包括珠的体外诊断装置及其用途的制作方法

本发明属于免疫诊断的领域。特别地，本发明涉及一种体外诊断装置，该体外诊断装置用于检测和/或鉴定来自生物流体样品、特别是来自血液样品或血液成分样品的抗原和/或抗体。本发明还涉及该装置的各种用途，例如检测和/或鉴定红血细胞抗原或抗红血细胞抗体、血小板抗原或抗血小板抗体、病毒抗原或抗病毒抗体、细菌抗原或抗细菌抗体、寄生虫抗原或抗寄生虫抗体。使用本发明的装置的体外方法也是本发明的一部分。
背景技术：
：免疫诊断分析是可以多种测试形式使用的方法，并且可用于检测抗体、抗原或两者的组合。通常，这些检测测试是基于固定的抗原的使用，所述固定的抗原捕获所测试样品中的任何存在的特异性(specific，特定)抗体，而用于检测抗原的测试在于(consiston，包括)固定的抗体，所述固定的抗体允许捕获样品中存在的特异性抗原。这些分析广泛用于例如免疫血液学中，用于检测传染性(感染性)病原体等，尤其是确保输血安全。输血包括(consistsin，在于)静脉注射从提供者血液中获得的浓缩红细胞制剂(球状浓缩物)。输血有两个主要风险：最重要的风险是可能在接受者的身体(接受输血的人)中使抗体及其红血球抗原聚集在一起。这样的免疫学反应的后果可为从无临床症状的无效输血到轻度的临床反应(焦虑，颤抖)、严重的临床反应(休克，血红蛋白尿(hemoglobinurea)，肾衰竭)或导致死亡的剧烈的临床反应(休克，弥散性血管内溶血)。输血是疾病传播的可能来源。无数种源(agent，病源)可潜在地通过输血传播，包括细菌、病毒和寄生虫。其中，细菌是最常见的被传播的，并且包括以下属的种：密螺旋体属(treponema)、耶尔森菌属(yersinia)、变形杆菌属(proteus)、假单胞菌属(pseudomonas)、埃希菌属(escherichia)、克雷伯氏菌属(klebsiella)、不动杆菌属(acinetobacter)和沙雷氏菌属(serratia)，而在革兰氏阳性有机体中，丙酸杆菌属(propionibacterium)、葡萄球菌属(staphylococcus)、芽孢杆菌属(bacillus)、梭菌属(clostridium)和肠球菌属(enterococcus)被分离出来。能够通过输血传播的病毒源包括人类免疫缺陷病毒(hiv)、肝炎病毒、西尼罗病毒(wnv)、巨细胞病毒(cmv)、人类t细胞淋巴病毒(htlv)和细小病毒b19。另一个实例是原生动物有机体，其包括疟原虫属(genusplasmodium)的种，其引起疟疾并且可通过输血传播。为了确保输血安全，一方面，如果接受者没有针对提供者的红血球抗原的循环抗体，则要求提供者红血细胞与接受者的血液相容，另一方面，要求提供者红细胞没有输血(输注)可传播的感染源(传染源)。为了确保提供者红血细胞和接受者之间的相容性，目前使用用于测定血型和血浆/血清中的抗红血细胞抗体的存在的测试。免疫血液学诊断的目的是测定和/或鉴定红血细胞抗原和特异性地针对这种抗原的抗体之间的免疫反应。为此，必须具有用于测定在红血细胞的表面处存在的抗原的工具。它们的存在与否决定了血型。也可以鉴定接受者的血液中是否含有一种或多种针对提供者的红血细胞已知抗原的抗体，抗体的存在意味着不相容的可能性。迄今为止，在构成血型的红血球膜抗原的所有抗原变体中，已在人类中鉴定出三十多种红血球抗原系统：具有a(abo1)、b(abo2)、ab(ab03)和a1(abo4)的abo系统，具有d(rh1)、e(rh3)或e(rh5)和c(rh2)或c(rh4)抗原的rh系统，kell系统(k或kel1，k或kel2......)，duffy系统(fya或fy1，fyb或fy2......)，kidd系统(jka或jk1，jkb或jk2......)，mns(mns1，mns2，mns3，mns4......)系统或还存在的实践中较少研究的其他系统，例如lutheran，lewis等......具有相同的红血球抗原组合的个体属于相同的红血球血型。当使用几种抗原系统时，血型变得更加复杂和众多。常规技术包括(consistin，在于)搜索和鉴定在这些细胞的表面处的红血细胞抗原的存在或不存在和/或搜索和鉴定在血浆或血清中的血型的抗红血细胞抗体的存在或不存在。例如，对于abo系统，beth-vincent测试测定由红血细胞携带的抗原，而互补的simonin-michon测试或反向血型鉴定(reversebloodgrouping)测定在血清或血浆中循环的抗体。在beth-vincent测试中，将个体的红血细胞与特异性已知的抗体试剂结合在一起。通常，当抗体的试剂识别相应的红血细胞抗原时，通过观察红血细胞的凝集使该测试可见。在simonin-michon测试中，将个体的血浆或血清与红血细胞测试物结合在一起，每个测试物都属于abo系统的精确抗原组。这是来自个体的血浆或血清中存在的抗体的红血细胞的凝集的测试。这些igm型免疫球蛋白的抗体能够在体外凝集红血细胞。它们被称为“规则”抗体，因为它们系统地存在于在其红血细胞的表面处不携带相应抗原的个体的血清或血浆中。还存在被称为“不规则”(或“免疫”)抗体的第二类抗体。它们在血清或血浆中的存在是任选的，并且它们针对非abo系统的抗原。这通常涉及igg(有时为igm)，其在外来红血细胞的抗原刺激期间出现，例如在输血后或在怀孕期间通过针对不属于母体血型的胎儿红血球抗原的母体免疫反应，或在同种异体移植后而针对一种或多种抗原进行免疫之后。这些不规则抗体的筛选被称为间接凝集素测试(iat)或间接coombs分析。该测试用于通过使用人类抗球蛋白促进凝集来检测在个体的血液中针对各种红血细胞抗原的igg抗体的存在或不存在，因为igg本身不能够在体外自发诱导凝集。为此，该测试旨在证明这些抗体在抗原性已知的测试红血细胞上的结合。该方法同时在几种具有不同的抗原性已知的红血细胞上进行，并且结果的比较使得可鉴定存在的igg的特异性。对于大多数产生免疫性的抗原，例如rhd(rh1)，风险较大，但对于其他的恒河猴类型(e(rh3)>c(rh4)>e(rh5)>c(rh3))、kell系统的抗原(kel1)、duffy系统的抗原(fy1，fy2)、kidd系统的抗原(jk1，jk2)等......也是如此。实际上，在进行输血时不可能考虑所有这些抗原，因为在正确的时刻获得正确的血型是不可能的，尤其是因为某些抗原组合极其罕见。标准输血仅考虑abo血型以及存在或(of)不存在抗原d(rh:1或rh:-1)。在存在不规则抗体的情况下，要考虑许多其他系统，尤其是rh系统(c(rh2)或c(rh4)和e(rh3)或e(rh5))和kell系统，以及有时是其他系统。因此，对于这些风险情况，重要的是通过考虑这些不规则抗红血细胞抗体的存在或发生风险来确保提供者的血型和接受者的血型之间的相容性。因此，在具有不规则抗红血细胞抗体的接受者患者中，或在危险情况下(例如接受多次输血的患者)，重要的是选择被输注的红血球浓缩物单元(unit)以使得提供者的红血细胞没有接受者的抗体所针对的或可能出现的抗原。在这些患者中，测定血型以及搜索和鉴定不规则抗红血细胞的测试是强制性的，并且其预防性地用在施用红血球浓缩物之前的所有接受者患者中以及孕妇中以检测潜在的胎儿-母体不相容性。借助于在接受者血清或血浆的存在下与提供者的红血细胞的直接相容性测试的另外的测试也是强制性的，用以确认相容性。在这些情况下，在iat中所使用的技术中都不会发现凝集反应或分解反应。搜索所谓的不规则抗体需要检测个体的血液中的针对各种红血细胞抗原的免疫球蛋白的存在或不存在。当抗体已经在体内固定时，即可进行直接测试或直接coombs分析。在进行同种异体抗体搜索的情况下，目的是通过间接coombs技术揭示这些免疫球蛋白在已知的抗原的红血测试中的固定。在免疫血液学领域，有大量的用于检测和/或鉴定红血细胞抗原以及用于检测和/或鉴定抗红血细胞抗体的方法和装置，但它们有许多缺点。载玻片方法包括在玻璃载玻片或白瓷支持物上将一滴提供者或接受者血液与anti-a(anti-abo1)、anti-b(anti-abo2)和anti-d(anti-rh1)分别混合。可目视观察凝集，由此可测定血液的abo和rhd系统。测试在5-10min内完成，并且价格便宜。但是，其是一种不灵敏的方法。对于反应性弱或极低的抗原无法进行测试，其结果难以解释，并且另外，低滴度的anti-a(anti-abo1)或anti-b(anti-abo2)可导致假阳性或假阴性结果。由于其迅速的结果，在紧急情况下进行初步血型匹配是非常有价值的。但是，它不足以可靠地完全确保安全的输血。管测试包括测定beth-vincent和simonin-michon这两种分析。在该方法中，对于beth-vincent分组(血型鉴定)，将血细胞与作为稀释介质的盐水一起放入两个测试管中，然后在这些样品中分别添加一滴每种anti-a(anti-abo1)和anti-b(anti-abo2)。使这些管经历离心数分钟，然后将所得基质轻轻摇动以观察凝集。离心的目的是确保增强的化学相互作用，特别是对于较弱的抗体发生反应，从而导致凝集。以类似的方式，可通过针对a1和b(以及任选地o和a2血型)的红血细胞试剂组处理血清来进行simonin-michon反向分组(血型鉴定)，并且监测随后的凝集模式。通常，管方法比载玻片测试灵敏得多并且需要低体积的试剂，而且还可检测到一些意想不到的抗原。但是，在婴儿中，反向分组(血型鉴定)有些难以进行，因为它们产生的抗体的量不足而无法测定。由于该测试是手动方法，因此其用于高通量分析的使用非常有限。在经典方法中，微平板技术包括大量的小管，这些小管含有几微升(μl)的试剂，这些试剂针对血液样品进行处理。在离心和培育之后，随后的凝集可通过自动读取装置进行检查。该方法对于血液分型以及检测/鉴定抗红血细胞抗体是更灵敏和快速的分析，其具有低试剂体积以及对于高通量分析的自动化的可行性。然而，由于微平板技术需要离心阶段，之后是搅拌步骤，因此存在着在不能成功地再悬浮(resuspending，恢复)强凝集的情况下，消除弱凝集的风险。它们必须在目视检查下进行，并且必须特别注意某些试剂的粘附现象。通过凝胶测试进行的过滤技术是量化细胞凝集的标准程序。柱含有凝胶基质以捕获凝集物。对于血液分型，在受控的培育和离心下，在微管中将红血细胞与anti-a(anti-abo1)、anti-b(anti-abo2)和anti-d(anti-rh1)试剂或针对其他血型的其他抗体混合。对于反向血液分型和检测/鉴定抗红血细胞抗体，在受控的培育和离心下将血浆或血清与抗原性已知的红血细胞混合。凝胶颗粒捕获凝集物，而未凝集的血细胞则允许通过柱。通过使用玻璃珠代替凝胶材料可减少分析时间，因为以此方式可实现更快的离心速度，这得到快速结果。对于受过较少培训的人员而言，此技术灵敏、简单且相对易于操作。然而，主要风险在于未检测到某些凝集，尤其是在abo血型的血浆测试期间，因为小凝集物在进入到凝胶中时被剪切力离解。而且，所有这些技术都存在一个主要缺点，因为它们需要离心步骤来倾析红血细胞或使其通过凝胶，这是一个限制性步骤，它增加了相当长的时间和分析成本，并且需要使用难以处理的笨重的离心机。在相关领域中还描述了基于以下的其他方法：基于分子印迹(forreview:mujahid,2016,sensors)，基于等离子体共振成像的抗体阵列技术表面(houngkamhang,2013,sensors；pipatpanukul,2018,biosensorsandbioelectronics)，基于量子点-磁珠分析(xu,2017,internationaljournalofnanomedicine)，或基于毛细管或真空驱动的微流体(zhai,2017,labonachip)，以及其他方法。wo2012010666描述了用于测定血型和表型的抗体/抗原复合物的磁免疫诊断方法例如在申请ep2167967中描述的免疫过滤方法包括在样品通过带有捕获元素的多孔膜时捕获样品中存在的分析物并且通过显示元素显示其存在。该方法具有显著的灵敏度和特异性问题，因为在沉积样品时，样品会扩散并且吸入(imbibe)多孔膜，并且许多分析物会丢失在多孔膜的死体积中或在捕获区域外通过。对于显示溶液同样适用。因此，有必要加大吸收系统的尺寸，以能够沉积更大体积的待测试的样品和显示溶液，从而阻止了进行小型化的测试，其动力学受到控制，免于接受显示剂并且可通过自动移液器使用。为了尝试解决该问题并且集中抗原/抗体反应之后发出的信号，在申请ca1312265或w002052263中提出了在亲水多孔膜的上方和下方插入一个刺穿的疏水结构，以迫使流通过捕获点。然而，对于这些装置，仍然存在从点离心扩散的问题，并且通过捕获点且未固定至其上的显示元素将能够在亲水多孔膜中离心扩散并且存储在该点的外围处。当今现有的免疫过滤装置的另一个主要问题是控制样品通过膜的运动速度以及某些情况下的预培育时间。这些时间很重要，因为捕获元素(通常是抗体)和分析物(通常是抗原)之间以及分析物和显示元素之间的相互作用具有特定的动力学。没有特定的系统，通过亲水膜的速度很快(500μl/min)。为了控制流，已经提出利用活塞，特别是在申请us2008318342中。为了控制预培育时间，在申请wo03016902中提出了将装置以两部分使用；上部分包括样品收集区域和多孔膜，而下部分包括多孔膜和吸收膜。这样的机械方法难以使用自动操作装置来执行，因为它们需要开发和使用专用系统。它们还使专业人员在处理期间暴露于任何突起物(projection)。在ep0334015中描述的另一种方法包括使用在第一个膜下方的额外膜来控制流，但是所提出的装置不能解决与在亲水多孔膜中显示元素和样品的扩散有关的问题。血小板输注(也称为血小板浓缩物)被使用用于预防或治疗血小板计数低或血小板功能差的人的出血。血小板水平低于10x109/l的人通常进行预防性输注。在那些出血的人中，输注典型地以低于50x109/l进行。血小板通过注射到静脉中来供给。血小板可从全血或通过单采血液成分法(apheresis)产生。迄今为止，已对六种功能重要的血小板糖蛋白(gp)复合物鉴定出33种人血小板同种异体抗原(hpa)。最多数量的经验证的hpa(33种中的20种)位于gpiib/iiia复合物上，该复合物充当在介导止血和炎症中重要的配体的受体。这些包括hpa-1a，这是高加索人群体中的fnait和ptp中最常见的hpa。其他血小板gp复合物gpib/v/ix、gpia/iia和cd109表达其余13种hpa。在经验证的hpa中，有12种是作为六个在血清学和基因上确定的双等位基因“系统”出现的，其中“a”形式表示较高频率的等位基因，而“b”形式表示较低频率的等位基因。二十一种其他hpa是低频率或稀有抗原，其假定的较高频率的“a”等位基因尚未被鉴定为抗体特异性。除hpa标记之外，血小板还表达abo和人类白细胞抗原(hla)抗原。典型地建议在供给血小板之前进行血型匹配(abo，rh1)。在几种不同的临床情况下，需要对患者的hpa抗原进行准确分型，并且血液服务需要维持hpa类型的单采血液成分法血小板提供者和全血提供者的组，以支持hpa同种异体免疫(hpa-allo-immunized)的患者。血清学hpa表型的价值是有限的，因为通常很少的血小板可由血小板减少症患者获得，并且除hpa-1a和hpa-5b之外，很少有用于hpa抗原的可靠的血清分型试剂。相比于红血细胞表型，除hpa-1a之外，尚未开发出用于hpa分型的单克隆抗体。但是，最近已经发表了几种使用多克隆或重组抗hpa-1a进行快速筛选分析的方法。这些表型分析可补充基因分型分析，以提供hpa选择的提供者组。确保血小板的提供者和血小板的接受者之间的相容性很重要。但是，由于没有匹配的血小板，经常使用不匹配的血小板。不相容性可导致同种异体免疫血小板病症，包括胎儿和新生儿同种异体免疫血小板减少症(fnait)、输血后紫癜(ptp)和多次输注血小板无效(mpr)fnait(通常称为胎儿-母体同种异体免疫血小板减少症(fmait))是由于母体针对从父亲遗传的胎儿血小板同种异体抗原进行免疫而产生的。然后，母体igg同种异体抗体穿过胎盘并导致子宫内血小板的免疫破坏，这种情况类似于新生儿的溶血性疾病。输血后紫癜(ptp)是一种罕见但严重的疾病，其发生在输注任何含有血小板或血小板膜的血液产品后约一周。推测患者可能是因先前的怀孕或输血而致敏，并且通过制造高滴度hpa(并且通常是hla)抗体来应对不相容的血小板的第二个挑战。所产生的输注的血小板的免疫破坏可促成通常发生的输注反应。mpr定义为输注随机的abo相同的提供者血小板之后血小板增量计数不足。这是接受多次血小板输注的患者的常见并发症。尽管在过去的25年中已经开发了多种hpa抗体检测的技术，但是四种技术或其变型已成为最常见的；(1)血小板免疫荧光测试(pift)；(2)血小板抗原的单克隆抗体固定化(maipa)分析；(3)固相红细胞粘附分析；(4)多种基于elisa的技术。但是，抗血小板抗体检测的熟练度取决于多种因素，包括技术、细胞组(cellpanels)和操作人员的经验，这些因素可使某些上述技术昂贵、难以实施且较不可靠。为了检测潜在的输注(输血)可传播的感染，在过去四十年期间开发了许多利用免疫应答的诊断测试。最常用的测试被设计为来检测感染源的抗原，例如病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原，或检测感染时通过免疫反应产生的针对感染源的抗体。尽管如此，这些测试并不适合所有情况，并且每个测试都有限制，在选择时必须了解并考虑到这些限制。通常，免疫诊断是基于使用抗体作为试剂的。在免疫诊断测试中使用了不同的方法。这些方法中的一些描述如下。免疫沉淀是最简单的免疫分析方法，其测量沉淀物的量，所述沉淀物是在试剂抗体与样品一起培育并与其各自的抗原反应而形成不溶性聚集体之后形成的。免疫沉淀反应可为定性或定量的。颗粒免疫分析检测样品中抗体或特异性抗原的存在，其使用包覆有抗原或适当抗体的颗粒进行测试。通过将几种抗体连接至颗粒(明胶或胶乳)，颗粒能够同时结合许多分子并且促进凝集。这大大加快了可见反应的速度。梅毒螺旋体(treponemapallidum)颗粒凝集分析(也称为tppa测试)是用于检测针对梅毒的病原体(其可能是输血可传播的感染源)的抗体的颗粒免疫分析的另一个实例(manavi等2006int.j.stdaids)。其是一种间接凝集分析，其中明胶颗粒被梅毒螺旋体抗原致敏。当患者血清对于梅毒呈阳性时，颗粒聚集而形成团块，而阴性测试显示没有明胶颗粒团块。免疫比浊分析是开发用于检测感染的免疫分析的另一个实例。当由抗体和抗原的结合形成的免疫复合物太小而无法沉淀时，可使用被称为浊度计的仪器来测量这些复合物，因为它们会使入射光散射。抗原浓度可在反应的几分钟内测定。放射免疫分析(ria)使用放射性同位素来标记抗原或抗体。该同位素发射伽马射线，其通常在移除未结合的放射性标记之后进行测量。与其他免疫分析相比，ria的主要优点是灵敏度更高、信号检测容易以及完善建立的快速分析。主要缺点是使用辐射所带来的健康和安全风险，以及与维持许可的辐射安全和处置计划相关的时间和费用。为此原因，在常规的临床实验室实践中，ria已大体被酶(eia)、荧光(fia)或化学发光(clia)免疫分析所替代。eia、fia和clia是目前最常用的检测病毒、细菌和寄生虫感染的测试，尤其是血液提供者样品中的输血可传播的感染。酶联免疫吸附分析(elisa)是检测传染病(感染性疾病)最广泛使用的eia方法之一。有许多专利和出版物示出了这种用于检测感染源的分析的性能。这些方法在其原理上是相似的，并且仅在于检测所得的免疫复合物的模式不同：对于eia和elisa而言是比色法，对于fia和clia而言是由酶/化学反应产生的荧光和光度的测量。荧光和化学发光测量固有地比色测量更灵敏。因此，这些方法比采用光密度测量的eia方法具有更高的分析灵敏度。还存在没有中间阶段并且是一次性的快速/简单的单元测试，它们仅使用一次并被淘汰。这些测试大多数是基于免疫色谱法，其中样品(血液、血浆或血清)通过惰性条带，并且与预先固定在条带上的试剂(抗体或抗原)反应。任何阳性反应都会可视化为条带上出现的点或带。这些测试易于使用，并且除了试剂盒中所包括的试剂外，不需要另外的试剂。它们也会在几分钟内给出简单的定性结果。但是，这些测试不适合于大量样品的筛选。为了克服上述缺点，申请人实施了一种体外诊断装置，其用于从血液样品或其成分之一中检测抗原和特异性地针对该抗原的抗体之间的至少一种反应，其包括疏水多孔膜，其中至少一个旨在接收所述样品的亲水反应区域的表面不如疏水多孔膜的表面大(important，重要)。例如在专利申请wo2013/186482中描述了该装置。它通过以下弥补了来自上述测试，特别是来自免疫过滤测试的一些缺点：-防止对假阳性导致的显示剂的返回-来自使用较小的体积的提高的灵敏度-系统的小型化和自动化-在无需装置的机械处理的情况下控制反应动力学。尽管该装置具有明显的优点，但是当诊断包括使用捕获剂并且当该捕获剂是抗体(用于检测样品中的相应抗原)或抗原(用于检测样品中的相应抗体)时，仍然需要提高所进行的诊断的灵敏度和特异性。当使用所述装置时，在诊断测试期间设置在亲水化反应区域上的捕获剂(例如，针对血细胞抗原的抗体)的一部分与用于抗体稀释的溶液一起被多孔膜用吸附。因此，降低了测试的特异性和灵敏度。为了补偿捕获剂的这种“损失”，有必要添加大量的捕获剂，这可增加该诊断测试的成本。为了克服该缺点，本发明的发明人已经测试了几种技术方案，例如使用较厚的多孔膜或较不多孔的膜，但是没有明显的结果。与研究调节该装置的多孔膜或其他结构元件的特性的其他可能性相反，发明人出人意料地发现，添加特别选择的放置在多孔膜的反应区域上的珠(捕获剂(例如抗体或抗原)可固定或吸附在其表面上)允许将捕获剂保留在膜的表面上，并且因此改进了当捕获剂结合分析物(例如抗原或抗体)时所发出的信号。因此，使用这样的珠允许改进先前公开的装置的特异性和灵敏度，而无需使用大量的捕获剂。表面上固定有抗体和/或抗原的珠对于诊断目的而言在本领域是已知的。例如，国际申请wo95/31731公开了一种用于检测红血细胞抗原的方法，所述方法包括将含有血细胞的样品添加在含有颗粒的柱中，在所述颗粒的表面上通过蛋白质配体固定有特异性抗红血细胞抗体。但是，所描述的方法没有使用包括亲水化多孔膜的装置，并且没有涉及(解决)与通过膜吸收捕获剂有关的问题。因此，鉴于相关现有技术的状态，部分亲水化的多孔膜与表面上直接或间接固定或吸附有抗体和/或抗原作为捕获剂的珠的结合用于进行具有高特异性和灵敏度的体外诊断方法是出人意料的。技术实现要素：如上所述，为了改进抗原和/或抗体的检测和/或鉴定的灵敏度和特异性以及减少所使用的分析物的量，发明人实施了类似于专利申请wo2013/186482中公开的装置的装置，该装置还包括设置在反应区域上的珠，其中抗体和/或抗原固定或吸附在珠表面上。根据一个方面，本发明因此涉及一种体外诊断装置，该体外诊断装置用于检测和/或鉴定来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品的抗原和/或抗体，其包括：-支持物(支撑物，载体)，和-布置在支持物中的疏水多孔膜，其包括至少一个旨在接收所述样品的亲水反应区域，该亲水反应区域的表面小于疏水多孔膜的表面，所述亲水反应区域的表面包括至少一种抗体和/或抗原，其中所述抗体和/或抗原被固定或吸附在珠表面上。本发明的发明人已经进行了几次测试，并且已经证明了本发明的体外诊断装置可用于检测和/或鉴定不同类型的抗原或抗体。为此，可将不同类型的抗体和/或抗原固定或吸附在珠表面上。这些抗体可选自针对红血细胞抗原的抗体、可选自针对血小板抗原、抗病毒抗原、抗细菌抗原和抗寄生虫抗原的抗体或抗免疫球蛋白。这些抗原可选自红血细胞抗原、血小板抗原、病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原。根据另一方面，本发明因此涉及根据本发明的体外装置的用途，其用于测定和/或鉴定：-至少一种抗原，其选自包括混合场群体(mixed-fieldpopulation)的红血细胞抗原、血小板抗原、病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原；-至少一种抗体，其选自抗红血细胞抗体、抗血小板抗体、抗病毒抗体、抗细菌抗体和抗寄生虫抗体其来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品。发明人已经特别证明了本发明的体外装置可在检测和/或鉴定来自生物流体样品、特别是来自血液或血液成分样品的红血细胞抗原和/或体内致敏的红血细胞和/或血小板抗原的体外方法中使用。根据另一方面，本发明因此涉及一种检测和/或鉴定来自血液样品或血液成分样品的红血细胞抗原和/或体内致敏的红血细胞和/或血小板抗原的体外方法，其包括以下步骤：–在根据本发明的体外装置的反应区域上添加含有所述样品的溶液，-在清洗前读数(reading)当作样品装载对照–将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-如果在反应区域中出现红色或粉红色斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的存在来测定所述抗原或所述血细胞的存在，或如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的不存在来测定所述抗原或所述血细胞的不存在。此外，发明人还证明了本发明的体外装置可在检测和/或鉴定来自生物流体样品、特别是来自血液或血液成分样品的抗红血细胞抗体的体外方法中使用。本发明的另一方面因此涉及一种检测和或鉴定来自血液样品或血液成分样品的抗红血细胞抗体的体外方法，其包括以下步骤：-将待测试的样品与缓冲液和抗原性已知的红血细胞测试物一起培育，或将接受者的血浆或血清与提供者的红血细胞一起培育，-将混合物沉积在根据本发明的体外装置的反应区域上，-将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-如果在反应区域中出现红色或粉红色斑点，则通过测定相互作用抗体/抗原的存在来测定抗红血细胞抗体的存在，或如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定相互作用抗体/抗原的不存在来测定所述抗体的不存在。本发明的体外装置可在检测和/或鉴定来自生物流体样品、特别是来自血液或血液成分样品的抗血小板抗体的体外方法中使用。本发明的另一方面因此涉及一种检测和或鉴定来自血液样品或血液成分样品的抗血小板抗体的体外方法，其包括以下步骤：-将待测试的样品与缓冲液和抗原性已知的血小板测试物一起培育，或将接受者的血浆或血清与提供者的血小板一起培育，-将混合物沉积在根据本发明的体外装置的反应区域上，-将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-如果在反应区域中出现红色或粉红色斑点，则通过测定相互作用抗体/抗原的存在来测定抗血小板抗体的存在，或如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定相互作用抗体/抗原的不存在来测定所述抗体的不存在。本发明的体外装置还可在检测和/或鉴定选自病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原的不同类型的抗原或选自抗病毒抗体、抗细菌抗体和/或抗寄生虫抗体的不同类型的抗体的体外方法中使用，所述抗体是在感染时针对病毒、细菌或寄生虫抗原产生的。本发明的又一方面因此涉及一种检测和/或鉴定来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品的选自病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原的抗原的体外方法，其包括以下步骤：-任选地将待测试的样品与缓冲液一起培育，-在根据本发明的体外装置的反应区域上添加含有所述样品的溶液或样品与缓冲液的混合物，-任选地在清洗前读数当作样品装载对照；-任选地将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-如果在反应区域中出现有颜色的斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的存在来测定所述抗原的存在，或如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定抗原/抗体反应的不存在来测定所述抗原的不存在。根据另一方面，本发明还涉及一种检测和/或鉴定来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品的选自抗病毒抗体、抗细菌抗体和/或抗寄生虫抗体的抗体的体外方法，其包括以下步骤：-任选地将待测试的样品与缓冲液一起培育，-在根据本发明的体外装置的反应区域上添加含有所述样品的溶液或样品与缓冲液的混合物，-任选地在清洗前读数当作样品装载对照；-任选地将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-如果在反应区域中出现有颜色的斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的存在来测定所述抗原的存在，或如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定抗原/抗体反应的不存在来测定所述抗原的不存在。本发明的特征和优点将从以下的详细描述中、从在本申请所附的一组附图中也示出的证实本发明的一些实施方案的实例中显现。具体实施方式除非另有定义，否则本文使用的所有技术和科学术语都具有与本发明所属领域的普通技术人员通常所理解的相同含义。这些定义中的一些在本申请的
背景技术：
部分中提到，并且适用于本发明。在以下的详细描述中还给出了特定的定义。·本发明的体外装置如上所述，本发明的发明人已经实施了用于以高特异性和灵敏度来测定和/或鉴定抗原和/或抗体的体外装置。在一个方面中，本发明的体外诊断装置为用于检测和/或鉴定来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品的抗原和/或抗体的体外诊断装置，其包括：-支持物，和-布置在所述支持物中的疏水多孔膜，其包括至少一个旨在接收所述样品的亲水反应区域，该亲水反应区域的表面小于疏水多孔膜的表面，所述亲水反应区域的表面包括至少一种抗体和/或抗原，其中所述抗体和/或抗原被固定或吸附在珠表面上。本发明的装置适合于检测和/或鉴定几种类型的抗原或抗体。该检测和/或鉴定通过与固定在吸附(固定或吸附)在珠表面上的抗体结合的抗原或通过与固定或吸附在珠表面上的抗原结合的抗体来进行。在本上下中，取决于待检测和/或鉴定的抗原或抗体的类型，任何抗体和/或抗原都可固定或吸附在本发明的装置中的珠表面上。本发明的体外装置因此不仅用于检测和/或鉴定特定的(specific，特异性)抗原或抗体(如红血细胞抗原和抗红血细胞抗体)，而且可适于检测和/或鉴定不同类型的抗原和抗体。通过将分别连接所关注的抗体或抗原的抗原或抗体固定在珠表面上，本领域技术人员将能够根据待检测和/或鉴定的所关注的抗体或抗原来使本发明的体外装置相适应。因此，术语“抗体”在本文中以最广义使用，并且特别地涵盖任何同种型的单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)，例如igg、igm、iga、igd和ige、多克隆抗体、多特异性抗体、嵌合抗体和抗原结合片段。与特定的抗原反应的抗体可通过重组方法产生，例如在噬菌体或类似载体中选择重组抗体的库，或通过用抗原或编码抗原的核酸使动物免疫。典型的抗体包括通过二硫键连接的两个相同的轻链和两个相同的重链。在本发明的含义中，术语“轻链”是指具有两个连续域(结构域)(一个恒定域和一个可变域)的哺乳动物免疫球蛋白轻链lambda(λ)或kappa(κ)。术语“重链”是指表示为：α、δ、ε、γ和μ的哺乳动物免疫球蛋白的链。在这五类中，免疫球蛋白也可根据重链(γ1，γ2，γ3，γ4，α1和α2)分布在亚类(igg1，2，3或4，iga1或2)中。每个重链具有两个区，恒定区和可变区。恒定区在相同同种型的所有抗体中都相同。每个重链的可变区由单个ig域组成。抗体的“可变区”是指抗体的重链或轻链的氨基末端域。重链的可变域可称为“vh.”轻链的可变域可称为“vl.”这些域通常是抗体的变化最大的部分，并且含有抗原结合位点。每个可变区含有三个片段，称为“互补决定区”(“cdr”)或“高变区”，其主要导致结合抗原的表位。因此，cdr指导抗体结合的特异性。它们通常被称为cdr1、cdr2和cdr3，从n端开始顺序编号。可变区的最高度保守的部分被称为“框架区”。在本发明的一个实施方案中，在本发明中使用的抗体，特别是固定或吸附在珠表面上的抗体是多克隆抗体。“多克隆抗体”是在一种或多种其他不同抗体之间或在其存在下产生的抗体。通常，多克隆抗体由b淋巴细胞在几种产生不同抗体的其他b淋巴细胞的存在下产生。通常，多克隆抗体直接得自免疫的动物。根据另一个实施方案，在本发明中使用的抗体，特别是固定或吸附在珠表面上的抗体是单克隆抗体。如本文所使用，术语“单克隆抗体”是指源自几乎同质的抗体群体的抗体。更特别地，群体中的单个抗体是相同的，除了可以最小比例发现的少数可能的天然突变。换句话说，单克隆抗体由源自单细胞克隆(例如杂交瘤、用编码同质抗体的dna分子转染的真核宿主细胞、用编码同质抗体的dna分子转染的原核宿主细胞等)的生长产生的同质抗体群体组成，并且通常特征在于一个和仅一个类别和亚类的重链和仅一种类型的轻链。单克隆抗体具有高度特异性，并且针对单一抗原。如本文所使用，“嵌合抗体”是这样的抗体，其中恒定区或其一部分被改变、替换或交换，使得可变区与不同种的，或者属于另一个抗体类别或亚类的恒定区连接。如本文所使用，“抗原结合片段”是抗体上与抗原结合的区。其由重链和轻链各自的一个恒定域和一个可变域组成。根据本发明的一个优选的实施方案，抗体选自抗红血细胞抗体、抗血小板抗体、针对病毒抗原的抗体、针对细菌抗原的抗体和针对寄生虫抗原的抗体，优选选自抗红血细胞抗体或抗血小板抗体。如本文所使用，术语“抗血小板抗体”或“血小板抗原的抗体”涉及针对一种或多种血小板抗原的一种或多种抗体。优选地，在本发明中使用的血小板抗原的抗体可为纯化的或半纯化的单克隆抗体、纯化的或半纯化的多克隆抗体或抗血清。如本文所使用，术语“针对病毒抗原的抗体”涉及一种或多种针对病毒抗原的抗体，所述抗体是在个体感染时产生的。优选地，在本发明中使用的针对病毒抗原的抗体可为纯化的或半纯化的单克隆抗体、纯化的或半纯化的多克隆抗体或抗血清。通过本发明的体外装置检测和/或鉴定的抗病毒抗体可选自这样的抗体，所述抗体针对对以下具有特异性的抗原：奇昆古尼亚热，巨细胞病毒，登革热，埃博拉，ebv，脑炎，猫白血病病毒，汉坦病毒，甲型肝炎，乙型肝炎，丙型肝炎，丁型肝炎，戊型肝炎，疱疹，hiv，htlv，流感拉沙(influenzalassa)，麻疹，腮腺炎，诺如病毒，乳头瘤病毒细小病毒，风疹，sars，水痘，西尼罗病毒和寨卡。特别地，对于输血安全，检测针对hiv、htlv乙型肝炎或丙型肝炎的抗体是强制性的。特别地，本发明的体外装置用于检测和/或鉴定hiv、乙型肝炎和丙型肝炎，更特别是乙型肝炎。如本文所使用，术语“针对细菌抗原的抗体”涉及一种或多种针对细菌抗原的抗体，所述抗体是在个体感染时产生的。优选地，在本发明中使用的针对细菌抗原的抗体可为纯化的或半纯化的单克隆抗体、纯化的或半纯化的多克隆抗体或抗血清。这些抗体可为多克隆或单克隆抗体，特别是本领域技术人员众所周知的单克隆抗细菌抗体。例如，这样的抗体可选自革兰氏阳性或革兰氏阴性细菌，特别地选自疏螺旋体属(borrelia)、衣原体(chlamydia)、幽门螺杆菌(helicobacterpylori)、支原体(mycoplasma)、伤寒沙门氏菌(s.typhi)、耶尔森菌属(yersinia)、变形杆菌属(proteus)、假单胞菌属(pseudomonas)、埃希菌属(escherichia)、克雷伯氏菌属(klebsiella)、不动杆菌属(acinetobacter)、梭菌属(clostridium)、沙雷氏菌属(serratia)、丙酸杆菌属(propionibacterium)、葡萄球菌属(staphylococcus)、芽孢杆菌属(bacillus)、密螺旋体属(treponema)和肠球菌属(enterococcus)。特别地，抗细菌抗体是针对密螺旋体属、特别是导致梅毒的梅毒螺旋体的特异性抗原的。如本文所使用，术语“针对寄生虫抗原的抗体”涉及一种或多种针对寄生虫抗原的抗体，所述抗体是在个体感染时产生的。优选地，在本发明中使用的针对寄生虫抗原的抗体可为纯化的或半纯化的单克隆抗体、纯化的或半纯化的多克隆抗体或抗血清。在本发明中使用的抗寄生虫抗体选自弓形体属(toxoplasma)、锥虫属(trypanosoma)、疟原虫属(plasmodium)。特别地，抗体是针对导致恰加斯氏病的克鲁兹锥虫(trypanosmacruzi)的特异性抗原的。更特别地，抗体是针对疟原虫属，优选针对导致疟疾的恶性疟原虫(plasmodiumfacliparum)的。如本文所使用，术语“抗免疫球蛋白”涉及针对一种或多种免疫球蛋白例如igg、igm、iga、igd和ige的抗体。如本文所使用，术语“抗红血细胞抗体”或“红血细胞抗原的抗体”涉及针对一种或多种红血细胞抗原的一种或多种抗体。优选地，在本发明中使用的红血细胞抗原的抗体可为纯化的或半纯化的单克隆抗体、纯化的或半纯化的多克隆抗体或抗血清。也可使用凝集素或凝集素(lectins)。以下是在本发明中使用的抗体和抗原的非穷举列表：*多克隆抗体表1：红血细胞抗原和抗体的非穷举列表以上列出的大多数抗体可从申请人diagast购买。根据本发明的一个实施方案，固定或吸附在珠表面上的抗体是选自表1中的抗体中的任何一种的抗红血细胞抗体。例如，抗红血细胞抗体可选自抗体anti-a、anti-b、anti-ab、anti-d、anti-rh2、anti-rh3、anti-rh4、anti-rh5和anti-kell、anti-mns(mns1、2、3和4)、anti-jk(jk1，jk2)、anti-fy(fy1，fy2)、anti-le(le1，le2)、anti-lu(lu1，lu2)和anti-p1pk。在本发明的上下文中，术语“抗原”涉及抗体可选择性结合的预定分子。靶抗原可为多肽、碳水化合物、核酸、脂质、半抗原、糖蛋白或糖脂或任何其他天然存在或合成的化合物。优选地，靶抗原是多肽，糖蛋白或糖脂。根据本发明的一个优选的实施方案，抗原选自红血细胞抗原(如表1中所列)、血小板抗原、病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原，更优选选自红血细胞抗体或病毒抗原。优选地，在本发明中使用的抗原可为纯化的或半纯化的天然抗原、重组或合成抗原。如本文所使用，术语“病毒抗原”涉及具有多种抗原性的抗原，其是菌株特异性的并且与病毒颗粒紧密相关。该抗原可为天然或重组蛋白。病毒抗原可例如选自对对以下具有特异性的抗原：奇昆古尼亚热，巨细胞病毒，登革热，埃博拉，ebv，脑炎，猫白血病病毒，汉坦病毒，甲型肝炎，乙型肝炎(hbsag)，丙型肝炎(hcsag)，丁型肝炎，戊型肝炎，疱疹，hiv，htlv，流感拉沙(influenzalassa)，麻疹，腮腺炎，诺如病毒，乳头瘤病毒细小病毒，风疹，sars，水痘，西尼罗病毒和寨卡。特别地，本发明涉及抗原hbsag和hcsag的鉴定和/或检测，因为它们对于输血安全是强制性的，更特别是对于hbsag。如本文所使用，术语“细菌抗原”涉及在细菌有机体的表面上发现的分子。细菌抗原可选自细菌菌株中的任何一种，但是优选选自疏螺旋体属(borrelia)、衣原体(chlamydia)、幽门螺杆菌(helicobacterpylori)、支原体(mycoplasma)、伤寒沙门氏菌(s.typhi)、耶尔森菌属(yersinia)、变形杆菌属(proteus)、假单胞菌属(pseudomonas)、埃希菌属(escherichia)、克雷伯氏菌属(klebsiella)、不动杆菌属(acinetobacter)、沙雷氏菌属(serratia)、梭菌属(clostridium)、丙酸杆菌属(propionibacterium)、葡萄球菌属(staphylococcus)、芽孢杆菌属(bacillus)和肠球菌属(enterococcus)。特别地，导致梅毒的梅毒螺旋体的特异性抗原可被检测和/或鉴定，或者可被固定和/或吸附在珠表面上。如本文所使用，术语“寄生虫抗原”涉及在寄生虫细胞的表面上发现的分子。寄生物可如上所定义。优选地，寄生虫抗原选自对弓形体属(toxoplasma)、锥虫属(trypanosoma)、疟原虫属(plasmodium)具有特异性的抗原，更优选对疟原虫属、特别是对于引起疟疾的恶性疟原虫(plasmodiumfalciparum)具有特异性的抗原。以下表2中给出了针对病毒、细菌和寄生虫抗原的抗原和抗体的非穷举列表：表2：针对病毒、细菌和寄生虫抗原的抗原和抗体的非穷举列表如本文所使用，术语“血小板抗原”涉及与在血小板的表面处存在的所有免疫原性分子有关的血小板的抗原，在需要时能够引起针对这些分子的抗体的产生和/或允许其识别。血小板抗原可选自例如双等位基因抗原hpa-1、-2、-3、-4、-5和-15。如本文所使用，术语“红血细胞抗原”(也被称为血型抗原)涉及在红血细胞的表面处存在的所有免疫原性分子，在需要时能够引起针对这些分子的抗体的产生和/或允许其识别。红血细胞抗原包括混合场群体抗原。表1中示出了红血细胞抗原的非穷举列表。如本文所使用，术语“混合场群体”涉及具有不同抗原的两个红血细胞群体，其在用提供者和接受者之间的相容性红血细胞输血(在a或b患者中输注o红血细胞)之后或在骨髓移植之后可观察到。本发明的体外装置允许检测具有混合场群体的样品。如本文所使用，术语“体内致敏的红血细胞”涉及免疫球蛋白(igg)或补体(c3d)在体内结合至其膜表面的红血细胞。体内致敏的红血细胞可出现在不同的临床溶血状况中，包括溶血性输血反应、胎儿和新生儿的溶血性疾病(hdfn)、自身免疫性溶血性贫血(aiha)以及患者体内的药物诱导抗体。根据本发明的另一个实施方案，所述抗体和/或抗原直接或间接固定或吸附在珠表面上。当前有几种将生物配体附着至在免疫学测试和分析中用作固相支持物的珠的方法，包括吸附至简单的(平的)聚合物珠、共价附着至表面官能化(functionalized，功能化)的微球。吸附机理主要基于吸附的配体的疏水部分和珠的聚合物表面之间的疏水(范德华力、伦敦型)吸引力。这是主要由共价偶联来固定生物分子所组成的方法(当需要非常活跃和稳定的珠试剂时)，而间接固定是通过共价固定或吸附在珠上的抗免疫球蛋白(例如抗人球蛋白(ahg))介导的，所述珠捕获针对所关注的抗原的第二种抗体。当抗体和/或抗原直接固定或吸附在珠表面上时，其是通过使珠与抗体和/或抗原接触来进行的。例如，含有抗体和/或抗原的溶液可为非变性缓冲液，其包含稳定在ph4和ph10之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、甚至更优选在ph7和ph7.5之间的ph溶液。抗体可被共价连接或吸附。抗体溶液选自培养物上清液或上清液的浓缩物、纯化的抗体、半纯化的或富集的抗体。抗原溶液选自纯化的或半纯化的天然抗原、重组或合成抗原。可将抗体和/或抗原添加至旨在维持其微生物学稳定性(例如叠氮化钠、抗生素)的佐剂，及其构象稳定性的佐剂例如糖(蔗糖，葡萄糖，海藻糖)，以及本领域技术人员已知的执行这些功能的任何其他试剂。根据一个实施方案，珠表面包含选自醛基、氯甲基、nhs基团和羧基的至少一种化学基团。特别地，当珠表面包含醛基时，该基团与抗体的氨基反应，其允许将针对待测定和/或待鉴定的抗原的抗体或用于间接固定(如下所述)的抗体直接固定至珠的表面。在固定抗原的情况下，该基团与抗原的氨基反应，其允许直接固定由待测定和/或待鉴定的抗体识别的抗原。在另一个特别的实施方案中，珠表面包含nhs基团或也被称为n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)官能团，优选其包含nhs-酯官能团。根据本发明的另一个实施方案，针对待测定和/或待鉴定的抗原或针对已知抗原的抗体可通过另一种抗体(例如抗免疫球蛋白)间接固定至珠表面。这样的抗免疫球蛋白优选针对免疫球蛋白，更优选igm或igg。在这种情况下，如果珠表面含有醛基，则抗免疫球蛋白的氨基与醛基反应，以这种方式将抗免疫球蛋白固定至珠表面。然后将针对待测定和/或待鉴定的抗原的抗体通过蛋白质/蛋白质相互作用固定至抗免疫球蛋白。根据又一个实施方案，可通过选自对抗体具有亲和性的蛋白质(例如蛋白质a，蛋白质g和/或蛋白质l)的配体将针对待测定和/或待鉴定的抗原或已知抗原的抗体间接固定至珠表面。放置在本发明的体外装置的多孔膜上的珠可由不同类型的材料(例如玻璃、聚合物，特别是胶乳)执行。优选地，珠选自玻璃珠、cooh官能化的聚苯乙烯珠、蛋白质a/g和/或l官能化的琼脂糖珠、nhs官能化的琼脂糖珠、环氧官能化的珠、氯甲基官能化的胶乳珠或醛官能化的珠。更优选地，珠是胶乳珠，特别是醛官能化的胶乳珠。根据一个实施方案，所述珠以占沉积在多孔膜的亲水化反应区域上的溶液的1％至10％、优选1％至5％、更优选2％至6％或1％至3％、甚至更优选3％的浓度使用，所述溶液的沉积体积在1和100μl之间，优选在1和50μl之间，更优选在5和50μl之间，并且甚至更优选在1和10μl之间或5和10μl之间。根据疏水多孔膜的孔的尺寸选择珠的尺寸。珠的尺寸必须大于多孔膜的孔的尺寸，以避免珠在多孔膜中的吸收。然而，为了避免凝集现象，珠的尺寸不必非常重要。技术人员将能够根据多孔膜的孔的尺寸来选择珠的尺寸。在本发明的一个优选的实施方案中，珠的尺寸在1μm和130μm之间，优选在5μm和20μm之间并且其更优选为9μm。根据本发明的体外装置的一个实施方案，多孔膜的厚度在0.4mm和2mm之间，优选在0.6mm和1.5mm之间。疏水多孔膜可包含不会被水性溶剂改变的任何材料。该材料可尤其选自经过化学改性或未经化学改性的天然聚合物，例如硝化纤维素聚合物、纤维素，或选自合成聚合物例如聚乙烯、高密度聚乙烯(hdpe)或氟化聚合物例如聚偏氟乙烯(pvdf)，优选聚乙烯。这些聚合物可被或不被能够与随后使用的捕获剂产生连接的试剂基团官能化。疏水多孔膜包括至少一个亲水反应区域，在其上沉积珠。反应区域的表面小于疏水多孔膜的表面，即膜不能完全被亲水化。优选通过局部添加表面活性剂使多孔膜的亲水反应区域(一个或多个)亲水，而不通过对疏水多孔膜进行先前的化学或物理处理来对多孔基底的化学功能进行改变(modification，改性)。在本发明的上下文中，术语“表面活性剂”意指任何亲水化剂，即能够以足以这样的方式使疏水膜亲水的任何物质，即使含有被检测的分析物的样品通过毛细作用穿过。所使用的表面活性剂可选自天然表面活性剂、经化学改性或通过化学合成获得的天然表面活性剂。优选地，其是非离子表面活性剂，例如tritonx-100、tween20或皂苷、聚氧乙烯或壬基-β-d葡萄糖苷。表面活性剂可以在0.01和5％之间(重量/体积)的浓度稀释在水溶液或有机溶剂(例如乙醇)中。优选地，用于使膜局部亲水的表面活性剂以在0.1％和3％之间、更优选在0.5和2％之间并且甚至更优选在0.5和1％之间(重量/体积)的浓度使用。为了使疏水多孔膜亲水化，将0.1至5μl、优选0.3至3μl、更优选0.5至2μl的含有表面活性剂的溶液沉积在膜上。因此，根据一个实施方案，疏水多孔膜的亲水反应区域被表面活性剂赋予亲水性，表面活性剂优选以溶液的0.01至5％w/v、更优选0.1％至3％w/v、甚至更优选0.5％至2％w/v的浓度使用，并且其中将0.1至5μl、优选0.3至3μl并且更优选0.5至2μl的含有表面活性剂的所述溶液放置在疏水多孔膜上。所使用的表面活性剂的浓度(其与膜的其他特性(特别是孔隙率和厚度)相关)控制通过膜的流体的运动速度。通常认为，为了使旨在接受捕获元素的膜亲水，对于tritonx-100不需要超过0.1％的最大剂量和对于tween不需要超过0.05％的最大剂量。但是由于根据本发明的膜的特别的特性，能够使该膜局部亲水的清洁剂可使用最高达5％，优选最高达3％，尤其是对于tritonx-100或tween-20，而不会破坏该区域的反应性，这使膜的亲水化更加容易。同一疏水膜可包括几个亲水反应区域，条件是这些区域不相交。反应区域可为所有几何形式，但优选为直径在0.3mm和20mm之间的圆形或斑点形式。反应区域可在多孔膜的整个厚度上和/或在表面处是亲水的。反应区域可具有单一的亲水化程度，即反应区域具有相同的亲水化程度。根据一个实施方案，反应区域可包括几个具有不同的亲水化程度的区域。例如，反应区域可包括两个亲水区域，其中在反应区域的中心处比在周边处的亲水化程度更高。这些亲水区域优选仅在膜的表面处。反应区域还可包括两个亲水化程度不同的亲水区域，一个在表面处，而另一个在厚度中。在反应区域包括两个亲水区域的情况下，已经用两种不同的表面活性剂使反应区域亲水，而没有通过对多孔膜进行先前的化学或物理处理来对多孔基底的化学功能进行改变。有利地，当检测来自血液或血液成分样品的混合场群体时，具有两个具有不同的亲水化的区域的反应区域的配置，特别是在表面处，是有用的。该配置还特别适于检测和/或鉴定待测试的样品中的特定的抗体和/或抗原。根据一个实施方案，本发明的体外装置可包括布置在多孔膜下方的吸收剂层(或也称为吸收剂膜)。该层吸收沉积在反应区域的水平处的液体，所述液体不被多孔膜保留，特别是当反应区域在膜的整个厚度上都是亲水的时。吸收剂层可包括能够通过毛细作用被动吸收的材料，例如吸收纸，纤维素等，或者由吸收性聚合物制成。举例来说，可列举以下产品用作吸收剂层：-c048、c068、c083、c248(merck)-cf3、cf4、cf10、grade470、cf5、cf6、cf7、grade900、grade300-grades601、642、631、238、237、222、243、320(munktell)-pallgrades111、113、133、165、197、8975、8964、8301(pallcorporation)，直接收集、存储和有效快速释放生物样品以进行临床诊断的膜ultra-cleanis超吸收垫。-mcarlaidt-499、scp-300-tcf、t-089、t-183-5和scp-200-tcf必须选择吸收膜的组成及其尺寸，使得其可吸收在测试期间使用的所有溶液(以μl表示的v全部)。每个膜的特征在于吸收能力(以μl/cm2表示的c)，选择膜及其尺寸(以cm2表示的d)以满足以下方程式：d>v全部/c。根据一个实施方案，本发明的体外装置还包括至少另一个层，其布置在多孔疏水膜和吸附层之间，所述层由排放(draining，排水，排干)材料制成。排放材料为例如棉絮、na7150pes、nt9610hy、nt9750hynv170f、nv250f、nv340f、(subrenat)或packtexhy050b。多孔膜以及任选地吸收剂层和排放层被布置在装置的支持物中。根据本发明的体外装置的支持物优选为刚性支持物。其可例如是外壳。支持物优选包括不让液体逸出的刚性材料。其可特别地为塑料材料，例如聚丙烯、聚乙烯、聚苯乙烯、丙烯腈-丁二烯-苯乙烯、聚对苯二甲酸乙二酯、聚碳酸酯、聚酰胺、聚氯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯。本发明的体外装置的支持物优选包括两个部分，在其上设置有疏水多孔膜、排放层和吸收剂层的下部以及覆盖该下部的上部。优选地，在支持物的下部的表面上布置吸收剂层，在其上布置疏水多孔膜。更优选地，在吸收剂层和多孔膜之间布置有排放层。甚至更优选地，在支持物的下部的表面上布置有泡沫体层，在其上沉积吸收剂层，然后排放层，在其上沉积包括至少一个(atleaston)亲水反应区域的疏水多孔膜，所述亲水反应区域的表面小于膜的表面，并且在反应区域上沉积有珠，所述珠具有固定和/或吸附在其表面上的抗体(图1a和b)。支持物的上部覆盖下部例如疏水多孔膜，并且其他层中的任何一层或全部，当它们存在于支持物中时，可被包封在支持物中。支持物的上部优选包括至少一个或多个开口。该开口(一个或多个)对应于沉积在亲水反应区域上的样品的收集区域。亲水区域可具有与开口的底部相同的尺寸，较小或较大(的相同的尺寸)，条件是两个亲水区域始终被膜上的疏水区域隔开。收集区域的尺寸必须使得其至少可含有最大体积的沉积在反应膜上的待测试的反应混合物或样品。根据一个实施方案，如果本发明的体外装置的不同部分作为套件供应，则它们可由用户组装。该装置可以一件供应。如上所述，本发明的体外装置还可检测和/或鉴定抗体。根据一个实施方案，通过固定和/或吸附在珠表面上的特定的已知抗原的结合来进行抗体的检测。在生物流体样品中待鉴定和/或待测定的抗体可特异性地结合已知抗原。该结合的检测允许检测特异性地针对所述抗原的抗体。根据本发明的另一个实施方案，抗体的检测可通过将抗免疫球蛋白(抗体)固定或吸附在珠表面上来进行，所述抗免疫球蛋白是能够结合存在于待测试的样品中的其他抗体(待检测和/或鉴定)的抗免疫球蛋白。然后通过使用显示剂(例如特异性结合该抗体的标记抗原)来检测和/或鉴定第二抗体。根据本发明的另一个实施方案，抗体的检测可通过将对抗体具有亲和性的蛋白质固定或吸附在珠表面上来进行，所述蛋白质能够结合存在于待测试的样品中的抗体(待检测和/或鉴定)。然后通过使用显示剂(例如特异性结合该抗体的标记抗原)来检测和/或鉴定抗体。在一个实施方案中，当测定和/或鉴定抗红血细胞抗体时，珠固定或吸附抗免疫球蛋白(anti-igg和/或anti-igm)，其会捕获血液样品、尤其是血清或血浆中的循环的抗红血细胞抗体。这些抗体的显示和鉴定可使用携带相应抗原的红血细胞进行。在一个实施方案中，当测定和/或鉴定抗红血细胞抗体时，珠固定或吸附抗免疫球蛋白(anti-igg和/或anti-igm)，其会捕获存在于体内致敏的红血细胞的表面处的抗红血细胞抗体。这些抗体的显示和鉴定通过体内致敏的红血细胞本身进行。在一个实施方案中，珠固定或吸附anti-c3d抗体，其会捕获体内补体敏化的红血细胞，所述体内补体敏化的红血细胞由通过igm型抗红血细胞抗体的体内固定来激活补体而产生。这些抗体的显示和鉴定通过体内致敏的红血细胞本身进行。相同的原理可应用于针对病毒、细菌或寄生虫抗原的抗体，这些抗体在怀疑被感染的所测试的个体的血液中循环，使用例如不同的显示体系，例如与相应的抗原或抗体偶联的第二组有颜色的珠，所述抗原或抗体与酶(例如辣根过氧化物酶)或与胶体金纳米颗粒结合(缀合，conjugated)。本发明的体外装置旨在测定和/或鉴定来自生物流体样品的抗原和/或抗体。在本发明的上下文中，术语“生物流体样品”涉及从由生命有机体产生的生物有机流体中获得的任何样品。生物流体选自细胞外流体、血管内流体、间质流体、淋巴液和跨细胞流体。特别地，生物流体样品选自血液和血液成分、尿液、唾液等。在更优选的实施方案中，生物流体样品是血液样品或血液成分样品。“血液样品”或“血液成分样品”意指总血液或其成分之一，尤其选自红细胞部分、白细胞部分、血小板、血浆或血清。特别地，当本发明的体外装置用于检测和/或鉴定红血细胞抗原和/或针对这些抗原的抗体时，样品是血液样品或血液成分样品。特别地，当本发明的体外装置用于检测和/或鉴定病毒、细菌或寄生虫抗原和/或针对这些抗原的抗体时，样品是血液样品或血液成分样品。如上所述的样品可获自任何有机体，特别地获自哺乳动物并且更特别地获自人类。优选的实施方案以上已经在与该元件具体相关的部分中描述了与根据本发明的体外装置的各种一般元件相对应的各种优选的特定特征。在本发明的上下文中，对于特定元件的适当特征的每个列表和对于特定元件公开的每个特定特征可与任何其他一般元件、对于所述其他元件的适当特征的列表或对于所述其他元件公开的任何特定特征组合。特别地，根据本发明的体外装置的元件的优选的实施方案可与任何其他一般元件或与所述其他元件的优选的实施方案组合。优选的实施方案对应于其中至少一个元件限于优选的实施方案的那些，如以下表3中所列：表3.根据本发明的体外装置的各种元件的优选的实施方案·本发明的体外装置的用途(使用)本发明的体外装置可用于确定和/或鉴定来自生物流体样品的抗原和/或抗体。如上所述，取决于固定在或吸附在珠表面上的抗体和/或抗原，该装置适合于检测和/或鉴定任何抗原和/或任何抗体。发明人进行了研究以证明本发明的体外装置适合于与固定在具有结构差异的珠表面上的抗体一起使用，例如针对血细胞抗原的抗体和针对至少一种(atleaston)对病毒、细菌或寄生虫具有特异性的抗原的抗体。例如，所测试的抗体是针对hcv(hcsag)或hbv(hbsag)抗原的抗体，其分别引起丙型和乙型肝炎，所述抗体可固定或吸附在珠表面以分别检测和/或鉴定所列举的抗原。优选地，所述抗体是针对抗原hbv(hbsag.)的抗体特别地，发明人证明了本发明的体外装置可用于检测和/或鉴定来自生物流体、特别是来自血液样品或血液成分样品的红血细胞、病毒、细菌和寄生虫的抗原和/或抗体。根据另一方面，本发明因此涉及根据本发明的体外装置的用途，其用于测定和/或鉴定：-至少一种抗原，其选自包括混合场群体(mixed-fieldpopulation)的红血细胞抗原、血小板抗原、病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原；-来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品的至少一种选自抗红血细胞抗体、抗血小板抗原、抗病毒抗体、抗细菌抗体和抗寄生虫抗体其来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品。如上所述，取决于固定或吸附在珠表面上的抗体或抗原的类型，本发明的体外装置可检测和/或鉴定不同类型的抗原或抗体。特别地，本发明的体外装置用于检测和/或鉴定包括红血细胞抗原、血小板抗原、病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原的组的抗原。更特别地，该装置用于检测和/或鉴定红血细胞抗原。本发明的体外装置可尤其用于测定和/或鉴定(或还有表型分析)红血细胞，即测定其表面处的抗原。红血细胞的表型分析通常意味着测定和/或鉴定血型。在本发明的上下文中，术语“血型”涉及例如选自abo、d、rh、kell、mns、jk(kidd)、fy(duffy)、le(lewis)、lu(lutheran)、p1pk系统的血型。本发明的体外装置还用于检测和/或鉴定选自抗红血细胞抗体或也称为抗血细胞抗体的抗体，其包括自身抗体、同种异体抗体、异种抗体和冷抗球蛋白。特别地，这些抗体自血液样品或血液成分样品中被检测和/或鉴定。本发明的体外装置可尤其用于：-simonin-michon测试，其鉴定anti–a(anti-abo1)或anti–b(anti-abo2)抗体的存在；-通过间接抗球蛋白测试，从搜索同种异体抗体、自身抗体、异种抗体或甚至冷凝集素方面来搜索或鉴定针对细胞抗原特别是红血细胞的抗体；-通过进行交叉匹配反应来搜索提供者的红血细胞和接受者的血液之间的相容性；-通过直接抗球蛋白测试来搜索体内固定在红血细胞上的抗体。如本文所使用，术语“同种异体抗体”涉及由个体产生的与来自相同物种的遗传不同的个体的一种或多种抗原反应的一种或多种抗体。这些同种异体抗体是在输血之后、在怀孕期间、在移植(transplantation)或移接(移植，graft)之后通过免疫产生的。如本文所使用，术语“自身抗体”涉及由个体产生的针对同一个体的一种或多种抗原的一种或多种抗体。自身抗体的检测优选在输血之后或在溶血性贫血的情况下(自身免疫，药物诱导或在输血之后)进行。如本文所使用，术语“异种抗体”涉及由个体产生的针对其他物种的一种或多种抗原的一种或多种抗体。如本文所使用，术语“冷凝集素”涉及在低温下引起红血细胞凝集的抗体。如本文所使用，术语“交叉匹配反应”涉及在输血之前进行的以测定提供者的红血细胞是否与预期接受者的血液或血浆相容的测试。通过体外装置检测和/或鉴定的抗病毒、抗细菌和抗寄生虫抗体是在个体感染时针对病毒、细菌或寄生虫抗原产生的免疫抗体。本发明的体外装置还可用于通过测定一种或多种病毒、细菌或寄生虫抗原的存在来检测病原体的存在。·本发明的方法本发明的体外装置特别适合于在体外方法中使用，所述体外方法用于检测和/或鉴定选自包括混合场群体的红血细胞抗原、体内致敏的红血细胞(也称为c3d-阳性细胞)、血小板抗原、病毒抗原、细菌抗原、寄生虫抗原的抗原，或用于检测和/或鉴定抗红血细胞抗体，包括体内致敏的红血细胞(igg阳性细胞)，和/或抗血小板抗体和/或针对病毒、细菌和寄生虫抗原的抗体，所述针对病毒、细菌和寄生虫抗原的抗体在个体被感染时存在于血液中针对病毒、细菌或寄生虫抗原而产生。根据另一方面，本发明因此涉及一种检测和/或鉴定来自血液样品或血液成分样品的包括混合场群体的红血细胞抗原，和/或体内致敏的红血细胞(c3d-阳性细胞)和/或血小板抗原的体外方法，其包括以下步骤–在根据本发明的体外装置的反应区域上添加含有所述样品的溶液，和-在清洗前读数当作样品装载对照；-将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-如果在反应区域中出现红色或粉红色斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的存在来测定所述抗原或血细胞的存在，或如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的不存在来测定所述抗原或血细胞的不存在。根据一个实施方案，在将待测试的样品沉积在包括珠的反应区域上之前，可借助于缓冲溶液进行已经经过亲水化的反应区域的水合。该缓冲液可包括稳定的ph在ph6和ph8.5之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、特别地在ph7和ph7.5之间并且渗透压在250mosm和800mosm之间、优选在300mosm和600mosm之间的溶液。该溶液可任选地含有低浓度的表面活性剂(0.01至0.05％m/v的tween20)、饱和剂(bsa)和/或能够使抗原-抗体反应具有潜力(potentializing，势能)的试剂。缓冲液可任选地具有蛋白酶活性，例如通过添加酶例如木瓜蛋白酶或菠萝蛋白酶获得。该缓冲液可任选地含有聚阳离子剂例如聚凝胺或聚赖氨酸(polylysin)，以使反应具有潜力并且保持红血细胞与捕获元件较长的接触。因此，以上体外方法任选地包括在添加所测试的样品之前使多孔膜水合的步骤。根据另一个实施方案，以上体外方法还包括另一个任选的步骤，即将待被表型分析的红血细胞稀释在缓冲溶液中，特别是已知有利于免疫血液学反应的缓冲溶液中，所述缓冲溶液任选地含有添加剂，例如包括稳定的ph在ph6和ph8.5之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、特别地在ph7和ph7.5之间并且渗透压在250mosm和800mosm之间、优选在300mosm和600mosm之间的溶液的缓冲液。该溶液可任选地含有低浓度的清洁剂(尤其是0.01至0.05％m/v的tween20)、饱和剂(例如bsa)和/或能够使抗原-抗体反应具有潜力的试剂。该缓冲液可任选地具有蛋白酶活性，例如通过添加酶例如木瓜蛋白酶或菠萝蛋白酶获得。该缓冲液可任选地含有聚阳离子剂例如聚凝胺或聚赖氨酸，以使反应具有潜力并且保持球与捕获元件较长的接触。根据又一个实施方案，上述本发明的方法任选地包括一个另外的步骤，即在将所测试的样品沉积在反应区域之前，将所测试的样品优选在15和40℃之间、特别是在18℃和37℃之间的温度下培育2sec至30min并且特别是1min至20min的时间。类似地，为读取结果，必须进行缓冲液清洗的步骤。洗涤缓冲液优选包含pbs、tbs或ph在2和10之间、优选在5和9之间的盐溶液。必须控制缓冲液的渗透压，以避免红血细胞的溶血(haemolysis，溶解)。必须选择缓冲液，以免使直接或间接固定至捕获剂(固定和/或吸附在珠表面上的抗体)的显示剂或有色分析物脱离。出人意料地，对于根据本发明的体外装置的使用，优选使用通过盐试剂(例如nacl)或非离子渗透剂(例如甘氨酸或牛磺酸)的存在而获得的轻度高渗洗涤溶液(即在300mosm和800mosm)之间。该缓冲液可任选地用与显示剂的颜色形成对比的颜色来着色。例如，如果显示剂是红血细胞，则洗涤缓冲溶液可被染成蓝色或绿色。还可向洗涤溶液添加低剂量的表面活性剂以消除背景噪音。这些表面活性剂优选是非离子表面活性剂，并且特别是糖的酯，尤其是脱水山梨糖醇的聚氧乙烯酯(tween)。在使用体外装置期间，尤其可借助于移液器系统或毛细管复制系统来沉积液体。在所述体外方法中，根据本发明的体外装置的多孔膜的反应区域的亲水化可为厚度亲水化，即在多孔膜的整个厚度上进行的亲水化。亲水化可借助于tritonx100的水溶液进行，所述tritonx100的水溶液的浓度在0.01％m/v和5％m/v之间，优选在0.1％m/v和3％w/v之间，优选在0.5％m/v和2％m/v之间，体积在0.1μl和5μl之间，优选在0.3μl和3μl之间并且更优选在0.5μl和2μl之间。在一些应用中，当使用triton时，多孔膜的亲水化可为部分的，也就是说，没有在膜的整个厚度上进行。如果样品中存在的红血细胞携带被固定或吸附在珠表面上的特异性(特定)抗体识别的抗原(红血细胞的抗原或固定在体内致敏的红血细胞上的抗体)，则尽管进行清洗但红血细胞保持固定在设置在反应区域上的珠表面上，并且反应区域保持红色或粉红色。如果样品中存在的红血细胞不携带被固定或吸附在珠表面的抗体识别的抗原，则红血细胞被清洗液冲洗，并且反应区域保持无色。读取结果可为目视的或自动的。体内致敏的红血细胞的检测和/或鉴定允许检测吸附在红血细胞的表面处的自身抗体或同种异体抗体。特别地，该检测是基于使用与抗免疫球蛋白(anti-igg)或anti-c3d抗体(对于igm)偶联的珠，其通过固定在它们的膜上的igg或c3d(由igm诱导其形成)来捕获待测试的红血细胞。有利地，根据本发明的装置既不需要离心，也不需要搅动，也不需要抽真空，也不需要特别的(adhoc)装置。其也可完全自主地手动使用，并且可在自动操作装置上容易地实现自动化。此外，发明人还证明了本发明的体外装置可在检测和/或鉴定来自生物流体样品、特别是来自血液或血液成分样品的抗红血细胞抗体(同种异体抗体，自身抗体和冷凝集素)的体外方法中使用。本发明的另一方面因此涉及一种检测和/或鉴定来自血液样品或血液成分样品的抗红血细胞抗体的体外方法，其包括以下步骤：-将待测试的样品与缓冲液和表型已知的红血细胞测试物一起培育，-将混合物沉积在根据本发明的体外装置的反应区域上，-将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-如果在反应区域中出现红色或粉红色斑点，则通过测定抗体/抗原反应的存在来测定抗红血细胞抗体的存在，或如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定抗体/抗原反应的不存在来测定所述抗体的不存在。所述培育步骤可在能够使红血细胞聚集的试剂的存在下在4至40℃的温度下进行3至60min、优选5至30min的时间。技术人员将能够根据待检测和/或鉴定的抗体来确定温度在培育步骤中使用的缓冲液是低离子力的缓冲液，例如liss缓冲液(例如含有少于50mmnacl)。根据该方法的一个实施方案，添加能够使红血细胞聚集的试剂，例如可向在培育步骤中获得的混合物添加海地美溴铵(hexadimethrinebromide)的溶液，优选在溶液中浓度在0.01和2％之间(m/v)、甚至更优选在0.05和0.5％之间的海地美溴铵。海地美溴铵促进红血细胞聚集。根据检测和/或鉴定抗红血细胞抗体的方法的另一个实施方案，在沉积能够使红血细胞聚集的试剂之后，可将人抗球蛋白或抗补体试剂沉积在反应区域上。用于清洗反应区域的清洗溶液可为例如稳定的ph在ph6和ph8.5之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、优选在ph7和ph7.5之间并且渗透压在300mosm和800mosm之间的高渗盐溶液。该溶液可任选地含有低浓度的清洁剂(例如0.01至0.05％m/v的tween20)和与红色形成对比的颜色(蓝色或绿色)的染料。待沉积的样品可为血浆、血清或全血或血液成分，其稀释或未稀释在包括在ph6和ph8.5之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、特别地在ph7和ph7.5之间并且渗透压在250mosm和800mosm之间、优选在300mosm和600mosm之间的稳定的ph溶液的缓冲液中。该溶液可任选地含有低浓度的清洁剂(例如0.01至0.05％m/v的tween20)、饱和剂(尤其是bsa)和/或能够使抗原-抗体反应具有潜力的试剂。该缓冲液的盐度优选小于50mm的nacl。如果所测试的血浆中含有针对显示剂中存在的抗原(红血细胞测试物)的抗体，则反应区域中会出现红色(或粉红色)斑点。无色中心意味着不存在或无法检测到的剂量的针对显示剂中存在的抗原(红血细胞测试物)的抗体。读取结果可为目视的或自动的。本发明的另一方面进一步涉及一种检测和或鉴定来自血液样品或血液成分样品的抗血小板抗体的体外方法，其包括以下步骤：-将待测试的样品与缓冲液和抗原性已知的血小板测试物一起培育，或将接受者的血浆或血清与提供者的血小板一起培育，-将混合物沉积在根据本发明的体外装置的反应区域上，-将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-如果在反应区域中出现红色或粉红色斑点，则通过测定抗体/抗原相互作用的存在来测定抗血小板抗体的存在，或如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的不存在来测定所述抗体的不存在。本发明的体外装置还可在检测和/或鉴定选自病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原的不同类型的抗原的体外方法中使用。本发明的又一方面因此涉及一种检测和/或鉴定来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品的选自病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原的抗原的体外方法，其包括以下步骤：-任选地将待测试的样品与缓冲液一起培育，-在根据本发明的体外装置的反应区域上添加含有所述样品的溶液或样品与缓冲液的混合物，-任选地在清洗前读数当作样品装载对照；-任选地将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-优选地如果在反应区域中出现有颜色的斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的存在来测定所述抗原的存在，或优选地如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定抗原/抗体反应的不存在来测定所述抗原的不存在。所述培育步骤可在能够增加(提高)反应的试剂的存在下在4至40℃的温度下进行3至60min、优选5至30min的时间。技术人员将能够根据待检测和/或鉴定的抗体或抗原确定适当的温度。在培育步骤中使用的缓冲液是具有用于增加反应的分子的缓冲液。待沉积的样品可为生物流体，实例为：血浆、血清或全血或血液成分，其稀释或未稀释在包括在ph6和ph8.5之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、特别地在ph7和ph7.5之间并且渗透压在250mosm和800mosm之间、优选在300mosm和600mosm之间的稳定的ph溶液的缓冲液中。该溶液可任选地含有低浓度的清洁剂(例如0.01至0.05％m/v的tween20)、饱和剂(尤其是bsa)和/或能够使抗原-抗体反应具有潜力的试剂。该缓冲液的盐度优选小于50mm，以nacl计。用于清洗反应区域的清洗溶液可为例如稳定的ph在ph6和ph8.5之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、优选在ph7和ph7.5之间并且渗透压在300mosm和800mosm之间的高渗盐溶液。该溶液可任选地含有低浓度的清洁剂(例如0.01至0.05％m/v的tween20)。抗原/抗体相互作用的显示可优选通过使用与抗体或其他会与相应的病原体抗原相互作用的分子偶联的有颜色的珠或hrp(辣根过氧化物酶)来进行。技术人员将能够确定允许检测和/或鉴定所述抗原的其他标记方式。如果所测试的血浆中含有针对显示剂中存在的抗体的抗原，则反应区域中会出现无色斑点。无色中心意味着不存在或无法检测到的剂量的针对显示剂中存在的抗体的抗原。读取结果可为目视的或自动的。如上所述，还可使用本发明的体外装置检测和/或鉴定针对选自病毒、细菌或寄生虫抗原的抗原的抗体。实际上，在大多数情况下例如在输血期间测定病原体(病毒，细菌或寄生虫)的存在或不存在时，其通过测定和/或鉴定被感染的个体所产生的针对所述抗原的抗体来进行。这些抗体在本申请中还被提及为在个体感染时针对病毒、细菌或寄生虫抗原产生的免疫抗体。它们可在被感染的个体的血液中循环。因此，根据又一方面，本发明的体外装置还可在检测和/或鉴定针对在个体感染时产生的病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原的不同抗体的体外方法中使用。本发明的又一方面因此涉及一种检测和/或鉴定来自生物流体样品、优选来自血液样品或血液成分样品的选自针对病毒抗原、细菌抗原和寄生虫抗原的抗体的抗体的体外方法，优选地所述抗体是在感染时产生的，其包括以下步骤：-任选地将待测试的样品与缓冲液一起培育-在根据本发明的体外装置的反应区域上添加含有所述样品的溶液或样品与缓冲液的混合物，-任选地在清洗前读数当作样品装载对照；-任选地将清洗溶液沉积在反应区域上，以及-优选地如果在反应区域中出现有颜色的斑点，则通过测定抗原/抗体相互作用的存在来测定所述抗体的存在，或优选地如果在反应区域中出现无色斑点，则通过测定抗原/抗体反应的不存在来测定所述抗体的不存在。所述培育步骤可在能够增加反应的试剂的存在下在4至40℃的温度下进行3至60min、优选5至30min的时间。技术人员将能够根据待检测和/或鉴定的抗体或抗原确定适当的温度在培育步骤中使用的缓冲液是具有用于增加反应的分子的缓冲液。用于清洗反应区域的清洗溶液可为例如稳定的ph在ph6和ph8.5之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、优选在ph7和ph7.5之间并且渗透压在300mosm和800mosm之间的高渗盐溶液。该溶液可任选地含有低浓度的清洁剂(例如0.01至0.05％m/v的tween20)。待沉积的样品可为生物流体，实例为：血浆、血清或全血或血液成分，其稀释或未稀释在包括在ph6和ph8.5之间、优选在ph6.5和ph7.8之间、特别地在ph7和ph7.5之间并且渗透压在250mosm和800mosm之间、优选在300mosm和600mosm之间的稳定的ph溶液的缓冲液中。该溶液可任选地含有低浓度的清洁剂(例如0.01至0.05％m/v的tween20)、饱和剂(尤其是bsa)和/或能够使抗原-抗体反应具有潜力的试剂。该缓冲液的盐度优选小于50mm，以nacl计。如果所测试的血浆中含有针对显示剂中存在的抗原的抗体，则反应区域中会出现无色斑点。无色中心意味着不存在或无法检测到剂量的针对显示剂中存在的抗原的抗体。抗体/抗原反应的显示优选通过使用与抗体或会与相应的病原体抗原相互作用的分子偶联的有颜色的珠或hrp(辣根过氧化物酶)来进行。技术人员将能够确定允许检测和/或鉴定所述抗体的其他标记方式。读取结果可为目视的或自动的。附图说明图1：a.以透视图观察的根据本发明的体外装置的一个特别的实施方案的图，所述装置包括多孔膜，所述多孔膜包括反应区域，在所述反应区域上沉积有多个尺寸为9μm的珠，在珠表面上直接或间接固定或吸附有抗体或抗原。在膜下方示出了三个层，一个层是排放材料，一个层是吸收材料并且一个层是泡沫体。图1还示出了多孔膜的一部分的扫描电子显微镜(sem)图，该多孔膜包括珠和固定在其表面上的抗体。b.本发明的体外装置的一个特别的实施方案的示意图，所述装置包括支持物，在所述支持物上放置有多孔膜，所述多孔膜包括亲水化的反应区域，在其上沉积有多个珠，在珠表面上固定有抗体。在多孔膜下方示出了与图1a所示相同的层。图2：通过如wo2013/186482(图2a)中所述的体外装置和本发明的体外装置(图2b)用anti-abo01、anti-abo02、anti-abo03、anti-rh1、anti-rh2、anti-rh3、anti-rh4、anti-rh5、anti-kel1和阴性对照来检测红血细胞抗原的对比测试。图3：通过经由蛋白质a/g/l上的蛋白质间接固定在胶乳珠上的igm抗体来检测红血细胞abo01、abo02和abo3抗原。图4：a和b：.通过结合至ahg(抗人球蛋白)的igm抗体来检测红血细胞abo01抗原，所述ahg偶联至氯甲基胶乳珠，其中在膜上装有两种不同体积的偶联了抗体的珠(a：20μl和b：10μl)。c和d：通过结合至偶联了ahg的氯甲基胶乳珠的igg抗体来检测红血细胞abo01抗原，其中在膜上装有两种不同体积的偶联了抗体的珠(c：20μl和d：10μl)。。图5：用结合至偶联了ahg的环氧化物珠的igm特异性抗体来检测红血细胞抗原。(a：rh2；b：rh3；c：rh4；d：rh5；e：kel1抗原和f：阴性对照)图6：在实施例3中所述的条件下，通过结合至偶联了ahg(抗人球蛋白)的nhs琼脂糖珠的igg特异性抗体来检测fy1和rh1红血细胞抗原。a.b.和c.代表不同的检测程序，而d.代表不同的反应装置和检测程序。图7：检测红血细胞abo02抗原和混合场群体，其具有不同量(1至5％)的anti-abo02，所述anti-abo02与负载在多孔膜上的醛9μm胶乳珠偶联。图8：a.通过与在包括1.5mm厚度的膜的装置上的醛9μm胶乳珠偶联的不同量的特异性抗体(0.125至4％)来检测abo01、rh2、rh5和kel1红血细胞抗原。b.通过与在包括0.6mm厚度的膜的装置上的醛9μm胶乳珠偶联的特异性抗体(4％)来检测abo01、rh2和kell1红血细胞抗原。图9：通过与负载在包括0.6mm厚度的膜的体外装置上的醛9μm胶乳珠偶联的特异性抗体来检测红血细胞abo1抗原，所述膜用a.tritonx-100b.聚氧乙烯和c.壬基βd葡萄糖苷亲水化。图10：a.通过偶联在包括t-499(左)或scp-300-tcf(右)作为吸收剂的装置上的醛9μm胶乳珠上的特异性抗体来检测红血细胞rh2抗原。b.通过与在包括t-099(左)或t-499(右)作为吸收剂的装置上的醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联的特异性抗体来检测红血细胞rh2抗原。c.通过在在包括t-499(左)或t-183-5(右)作为吸收剂的装置上的醛/硫酸盐9μm胶乳珠上偶联的特异性抗体来检测红血细胞rh2抗原。d.通过与在包括t-499(左)或scp-200-tcf(右)作为吸收剂的装置上的醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联的特异性抗体来检测红血细胞rh2抗原。对于每个图像，装置都以拆卸状态显示；从上到下：在塑料装置上的膜和吸收剂。图11：a.通过与在包括棉絮作为排放垫的装置上的醛9μm胶乳珠偶联的anti-abo03抗体来检测红血细胞abo02抗原。b.通过与在包括nt9750hy作为排放垫的装置上的醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联的anti–abo03抗体来检测红血细胞abo02抗原。c.通过在在包括nt9610hy作为排放垫的装置上的醛/硫酸盐9μm胶乳珠上偶联的anti-abo03抗体来检测红血细胞abo02抗原。对于每个图像，装置都以拆卸状态显示；从上到下：膜，排放垫和吸收剂。图12：a.和c.通过与醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联的igm抗体(anti-abo01和anti-abo02)来检测红血细胞abo01或abo02抗原。b.和d.允许区分混合场群体的信号解释。图13：a.弱rh1抗原的检测：不同类型的弱rh1红血细胞(df1，df2......)通过固定至a/g/l蛋白的anti-rh1(hm16和esd1克隆)捕获，所述蛋白与醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联。b.检测duffy(fy1和fy2)、kidd(jk1和jk2)和msn(mns3和mns4系统)的抗原：阳性红血细胞通过固定至a/g/l蛋白的特异性抗体捕获，所述a/g/l蛋白与醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联。图14：反向分血型，将表型已知的测试红血细胞(a1，a2，b和o)与血浆一起培育，并且通过与醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联的抗人igm(cp6d4克隆)捕获。图15：直接coombs测试：a.igg致敏的红血细胞通过与醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联的抗人球蛋白(sa6532，cpc5-1和18833种克隆)捕获。b.阳性红血细胞通过与醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联的抗人球蛋白(sa6532)和/或抗人c3d(c7610)捕获。c.阳性红血细胞被固定至抗人球蛋白(sa6532)和/或抗人c3d(c7610)，并且被捕获在与醛/硫酸盐9μm胶乳珠偶联的a/g/l蛋白上。图16：检测对恶性疟原虫msp1抗原具有特异性的抗体。a.使用本发明的装置用hrp检测方法b.使用本发明的装置用1μm红色珠作为检测方法c.使用本发明的装置用胶体金纳米颗粒作为检测方法。对于每个实例，示出阴性和阳性反应以及信号强度的量化(n＝3-5)。图17.使用本发明的装置用1μm红色珠作为检测方法来检测对梅毒螺旋体p15、p17和p47抗原具有特异性的抗体。示出阴性和阳性反应以及信号强度的量化(n＝3)。图18.使用本发明的装置用1μm红色珠作为检测方法来检测对来自乙型肝炎病毒的hbsag抗原具有特异性的抗体。示出阴性和阳性反应以及信号强度的量化(n＝3)。图19.检测来自乙型肝炎病毒的hbsag抗原。a.使用本发明的装置用hrp(辣根过氧化物酶)作为检测方法(图形和图像)。b.使用本发明的装置用1μm红色珠作为检测方法。对于每个实例，示出阴性和阳性反应以及信号强度的量化(n＝3)。实施例实施例1：通过将抗红血细胞抗体直接和间接经由抗免疫球蛋白igm和igg偶联在珠上来在体外装置中进行红血细胞分型和表型分析制备体外装置的方案，该装置在反应区域的表面上包括直接沾点(spotted)在膜上的抗红血细胞抗体。1.1.用于制备体外装置的材料：-膜"porex"0.6mm疏水，具有9至12μm孔隙率；棉；-cleanis；-亲水化缓冲液(1％triton，1％绿色染料，磷酸盐缓冲盐水)。-洗涤缓冲液(tla组成)；-稀释缓冲液(chromasolcoombs)；-抗体(anti-abo01，anti-abo02，anti-abo03，anti-rh1，anti-rh2，anti-rh3，anti-rh4，anti-rh5，anti-kel1，阴性对照)。1.2.反应介质的制备模式：-在每个孔中沉积1μl的亲水化溶液；-在37℃和10％湿度下干燥16小时；-每个孔沉积2μl的抗体；-在37℃和10％湿度下干燥72小时。用于实现测试的材料是反应支持物(载体)、洗涤缓冲液和稀释缓冲液1.3.测试实施方案：-在稀释缓冲液中将红血细胞颗粒(pellet)稀释至20％；-在孔中沉积20μl的悬浮液；-在室温下培育3min；-沉积80μl的洗涤缓冲液；-在室温下培育1min；-沉积80μl的洗涤缓冲液。2.通过将抗红血细胞抗体直接和间接经由抗免疫球蛋白igm和igg偶联在珠上制备体外装置的方案(流程)。2.1.将anti-abo01(anti-a)、anti-abo02(anti-b)和anti-abo03(anti-ab)抗体与胶乳珠直接偶联的方案。在1ml的均质的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐珠9μm，4％w/v)上，添加100μl的20x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解2ml的浓缩抗体。用去离子水补足体积至4ml。将溶液端对端(来回，endoverend)混合过夜，以确保偶联。通过将150μl的1m乙醇胺悬浮在珠抗体溶液中，来封端过量的活性基团，随后在室温下混合2小时。然后将偶联的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒(beadpellet)再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.2.anti-rh1、anti-rh2、anti-rh3、anti-rh4、anti-rh5和anti-kel1抗体间接偶联方案在1ml的均质的4％珠上，添加200μl的20x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解250μl的1mg/ml的6d4(抗人igm，diagast克隆)或100μl的3.69mg/ml的c5-1(抗人igg，diagast克隆)。用去离子水补足体积至4ml。将溶液端对端(endoverend)混合过夜，以确保偶联。通过将150μl的1m乙醇胺悬浮在珠抗体溶液中来封端过量的活性基团，随后在室温下混合2小时。然后将抗人球蛋白(ahg)偶联的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。用2ml的浓缩抗体加2ml的磷酸盐缓冲盐水将珠颗粒再悬浮。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将所得的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。阴性对照珠直接用乙醇胺饱和。在实施例中使用的抗体克隆在以下表4中示出：克隆名称抗原特异性同型种类偶联类型9113d10abo01igm小鼠直接9621a8abo02igm小鼠直接152d12abo03igm小鼠直接p3x25513g8rh2igm人通过6d4间接rh3906rh3igm人通过6d4间接rh4951rh4igm人通过6d4间接p3gd512rh5igm人通过6d4间接k601kel1igg1人通过c51间接p3x21211f1rh1igg1人通过c51间接6d4ahgigg1小鼠直接c51ahgigg1小鼠直接表4：在实施例中使用的抗体克隆。表4中的抗体克隆是由申请人(diagast，法国)进行和出售的克隆。2.3.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自subrenat的na7150pes)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％tritonx-100；0.5％绿色染料和0.13m蔗糖)亲水化，并且潜在地在37℃、10％湿度下干燥1小时。然后沾点5μl的4％的偶联了抗体或阴性对照的珠，并且在立即使用或长期保存之前，将装置在37℃、10％湿度下干燥1小时。通过在chromasolcoombs(diagast制剂)中以5％稀释红血细胞来启动测试，并且在每个孔中引入10μl，随后进行两次30μl洗涤(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.2％tween20和0.54％绿色染料)。在该实施例中，申请人还比较了通过上述方案制备的用于血型鉴定和表型分析的含有与珠偶联的抗红血细胞抗体的体外装置与将抗红血细胞抗体直接沾点在多孔膜上的体外装置(类似于wo2013/186482中所述的装置)。3.结果所获得的比较结果示于图2，其中暗灰色斑点(对应于彩色版本中的红色斑点)的存在表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应(在红血细胞表面处存在抗原)，而无色斑点的存在反映了阴性反应(在红血细胞表面处不存在抗原)。从图2可以看出，直接或间接固定在珠表面上的血型抗体anti-abo01、anti-abo02、anti-abo03、anti-rh1、antirh2、anti-rh3anti-rh4antirh5和anti-kel1以特定方式结合存在于所测试的样品的红血细胞的表面上的相应抗原。实际上，珠沉积的斑点的表面仍然保持着良好的红色，这表明红血细胞的抗体没有被多孔膜吸附，这允许特异性和灵敏地检测红血细胞抗原(图2b)。从图2a可以看出，在没有珠的体外装置中，与某些抗体、特别是anti-rh1、anti-rh3、anti-rh4、anti-rh5和anti-kel1抗体的反应的灵敏度低(暗灰色的强度非常低)。当比较用本发明的体外装置获得的图2b的结果与用没有珠的体外装置获得的图2a的结果时，似乎对于抗体anti-rh1、anti-rh3、anti-rh4、anti-rh5和anti-kel1kel1的灰色斑点(pots，罐)在图2a上比在图2a上更可见，这证实了本发明的体外装置允许获得对大多数抗红血细胞抗原的更灵敏的检测。实施例2：将红血细胞抗体经由抗体的亲和性蛋白质间接偶联1.间接抗体偶联在1ml的均质的4％胶乳珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，将5或2.5μg的蛋白质agl溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。在与蛋白质agl偶联的1ml的离心的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，添加3ml的1x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解1ml的anti-abo01抗体(9113d10diagast克隆)或anti-abo02抗体(9621a8diagast克隆)或anti-abo03(152d12diagast克隆)。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有2％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点2μl的2％的偶联了抗体的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入50μl的在补充有0.00625％tween20的pbs1x中以1.5％稀释的红血细胞来启动检测程序。获取洗涤前的第一张图像。然后用30μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。洗涤后获取图像。3.结果图3示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应。实施例3：在不同反应条件下红血细胞的抗体在表面上具有不同化学官能团和具有不同尺寸的珠上的偶联。1.氯甲基1.2.抗体偶联在500μl的均质的氯甲基珠(thermofisher氯甲基胶乳珠4％w/v，2.0μm)上添加1.5ml的磷酸盐缓冲液，并且将所获得的溶液以3000g离心20min。弃去上清液，然后用950μl的磷酸盐缓冲盐水和50μl的浓缩的cpc51或cp6d4(diagastahg)的混合物将珠颗粒再悬浮。将抗体珠溶液在室温下在翘板摇床(tuberocker)上培育过夜。在ahg化学偶联之后，将珠溶液以3000g离心15min，并且弃去上清液。将珠用1.5ml的磷酸盐缓冲盐水洗涤，并且将溶液以3000g离心10min。弃去上清液，并且通过添加1ml的1m乙醇胺来封端过量的活性基团，然后在室温下混合20min。将偶联了ahg的珠溶液以3000g离心20min，然后用1.5ml的磷酸盐缓冲盐水洗涤。将1ml的浓缩的anti-a(anti-abo1)抗体(克隆igm9113d10或igg16247(3)e6，均为diagast克隆)溶解在珠颗粒上，并且将溶液在室温下混合两小时，然后离心并且用1.5ml的磷酸盐缓冲盐水洗涤。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。1.2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自alan&co的棉絮)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用2.5μl的表面活性剂溶液(经过过滤的水，补充有1％tritonx-100)亲水化，然后沾点20μl(图4a和4c)或10μl(图4b和4d)的4％的偶联了抗体的珠。使用前，让该装置在室温下放置30min。通过在每个孔中引入13μl的10％的30μl的在chromasolcoombs(diagast制剂)中的红血细胞和10μl的海地美溴铵溶液的混合物来启动检测程序。用25μl的补充有0.1％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区两次。1.3.结果图4示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成(a型红血细胞)，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应(b型红血细胞)。2.环氧基团2.1.抗体偶联称出0.5g的环氧树脂(bioradprofinity环氧树脂，作为干粉末供应，粒度45-90微米)，并且在50ml的磷酸盐缓冲盐水中在温和搅拌下溶胀30min。珠膨胀至5ml，得到约10％的溶液。将珠以2500g离心5min，弃去上清液，并且将颗粒再悬浮在4.5ml的磷酸盐缓冲盐水中，然后再次离心。将360μl的浓缩的antiigmahg(cp6d4diagast)溶解在12ml的磷酸盐缓冲盐水中，并且将混合物添加在珠颗粒上以进行偶联。将抗体珠溶液在室温下在旋转振荡器上培育1h30。在ahg化学偶联之后，将珠溶液以2500g离心5min，并且弃去上清液。将珠用4.5ml的磷酸盐缓冲盐水洗涤，并且将溶液以2500g离心5min。弃去上清液，并且通过添加3ml的1m乙醇胺来封端过量的活性基团，然后在室温下混合45min。将偶联了ahg的珠溶液以2500g离心5min，然后用4.5ml的磷酸盐缓冲盐水洗涤。将300μl的anti-rh2、anti-rh3、anti-rh4或anti-rh5(分别为p3x25513g8diagast克隆，rh3906diagast克隆，ms33millipore克隆和p3gdc512diagast克隆)稀释在2200μl的磷酸盐缓冲盐水中，并且添加在偶联了ahg的珠上。对于anti-kell抗体，将1500μl稀释在1000μl的磷酸盐缓冲盐水中，而对于阴性对照，稀释在2500μl的磷酸盐缓冲盐水中。将所获得的溶液在室温下混合45min，然后离心和洗涤。最后，将珠颗粒再悬浮在补充有保存剂(conservatives)的磷酸盐缓冲盐水中，以恢复偶联的珠的50％溶液。2.2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自alan&co的棉絮)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用1μl的表面活性剂溶液(经过过滤的水，补充有1％tritonx-100)亲水化，并且在室温下干燥过夜。然后沾点10μl的50％的偶联了抗体的珠。使用前，让该装置在室温下放置30min。通过在每个孔中引入10μl的未稀释的红血细胞来启动检测程序。用40μl的补充有0.2％tween-20和防腐剂的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区两次。2.3.结果图5示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应。无论红血细胞表型如何，阴性对照都得到无色斑点。3.n-羟基琥珀酰亚胺(nhs)基团3.1.抗体偶联将1ml的nhs珠(piercetmnhs-activatedagaroseslurry)用5ml的磷酸盐缓冲盐水稀释，并且以2500g离心5min，弃去上清液，并且将颗粒再悬浮在4.5ml的磷酸盐缓冲盐水中进行3次另外的洗涤。将2ml的浓缩的antiiggahg(c51diagast)溶解在3ml的磷酸盐缓冲盐水中，并且将混合物添加在珠颗粒上以进行偶联。将抗体珠溶液在室温下在旋转振荡器上培育一个半小时。在ahg化学偶联之后，将珠溶液以2500g离心5min，并且弃去上清液。将珠用4.5ml的磷酸盐缓冲盐水洗涤，并且将溶液以2500g离心5min。弃去上清液，并且通过添加3ml的1m乙醇胺来封端过量的活性基团，然后在室温下混合45min。将偶联了ahg的珠溶液以2500g离心5min，然后用4.5ml的磷酸盐缓冲盐水洗涤。将10ml的anti-rh1和anti-fy1抗体(分别为hm16和f655diagast克隆)添加在偶联了ahg的珠上。将所获得的溶液在室温下混合1小时，然后离心和洗涤。最后，将珠颗粒再悬浮在补充有保存剂的磷酸盐缓冲盐水中，以得到偶联的珠的50％溶液。3.2.反应装置的制备和检测程序图6上所示的装置(a，b和c)是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自alan&co的棉絮)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用2.5μl的表面活性剂溶液(经过过滤的水，补充有1％tritonx-100)亲水化，并且在37℃下干燥过夜。然后沾点20μl的50％的偶联了抗体的珠。使用前，让该装置在室温下放置30min。图6a：通过在每个孔中引入7μl的在0.25％海地美溴铵溶液中以25％稀释的红血细胞来启动检测程序。用20μl+30μl的补充有0.01％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。图6b：通过在每个孔中引入5μl的在0.3％海地美溴铵溶液中以25％稀释的红血细胞来启动检测程序。用20μl+30μl的补充有0.01％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。图6c：通过在每个孔中引入5μl的在0.4％海地美溴铵溶液中以25％稀释的红血细胞来启动检测程序。用20μl+30μl的补充有0.01％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。图6d上所示的装置是模制塑料盒，其中组装了105μm厚并且孔隙率为12μm的lydalluhmwpe疏水膜(solupor70m01a)，排放垫(来自alan&co的棉絮)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用2μl的表面活性剂溶液(经过过滤的水，补充有1％tritonx-100)亲水化，并且在37℃下干燥1hr30min。然后沾点20μl的50％的偶联了抗体的珠。使用前，让该装置在室温下放置30min。通过在每个孔中引入7μl的在0.25％海地美溴铵溶液中以25％稀释的红血细胞来启动检测程序。用30μl+50μl的补充有0.01％tween-20的磷酸盐缓冲盐水和另外的20μl的补充有0.1％tween-20和0.007％tritonx-100的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。3.3.结果从所得图像的图6上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应(检测rh1或fy1抗原)，而无色斑点的存在反映了阴性反应。实施例4：珠的浓度该经历的目的是测试待沉积在多孔膜上的珠的不同浓度。1.抗体偶联在1ml的均质的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，添加100μl的20x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解2ml的亲和性纯化的anti-abo02抗体(9621a8diagast克隆)。用去离子水补足体积至4ml。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。通过将150μl的1m乙醇胺悬浮在珠抗体溶液中来封端过量的活性基团并且在室温下混合2小时。然后将偶联的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.反应装置的制备和检测程序该装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自alan&co的棉絮)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用1μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有1％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点10μl的浓度在1至5％之间的偶联了抗体的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入50μl的在补充有0.00625％tween20的chromasolcoombs中以0.15％稀释的红血细胞来启动检测程序。用30μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区一次或两次。3.结果图7示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应(abo02型红血细胞)，而无色斑点的存在反映了阴性反应。在一次或两次洗涤后，对于从1至5％的珠浓度遵守(respected)特异性和灵敏度。通过与100％阳性群体的信号相比的强度的降低可检测混合场血细胞。实施例5：疏水多孔膜的厚度1.抗体偶联1.1.anti-abo01偶联在1ml的均质的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，添加100μl的20x磷酸盐缓冲液，并且溶解2ml的亲和性纯化的anti-abo01(2521b8diagast克隆)抗体。用去离子水补足体积至4ml。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。通过将150μl的1m乙醇胺悬浮在珠抗体溶液中来封端过量的活性基团并且在室温下混合2小时。然后将偶联的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。1.2.anti-rh2，anti-rh5和anti-kel1偶联在1ml的均质的4％珠上，添加200μl的pbs20x，并且对于anti-rh2和anti-rh5(分别为p3x25513g8和p3gdc512diagast克隆)以1mg/ml溶解250μl的6d4(抗人igm)或者对于anti-kel1(601diagast克隆)以3.5mg/ml溶解100μl的c5-1(抗人igg)。用去离子水补足体积至4ml。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。通过将150μl的1m乙醇胺悬浮在珠抗体溶液中来封端过量的活性基团并且在室温下混合2小时。然后将偶联了ahg的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。用2ml的浓缩抗体加2ml的磷酸盐缓冲液将珠颗粒再悬浮。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠用3ml的保存缓冲液洗涤两次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。1.3.反应装置的制备和检测程序图8a上所示的装置是模制塑料盒，其中组装了1.5mm厚并且孔隙率在7至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自alan&co的棉絮)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用1μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有3％tritonx-100、0.26m蔗糖和1％的绿色染料)亲水化。将装置在37℃、10％湿度下第一次干燥1小时。然后沾点5μl的浓度在0.125至4％之间的偶联了抗体的珠。使用前，将装置在37℃、10％湿度下第二次干燥1小时。通过在每个孔中引入10μl的在生理水中以5％稀释的红血细胞来启动检测程序。用100μl补充有0.1％tween-20和0.007％tritonx-100的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。图8b上所示的装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自subrenat的na7300pes)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％tritonx-100、0.13m蔗糖和0.5％的绿色染料)亲水化。将装置在37℃、10％湿度下第一次干燥1小时。然后沾点5μl的4％的偶联了抗体的珠。使用前，将装置在37℃、10％湿度下第二次干燥1小时。通过在每个孔中引入10μl的在生理水中以5％稀释的红血细胞来启动检测程序。用100μl的补充有0.1％tween-20和0.007％tritonx-100的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。1.4.结果图8a上暗灰色斑点(红色斑点)的存在表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应。对于从4至0.125％的珠浓度随着强度的降低而遵守灵敏度。图8b上暗灰色斑点(红色斑点)的存在表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应。实施例6：用于使多孔膜亲水化的表面活性剂的类型和浓度1.anti-abo01偶联在1ml的均质的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，添加100μl的20x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解1ml的亲和性anti-abo01抗体(2521b8diagast克隆)。用去离子水补足体积至4ml。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.反应装置的制备和检测程序该装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自alan&co的棉絮)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用1μl的以上列出的表面活性剂溶液亲水化a.1.5％tritonx-100b.聚氧乙烯10％c.壬基-β-d葡萄糖苷50mm然后沾点10μl的浓度为3％的偶联了抗体的珠。通过在每个孔中引入50μl的在补充有0.00625％tween-20的磷酸盐缓冲盐水中以1.5％稀释的红血细胞来启动检测程序。用30μl补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。3.结果图9示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应。无论所使用的表面活性剂如何，都遵守特异性。实施例7：在本发明的装置中使用的吸收和排放材料1.吸收材料1.1.抗体偶联在1ml的均质的4％珠上，添加200μl的20x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解250μl的6d4(抗人igmdiagast克隆)。用去离子水补足体积至4ml。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。通过将150μl的1m乙醇胺悬浮在珠抗体溶液中来封端过量的活性基团并且在室温下混合2小时。然后将偶联了ahg的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。用2ml的浓缩的antirh2抗体(p3x25513g8diagast克隆)加2ml的磷酸盐缓冲盐水将珠颗粒再悬浮。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。1.2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自subrenat的na7150pes)和吸收剂垫(来自以下mcarlaid的参考)。所使用的吸附材料如下：οt-499或scp-300tcf(图10a)οt-099或t-499(图10b)οt-499或t-183-5(图10c)οt-499或scp-200-tcf(图10d)多孔膜用1μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％tritonx-100；1％绿色染料)亲水化。然后沾点10μl的1％的抗体或阴性对照偶联的珠，并且在立即使用或长期保存之前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在chromasolcoombs(diagast制剂)中以2.5％稀释红血细胞来启动测试，并且在每个孔中引入50μl，随后是两次30μl的洗涤缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.2％tween20)。1.3.结果从图10a、b、c和d可以看出，任何所测试的吸收层都可确保检测rh2阳性红血细胞(存在红色斑点，作为暗灰色斑点可见)。遵守特异性；无色斑点反映了rh2阴性红血细胞。2.排放材料2.1.抗体偶联在1ml的均质的4％珠上，溶解1ml的浓缩的anti-ab抗体(152d12diagast克隆)。用磷酸盐缓冲盐水补足体积至4ml。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(以下参考)和吸收剂垫(cleanis)。排放材料如下：ο棉絮(来自alan&co)，示于图11aοnt9750hy(来自subrenat)，示于图11b，οnt9610hy(来自subrenat)，示于图11c多孔膜用1μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有1％tritonx-100；1％绿色染料)亲水化。然后沾点10μl的1％的抗体或阴性对照偶联的珠，并且在立即使用或长期保存之前，将装置在37℃、10％湿度下干燥15min。通过在chromasolcoombs(diagast制剂)中以2.5％稀释红血细胞来启动测试，并且在每个孔中引入50μl，随后进行两次30μl洗涤(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.2％tween20)。2.3.结果图11示出任何排放垫都可确保检测b阳性红血细胞(存在红色斑点，在图上作为暗灰色斑点可见)。遵守特异性；无色斑点用o红血细胞获得。实施例8：使用本发明的装置对混合场群体进行分血型和检测1.抗体偶联在1ml的均质的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，添加100μl的20x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解2ml的anti-abo01抗体(9113d10diagast克隆)或anti-abo02抗体(9621a8diagast克隆)。用去离子水补足体积至4ml。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。通过将150μl的1m乙醇胺悬浮在珠抗体溶液中来封端过量的活性基团并且在室温下混合2小时。然后将偶联的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(来自alan&co的棉絮)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用1μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有1％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点10μl的3％的偶联了抗体的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入50μl的在补充有0.00625％tween20的chromasolcoombs中以0.15％稀释的红血细胞来启动检测程序。通过将分别在期望浓度下(30％o与70％a或b红血细胞或50％o与50％a或b红血细胞)在chromasolcoombs中以0.15％预稀释的a和o或b和o红血细胞混合来产生混合场a和b群体。获取洗涤前的第一张图像。然后用30μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区两次。每次洗涤后获取图像。3.结果如图12a和c上所示，在洗涤之前，所有斑点均显示暗灰色(或红色)。在第二次洗涤后达到特异性：红色斑点(作为暗灰色斑点可见)的存在表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应。图12b和d示出了，在对所获取的图像进行强度解释(减去两次洗涤前后的信号)之后，满足了自然和混合场群体之间的区分。实施例9：通过将红血细胞抗体经由抗体的亲和性蛋白质与珠间接偶联来检测弱rh1抗原和扩展表型1.蛋白质agl偶联在1ml的均质的4％珠上，将50μg的蛋白质agl溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用1μl的具有偶联了agl的珠的表面活性剂溶液(1.5％tritonx-100；磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白；0.25m蔗糖和5.1％珠)亲水化。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入50μl的反应物(弱rh1或扩展表型)来启动检测程序；添加50μl的在补充有0.00625％tween20的pbs1x中以1.5％稀释的红血细胞。获取洗涤前的第一张图像。然后用30μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。洗涤后获取图像。3结果图13a示出了弱rh1的所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应。图13b示出了扩展表型的所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应。实施例10：通过与珠偶联的6d4抗体进行反向分血型1.反向分血型1.1.抗体偶联在1ml的均质的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，添加3ml的1x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解100μg的cp6d4抗体。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。通过将150μl的1m乙醇胺悬浮在珠抗体溶液中来封端过量的活性基团并且在室温下混合2小时。然后将偶联的珠用3ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。1.2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(subrenat9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有1.5％tritonx-100；0.5％绿色染料)亲水化。沾点5μl的1％的偶联了抗体的珠，并且在立即使用或长期保存之前，将装置在37℃、10％湿度下干燥15min。通过在5min内培育30μl的血浆和20μl的红血细胞(a1；b；a2；o)来启动测试。在每个孔中引入25μl，随后是30μl的洗涤缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.2％tween20)。1.3.结果图14示出了暗灰色斑点(对应于红色斑点)的存在，其表明捕获了igm致敏的红血细胞，因此是阳性反向分血型反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应(未致敏的红血细胞)。实施例11：使用本发明的装置的dat(直接coombs测试)测试1.用抗体预致敏的红血细胞1.1.抗体偶联在3ml的均质的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，溶解3ml的抗人球蛋白溶液。所研究的ahg是sa6532(针对人igg的多克隆兔抗体)，c5-1(diagast克隆，针对人igg的小鼠igg)和18833(diagast克隆，针对人igg的小鼠igm)。将溶液端对端混合一小时，以确保偶联。将珠悬浮液以2500g离心5min。通过将珠颗粒再悬浮在6ml的50mm的乙醇胺溶液中来封端过量的活性基团，随后混合30min。然后将偶联的珠用9ml的保存缓冲液充分洗涤2次(洗涤前后以2500g离心5min)。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。1.2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(subrenat9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有1.5％tritonx-100；0.5％绿色染料)亲水化。沾点5μl的3％的偶联了抗体的珠，并且在立即使用或长期保存之前，将装置在37℃、10％湿度下干燥15min。用fy、kel1kel1或rh1igg抗体对红血细胞进行体外预致敏，以模拟直接coombs阳性红血细胞。通过将红血细胞(coombs阴性或阳性)以0.25％稀释在补充有0.00625％tween20的chromasolcoombs(diagast制剂)中来启动测试。在每个孔中引入50μl，随后是30μl的洗涤缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.2％tween20)。2.用anti-igg和anti-c3d进行的直接抗球蛋白测试2.1.抗体偶联在1ml的均质的4％珠(thermofisher胶乳醛/硫酸盐9μm4％w/v)上，添加3ml的1x磷酸盐缓冲盐水，并且溶解100μg的sa6532或c7610抗体。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(subrenat9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有1.5％tritonx-100；0.5％绿色染料)亲水化。沾点5μl的4％的偶联了抗体的珠，并且在立即使用或长期保存之前，将装置在37℃、10％湿度下干燥15min。通过将红血细胞(dat阴性或阳性)以1.5％稀释在补充有0.00625％tween20的磷酸盐缓冲盐水中来启动测试。在每个孔中引入50μl，随后是30μl的洗涤缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.2％tween20)。3.通过抗体的亲和性蛋白质进行的dat3.1.蛋白质agl偶联在1ml的均质的4％珠上，将50μg的蛋白质agl溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。3.2.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用1μl的具有偶联了agl的珠的表面活性剂溶液(1.5％tritonx-100；磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白；0.25m蔗糖和5.1％珠)亲水化。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在孔中培育20μl的反应物(dat)来启动检测程序；在孔中添加50μl的在补充有0.00625％tween20的pbs1x中以3％稀释的红血细胞；添加20μliat溶液2缓冲液。将120μl的混合物转移到盒(cartridge)孔中。获取洗涤前的第一张图像。然后用40μl的iat溶液2缓冲液洗涤反应区。洗涤后获取图像。4.结果图15a示出了暗灰色斑点(对应于红色斑点)的存在，其表明捕获了igg致敏的红血细胞，因此是阳性直接coombs反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应(未致敏的红血细胞)。图15b示出了暗灰色斑点(对应于红色斑点)的存在，其表明捕获了igg或/和c3d致敏的红血细胞，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应(未致敏的红血细胞)。图15c示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点(对应于彩色图像中的红色斑点)的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应。实施例12：使用本发明的装置检测对疟疾抗原具有特异性的抗体1.抗原偶联在1ml的均质的4％珠上，将100μg的antigenmal003溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.用于检测的抗体偶联在1ml的均质的4％珠1μm上，将200μg的antibodies6d4溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以5000g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。3.反应装置的制备和用hrp进行的检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有2％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点2μl的4％的偶联了抗原mal003的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入100μl的样品(套件ab178649)来启动检测程序。添加100μl的抗体anti-igg和/或anti-igmhrp结合物(套件ab178649)。获取洗涤前的第一张图像。然后用30μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。然后用30μl的显示缓冲液(tmb底物(套件ab178649))洗涤反应区。15min后获取图像。4.反应装置的制备和用珠进行的检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有2％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点2μl的4％的偶联了抗原mal003的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入100μl的样品(套件ab178649)来启动检测程序。添加30μl的0.1％的抗体6d4珠1μm。获取洗涤前的第一张图像。然后用120μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。洗涤后获取图像。5.反应装置的制备和用胶体金纳米颗粒进行的检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有2％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点5μl的4％的偶联了抗原mal003的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入50μl的样品(套件ab178649)来启动检测程序。添加10μl的抗人iga、igg、igm60nm金结合物(ac-60-14-10)。获取洗涤前的第一张图像。然后用50μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。洗涤后获取图像。6.结果图16a示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应和具有灰色强度的图形。图16b示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应和具有灰色强度的图形。图16c示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应和具有灰色强度的图形。实施例13：使用本发明的装置用1μm-红色珠作为检测方法来检测对梅毒螺旋体抗原具有特异性的抗体1.抗原偶联在1ml的均质的4％珠上，将100μg的p15、p17、p47梅毒螺旋体抗原(30-at76)溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.用于检测的抗体偶联在1ml的均质的4％珠1μm上，将200μg的agl蛋白质溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以5000g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。3.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有2％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点2μl的4％的偶联了p15、p17、p47梅毒螺旋体抗原的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入10μl的样品(梅毒螺旋体抗体20-tr89)来启动检测程序。添加30μl的0.1％的agl蛋白质珠1μm。获取洗涤前的第一张图像。然后用120μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。洗涤后获取图像。4.结果图17示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应和具有灰色强度的图形。实施例14：使用本发明的装置用珠1μm红色检测方法来检测对乙型肝炎病毒抗原(hbsag)具有特异性的抗体1.抗原偶联在1ml的均质的4％珠上，将100μg的hbsantigen(30-ah15)溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.用于检测的抗体偶联在1ml的均质的4％珠1μm上，将200μg的agl蛋白质溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以5000g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。3.反应装置的制备和检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有2％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点2μl的4％的偶联了hbs抗原的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入10μl的样品(hbsag抗体10-h05g)来启动检测程序。添加30μl的0.1％的agl蛋白质珠1μm。获取洗涤前的第一张图像。然后用120μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。洗涤后获取图像。4.结果图18示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应和具有灰色强度的图形。实施例15：使用本发明的装置检测乙型肝炎病毒抗原1.抗原偶联在1ml的均质的4％珠上，将100μg的hbsantibody(10-h05g)溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以2500g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。2.用于检测的抗体偶联在1ml的均质的4％珠1μm上，将200μg的hbsantibody(10-h05h)溶解在3mlpbs1x中并且添加。将溶液端对端混合过夜，以确保偶联。然后将偶联的珠以5000g离心5min。最后，将珠颗粒再悬浮在保存缓冲液(磷酸盐缓冲盐水，补充有0.5％牛血清白蛋白和0.25m蔗糖)中，以恢复引入的珠溶液的重量。3.反应装置的制备和用hrp方法作为检测方法的检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有2％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点2μl的4％的偶联了抗原hbsantibody(10-h05g)的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入50μl的样品(套件1701-12)来启动检测程序。添加50μl的抗体anti-hbs抗原hrp结合物(套件1701-12)。获取洗涤前的第一张图像。然后用100μl的显示缓冲液(tmb底物(套件1701-12))洗涤反应区。15min后获取图像。4.反应装置的制备和用珠方法进行的检测程序装置是模制塑料盒，其中组装了0.6mm厚并且孔隙率在9至12μm之间的porexhdpe疏水膜，排放垫(9610hy)和吸收剂垫(cleanis)。多孔膜用0.5μl的表面活性剂溶液(磷酸盐缓冲盐水，补充有2％tritonx-100和1％的绿色染料)亲水化。然后沾点2μl的4％的偶联了hbsantibody(10-h05g)的珠。使用前，将装置在37℃、20％湿度下干燥15min。通过在每个孔中引入10μl的样品hbs抗原(套件1701-12)来启动检测程序。添加100μl的0.025％的hbsantibody(10-h05h)珠1μm。获取洗涤前的第一张图像。然后用120μl的补充有0.2％tween-20的磷酸盐缓冲盐水洗涤反应区。洗涤后获取图像。5.结果图19a示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应和具有灰色强度的图形。图19b示出了所得图像，在该图像上观察到暗灰色斑点的存在，其表明免疫复合物的形成，并且因此是阳性反应，而无色斑点的存在反映了阴性反应和具有灰色强度的图形。当前第1页12