1.红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化方法,其特征在于,包括以下步骤:
s1、取红豆杉样品,洗净、干燥后粉碎,过筛得红豆杉粉末备用;
s2、取红豆杉粉末置于甲醇溶液中水浴提取,分别考察料液比、超声时间、水浴时间、水浴温度对提取液中紫杉烷类化合物含量的影响;
s3、以料液比、超声时间、水浴时间、水浴温度为自变量,以紫杉烷类化合物提取率为响应值,建立多元二次方程;
s4、对多元二次方程进行响应面分析,取紫杉烷类化合物提取率为最大值,对红豆杉中紫杉烷类化合物的提取条件进行优化,得到提取工艺参数。
2.根据权利要求1所述的红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化方法,其特征在于,步骤s3中,建立多元二次方程时,根据实验数据进行多元回归拟合,获得红豆杉中紫杉烷类化合物的提取率对自变量料液比、超声时间、水浴时间、水浴温度的二次多项回归,根据实验结果建立红豆杉中紫杉烷类化合物提取的数学模型并对该模型进行显著性检验。
3.根据权利要求1-2中任一项所述的红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化方法,其特征在于,步骤s2中,测定提取液中紫杉烷类化合物的含量,通过优化的液相色谱-串联质谱-多反应监测(lc-ms/ms-mrm)方法进行定量分析,根据标准曲线快速有效的检测样品中紫杉烷类的含量。
4.根据权利要求3所述的红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化方法,其特征在于,液相色谱-串联质谱-多反应监测(lc-ms/ms-mrm)方法的色谱条件具体为,phenomenexaqua5uc18色谱柱(50mm×2.0mm,5μm),以a(0.4%甲酸,10mm乙酸铵水溶液)-b(乙腈)为流动相进行梯度洗脱(0.01-0.5min,20%b;0.5-3min,20%-85%b;3-5min,85%b;5-5.1min,85%-20%b;5.1-7min,20%b);检测波长227nm;进样量5μl;体积流量:3ml/min;柱温:40℃;液相色谱-串联质谱-多反应监测(lc-ms/ms-mrm)方法的质谱条件具体为,esi正离子模式和esi负离子模式共同扫描;最大压力:20mpa;离子化源:电喷雾离子化源(esi源);气帘气(cur):10psi;碰撞活化参数(cad):5;离子源电压:-4500.0v;离子源温度(tem):400℃;雾化气(gs1):65psi;辅助气(gs2):60psi。
5.根据权利要求4所述的红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化方法,其特征在于,将紫杉醇、巴卡亭ⅲ、10-脱乙酰基巴卡亭ⅲ、三尖杉宁碱和10-脱乙酰基紫杉醇分别配制浓度梯度为50μg/l、100μg/l、200μg/l、500μg/l、1mg/l、2mg/l、5mg/l、10mg/l的混标,然后用lc-ms/ms-mrm对混标进行标准曲线的绘制。
6.根据权利要求1-5任一项所述的红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化方法,其特征在于,步骤s4中选取最佳工艺参数时,在选取的4个因素范围内,紫杉烷类化合物提取率选最大,据回归模型通过design-expert8.0.6软件分析得出,红豆杉中紫杉烷类化合物最佳提取工艺参数。
7.根据权利要求6所述的红豆杉中紫杉烷类化合物的提取工艺优化方法,其特征在于,利用s4得到的提取工艺参数,再进行红豆杉中紫杉烷类化合物最佳提取参数的确定和实验验证。