代森铵的分析方法与流程

1.本发明涉及一种使用气相色谱质谱仪(gc/ms)分析残留于试样中的代森铵的方法。


背景技术：

2.代森铵(amobam)为乙撑双二硫代氨基甲酸盐系的有机硫杀菌剂，也以代森铵(
アモバム
)、代森铵(
アンビス
)、代森铵(
ジタンステンレス
)、代森铵(
ダイセンステンレス
)、乙撑双(二硫代氨基甲酸铵)、乙撑双(二硫代氨基甲酸铵)、1,2-乙二基双(氨基甲酰二硫代酸铵)(1，2－
エタンジイルビス
(
カルバモジチオ
酸
アンモニウム
)、乙撑双(二硫代氨基甲酸)二铵、n,n
’‑
乙撑双(二硫代氨基甲酸)双铵等的名称被命名。
3.代森铵具有下式：
4.【化学式1】
[0005][0006]
表示的结构，为容易分解的化合物，因此，迄今为止已知用
14
c标记的
14
c标记物来分析代森铵(非专利文献1)，但没有确立直接分析代森铵的方法。
[0007]
在由厚生劳动省所公布的“使用gc/ms的农药等的一齐试验法(农产品)”中，记载了乙腈作为用于萃取残留于试样中的农药的溶剂(非专利文献2)，在专利文献1中记载了优选乙腈及丙酮作为萃取溶剂。
[0008]
如上所述，在使用gc/ms的农药分析方法中，作为农药的萃取溶剂通常使用的是乙腈、丙酮等极性非质子溶剂，而很少使用甲醇、乙醇等极性质子溶剂。
[0009]
现有技术文献
[0010]
专利文献
[0011]
专利文献1：日本特开2018-36258号公报(权利要求3、第0079段)
[0012]
非专利文献
[0013]
非专利文献1：安全性评价资料、代森铵、2014年7月、环境省水
·
大气环境局土壤环境課农药环境管理室《url：https://www.env.go.jp/council/10dojo/y104-46/％e3％80％90％e8％b3％87％e6％96％99％ef％bc％95％ef％bc％8d％ef％bc％91％e3％80％91.pdf》
[0014]
非专利文献2：使用gc/ms的农药等的一齐试验法(农产品)(厚生劳动省)《url：https://www.mhlw.go.jp/stf/seisakunitsuite/bunya/0000075497.html》


技术实现要素：

[0015]
发明所要解决的问题
[0016]
本发明的目的在于，提供一种使用gc/ms直接分析残留于试样中的代森铵的方法。
[0017]
用于解决问题的技术方案
[0018]
本发明的要点如下所述。
[0019]
(1)一种代森铵的分析方法，该方法使用气相色谱质谱仪分析残留于试样中的代森铵，其中包括使用碳原子数1-3的醇作为萃取溶剂从试样中萃取代森铵。
[0020]
(2)根据上述(1)所述的方法，其中，作为萃取溶剂的碳原子数1-3的醇为甲醇、乙醇、1-丙醇或它们的混合物。
[0021]
(3)根据上述(1)或(2)所述的方法，其中，气相色谱质谱仪为气相色谱串联型质谱仪。
[0022]
(4)根据上述(1)-(3)中任一项所述的方法，其中，试样为生药、农作物或土壤。
[0023]
发明效果
[0024]
根据本发明，可以使用gc/ms直接分析残留于试样中的代森铵。
附图说明
[0025]
图1是表示本发明的实施方案的一个实例的示意图。
具体实施方式
[0026]
作为可适用于本发明的试样，只要是怀疑残留代森铵，就没有特别限制，可列举例如生药、中医制剂、农作物、土壤、畜产品、水产品、加工食品等，优选生药(例如人参(红参)、地黄、山药、龙胆、五味子、细辛)、农作物(例如：菊、苹果等)。
[0027]
在本发明中，作为用于从试样中萃取代森铵的溶剂，使用碳原子数1-3的醇，优选使用甲醇、乙醇、1-丙醇或它们的混合物。在残留农药的分析方法中作为萃取溶剂通常使用的乙腈、丙酮等极性非质子溶剂不能充分地回收代森铵。
[0028]
用作萃取溶剂的碳原子数1-3的醇优选是含水率低的(通常为5质量％以下)。
[0029]
萃取溶剂可以不含碳原子数1-3的醇以外的有机溶剂，但根据需要可以含有乙二胺四乙酸(edta)、edta
·
2na、edta
·
4na、edta
·
2nh4、edta
·
oh、edta
·
ca
·
2na等螯合剂或者硫酸钠、硫酸镁、无水硫酸钠、无水乙醇、无水硫酸镁等脱水剂。作为螯合剂，特别优选edta
·
2na；作为脱水剂，特别优选硫酸钠。
[0030]
本发明除使用碳原子数1-3的醇作为用于从试样中萃取代森铵的溶剂之外，没有特别限制，例如可以如下文那样实施。图1示出了将表示本发明的实施方案的一个实例的示意图。
[0031]
(1)试验品称量
[0032]
取0.1-10g试验品、通常约1g(优选0.995-1.004g)试验品，放入50ml离心沉淀管中。
[0033]
(2)萃取溶剂的添加
[0034]
将萃取溶剂(碳原子数1-3的醇)，通常5-20ml、优选约10ml(根据需要添加上述的螯合剂、脱水剂)，放入离心沉淀管中。
[0035]
(3)超声波萃取
[0036]
在优选20℃以下的温度进行超声波萃取通常5-20分钟、优选约10分钟。
[0037]
(4)离心分离
[0038]
在通常2000-4000rpm、优选约3000rpm、通常1-10分钟、优选约5分钟的条件下进行离心分离来取出上清液。
[0039]
在沉淀物(残渣)中加入通常5-20ml、优选约10ml的萃取溶剂(碳原子数1-3的醇)并振荡萃取(通常150-250rpm、优选约200rpm，通常5-20分钟、优选约15分钟)，再次进行离心分离(通常2000-4000rpm、优选约3000rpm，通常1-10分钟、优选约5分钟)，取出上清液，与最初得到的上清液合并。
[0040]
(5)定容
[0041]
将上文得到的上清液定容为通常10-50ml、优选约25ml。
[0042]
(6)固相柱、浓缩、定容
[0043]
从低浓度下的代森铵的回收率及装置的防污方面考虑，优选使上述得到的溶液通过固相柱。通常在固相柱中放入通常5-20ml、优选约10ml的溶剂(碳原子数1-3的醇)来使其活化。在固相柱中放入10ml试样溶液并使其流出，接着用相同量的溶剂(碳原子数1-3的醇)使其流出。将得到的流出液在40℃以下浓缩。此时，若使其蒸发干燥固化，则代森铵的回收率降低，因此需要注意。其后，用溶剂(碳原子数1-3的醇)准确地定容为1-2ml。
[0044]
作为在此使用的固相柱，可列举出：具有聚合键合的氨基丙基相的二氧化硅系的固相柱、例如sigma-aldrich公司制造的discovery
tm dsc-nh
2 spe管、waters公司制造的sep-pak nh2 cartridge等、优选discovery
tm dsc-nh
2 spe管。discovery
tm dsc-nh
2 spe管的极性非常高，可以以正相、离子交换两种模式使用，其作为弱阴离子交换体与sax相相比在短时间内使强阴离子释放。
[0045]
(7)冷却、离心分离
[0046]
根据需要，将试样溶液在0-5℃冷却约30分钟后，进行离心分离(通常5000-12000rpm、优选约6000-10000rpm，通常20秒-5分钟、优选约30秒-3分钟)。
[0047]
(8)利用gc/ms的代森铵的测定
[0048]
将代森铵标准品用溶剂(碳原子数1-3的醇)稀释，制备标准溶液，描绘定量离子的峰面积的校准线。使用气相色谱质谱仪对试样溶液中的代森铵进行分析，由校准线得到其浓度。在本发明中，为了不使试样溶液中所含的夹杂成分对测定产生不良影响，需要提高选择性，从这一点出发，作为气相色谱质谱仪，优选气相色谱串联型质谱仪(gc-ms/ms)。用于气相色谱质谱仪的柱可以为高极性柱、中极性柱、微极性柱、无极性柱中的任一种，可以根据与使用的溶剂(碳原子数1-3的醇)的关系适当选择，但特别优选高极性柱，作为高极性柱，具体而言优选脂肪酸甲酯(fame)高速分析用柱、wax系柱。
[0049]
根据本发明，可以高精度地分析残留于试样中的代森铵。
[0050]
【实施例】
[0051]
以下，列举了实施例来对本发明进行具体地说明，但本发明的范围并不限于以下的实施例。
[0052]
(实施例1)
[0053]
准确称重1.0g人参的粉末，放入离心沉淀管中，加入10ml乙醇，在20℃以下超声波萃取10分钟。其后离心分离5分钟，取出上清液。向残留物中加入10ml乙醇，振荡萃取15分钟，再次离心分离5分钟，将上清液与前面所述的上清液合并并用乙醇准确地定容为25ml，
作为萃取溶液。
[0054]
在预先用乙醇进行活化的sigma-aldrich公司制造的discovery
tm dsc-nh
2 spe管中放入10ml萃取溶液并使其流出，接着用10ml乙醇使其流出。使得到的流出液在减压下在40℃浓缩，用乙醇准确地定容为2ml。将其在0-5℃放置30分钟以上之后，高速离心分离3分钟，将上清液作为试样溶液。在人参的粉末中加入相当于2ppm的代森铵标准品的乙醇稀释液，进行同样的处理，得到添加代森铵的试样溶液。
[0055]
另外，用乙醇稀释代森铵标准品，制备0.1μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml、5.0μg/ml的标准液，并描绘对应的定量离子峰面积的校准线。
[0056]
使用气相色谱质谱仪对试样溶液及添加代森铵的试样溶液进行分析，得到添加回收率。添加回收率为96％，确认符合作为残留农药分析试验成立的条件的70-120％添加回收率。
[0057]
试验条件
[0058]
柱：zb-fame、内径0.25mm、长度30m、膜厚0.25μm
[0059]
柱温：150℃(1分钟)-50℃/分钟-280℃(12分钟)
[0060]
进样口温度：280℃
[0061]
载气：氦
[0062]
载体流量：1.0ml/min
[0063]
离子化模式：ei(70ev)
[0064]
离子源温度：260℃
[0065]
碰撞气体：氮气
[0066]
测定模式：mrm
[0067]
监测离子(m/z)：定量离子(102.1＞73.9)、定性离子(104.0＞76.1)
[0068]
(比较例1)
[0069]
准确称重1.0g人参的粉末，放入离心沉淀管中，加入10ml丙酮，在20℃以下超声波萃取10分钟。其后离心分离5分钟，分取上清液。向残留物中加入10ml丙酮，振荡萃取15分钟，再次离心分离5分钟，使上清液与前面所述的上清液合并并用丙酮准确地定容为25ml，作为萃取溶液。
[0070]
在预先用丙酮进行了活化的sigma-aldrich公司制造的discovery
tm dsc-nh
2 spe管中放入10ml萃取溶液并使其流出，接着用10ml丙酮使其流出。使得到的流出液在减压下在40℃浓缩，用丙酮准确地定容为2ml。将其在0-5℃放置30分钟以上之后，高速离心分离3分钟，将上清液作为试样溶液。在人参的粉末中加入相当于2ppm的代森铵标准品的丙酮稀释液，进行同样的处理，得到添加代森铵的试样溶液。
[0071]
另外，将代森铵标准品用丙酮稀释，制备0.1μg/ml、0.25μg/ml、0.5μg/ml、1.0μg/ml、5.0μg/ml的标准液，描绘对应的定量离子峰面积的校准线。
[0072]
使用气相色谱质谱仪对试样溶液及添加代森铵的试样溶液进行分析，得到添加回收率。添加回收率为64％，不符合作为残留农药分析试验成立的条件的70-120％添加回收率。
[0073]
(实施例2)
[0074]
准确称重1.0g人参的粉末，放入离心沉淀管中，并添加10ml萃取溶剂，所述萃取溶
剂为预先在乙醇中加入edta和硫酸钠并过夜放置的溶剂，在20℃以下超声波萃取10分钟。其后离心分离5分钟，分取上清液。向残留物中加入10ml萃取溶剂，振荡萃取15分钟，再次离心分离5分钟，使上清液与前面所述的上清液合并并用萃取溶剂准确地定容为25ml，作为萃取溶液。
[0075]
在预先用乙醇进行活化的sigma-aldrich公司制造的discovery
tm dsc-nh
2 spe管中放入10ml萃取溶液并使其流出，接着用10ml乙醇使其流出。将5ml得到的流出液在减压下在40℃浓缩，用乙醇准确地定容为1ml。将其在0-5℃下放置30分钟以上之后，高速离心分离30秒，将上清液作为试样溶液。在人参的粉末中加入相当于5ppm的代森铵标准品的乙醇稀释液，进行同样的处理，得到添加代森铵的试样溶液。
[0076]
另外，将代森铵标准品用乙醇稀释，制备0.5μg/ml、1.0μg/ml、5.0μg/ml的标准液，描绘对应的定量离子峰面积的校准线。
[0077]
使用气相色谱质谱仪对试样溶液及添加代森铵的试样溶液进行分析，得到添加回收率。
[0078]
使用甲醇和1-丙醇替代乙醇作为萃取溶剂，实施同样的试验。添加回收率为：乙醇73％、甲醇96％、1-丙醇69％，确认大致符合作为分析试验成立的条件的70-120％添加回收率。
[0079]
试验条件
[0080]
柱：zb-fame、内径0.25mm、长度30m、膜厚0.20μm
[0081]
柱温：150℃(1分钟)-50℃/分钟-280℃(12分钟)
[0082]
进样口温度：250℃
[0083]
载气：氦气
[0084]
载体流量：1.0ml/min
[0085]
离子化模式：ei(70ev)
[0086]
离子源温度：260℃
[0087]
碰撞气体：氩气
[0088]
测定模式：mrm
[0089]
监测离子(m/z)：定量离子(102＞74)
[0090]
(实施例3)
[0091]
准确称重1.0g山药的粉末，放入离心沉淀管中，并添加10ml萃取溶剂，所述萃取溶剂为预先在乙醇中加入edta和硫酸钠并过夜放置的溶剂，在20℃以下超声波萃取10分钟。其后离心分离5分钟，分取上清液。向残留物中加入10ml萃取溶剂，振荡萃取15分钟，再次离心分离5分钟，使上清液与前面所述的上清液合并并用萃取溶剂准确地定容为25ml，作为萃取溶液。
[0092]
在预先用乙醇进行活化的sigma-aldrich公司制造discovery
tm dsc-nh
2 spe管中放入10ml萃取溶液并使其流出，接着用10ml乙醇使其流出。将5ml得到的流出液在减压下在40℃浓缩，用乙醇准确地定容为1ml。将其在0-5℃放置30分钟以上之后，高速离心分离30秒，将上清液作为试样溶液。在人参的粉末中加入相当于5ppm的代森铵标准品的乙醇稀释液，进行同样的处理，得到添加代森铵的试样溶液。
[0093]
另外，将代森铵标准品用乙醇稀释，制备0.5μg/ml、1.0μg/ml、5.0μg/ml的标准液，
描绘对应的定量离子峰面积的校准线。
[0094]
使用气相色谱质谱仪对试样溶液及添加代森铵的试样溶液进行分析，得到添加回收率。添加回收率为96％，确认符合作为分析试验成立的条件的70-120％添加回收率。
[0095]
试验条件
[0096]
柱：zb-fame、内径0.25mm、长度30m、膜厚0.20μm
[0097]
柱温：150℃(1分钟)-50℃/分钟-280℃(12分钟)
[0098]
进样口温度：250℃
[0099]
载气：氦气
[0100]
载体流量：1.0ml/min
[0101]
离子化模式：ei(70ev)
[0102]
离子源温度：260℃
[0103]
碰撞气体：氩气
[0104]
测定模式：mrm
[0105]
监测离子(m/z)：定量离子(102＞74)。