一种高安全性的氢醌组合物的纯化方法与流程

[0001]
本发明属于医药化工领域，具体涉及一种高安全性的氢醌组合物的纯化方法。


背景技术：

[0002]
氢醌(又称对苯二酚)作为酪氨酸酶抑制剂主要通过络合作用抑制酪氨酸酶活性，调控黑色素细胞代谢过程，使表皮内多巴反应阳性黑色素细胞数量显著减少，产生可逆性的皮肤褪色。oettel于1936年首次提出氢醌具有美白皮肤的作用。自20世纪60年代起，许多国家将氢醌用作化妆品的增白剂和皮肤科用于治疗色素沉着症、祛斑等外用制剂。但须严格控制氢醌的用量。
[0003][0004]
氢醌不稳定，易受光照、温度等环境因素的影响而发生氧化降解反应，故在其制备及储存中易发生反应而生成氧化降解杂质(如对苯醌等)。已有研究表明，对苯醌是光敏感性比氢醌更强的基因毒性物质，且光照将加速氢醌的氧化降解反应。对苯醌为氢醌的主要氧化降解产物，且容易与氢醌形成有色复合物，进而影响氢醌及其产品的纯度、质量、稳定性和其性状外观等。另外，氢醌在其制备过程中还会引入工艺杂质和副产物，如苯胺。苯胺是一种致癌物质，还会损害血液中运输氧的血红蛋白，急性高暴露会出現头晕、头痛、心律不整、抽搐、昏迷及死亡，严重影响人们的生命安全。为了保障药品质量，需要严格控制其将对苯醌、苯胺的限量严格控制在安全范围之内。另有研究表明，氢醌制备储存中生成的杂质(如对苯醌、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚等)对皮肤、黏膜及中枢神经呼吸系统具有较强的刺激作用，对其加以质量控制具有十分重要的临床价值。另外，原料、制备及储存过程中，还会引入苯酚、偏苯三酚、间苯三酚、对苯二酚硫酸钾等杂质，亦需进行控制。
[0005]
为此，本领域亟需一种操作简便、绿色环保、易于工业化生产的氢醌纯化方法，使得所得产品收率高、纯度高，以保障产品质量可控，保障患者用药安全。


技术实现要素：

[0006]
本发明提供了一种高安全性的氢醌组合物的纯化方法，并提供了一种高效分离并检测氢醌中有关物质的高效液相色谱法，该方法通过优化色谱条件和洗脱条件，实现氢醌与有关物质的高效分离与检测，并具有专属性好、灵敏度高等优点，可用于氢醌与有关物质的高效分离、含量测定或其药品质量控制。
[0007]
本发明的目的在于提供一种高安全性的氢醌组合物的纯化方法，包括下述步骤：1)在80-100℃条件下，将待精制的氢醌溶解于结晶溶剂中，制得结晶溶液；2)在制得的结晶溶液中加入还原剂，搅拌，分离，收集分离液经冷却析晶、分离，收集结晶，干燥，即得。
[0008]
本发明的优选技术方案中，所述结晶溶剂选自水、乙醇、异丙醇、正丙醇、正丁醇的任一种或其组合。
[0009]
本发明的优选技术方案中，步骤1)、步骤2)在避光、无氧条件下进行。
[0010]
本发明的优选技术方案中，所述结晶溶液中的氢醌浓度为5-40％，优选为10-35％，更优选为15-30％，还优选为20-25％。
[0011]
本发明的优选技术方案中，所述结晶溶液的温度为85-95℃。
[0012]
本发明的优选技术方案中，步骤2)的结晶溶液中，氢醌：还原剂的摩尔比为1:0.001-0.2，优选为1:0.002-0.15，更优选为1:0.005-0.1。
[0013]
本发明的优选技术方案中，所述的还原剂选自铁粉、锌粉的任一种或其组合。
[0014]
本发明的优选技术方案中，步骤2)的结晶溶液中任选加入抗氧剂。
[0015]
本发明的优选技术方案中，步骤2)的结晶溶液中，抗氧剂：氢醌的重量百分比为0.1％-1.0％，优选为0.2％-0.9％，更优选为0.4％-0.8％。
[0016]
本发明的优选技术方案中，所述的抗氧剂选自焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、v
c
中的任一种或其组合。
[0017]
本发明的优选技术方案中，步骤2)的结晶溶液中任选加入活性炭。
[0018]
本发明的优选技术方案中，所述的结晶在无氧条件下进行。
[0019]
本发明的优选技术方案中，所述的无氧条件选自充入惰性气体，优选惰性气体选自氮气、氩气、氦气的任一种或其组合。
[0020]
本发明的优选技术方案中，所述冷却结晶选自搅拌冷却析晶、静置冷却析晶中的任一种或其组合。
[0021]
本发明的优选技术方案中，所述的冷却结晶温度为-5℃-25℃，优选为0-20℃，更优选为5-15℃。
[0022]
本发明的优选技术方案中，所述分离选自过滤、离心、膜分离的任一种或其组合。
[0023]
本发明的优选技术方案中，收集结晶经洗涤后干燥，优选洗涤溶剂为水。
[0024]
本发明的优选技术方案中，所述干燥选自热风干燥、真空干燥、减压干燥的任一种或其组合。
[0025]
本发明的优选技术方案中，所述干燥温度为45-75℃，优选为50-70℃，更优选为55-65℃。
[0026]
本发明的优选技术方案中，制得氢醌避光保存，优选将制得氢醌置于避光、无氧条件下保存。
[0027]
本发明的优选技术方案中，制得氢醌的纯度不低于99.0％，优选不低于99.5％，更优选不低于99.9％。
[0028]
本发明的优选技术方案中，制得的氢醌中对苯醌的含量不高于0.1％，优选不高于0.08％，还优选不高于0.05％，更优选不高于0.03％。
[0029]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌中苯胺的含量均不高于0.08％，优选不高于0.05％，还优选不高于0.03％。
[0030]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌中硝基苯的含量均不高于0.08％，优选不高于0.05％，还优选不高于0.03％。
[0031]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌中除对苯醌、苯胺、硝基苯之外的有关物质的总含量不高于0.3％，优选不高于0.1％，还优选不高于0.05％。
[0032]
本发明的优选技术方案中，所述有关物质选自对苯醌、苯胺、硝基苯、连苯三酚、间
苯二酚、邻苯二酚的任一种或组合。
[0033]
本发明的优选技术方案中，所述有关物质选自对苯醌、苯胺、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚、偏苯三酚、间苯三酚、苯酚、对苯二酚硫酸钾、硝基苯的任一种或组合。
[0034]
本发明的目的在于提供一种高安全性的氢醌组合物，所述氢醌组合物中的氢醌纯度不低于99.0％，氢醌组合物中对苯醌、苯胺的含量不高于0.1％。
[0035]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌组合物中的氢醌纯度不低于99.5％，优选不低于99.9％。
[0036]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌组合物中对苯醌、苯胺的含量不高于0.08％，优选不高于0.05％，还优选不高于0.03％。
[0037]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌组合物中除对苯醌、苯胺之外的有关物质的总含量不高于0.3％，优选不高于0.1％，还优选不高于0.05％。
[0038]
本发明的优选技术方案中，所述有关物质选自对苯醌、苯胺、硝基苯、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚的任一种或组合。
[0039]
本发明的优选技术方案中，所述有关物质选自对苯醌、苯胺、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚、偏苯三酚、间苯三酚、苯酚、对苯二酚硫酸钾、硝基苯的任一种或组合。
[0040]
本发明的目的在于提供一种高效分离并检测氢醌中有关物质的高效液相色谱法，所述方法中的色谱柱选自反相柱或可采用反相溶剂的正相柱的任一种，所述流动相由a相和b相组成，其中，a相选自水、甲醇水溶液、乙腈水溶液中的任一种，b相选自甲醇、乙腈中的任一种，检测波长为200-400nm，进样量为1-100μl，柱温为10-45℃。
[0041]
本发明的优选技术方案中，所述a相中含有浓度为0-0.5％的酸，优选a相中的酸含量为0.02-0.3％，还优选a相中的酸含量为0.05-0.1％。
[0042]
本发明的优选技术方案中，所述a相ph1.0-ph6.0，优选a相ph2.0-ph5.0，更优选a相ph2.5-ph4.0，还优选a相ph2.7-ph3.85。
[0043]
本发明的优选技术方案中，所述的酸选自甲酸、冰乙酸、三氟乙酸、磷酸、磷酸盐的任一种或其组合，优选磷酸盐选自磷酸二氢钾、磷酸二氢钠、磷酸二氢铵的任一种或其组合。
[0044]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相:b相的体积比为99:1-70:30，优选为98:2-80:20，更优选为97:3-90:10。
[0045]
本发明的优选技术方案中，所述流动相洗脱选自等度洗脱、梯度洗脱的任一种。
[0046]
本发明的优选技术方案中，所述流动相的流速为0.6-1.5ml/min，优选为0.8-1.2ml/min，更优选为0.9-1.0ml/min。
[0047]
本发明的优选技术方案中，所述检测波长为210nm-290nm，优选为210-230nm。
[0048]
本发明的优选技术方案中，稀释溶剂用于配置、溶解、稀释供试品溶液、对照溶液、对照品溶液的任一种，优选稀释溶剂选自水、甲醇、乙腈、流动相的任一种。
[0049]
本发明的优选技术方案中,所述柱温为20-40℃，优选为20℃、25℃、30℃、35℃的任一种。
[0050]
本发明的优选技术方案中，所述的进样量为5-50μl，优选为10μl、15μl、20μl、30μl、40μl的任一种。
[0051]
本发明的优选技术方案中，所述的色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷
基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种。
[0052]
本发明的优选技术方案中，所述的色谱柱选自gl-science、wondasil、tskgel、agela venusil、inertsil ods-p、xbridge hplc色谱柱的任一种或其组合。
[0053]
本发明的优选技术方案中，所述色谱柱的直径为3-5mm，色谱柱的长度100-300mm，色谱柱中的填料粒径为3-5μm。
[0054]
本发明的优选技术方案中，所述的色谱柱选自岛津gl-science c18wondasil c18 superb 4.6
×
250mm 5μm、inertsil ods-p4.6
×
250mm 5μm、tosoh tskgel c18 4.6
×
250mm 5μm、agela venusil c18 4.6
×
250mm 5μm的任一种或其组合。
[0055]
本发明的优选技术方案中,供试品浓度为0.5μg/ml-3mg/ml，优选为1μg/ml-2mg/ml，更优选为2μg/ml-1mg/ml。
[0056]
本发明的优选技术方案中，氢醌中的有关物质选自对苯醌、苯胺、偏苯三酚、间苯三酚、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚、苯酚、对苯二酚硫酸钾、硝基苯中的任一种或其组合。
[0057]
本发明的优选技术方案中,所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种，流动相中的a相：b相的体积比为80:20-95：5，其中，a相为0.03-0.50％的冰乙酸溶液，b相为甲醇，等度洗脱，检测波长为210-290nm，进样量为5-50μl，柱温为25-35℃，流速为0.6-1.5ml/min。
[0058]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为85:15-92：8，其中，a相为0.05-0.25％冰乙酸溶液，b相为甲醇，等度洗脱，检测波长为210-230nm，进样量为5-20μl，柱温为28-32℃，流速为0.8-1.2ml/min。
[0059]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为90:10，其中，a相为0.1％冰乙酸溶液，b相为甲醇，等度洗脱，检测波长为210nm、220nm、230nm的任一种或其组合，进样量为10-15μl，柱温为30℃，流速为0.9-1ml/min。
[0060]
本发明的优选技术方案中,所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种，流动相中的a相：b相的体积比为90:10-99：1，其中，a相为0.03-0.50％冰乙酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-290nm，进样量为5-50μl，柱温为25-35℃，流速为0.6-1.5ml/min。
[0061]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为95:5-98：2，其中，a相为0.05-0.25％冰乙酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-230nm，进样量为5-20μl，柱温为28-32℃，流速为0.8-1.2ml/min。
[0062]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为97:3-94:6，其中，a相为0.1％冰乙酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210nm、220nm、230nm的任一种或其组合，进样量为5-10μl，柱温为30℃，流速为0.9-1.0ml/min。
[0063]
本发明的优选技术方案中,所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种，流动相中的a相：b相的体积比为85:15-98：2，其中，a相为0.015-0.035％磷酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-290nm，进样量为5-50μ
l，柱温为25-35℃，流速为0.6-1.5ml/min。
[0064]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为90:10-97：3，其中，a相为0.020-0.030％磷酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-230nm，进样量为5-30μl，柱温为28-32℃，流速为0.8-1.2ml/min。
[0065]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为95:5，其中，a相为0.025％的磷酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210nm、220nm、230nm的任一种或其组合，进样量为10μl-20μl，柱温为30℃，流速为0.9-1.1ml/min。
[0066]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为94:6，其中，a相为0.02％的磷酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210nm、220nm、230nm，进样量10μl-20μl，柱温为30℃，流速：0.8-1.2ml/min。
[0067]
本发明的优选技术方案中,所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种，流动相为0.005-0.05mol/l磷酸水溶液，等度洗脱，检测波长为210-290nm，进样量5μl-50μl，柱温为25-35℃，流速：0.6-1.2ml/min。
[0068]
本发明的优选技术方案中，流动相为0.01-0.03mol/l磷酸水溶液，等度洗脱，检测波长为210-230nm，进样量5μl-30μl，柱温为28-32℃，流速：0.6-1.0ml/min。
[0069]
本发明的优选技术方案中，流动相为0.02mol/l磷酸水溶液，等度洗脱，检测波长选自210nm、220nm、230nm的任一种或其组合，进样量为10μl-20μl，柱温为30℃，流速：0.6-0.8ml/min。
[0070]
本发明的优选技术方案中,所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种，流动相中的a相：b相的体积比为85:15-98：2，其中，a相为ph1-5的磷酸盐缓冲溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-290nm，进样量为5-50μl，柱温为25-35℃，流速为0.6-1.5ml/min。
[0071]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为90:10-97：3，其中，a相为ph2-4的磷酸盐缓冲溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-230nm，进样量为5-30μl，柱温为28-32℃，流速为0.8-1.2ml/min。
[0072]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为95:5，其中，a相为ph3-3.5的磷酸二氢钾缓冲溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210nm、220nm、230nm的任一种或其组合，进样量10μl-20μl，柱温为30℃，流速：1ml/min。
[0073]
本发明的优选技术方案中,所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种，流动相中的a相：b相的体积比为85:15-99：1，其中，a相为ph1-6的冰乙酸水溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-290nm，进样量为5-50μl，柱温为25-35℃，流速为0.6-1.5ml/min。
[0074]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为90:10-98：2，其中，a相为ph3-4的冰乙酸水溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-230nm，进样量为5-30μl，柱温为28-32℃，流速为0.8-1.2ml/min。
[0075]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为97:3，其中，a相为
ph3.5-ph3.85的冰乙酸水溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长选自210nm、220nm、230nm的任一种或其组合，进样量10μl-20μl，柱温为30℃，流速：1ml/min。
[0076]
本发明的优选技术方案中,所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种，流动相中的a相：b相的体积比为50:50-85:15，其中，a相为ph1-6的磷酸盐缓冲溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-290nm，进样量为5-50μl，柱温为25-35℃，流速为0.6-1.5ml/min。
[0077]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为60:40-80:20，其中，a相为ph2-5的磷酸盐缓冲溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-230nm，进样量为5-30μl，柱温为28-32℃，流速为0.8-1.2ml/min。
[0078]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为75:25，其中，a相为ph3-4的磷酸二氢钾缓冲溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210nm、220nm、230nm的任一种或其组合，进样量10μl-20μl，柱温为30℃，流速：1ml/min。
[0079]
本发明的优选技术方案中,所述色谱柱选自十八烷基键合硅胶反相柱、十二烷基键合硅胶反相柱、八烷基键合硅胶反相柱、六烷基键合硅胶反相柱、四烷基键合硅胶反相柱、丙基酰胺键合硅胶柱的任一种，流动相中的a相：b相的体积比为50:50-85:15，其中，a相为ph1-6的冰乙酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-290nm，进样量为5-50μl，柱温为25-35℃，流速为0.6-1.5ml/min。
[0080]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为60:40-80:20，其中，a相为ph2-5的冰乙酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210-230nm，进样量为5-30μl，柱温为28-32℃，流速为0.8-1.2ml/min。
[0081]
本发明的优选技术方案中，流动相中的a相：b相的体积比为75:25，其中，a相为ph3-4的冰乙酸溶液，b相为乙腈，等度洗脱，检测波长为210nm、220nm、230nm的任一种或其组合，进样量10μl-20μl，柱温为30℃，流速：1ml/min。
[0082]
本发明的另一目的在于提供本发明的高效液相色谱法用于检测氢醌、氢醌组合物、氢醌制剂的任一种，优选氢醌制剂为氢醌乳膏剂。
[0083]
本发明的目的在于提供一种高安全性的氢醌组合物的制备方法，包括下述步骤：1)将苯胺、mno2、硫酸按照苯胺：mno2：硫酸的摩尔比为1:1-5:2-6加入反应装置，搅拌至反应完全，制得对苯醌，其中，加料温度为0-15℃，反应温度为0-30℃；2)将制得的对苯醌反应液经蒸汽蒸馏，在收集的蒸馏冷凝液中，按照对苯醌：铁粉的摩尔比为1:0.5-1.0加入铁粉，在70-100℃条件下，搅拌至反应完全，制得氢醌。
[0084][0085]
本发明的优选技术方案中，步骤1)中，苯胺：mno2：硫酸的摩尔比为1:1-5:2-6，优选为1:2-4:3-5，更优选为1:3:4。
[0086]
本发明的优选技术方案中，步骤1)的加料温度为5-10℃。
[0087]
本发明的优选技术方案中，步骤1)的反应温度为10-25℃。
[0088]
本发明的优选技术方案中，步骤2)在避光、无氧条件下进行还原反应。
[0089]
本发明的优选技术方案中，步骤2)中，对苯醌：铁粉的摩尔比为1:0.6-0.9，优选为1:0.7-0.8。
[0090]
本发明的优选技术方案中，步骤2)中的反应温度为80-100℃，优选为90-100℃。
[0091]
本发明的优选技术方案中，分离除去步骤2)制得的反应产物中的氧化铁渣后，将收集的分离液经减压浓缩或真空浓缩，制得反应浓缩液。
[0092]
本发明的优选技术方案中，将步骤2)制得的反应浓缩液中加入还原剂、抗氧剂、活性炭的任一种或其组合，搅拌，分离，收集滤液，冷却结晶，分离，收集结晶，干燥，制得氢醌。
[0093]
本发明的优选技术方案中，步骤2)的浓缩液反应体系中，氢醌：还原剂的摩尔比为1:0.001-0.2，优选为1:0.002-0.15，更优选为1:0.005-0.1。
[0094]
本发明的优选技术方案中，所述的还原剂选自铁粉、锌粉的任一种或其组合。
[0095]
本发明的优选技术方案中，浓缩液反应体系中，抗氧剂：氢醌的重量百分比为0.1％-1.0％，优选为0.2％-0.9％，更优选为0.4％-0.8％。
[0096]
本发明的优选技术方案中，所述的抗氧剂选自焦亚硫酸钠、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、v
c
中的任一种或其组合。
[0097]
本发明的优选技术方案中，所述的结晶在无氧条件下进行。
[0098]
本发明的优选技术方案中，所述的无氧条件选自充入惰性气体，优选惰性气体选自氮气、氩气、氦气的任一种或其组合。
[0099]
本发明的优选技术方案中，所述冷却结晶选自搅拌冷却析晶、静置冷却析晶中的任一种或其组合。
[0100]
本发明的优选技术方案中，所述的冷却结晶温度为-5℃-25℃，优选为0-20℃，更优选为5-15℃。
[0101]
本发明的优选技术方案中，所述分离选自过滤、离心、膜分离的任一种或其组合。
[0102]
本发明的优选技术方案中，收集结晶经洗涤后干燥，优选洗涤溶剂为水。
[0103]
本发明的优选技术方案中，所述干燥选自热风干燥、真空干燥、减压干燥的任一种或其组合。
[0104]
本发明的优选技术方案中，所述干燥温度为45-75℃，优选为50-70℃，更优选为55-65℃。
[0105]
本发明的优选技术方案中，步骤1)或步骤2)中的反应溶剂为水。
[0106]
本发明的优选技术方案中，制得氢醌的纯度不低于99.0％，优选不低于99.5％，更优选不低于99.9％。
[0107]
本发明的优选技术方案中，制得的氢醌中对苯醌的含量不高于0.1％，优选不高于0.08％，还优选不高于0.05％，更优选不高于0.03％。
[0108]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌中苯胺的含量均不高于0.08％，优选不高于0.05％，还优选不高于0.03％。
[0109]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌中硝基苯的含量均不高于0.08％，优选不高于0.05％，还优选不高于0.03％。
[0110]
本发明的优选技术方案中，所述氢醌中除对苯醌、苯胺、硝基苯之外的有关物质的
总含量不高于0.3％，优选不高于0.1％，还优选不高于0.05％。
[0111]
本发明的优选技术方案中，所述有关物质选自对苯醌、苯胺、硝基苯、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚的任一种或组合。
[0112]
本发明的优选技术方案中，所述有关物质选自对苯醌、苯胺、硝基苯、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚、偏苯三酚、间苯三酚、苯酚、对苯二酚硫酸钾的任一种或组合。
[0113]
本发明的目的在于提供一种高安全性的氢醌组合物用于制备氢醌制剂中的应用。
[0114]
本发明的优选技术方案中，氢醌组合物中的氢醌纯度不低于99.0％，优选不低于99.5％，更优选不低于99.9％。
[0115]
本发明的优选技术方案中，氢醌组合物中对苯醌的含量不高于0.1％，优选不高于0.08％，还优选不高于0.05％，更优选不高于0.03％。
[0116]
本发明的优选技术方案中，氢醌组合物中苯胺的含量均不高于0.08％，优选不高于0.05％，还优选不高于0.03％。
[0117]
本发明的优选技术方案中，氢醌组合物中硝基苯的含量均不高于0.08％，优选不高于0.05％，还优选不高于0.03％。
[0118]
本发明的优选技术方案中，氢醌组合物中除对苯醌、苯胺、硝基苯之外的有关物质的总含量不高于0.3％，优选不高于0.1％，还优选不高于0.05％。
[0119]
本发明的优选技术方案中，所述有关物质选自对苯醌、苯胺、硝基苯、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚的任一种或组合。
[0120]
本发明的优选技术方案中，所述有关物质选自对苯醌、苯胺、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚、偏苯三酚、间苯三酚、苯酚、对苯二酚硫酸钾、硝基苯的任一种或组合。
[0121]
本发明的优选技术方案中，所述的氢醌制剂选自乳膏、凝胶、乳剂、霜剂、溶液、泡沫剂、气雾剂、喷雾剂、搽剂、糊剂的任一种。
[0122]
本发明的优选技术方案中，所述的氢醌制剂选自氢醌药物制剂、氢醌化妆品的任一种。
[0123]
本发明的优选技术方案中，所述的氢醌制剂用于制备防治皮肤病症、色斑、色素沉着症、祛斑、增白的药物中的应用。
[0124]
本发明优选的技术方案中，所述色斑选自雀斑、黄褐斑、老年斑、炎症后色素沉着斑、局部色素沉着所致色斑的任一种或其并发症。
[0125]
本发明所述的“无氧条件”为隔绝氧气或隔绝其它氧化剂的反应条件，所述的“无氧条件”选自采用惰性气体保护或者加入还原剂的任一种或其组合。
[0126]
本发明采用waters2695高效液相色谱仪、thermo fisher u3000高效液相色谱仪。
[0127]
除非另有说明，本发明涉及液体与液体之间的百分比时，所述的百分比为体积/体积百分比；本发明涉及液体与固体之间的百分比时，所述百分比为体积/重量百分比；本发明涉及固体与液体之间的百分比时，所述百分比为重量/体积百分比；其余为重量/重量百分比。
[0128]
与现有技术相比，本发明具有下述有益效果：
[0129]
1、本发明提供了一种高安全性的氢醌组合物，并严格控制组合物中的对苯醌限量，促进了氢醌及其制剂的质量升级，显著提高了氢醌的用药安全性，显著降低甚至避免了对苯醌与氢醌之间的副反应而影响产品色泽和药品质量。
[0130]
2、本发明的高效液相色谱法显著改善了氢醌及其有关物质(如对苯醌、间苯二酚、连苯三酚等)的分离度，实现了氢醌及其有关物质的高效分离与检测。本发明的检测方法具有操作简便、分离度高、专属性好、灵敏度高等优点，利于更好地控制氢醌及其制剂的质量，保障药品的有效性和安全性。
[0131]
3、本发明的制备方法在避光、避氧条件下进行，避免了氧化反应的发生并提高反应速率，有效降低了副反应的发生和副产物的生成，提高了反应收率和制得产品的纯度及质量，利于保障用药安全，并具有操作简便、绿色环保、成本更优，适合工业化生产等优点。
附图说明
[0132]
图1水-甲醇(70:30)条件下氢醌中对苯醌、间苯二酚、连苯三酚的分离与检测结果；
[0133]
图2水-甲醇(70:30)条件下对苯醌、苯胺、氢醌、连苯三酚、间苯二酚的分离与检测结果；
[0134]
图3水-甲醇(70:30)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0135]
图4 0.1％冰乙酸水溶液-甲醇(90:10)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0136]
图5 0.1％冰乙酸水溶液-乙腈(94:6)条件下氢醌、对苯醌、连苯三酚、间苯二酚的分离与检测结果；
[0137]
图6 0.025％磷酸水溶液-乙腈(94:6)条件下氢醌、对苯醌、连苯三酚、间苯二酚的分离与检测结果；
[0138]
图7 ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95:5)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0139]
图8 ph3.85冰乙酸水溶液-乙腈(97:3)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0140]
图9 0.02mol/l磷酸水溶液条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0141]
图10 0.1％冰乙酸水溶液-甲醇(90:10)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0142]
图11实施例1制得氢醌在0.1％冰乙酸水溶液-乙腈(97:3)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0143]
图12实施例2制得氢醌在0.1％冰乙酸水溶液-乙腈(97:3)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0144]
图13实施例3制得氢醌在0.1％冰乙酸水溶液-乙腈(97:3)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0145]
图14a实施例4制得氢醌精制品在ph3.85磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(75:25)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0146]
图14b硝基苯在ph3.85磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(75:25)条件下的定位；
[0147]
图15实施例4制得氢醌精制品在ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95:5)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果；
[0148]
图16实施例5制得氢醌精制品在ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95:5)条件下氢醌
中有关物质的分离与检测结果；
[0149]
图17实施例6制得氢醌精制品在ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95:5)条件下氢醌中有关物质的分离与检测结果。
具体实施方式
[0150]
下面通过实施例对本发明作本发明优选的技术方案说明。应该理解的是，本发明实施例仅用于说明本发明，而不是对本发明的限制，在本发明的构思前提下对本发明的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
[0151]
实施例1本发明氢醌的制备
[0152]
氢醌的制备方法，包括下述步骤：
[0153]
1)将mno
2 280g、98％硫酸430g、水2.0l加入反应瓶内，在5-10℃条件下，缓慢滴加苯胺100g，搅拌，逐渐升温至25℃左右，至反应完全。将反应液在60-90℃蒸汽蒸馏，将收集的对苯醌冷凝液导入另一反应瓶；
[0154]
2)在遮光、氮气保护条件下，在收集的对苯醌冷凝液中加入铁粉42g，在90-100℃条件下，搅拌反应3-4小时，至反应完全，过滤，收集的滤液减压浓缩至浓缩液中氢醌含量为35％；
[0155]
3)在浓缩液中加入焦亚硫酸钠550mg、活性炭2.2g、锌粉330mg，加热至95℃，热过滤，收集滤液，降温至5℃，搅拌析晶，离心，收集湿品，60℃真空干燥，制得氢醌100.86g。
[0156]
实施例2本发明氢醌的制备
[0157]
氢醌的制备方法，包括下述步骤：
[0158]
1)将mno
2 350g、98％硫酸500g、水2.0l加入反应瓶内，在5℃-8℃条件下，缓慢滴加苯胺100g，搅拌，逐渐升温至25℃左右，至反应完全。将反应液60-90℃条件下蒸汽蒸馏，将收集的对苯醌冷凝液导入另一反应瓶；
[0159]
2)在遮光、氮气保护条件下，在收集的对苯醌冷凝液中加入铁粉60g，在90-100℃条件下，搅拌反应2-3小时，至反应完全，过滤，收集滤液减压浓缩至浓缩液中氢醌含量为25％；
[0160]
3)在浓缩液中加入焦亚硫酸钠750mg、活性炭3.1g、铁粉500mg，加热至90℃，过滤，将滤液降温至8℃，搅拌析晶，离心，收集湿品，65℃真空干燥，制得氢醌96.20g。
[0161]
实施例3本发明氢醌的制备
[0162]
氢醌的制备方法，包括下述步骤：
[0163]
1)将mno
2 250g、98％硫酸370g、水2.5l加入反应瓶内，在6-10℃条件下，缓慢滴加苯胺100g，搅拌，逐渐升温至25℃左右,至反应完全。将反应液在70-95℃蒸汽蒸馏，将收集的对苯醌冷凝液导入另一反应瓶；
[0164]
2)在遮光，氮气保护条件下，在收集的对苯醌冷凝液中加入铁粉31g，在90-100℃条件下搅拌反应2-3小时，至反应完全，过滤，收集滤液减压浓缩至浓缩液中氢醌含量为30％；
[0165]
3)在浓缩液中加入焦亚硫酸钠550mg、活性炭2.20g、锌粉350mg，加热至90℃，过滤，将滤液降温至10℃，搅拌析晶，离心，收集湿品，65℃真空干燥，制得氢醌98.43g。
[0166]
实施例4本发明氢醌的纯化
[0167]
氢醌的纯化方法，包括下述步骤：
[0168]
将25g待精制的氢醌溶解于100ml 95℃水中，再加入焦亚硫酸钠140mg、活性炭600mg、锌粉100mg，搅拌40min，趁热过滤，收集滤液，降温至8℃，静置析晶11h，过滤，用水洗涤收集结晶后，将其置于70℃真空干燥，将制得的22.8g氢醌用棕色玻璃瓶内包并用黑色袋外包，瓶内充氮。
[0169]
实施例5本发明氢醌的纯化
[0170]
氢醌的纯化方法，包括下述步骤：
[0171]
将40g待精制的氢醌溶解于120ml 92℃水中,再加入焦亚硫酸钠100mg、活性炭400mg、铁粉60mg，搅拌35min，趁热过滤，收集滤液，氮气保护，降温至5℃，静置析晶12h，过滤，用水洗涤收集结晶后，将其置于65℃真空干燥，将制得的36.8g氢醌用棕色玻璃瓶内包并用黑色袋外包，瓶内充氮。
[0172]
实施例6本发明氢醌的纯化
[0173]
氢醌的纯化方法，包括下述步骤：
[0174]
将50g待精制的氢醌溶解于140ml 100℃水中,再加入锌粉175mg后，搅拌30min，再加入活性炭1.10g和焦亚硫酸钠275mg，搅拌10min，趁热过滤，收集滤液，氮气保护，降温至10℃，静置析晶12h，趁热过滤，用水洗涤收集结晶后，将其置于65℃真空干燥，将制得的45g氢醌用棕色玻璃瓶内包并用黑色袋外包，瓶内充氮。
[0175]
对比例1-3氢醌中杂质检测
[0176]
1、色谱条件
[0177][0178][0179]
2、溶液的配制
[0180]
供试品溶液：称取氢醌样品，加稀释溶剂溶解并稀释制成每1ml约含氢醌1mg的溶液。
[0181]
对照溶液：精密量取供试品溶液1ml，将其置于100ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
[0182]
杂质定位溶液：精密称定对苯二酚硫酸钾、偏苯三酚、间苯三酚、连苯三酚、苯胺、间苯二酚、邻苯二酚、对苯醌和苯酚适量，用稀释溶剂溶解并定量稀释制成每1ml约含各杂质1mg的贮备液。精密量取各杂质贮备液适量，分别用稀释溶剂稀释制成每1ml约含各杂质10μg的溶液，作为定位溶液。
[0183]
混合杂质溶液：精密量取供试品溶液和杂质贮备液适量，将其置于同一量瓶中，用稀释溶剂定量稀释制成每1ml约含主成分及杂质10μg的混合溶液。
[0184]
精密量取氢醌对照溶液和对苯醌、间苯二酚、连苯三酚定位溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见图1、表1。
[0185]
表1
[0186]
化合物保留时间峰面积拖尾因子分离度理论塔板数半峰宽连苯三酚4.3574.37691.150.20192000.074氢醌4.3864.49190.989.11199160.073间苯二酚5.9535.7780.960.92201790.099对苯醌6.1323.66431.00n/a226880.096
[0187]
精密量取氢醌对照溶液和对苯醌、苯胺、连苯三酚、间苯二酚定位溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见图2、表2。
[0188]
表2
[0189]
化合物保留时间峰面积拖尾因子分离度理论塔板数半峰宽连苯三酚4.3574.37691.150.20192000.074氢醌4.3864.49190.989.11199160.073间苯二酚5.9535.77800.960.92201790.099对苯醌6.1323.66431.0015.31226880.096苯胺9.99022.27971.07n/a227520.156
[0190]
精密量取对苯醌定位溶液、杂质混合溶液，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。结果见图3、表3。
[0191]
表3
[0192]
化合物保留时间峰面积拖尾因子分离度理论塔板数半峰宽对苯二酚硫酸钾2.4321.14981.1019.04537420.025偏苯三酚3.4980.2532n/a0.84712140.031间苯三酚3.5693.26181.165.93712140.054连苯三酚/氢醌4.3699.31131.058.82162920.081间苯二酚5.9485.80850.990.95205480.098对苯醌6.1323.66431.007.18226880.096邻苯二酚7.7114.35011.047.42215480.124苯胺9.93622.92541.0711.74177180.176苯酚14.6574.15230.95n/a232030.226
[0193]
实施例7氢醌中杂质的分离与检测
[0194]
1、色谱条件：
[0195]
名称色谱参数色谱柱tosoh tskgel c18 4.6*250mm 5μm流动相0.1％冰乙酸溶液-甲醇(90：10)洗脱梯度等度洗脱流速1.0ml/min检测波长220nm柱温30℃
进样量10μl稀释溶剂0.1％冰乙酸溶液
[0196]
2、溶液的配制
[0197]
供试品溶液：称取氢醌样品，加稀释溶剂溶解并稀释制成每1ml约含氢醌1mg的溶液。
[0198]
对照溶液：精密量取供试品溶液1ml，将其置于100ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
[0199]
杂质定位溶液：精密称定对苯二酚硫酸钾、偏苯三酚、间苯三酚、连苯三酚、苯胺、间苯二酚、邻苯二酚、对苯醌和苯酚适量，用稀释溶剂溶解并定量稀释制成每1ml约含各杂质1mg的贮备液，精密量取适量，分别用稀释溶剂稀释制成每1ml约含杂质10μg的溶液，作为定位溶液。
[0200]
混合杂质溶液：精密量取供试品溶液和杂质贮备液适量，置同一量瓶中，用稀释溶剂定量稀释制成每1ml约含主成分及杂质10μg的混合溶液。
[0201]
精密量取对苯醌定位溶液、混合杂质溶液，分别注入液相色谱仪，依法测定，记录色谱图。结果见图4、表4。
[0202]
表4
[0203]
化合物保留时间峰面积拖尾因子分离度理论塔板数半峰宽对苯二酚硫酸钾4.9133.30603.013.5283620.126偏苯三酚5.7470.72901.151.28147220.111苯胺6.0370.60181.573.82149050.116间苯三酚6.9734.20961.092.24161630.129连苯三酚7.5633.99891.102.69177770.134氢醌8.2976.14921.0814.72196140.139间苯二酚13.4203.70351.071.22227610.209对苯醌14.0032.08741.314.47152050.267邻苯二酚16.3103.06711.0623.48238600.249苯酚33.9702.72111.07n/a253050.503
[0204]
实施例8氢醌中有关物质的高效分离与检测
[0205]
1、色谱条件
[0206][0207][0208]
2、溶液的配制
[0209]
精密称定所需量的氢醌、对苯醌、连苯三酚、间苯二酚，将其分别稀释溶剂溶解定量至50ml，将其制成每1ml中约含0.3mg的溶液，摇匀，即得。
[0210]
精密量取各溶液，分别注入液相色谱仪，依法测定，记录色谱图。结果见图5。
[0211]
实施例9氢醌中有关物质的高效分离与检测
[0212]
1、色谱条件
[0213]
仪器色谱参数色谱柱gl-science，wondasil c18 superb 4.6
×
250mm 5μm流动相0.025％磷酸水溶液-乙腈(94:6)洗脱梯度等度洗脱流速1.0ml/min检测波长210nm柱温30℃进样体积10μl稀释溶剂0.025％磷酸水溶液-乙腈(94:6)
[0214]
2、溶液的配制
[0215]
按照实施例7方法配制对苯醌、连苯三酚、间苯二酚的定位溶液和氢醌供试品溶液。精密量取各溶液，分别注入液相色谱仪，依法测定，记录色谱图。结果见图6。
[0216]
实施例10氢醌中有关物质的高效分离与检测
[0217]
1、色谱条件
[0218]
名称色谱参数色谱柱inertsil ods-p 4.6
×
250mm 5μm流动相ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95：5)洗脱梯度等度洗脱流速1.0ml/min进样量10μl检测波长220nm柱温30℃流动相ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95：5)
[0219]
2、溶液的配制
[0220]
溶剂配制同实施例7，精密量取对苯醌定位溶液、杂质混合溶液，分别注入液相色谱仪，依法测定，记录色谱图。结果见图7、表5。
[0221]
表5
[0222]
化合物保留时间峰面积拖尾因子分离度理论塔板数半峰宽对苯二酚硫酸钾/苯胺5.5272.08581.722.55151490.106偏苯三酚6.0702.56431.074.46179090.107间苯三酚7.0833.93101.074.26191700.12连苯三酚8.1574.05761.082.05211870.132氢醌8.7032.78721.0314.87234530.134对苯醌13.8472.34121.001.61237340.212
间苯二酚14.5333.61191.056.97255440.214邻苯二酚17.8303.06951.0423.90263240.259苯酚36.5703.23041.03n/a268370.525
[0223]
实施例11氢醌中有关物质的高效分离与检测
[0224]
1、色谱条件
[0225][0226][0227]
2、溶液的配制
[0228]
溶剂配制同实施例7，精密量取对苯醌定位溶液、杂质混合溶液，分别注入液相色谱仪，依法测定，记录色谱图。结果见图8、表6。
[0229]
表6
[0230]
化合物保留时间峰面积拖尾因子分离度理论塔板数半峰宽对苯二酚硫酸钾5.4712.58641.524.8554190.175偏苯三酚6.8293.43081.128.00234120.105间苯三酚8.7005.86661.041.59253870.129连苯三酚9.1335.68191.043.42227240.143氢醌10.1174.41391.071.59270250.145苯胺10.6123.04981.1114.86223510.167对苯醌16.8833.336511.10243150.255间苯二酚17.4375.83291.055.81272380.249邻苯二酚20.6714.69921.0123.90248730.308苯酚42.4924.02391.04n/a273160.605
[0231]
实施例12氢醌中有关物质的高效分离与检测
[0232]
1、色谱条件
[0233]
名称色谱参数色谱柱inertsil ods-p 4.6
×
250mm 5μm流动相0.02mol/l磷酸水溶液(ph2.7)洗脱梯度等度洗脱流速0.6ml/min检测波长210nm进样量10μl检测波长210nm
柱温30℃稀释溶剂0.02mol/l磷酸水溶液(ph2.7)
[0234]
2、溶液的配制
[0235]
溶剂配制同实施例7，精密量取各杂质定位溶液、对照溶液、混合杂质溶液，分别注入液相色谱仪，依法测定，记录色谱图。结果见图9、表7。
[0236]
表7
[0237]
化合物保留时间峰面积拖尾因子分离度理论塔板数半峰宽对苯二酚硫酸钾13.4106.20781.201.55179440.236苯胺14.1907.59681.502.41158160.266偏苯三酚15.4230.71601.469.16218520.246连苯三酚20.60716.50371.111.85229440.32间苯三酚21.82321.88011.103.41232070.337氢醌24.24711.40161.1117.81234230.373间苯二酚42.41711.66791.074.52238380.647邻苯二酚48.7539.86681.072.31231810.754对苯醌52.7002.29981.20n/a168030.957
[0238]
上述色谱条件实现氢醌和各杂质间色谱峰有效分离的有效分离与检测，实现药品质量控制。
[0239]
实施例13氢醌中有关物质的高效分离与检测
[0240]
1、色谱条件
[0241]
仪器色谱参数色谱柱gl-science，wondasil c18 superb 4.6
×
250mm 5μm流动相0.1％冰乙酸水溶液-甲醇(90:10)洗脱梯度等度洗脱流速1.0ml/min检测波长220nm柱温30℃进样体积10μl稀释溶剂0.1％冰乙酸水溶液
[0242]
2、溶液的配制
[0243]
溶剂配制同实施例7，精密量取各杂质定位溶液、对照溶液、混合杂质溶液，分别注入液相色谱仪，依法测定，记录色谱图，结果见图10、表8和表9。
[0244]
表8杂质定位结果
[0245]
[0246][0247]
表9混合杂质溶液考察结果
[0248]
序号混合杂质保留时间相对保留峰面积分离度理论板数1对苯二酚硫酸钾4.9130.593.3064.1383622偏苯三酚5.7470.690.7291.5147223苯胺6.0370.730.60184.5149054间苯三酚6.9730.844.20962.65161635连苯三酚7.5630.913.99893.17177776氢醌8.297——6.149217.33196147间苯二酚13.421.623.70357.45227618邻苯二酚16.311.973.067127.74238609苯酚33.974.092.7211n/a25305
[0249]
实施例7-13方法学验证结果：
[0250]
定量限与检测限
[0251]
10个物质的检测限为0.32-1.65ng，定量限为0.64-3.30ng。
[0252]
线性与范围
[0253]
10个物质在限度浓度200％至定量限浓度范围内，各杂质及主峰线性关系良好，相关系数均大于0.998，截距均小于限度浓度响应值25％。
[0254]
精密度
[0255]
重复性：同一批次样品，重复测定6次，6次测得的结果无明显差异，表明本法重复性良好。
[0256]
回收率
[0257]
本方法测得本品中各杂质的高中低3个浓度(限度浓度的50％、100％、150％的溶液)9份样品回收率结果均在90％～110％范围内，且9份样品回收率结果的rsd均小于5.0％，结果符合验证要求，本方法的准确度良好。
[0258]
溶液稳定性
[0259]
有关物质供试品溶液在室温条件下分别于0h、2h、4h、6h、8h、15h、24h进样检测，各杂质检出量无明显变化，且未检出新的杂质，说明本品在室温下放置24h，溶液稳定性良好。
[0260]
耐用性
[0261]
本品经改变柱温、流速、缓冲盐浓度、有机相比例、改变不同厂家色谱柱后杂质检出量及杂质个数均无明显变化；系统适用性溶液中杂质与主成分之间分分离良好。由此可
知，条件微调不会影响有关物质的测定，本方法耐用性较好。
[0262]
实施例14对苯醌的相容性
[0263]
偏苯三酚、连苯三酚和间苯三酚分别与对苯醌及氢醌配伍，考察溶液中峰面积的变化，结果见表10。
[0264]
表10对苯醌的配伍稳定性考察结果(峰面积)
[0265][0266][0267]
实施例15稳定性考察
[0268]
1、色谱条件
[0269]
仪器色谱参数色谱柱gl-science，wondasil c18 superb 4.6
×
250mm 5μm流动相0.025％磷酸水溶液-乙腈(95:5)洗脱梯度等度洗脱流速1.0ml/min检测波长210nm柱温30℃进样体积10μl稀释溶剂0.025％磷酸水溶液-乙腈(95:5)
[0270]
2、溶液的配制
[0271]
取氢醌原料药、对苯醌对照品，分别用稀释溶剂溶解并稀释制成供试品溶液和对照品溶液。
[0272]
分析检测供试品溶液和对照品溶液配置放置0h、2h、4h、6h、8h的成分变化。结果见表12、表13。
[0273]
表12氢醌稳定性考察结果
[0274] 0h2h4h6h8h主峰577.3538578.3176577.5982577.0191577.2214对苯醌未检出0.17760.20020.22120.2112峰面积％未检出0.030.030.040.04
[0275]
表13对苯醌稳定性考察结果
[0276] 0h2h4h6h8h
对苯醌2.43402.41212.38622.38282.4728
[0277]
实施例16-18本发明氢醌纯度检测
[0278]
1、色谱条件
[0279]
仪器色谱参数色谱柱gl-science，wondasil c18 superb 4.6
×
250mm 5μm流动相0.1％冰乙酸水溶液-乙腈(97:3)洗脱梯度等度洗脱流速1.0ml/min检测波长220nm柱温30℃进样体积10μl稀释溶剂0.1％冰乙酸水溶液-乙腈(97:3)
[0280]
2、溶液的配制
[0281]
检测样品：实施例1-3制得的氢醌。
[0282]
空白溶剂：0.1％冰乙酸水溶液-乙腈(97:3)。
[0283]
杂质定位溶液：精密称定对苯醌适量，加水溶解并稀释制成每1ml约含10μg的溶液，摇匀，即得。
[0284]
供试品溶液：精密称取氢醌适量，加稀释溶剂溶解并稀释制成每1ml约含1mg的溶液，摇匀，即得。
[0285]
对照溶液：精密量取供试品溶液1ml，将其置于100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
[0286]
取上述空白溶剂、杂质定位溶液、供试品溶液和对照品溶液各10μl，将其注入液相色谱仪中，记录色谱图，测试产品含量，结果见图11-13。
[0287]
实施例1-3氢醌纯度分别为99.95％、99.93％、99.96％。
[0288]
实施例19本发明氢醌纯度检测
[0289]
1、色谱条件
[0290][0291][0292]
2、溶液的配制
[0293]
检测样品：实施例4制得的氢醌精制品。
[0294]
空白溶剂：ph3.85磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(75:25)。
[0295]
供试品溶液：精密称取氢醌精制品适量，加稀释溶剂溶解并稀释制成每1ml约含1mg的溶液，摇匀，即得。
[0296]
对照溶液：精密量取供试品溶液1ml，将其置于100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
[0297]
硝基苯定位溶液：精密称取硝基苯适量，加稀释溶剂溶解并稀释制成每1ml约含1mg的溶液，摇匀，即得。
[0298]
取上述空白溶剂、供试品溶液和对照溶液，硝基苯定位溶液各10μl，将其注入液相色谱仪中，记录色谱图，结果见图14a-14b。
[0299]
实施例4氢醌纯度为100％。
[0300]
实施例20-22本发明氢醌纯度检测
[0301]
1、色谱条件
[0302]
仪器色谱参数色谱柱gl-science，wondasil c18 superb 4.6*250mm 5μm流动相ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95：5)洗脱梯度等度洗脱流速1.0ml/min检测波长220nm柱温30℃进样体积10μl稀释溶剂ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95：5)
[0303]
2、溶液的配制
[0304]
检测样品：实施例4-6制得的氢醌精制品。
[0305]
空白溶剂：ph3.0磷酸二氢钾缓冲液-乙腈(95：5)。
[0306]
供试品溶液：精密称取氢醌精制品适量，加稀释溶剂溶解并稀释制成每1ml约含1mg的溶液，摇匀，即得。
[0307]
对照溶液：精密量取供试品溶液1ml，将其置于100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得。
[0308]
取上述空白溶剂、供试品溶液和对照品溶液各10μl，将其注入液相色谱仪中，记录色谱图，测试产品含量，结果见图15-17。
[0309]
实施例4-6氢醌纯度分别为100％、100％、100％。
[0310]
以上对本发明具体实施方式的描述并不限制本发明，本领域技术人员可以根据本发明作出各种改变或变形，只要不脱离本发明的精神，均应属于本发明权利要求保护的范围。