一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台的制作方法

1.本发明涉及细胞计数技术领域，具体为一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台。


背景技术：

2.细胞已经成为基础科研、医学临床及制药等行业常规的研究对象，而细胞计数几乎成了必不可少的工作，如何快速精确低成本的进行细胞计数成为首要问题，目前，市场上常规的细胞计数方法有两类：图像法和库尔特法，操作如下：
3.1.图像法：研究者将细胞染色后，加入到标准的玻璃计数板或者一次性塑料细胞计数板中，把计数板放置到细胞计数仪里拍照，根据照片中细胞的着色情况比较准确判断出细胞的死活，从而分别计算出死、活细胞的浓度和总数。此方法速度较快，检测效率高，但每次使用后，一次性塑料细胞计数板直接被抛弃，容易引起白色塑料污染，而且导致使用成本很高，如果使用玻璃计数板，则要对玻璃计数板进行清洗烘干后备用，需要花费大量时间，计数效率低。
4.2.库尔特法：研究者将细胞样品处理为单细胞混悬液，把细胞悬液加入毛细管或者微流芯片。通过电讯号的强弱来判断细胞的大小并计数细胞的数量。但每次计数完成后，都要花费大量时间清洗毛细管和微流芯片，而且细胞悬液制备不好极易堵塞毛细管。库尔特法计数比较准确，但计数时间长，无法满足几十个甚至几百个细胞样品的快速计数要求，效率低是一个无法避免的问题。
5.为解决目前图像法一次性塑料耗材使用成本高及白色污染的问题，以及库尔特法技术效率低的缺陷，需要一种可以重复使用的，自清洁且具有细胞计数快速、精准、低成本的一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台对上述问题做出改善。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提供一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台，以解决上述背景技术中提出的问题。
7.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
8.一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台，包括样品台基座，所述样品台基座的顶端沿着长度方向等距离开设有多个凹槽，所述样品台基座顶部设置有石英盖玻片，所述样品台基座与石英盖玻片之间形成多个样品腔，所述石英盖玻片上位于凹槽的一端开设有贯通石英盖玻片的样品孔，所述凹槽远离样品孔的一端开设有贯通样品台基座的废弃细胞样品排液口，所述废弃细胞样品排液口内设置有中空圆柱体，所述中空圆柱体底端连接有软管。
9.作为本发明的优选方案，所述软管远离中空圆柱体的一端共同连接有多通道电磁阀再连接电动真空泵装置。
10.作为本发明的优选方案，所述样品台基座的表面经过等离子亲水处理，所述样品
台基座采用高硬度高耐磨石英/蓝宝石材质。
11.作为本发明的优选方案，所述废弃细胞样品排液口的直径与凹槽的宽度相同，所述中空圆柱体的外径与废弃细胞样品排液口的直径相同，并且所述中空圆柱体与样品台基座之间通过键合或胶粘粘接。
12.作为本发明的优选方案，相邻的两个所述凹槽的中心距离为9mm。
13.作为本发明的优选方案，所述石英盖玻片的横截面积与样品台基座的横截面积相同或小于样品台基座的横截面积，所述样品孔的横截面为圆弧形，并且所述样品孔的直径与凹槽的宽度相同。
14.作为本发明的优选方案，所述凹槽的深度范围为10um
‑
500um。
15.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
16.本发明中，通过细胞样品加到样品孔，细胞均匀进入样品腔，结合图像法细胞计数仪，通过拍照进行计数，可以实现快速，精确的计数，计数完毕后，电磁阀打开，电动真空泵装置工作通过连接在样品腔下部的中空圆体将细胞样品从样品腔中抽走，在真空负压的作用下，样品腔里无残留的细胞样品，此时，可以继续加样进行检测，然后再把检测完毕的细胞样品抽走，确保样品腔清洁，从而可以加入新的样品进行检测，如此反复操作，无需一次性的细胞计数板，而且每个细胞样品计数过程在10秒内完成，而凹槽的数量的可以为1到96个，以标准的8/12道移液器加样，实现1个或多个样品的检测，大大节省操作时间，提高效率，避免了一次性细胞计数板的塑料污染和成本浪费。
附图说明
17.图1为本发明一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台的整体结构示意图；
18.图2为本发明一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台的俯视图；
19.图3为本发明一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台的侧视图；
20.图4为本发明一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台的样品台基座结构示意图。
21.图中：1、样品台基座；101、凹槽；102、废弃细胞样品排液口；2、石英盖玻片；201、样品孔；3、中空圆柱体；301、软管。
具体实施方式
22.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例,基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
23.为了便于理解本发明，下面将参照相关附图对本发明进行更全面的描述。附图中给出了本发明的若干实施例。但是，本发明可以以许多不同的形式来实现，并不限于本文所描述的实施例。相反地，提供这些实施例的目的是使对本发明的公开内容更加透彻全面。
24.需要说明的是，当元件被称为“固设于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“左”、
“
右”以及类似的表述只是为了说明的目的。
25.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本发明的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本发明的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本发明。本文所使用的术语“及/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
26.请参阅图1
‑
4，本发明提供一种技术方案：
27.一种基于图像法的无耗材细胞计数样品台，包括样品台基座1，样品台基座1的顶端沿着长度方向等距离开设有多个凹槽101，样品台基座1顶部设置有石英盖玻片2，样品台基座1与石英盖玻片2之间形成多个样品腔，石英盖玻片2上位于凹槽101的一端开设有贯通石英盖玻片2的样品孔201，凹槽101远离样品孔201的一端开设有贯通样品台基座1的废弃细胞样品排液口102，废弃细胞样品排液口102内设置有中空圆柱体3，中空圆柱体3底端连接有软管301，软管301远离中空圆柱体3的一端共同连接有多通道电磁阀再连接电动真空泵装置，本发明中，通过细胞样品加到样品孔201，细胞均匀进入样品腔，结合图像法细胞计数仪，通过拍照进行计数，可以实现快速，精确的计数，计数完毕后，电磁阀打开，电动真空泵装置工作通过连接在样品腔下部的中空圆体3将细胞样品从样品腔中抽走，在真空负压的作用下，样品腔里无残留的细胞样品，此时，可以继续加样进行检测，然后再把检测完毕的细胞样品抽走，确保样品腔清洁，从而可以加入新的样品进行检测，如此反复操作，无需一次性的细胞计数板，而且每个细胞样品计数过程在10秒内完成，而凹槽101的数量的可以为1到96个，以标准的8/12道移液器加样，实现1个或多个样品的检测，大大节省操作时间，提高效率，避免了一次性细胞计数板的塑料污染和成本浪费。
28.实施例，请参照图1、图2、图3和图4，样品台基座1的表面经过等离子亲水处理，使得细胞样品能够很容易进入亲水的微米级样品腔，可以反复使用，没有磨损或划伤，样品台基座1采用高硬度高耐磨石英/蓝宝石材质，可以是石英，蓝宝石，高硬度玻璃，聚二甲基硅氧烷，聚甲基丙烯酸甲酯，等。
29.实施例，请参照图1和图3，废弃细胞样品排液口102的直径与凹槽101的宽度相同，中空圆柱体3的外径与废弃细胞样品排液口102的直径相同，并且中空圆柱体3与样品台基座1之间通过胶粘粘接，同时中空圆柱体3与样品台基座1之间也可以通过键合或者螺纹紧固，只需连接紧固无渗漏即可。
30.实施例，请参照图1、图2和图4，相邻的两个凹槽101的中心距离为9mm，石英盖玻片2的横截面积与样品台基座1的横截面积相同或小于基座横截面积，样品孔201的横截面为圆弧形，并且样品孔201的直径与凹槽101的宽度相同。
31.实施例，请参照图1、图3和图4，凹槽101的深度范围为10um
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500um，例如30um，50um，100um,200um，300um等，使用时根据细胞样品浓度不同选择不同深度的样品槽。
32.本发明工作原理：使用时，通过细胞样品加到样品孔201，细胞均匀进入样品腔，结合图像法细胞计数仪，通过拍照进行计数，可以实现快速，精确的计数，计数完毕后，电磁阀打开，电动真空泵装置工作通过连接在样品腔下部的中空圆体3将细胞样品从样品腔中抽走，在真空负压的作用下，样品腔里无残留的细胞样品，此时，可以继续加样进行检测，然后再把检测完毕的细胞样品抽走，确保样品腔清洁，从而可以加入新的样品进行检测，如此反复操作，无需一次性的细胞计数板，而且每个细胞样品计数过程在10秒内完成，而凹槽101
的数量的可以为1到96个，以标准的8/12道移液器加样，实现1个或多个样品的检测，大大节省操作时间，提高效率，避免了一次性细胞计数板的塑料污染和成本浪费。
33.尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。