，本申请方法能准确地量化分析出纸张样品中功能性添加剂全含量和表面含量，进而对目标物的分布情况进行表征。
本申请的核心思路为：以水为溶剂，超声萃取样品，分别提取中纸张样品功能性添加剂全含量和表面含量，其中表面含量采用提取；再使用高效液相色谱（hplc）对目标物全含量和表面含量进行定量分析；最后以表面含量除以全含量的比值，来表征食品包装纸中功能性添加剂的表面分布率。该方法能准确地量化分析出纸张样品中功能性添加剂全含量和表面含量，进而对目标物的分布情况进行表征。
根据本申请的一个实施方案，一种评价干性食品包装纸中功能性添加剂表面分布率的方法，包括以下步骤：
（1）样品中功能性添加剂全含量提取：以水为溶剂，超声萃取样品，萃取液过水相滤膜，得全含量进样液；
（2）样品中功能性添加剂表面含量提取：以用水浸润过的玻璃纤维滤片为擦拭纸，对样品表面来回擦拭，收集擦拭后的擦拭纸，萃取样品，萃取液过水相滤膜，得表面含量进样液；
（3）系列标准工作溶液制备：称取一定量的功能性添加剂标准物质，以水为溶剂，经逐级稀释，配置系列标准工作溶液；
（4）功能性添加剂全含量和表面含量分析：用高效液相色谱（hplc）对系列标准工作溶液、表面含量进样液和全含量进样液分别进行检测；
（5）功能性添加剂表面分布率的计算：根据标准工作曲线，计算得出样品中目标物的表面含量和全含量，用表面含量除以全含量，得功能性添加剂的表面分布率。
步骤（1）中，样品中功能性添加剂全含量提取：取干性食品包装纸，准确裁取面积为4cm×4cm试样，将其剪碎成约1mm×1mm大小纸片，并全部分布至50ml具塞锥形瓶中，准确加入20ml超纯水，于60%功率条件下超声萃取45min，结束后摇匀，静置片刻，经水相滤膜过滤，得全含量进样液。
步骤（2）中，样品中功能性添加剂表面含量提取：选用厚度合适的海面垫，上面覆盖塑料薄膜，在其左右两侧用固定针固定。然后准确裁取面积为4cm×4cm试样，使用双面胶将其粘贴于塑料薄膜上。再使用镊子夹注经水浸润过的、面积约为1cm×1cm的玻璃纤维滤片，在待测试样表面往复擦拭，擦拭时力度适中、压力约为1～10n，确保不破损纸张，来回约50回，前后累计共擦拭5次，擦拭后的擦拭纸一并收集于50ml具塞锥形瓶中，准确加入10ml超纯水，于60%功率条件下超声萃取45min，结束后摇匀，静置片刻，经水相滤膜过滤，得表面含量进样液。
步骤（3）中，系列标准工作溶液制备：准确称取0.1g功能性添加剂标准品于100ml容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，混匀，得标准储备液。分别准确移取一定体积的标准储备液，用水稀释定容。配制得到5级系列标准工作溶液。
步骤（4）中，用hplc对系列标准工作溶液、表面含量进样液和全含量进样液分别进行检测，仪器分析条件依据目标物的性质进行设定。
步骤（5）中，以系列标准工作溶液中目标物的浓度为横坐标，以色谱图中目标物的峰面积为纵坐标，进行线性回归分析，得到标准工作曲线；将相同条件下测得的表面含量进样液和全含量进样液中目标物的峰面积，代入标准工作曲线，根据下列公式求得纸张样品中功能性添加剂的表面分布率。
式中：
x为样品中功能性添加剂的表面分布率；
c表面为由标准工作曲线得出的表面含量进样液中待测物的浓度，单位为µg/ml；
v表面为样品表面含量萃取使用溶剂水的体积，单位为ml；
s表面为样品表面含量提取裁取的面积，单位为cm2。
c全为由标准工作曲线得出的全含量进样液中待测物的浓度，单位为µg/ml；
v全为样品全含量萃取使用溶剂水的体积，单位为ml；
s全为样品全含量提取裁取的面积，单位为cm2。
与现有技术相比，本发明的评价干性食品包装纸中功能性添加剂表面分布率的方法，具有如下优点：（1）创新构建了纸张表面功能性添加剂的提取方法；（2）首次建立了纸张中功能性添加剂分布情况的表征方法，为客观评价功能性添加剂的摄入量提供科学的依据和方法。
具体实施方式
以下是本申请的具体实施例，对本申请的技术方案作进一步的描述，但本申请并不限于这些实施例。
实施例1
一种评价干性食品包装纸中功能性添加剂（酸味调节剂）表面分布率的方法，具体步骤如下：
（1）样品中功能性添加剂全含量提取
取干性食品包装纸，准确裁取面积为4cm×4cm试样，将其剪碎成约1mm×1mm大小纸片，并全部分布至50ml具塞锥形瓶中，准确加入20ml超纯水，于60%功率条件下超声萃取45min，结束后摇匀，静置片刻，经水相滤膜过滤，得全含量进样液。
（2）样品中功能性添加剂表面含量提取
选用厚度合适的海面垫，上面覆盖塑料薄膜，在其左右两侧用固定针固定。然后准确裁取面积为4cm×4cm试样，使用双面胶将其粘贴于塑料薄膜上。再使用镊子夹注经水浸润过的、面积约为1cm×1cm的玻璃纤维滤片，在待测试样表面往复擦拭，擦拭时力度适中、压力约为1～5n，确保不破损纸张，来回约50回，前后累计共擦拭5次，擦拭后的擦拭纸一并收集于50ml具塞锥形瓶中，准确加入10ml超纯水，于60%功率条件下超声萃取45min，结束后摇匀，静置片刻，经水相滤膜过滤，得表面含量进样液。
（3）系列标准工作溶液制备
准确称取0.1g功能性酸味调节剂柠檬酸标准品于100ml容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，混匀，得标准储备液。分别准确移取一定体积的标准储备液，用水稀释定容。配制得到5级系列标准工作溶液，各级系列溶液浓度如下。
系列标准工作溶液表
（4）功能性添加剂全含量和表面含量分析
用hplc对系列标准工作溶液、表面含量进样液和全含量进样液分别进行检测，仪器分析条件为：
——色谱柱：c18液相色谱柱，250mm×4.6mm，填料粒度5µm；
——流动相a：乙腈；
——流动相b：体积分数为0.1%的磷酸溶液；
——流速：1.0ml/min；
——进样量：20μl；
——柱温：30℃；
——检测器：紫外检测器，检测波长210nm；
——流动相梯度：见下表；
流动相洗脱程序表
（5）功能性添加剂表面分布率的计算
以系列标准工作溶液中目标物的浓度为横坐标，以色谱图中目标物的峰面积为纵坐标，进行线性回归分析，得到标准工作曲线；将相同条件下测得的表面含量进样液和全含量进样液中目标物的峰面积，代入标准工作曲线，根据下列公式求得纸张样品中功能性添加剂的表面分布率。
式中：
x——样品中功能性添加剂的表面分布率；
c表面——由标准工作曲线得出的表面含量进样液中待测物的浓度，单位为µg/ml；
v表面——样品表面含量萃取使用溶剂水的体积，单位为ml；
s表面——样品表面含量提取裁取的面积，单位为cm2。
c全——由标准工作曲线得出的全含量进样液中待测物的浓度，单位为µg/ml；
v全——样品全含量萃取使用溶剂水的体积，单位为ml；
s全——样品全含量提取裁取的面积，单位为cm2。
本实施例中2个不同干性纸张样品中功能性酸味调节剂柠檬酸检测结果见下表
表3样品检测结果
实施例2：
一种评价干性食品包装纸中功能性添加剂（甜味调节剂）表面分布率的方法，具体步骤如下：
（1）样品中功能性添加剂全含量提取
取干性食品包装纸，准确裁取面积为4cm×4cm试样，将其剪碎成约1mm×1mm大小纸片，并全部分布至50ml具塞锥形瓶中，准确加入20ml超纯水，于60%功率条件下超声萃取45min，结束后摇匀，静置片刻，经水相滤膜过滤，得全含量进样液。
（2）样品中功能性添加剂表面含量提取
选用厚度合适的海面垫，上面覆盖塑料薄膜，在其左右两侧用固定针固定。然后准确裁取面积为4cm×4cm试样，使用双面胶将其粘贴于塑料薄膜上。再使用镊子夹注经水浸润过的、面积约为1cm×1cm的玻璃纤维滤片，在待测试样表面往复擦拭，擦拭时力度适中、压力约为5～10n，确保不破损纸张，来回约50回，前后累计共擦拭5次，擦拭后的擦拭纸一并收集于50ml具塞锥形瓶中，准确加入10ml超纯水，于60%功率条件下超声萃取45min，结束后摇匀，静置片刻，经水相滤膜过滤，得表面含量进样液。
（3）系列标准工作溶液制备
准确称取0.1g功能性酸味调节剂阿斯巴甜标准品于100ml容量瓶中，用水稀释并定容至刻度，混匀，得标准储备液。分别准确移取一定体积的标准储备液，用水稀释定容。配制得到5级系列标准工作溶液，各级系列溶液浓度如下。
系列标准工作溶液表
（4）功能性添加剂全含量和表面含量分析
用hplc对系列标准工作溶液、表面含量进样液和全含量进样液分别进行检测，仪器分析条件为：
——色谱柱：c18液相色谱柱，250mm×4.6mm，填料粒度5µm；
——流动相a：乙腈；
——流动相b：2mmol/l乙酸铵溶液；
——流速：1.0ml/min；
——进样量：10μl；
——柱温：30℃；
——检测器：紫外检测器，检测波长230nm；
——流动相梯度：见下表；
流动相洗脱程序表
（5）功能性添加剂表面分布率的计算
以系列标准工作溶液中目标物的浓度为横坐标，以色谱图中目标物的峰面积为纵坐标，进行线性回归分析，得到标准工作曲线；将相同条件下测得的表面含量进样液和全含量进样液中目标物的峰面积，代入标准工作曲线，根据下列公式求得纸张样品中功能性添加剂的表面分布率。
式中：
x——样品中功能性添加剂的表面分布率；
c表面——由标准工作曲线得出的表面含量进样液中待测物的浓度，单位为µg/ml；
v表面——样品表面含量萃取使用溶剂水的体积，单位为ml；
s表面——样品表面含量提取裁取的面积，单位为cm2。
c全——由标准工作曲线得出的全含量进样液中待测物的浓度，单位为µg/ml；
v全——样品全含量萃取使用溶剂水的体积，单位为ml；
s全——样品全含量提取裁取的面积，单位为cm2。
本实施例中2个不同干性纸张样品中功能性甜味调节剂阿斯巴甜检测结果见下表
样品检测结果表
本文中所描述的具体实施例仅仅是对本申请精神作举例说明。本申请所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本申请的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。