一种以总酚含量评价高粱的方法与流程

1.本发明涉及作物分析领域，具体涉及一种以总酚含量评价高粱的方法。


背景技术：

2.高粱是我国重要的栽培作物，也是全国大部分名优酒厂主要的酿造原料。近年来，以茅台酒为代表的酱香酒行业发展迅速。随着酱香酒产业规模的扩大，对高粱原料的需求量很不断增加。然而，如何判断高粱的酿酒品质是酒厂在原料收购中需要面对的一个重要问题，原料的好坏影响到最终白酒产品的质量和品质。好酒离不开好粮，茅台酒为代表的酱香酒，需要使用具备“粒小、皮厚、色红、耐蒸煮、糯性高”的品质特征的原料高粱品种，才能适合酱香酒多轮次蒸煮发酵的工艺。同时，原料高粱中的具体化学成分，也极大地影响着白酒的香气种类与水平。
3.近年来，随着酱香酒行业的快速发展，通过感官检评酿酒原料的方法因为准确性差、经验依赖性强的缺点，且存在检评人员经验依赖度高、品质评价指标不全的情况，已无法满足日益增长的行业发展需求。现代分子标记和基因组测序技术的发展提供了准确的高粱品种评价方法，但该方法存在耗时长、成本高、难以推广的缺点。
4.因此，酿酒企业为了保证原料质量、选育优良品种，需要一种科学、可行的评价指标，开发快速、准确、可量化的与高粱酿酒品质相关的品种评价方法及标准。


技术实现要素：

5.高粱中的多酚类物质以单宁为主，多酚类物质是白酒中重要香气物质的来源及前体，同时，适量的多酚类物质还能抑制杂菌的生长。对于酱香酒而言，其“两次投粮、七次取酒”的特殊工艺需要合理控制发酵程度，使各轮次产酒比例协调；也需要原料中丰富的多酚类物质作为酒中香气物质的来源。因此，酱香酒酿造所用的高粱一般具有多酚类物质总含量高的特点。
6.本发明提供了一种基于总酚含量评价酿酒高粱的方法，该方法具有快速、简便、准确的特点，对酿造原料品质评价体系的构建和专用化水平的提高具有积极的意义。
7.本技术以高粱总酚含量为基础，通过建立一种高粱样品峰值总酚含量测定方法，形成具有特定适宜酿酒的品质特征的高粱品种的正态分布模型，并提出其总酚含量判别指标，可以通过总酚含量判别指标来对高粱品种综合评价酿酒适用性，从而提供了一种新的酿酒高粱品种评价方法。
8.本技术所建立的方法具有快速、简便、准确的特点，能够实现高粱品种的有效评价和区分，丰富了酿造原料品质评价体系，对酿造原料品质和专用化水平的提高、提高企业原料质量控制能力、促进产业发展具有重要意义。本技术所建立的方法解决了原料品质不一的问题，为白酒产品的质量和品质提供保障。
9.在本技术的一些实施例中，提供了一种评价高粱的方法，包括：测定高粱的总酚含量；以及当高粱的总酚含量大于或等于总酚含量数值基准指标时，评价高粱具有至少一个
适宜酿酒的品质特征。
10.在一些实施例中，测定高粱的总酚含量，包括：将高粱的籽粒预处理，得到高粱的待评价样品；对待评价样品测定水分含量；以及将待评价样品的提取液进行福林酚法测定，得到待评价样品的总酚含量。
11.在一些实施例中，还包括：将多个具有适宜酿酒的品质特征的高粱的籽粒各自预处理，得到各个具有适宜酿酒的品质特征的高粱的各个标准样品；对各个标准样品各自测定水分含量；将各个标准样品各自的提取液各自进行福林酚法测定，得到各个标准样品各自的总酚含量；以及对各个具有适宜酿酒的品质特征的高粱各自的总酚含量进行正态分布检验，将正态分布检验的概率样本理论区间的下限作为总酚含量数值基准指标。
12.在一些实施例中，适宜酿酒的品质特征为能为酒体提供丰富的香气前体。在一些实施例中，适宜酿酒的品质特征为有利于控制发酵程度。
附图说明
13.图1为福林酚法测定总酚含量的没食子酸标准曲线。
14.图2为本技术的一个实施例中，酿酒特定高粱品种样本集正态分布检验的p
‑
p图。
具体实施方式
15.为更进一步阐述本技术为了达成预定目的所采取的技术手段及功效，以下结合附图及较佳实施例，对依据本技术的具体实施方式、结构、特征及其功效，详细说明如下：
16.在一些实施例中，本技术的评价方法包括测定高粱籽粒的总酚含量，尤其是预处理后的高粱籽粒的总酚含量。在一些实施例中，本技术的评价方法包括得到特定高粱品种的总酚含量，作为总酚含量基准指标，尤其是通过统计学分析方法得到特定高粱品种的总酚含量，作为总酚含量基准指标。在一些实施例中，本技术的评价方法包括通过所述总酚含量基准指标评价未知高粱籽粒样品的品种。
17.在一些实施例中，本技术的评价方法包括对高粱籽粒预处理。在一些实施例中，预处理包括：将高粱的籽粒粉碎；以及将粉碎后的高粱的籽粒过筛。在一些实施例中，所述预处理包括除杂、粉碎、过筛等步骤中的一种或多种。在一些实施例中，所述粉碎为使用粉碎机粉碎，所述过筛为过1mm筛网。在一些实施例中，所述预处理包括对高粱籽粒除杂。在一些实施例中，所述预处理包括对高梁籽粒四分法采样。在一些实施例中，所述预处理包括旋风粉碎机粉碎。在一些实施例中，所述预处理包括过筛网，例如是过1mm筛网。
18.在一些实施例中，本技术的评价方法包括对高粱籽粒测定水分含量。在一些实施例中，测定水分含量包括在大于或等于100℃下，测定样品的水分含量。在一些实施例中，所述测定水分含量是测定高粱籽粒的粉末的水分含量。在一些实施例中，所述测定水分含量是取5g高粱籽粒的粉末采用快速水分测定仪于105℃下测定水分含量。
19.在一些实施例中，所述测定总酚含量包括使用采用福林酚法测定总酚含量。在一些实施例中，所述测定总酚含量的待测液包括样品的粉末以80％乙醇提取，离心所得的上清液。在一些实施例中，所述样品的提取液(测定总酚含量的待测液)为样品以80％乙醇提取的上清液。在一些实施例中，所述样品的提取液(测定总酚含量的待测液)为2g的样品以20ml的80％乙醇提取的上清液。在一些实施例中，所述福林酚法测定包括将样品的提取液
(测定总酚含量的待测液)、福林酚试剂混合，再与碳酸钠溶液混合，测定吸光度。在一些实施例中，所述福林酚法测定包括在2ml离心管加入450μl超纯水、150μl稀释一定倍数(例如是λ倍)的样品的提取液(测定总酚含量的待测液)、150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后，取200μl加入到96孔板中用酶标仪测定在760nm下的吸光度。在一些实施例中，所述样品的提取液(测定总酚含量的待测液)是通过将2g高粱粉末样品与20ml 80％乙醇加入50ml离心管中摇床振荡提取15分钟，再5000rpm离心5分钟，取上清液所制得的。在一些实施例中，所述测定总酚含量是根据福林酚法测得的吸光度，通过以没食子酸溶液为标准溶液得到的标准曲线，进行内插法或外插法求得。在一些实施例中，所述测定总酚含量的标准溶液浓度选自20mg/l、30mg/l、40mg/l、50mg/l、60mg/l、70mg/l、80mg/l、90mg/l、100mg/l中的一种或多种。
20.在一些实施例中，以每100g的干基高粱样品计的高粱样品总酚含量按下式计算:
[0021][0022]
式中，总酚含量单位为mg/100g；c为通过标准曲线计算出的浓度，单位为mg/l；λ为待测液(样品的提取液)的稀释倍数；w为水分占样品的重量比。0.02l是样品的提取液(稀释前)的体积，2g为配置样品的提取液时，所使用的样品的量。
[0023]
在一些实施例中，本技术的评价方法包括测定高粱籽粒的标准样品的总酚含量。在一些实施例中，本技术的评价方法选择具有特定适宜酿酒的品质特征的高粱品种的样品作为标准样品。在一些实施例中，本技术的评价方法包括分析高粱籽粒的标准样品的总酚含量数值得到基准指标。在一些实施例中，基准指标是对标准样品的总酚含量的数值进行正态分布检验得到的概率样本理论区间的下限。在一些实施例中，正态分布检验选自jarque
‑
bera检验、shapiro
‑
wilk检验、anderson
‑
darling检验中的一种或多种。在一些实施例中，概率样本理论区间是99％概率样本理论区间。在一些实施例中，概率样本理论区间为高粱籽粒的标准样品的总酚含量的平均值上下2.58倍标准差。在一些实施例中，基准指标是正态分布检验得到的样本平均值减去2.58个标准差。在一些实施例中，基准指标是924mg/100g干基样品。
[0024]
在一些实施例中，本技术的评价方法包括通过待测样品的高粱籽粒的总酚含量的数值是否大于或等于基准指标，判断待测样品是否是标准样品的品种。在一些实施例中，待测样品的高粱籽粒的总酚含量的数值小于基准指标，判断待测样品不是标准样品的品种。在一些实施例中，待测样品的高粱籽粒的总酚含量的数值大于或等于基准指标，判断待测样品是标准样品的品种。
[0025]
基准指标的确定
[0026]
获取106个特定适宜酿酒的品质特征的高粱品种(以下称“酿酒特定高粱品种”)的具有代表性的标准样品。分别进行以下步骤。
[0027]
(1)高粱样品预处理
[0028]
将标准样品的高粱籽粒除杂后，采用四分法采样获得10g标准样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到标准液。
[0029]
(2)总酚含量的测定
[0030]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0031]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的标准液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后，取200μl加入到96孔板中用酶标仪测定在760nm下的吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。
[0032]
分别配置浓度为20、30、40、50、60、70、80、90、100mg/l的标准溶液，按样品处理方式处理后测定吸光度，以没食子酸浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线，如图1所示。
[0033]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基标准样品的总酚含量，结果以mg/100g干基样品计。
[0034]
以所得到的106个标准样品的总酚含量作为样本集，进行jarque
‑
bera检验。得到的p值>0.05表明样本集符合正态分布。图2为标准样品样本集正态分布检验的p
‑
p图。p
‑
p图显示了变量的累积比例与正态分布的累积比例之间的关系，当数据符合正态分布时，p
‑
p图中各点近似呈一条直线。
[0035]
通过上述正态分布检验，同时得到99％样本理论下限(μ
–
2.58σ)(表1)，即酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标为924mg/100g。
[0036]
表1酿酒特定高粱品种总酚含量基准指标
[0037][0038]
实施例1
[0039]
本实施例选用红缨子高粱作为待测样品。
[0040]
(1)高粱样品预处理
[0041]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用四分法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0042]
(2)总酚含量的测定
[0043]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0044]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后，取200μl加入到96孔板中用酶标仪测定在760nm下的吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。
[0045]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为1120.9mg/100g。
[0046]
(3)品种评价
[0047]
样品总酚含量>924mg/100g，大于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断属于酿酒特定高粱品种。
[0048]
实施例2
[0049]
本实施例选用红缨子高粱作为待测样品。
[0050]
(1)高粱样品预处理
[0051]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用四分法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0052]
(2)总酚含量的测定
[0053]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0054]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后，取200μl加入到96孔板中用酶标仪测定在760nm下的吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。
[0055]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为1246.8mg/100g。
[0056]
(3)品种评价
[0057]
样品总酚含量>924mg/100g，大于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断属于酿酒特定高粱品种。
[0058]
实施例3
[0059]
本实施例选用红缨子高粱作为待测样品。
[0060]
(1)高粱样品预处理
[0061]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用四分法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0062]
(2)总酚含量的测定
[0063]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0064]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后，取200μl加入到96孔板中用酶标仪测定在760nm下的吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。
[0065]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为1336.6mg/100g。
[0066]
(3)品种评价
[0067]
样品总酚含量>924mg/100g，大于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断属于酿酒特定高粱品种。
[0068]
实施例4
[0069]
本实施例选用红缨子高粱作为待测样品。
[0070]
(1)高粱样品预处理
[0071]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用四分法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0072]
(2)总酚含量的测定
[0073]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0074]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后，取200μl加入到96孔板中用酶标仪测定在760nm下的吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。
[0075]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为955.2mg/100g。
[0076]
(3)品种评价
[0077]
样品总酚含量>924mg/100g，大于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断属于酿酒特定高粱品种。
[0078]
实施例5
[0079]
本实施例选用红缨子高粱作为待测样品。
[0080]
(1)高粱样品预处理
[0081]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用四分法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0082]
(2)总酚含量的测定
[0083]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0084]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后，取200μl加入到96孔板中用酶标仪测定在760nm下的吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。
[0085]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为947.5mg/100g。
[0086]
(3)品种评价
[0087]
样品总酚含量>924mg/100g，大于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断属于酿酒特定高粱品种。
[0088]
实施例6
[0089]
本实施例选用红缨子高粱作为待测样品。
[0090]
(1)高粱样品预处理
[0091]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用四分法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0092]
(2)总酚含量的测定
[0093]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0094]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后，取200μl加入到96孔板中用酶标仪测定在760nm下的吸光度。每个样
品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。
[0095]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为1129.3mg/100g。
[0096]
(3)品种评价
[0097]
样品总酚含量>924mg/100g，大于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断属于酿酒特定高粱品种。
[0098]
实施例7
[0099]
本实施例选用辽杂18号高粱作为待测样品。
[0100]
(1)高粱样品预处理
[0101]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用四分法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0102]
(2)总酚含量的测定
[0103]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0104]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后在760nm下检测吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。取200μl显色后的溶液加入到96孔板中用酶标仪测定吸光度。
[0105]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为834.6mg/100g。
[0106]
(3)品种评价
[0107]
样品总酚含量<924mg/100g，小于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断不属于酿酒特定高粱品种。
[0108]
实施例8
[0109]
本实施例选用龙米粱作为待测样品。
[0110]
(1)高粱样品预处理
[0111]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0112]
(2)总酚含量的测定
[0113]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0114]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后在760nm下检测吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。取200μl显色后的溶液加入到96孔板中用酶标仪测定吸光度。
[0115]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为106.4mg/100g。
[0116]
(3)品种评价
[0117]
样品总酚含量<924mg/100g，小于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判
断不属于酿酒特定高粱品种。
[0118]
实施例9
[0119]
本实施例选用济粱1号作为待测样品。
[0120]
(1)高粱样品预处理
[0121]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0122]
(2)总酚含量的测定
[0123]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0124]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后在760nm下检测吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。取200μl显色后的溶液加入到96孔板中用酶标仪测定吸光度。
[0125]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为139.4mg/100g。
[0126]
(3)品种评价
[0127]
样品总酚含量<924mg/100g，小于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断不属于酿酒特定高粱品种。
[0128]
实施例10
[0129]
本实施例选用济粱2号作为待测样品。
[0130]
(1)高粱样品预处理
[0131]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0132]
(2)总酚含量的测定
[0133]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0134]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后在760nm下检测吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。取200μl显色后的溶液加入到96孔板中用酶标仪测定吸光度。
[0135]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为595.5mg/100g。
[0136]
(3)品种评价
[0137]
样品总酚含量<924mg/100g，小于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断不属于酿酒特定高粱品种。
[0138]
实施例11
[0139]
本实施例选用龙杂11号作为待测样品。
[0140]
(1)高粱样品预处理
[0141]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎
机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0142]
(2)总酚含量的测定
[0143]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0144]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后在760nm下检测吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。取200μl显色后的溶液加入到96孔板中用酶标仪测定吸光度。
[0145]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为615.6mg/100g。
[0146]
(3)品种评价
[0147]
样品总酚含量<924mg/100g，小于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断不属于酿酒特定高粱品种。
[0148]
实施例12
[0149]
本实施例选用澳大利亚高粱作为待测样品。
[0150]
(1)高粱样品预处理
[0151]
将待测样品的高粱籽粒除杂后，采用法采样获得10g待测样品，进一步用旋风粉碎机粉碎全部通过1mm筛网。充分混匀后取5g粉末样品测定水分含量，然后称取2g(精确到0.01g)粉末样品，加入20ml乙醇水溶液(80％，v/v)振荡提取15min后离心，得到待测液。
[0152]
(2)总酚含量的测定
[0153]
采用福林酚法测定总酚含量，具体方法为：
[0154]
在2ml离心管加入450μl去离子蒸馏水，取150μl稀释15倍的待测液，加入450μl超纯水和150μl福林酚试剂，混匀反应6min后，加入600μl 75g/l的na2co3溶液，混合均匀并在室温下避光反应2h后在760nm下检测吸光度。每个样品做三次平行，以超纯水代替样品做相同处理作为空白对照。取200μl显色后的溶液加入到96孔板中用酶标仪测定吸光度。
[0155]
结合待测液稀释倍数和水分含量，通过标准曲线计算得到干基样品的总酚含量，为801.3mg/100g。
[0156]
(3)品种评价
[0157]
样品总酚含量<924mg/100g，小于酿酒特定高粱品种的总酚含量基准指标，因此判断不属于酿酒特定高粱品种。
[0158]
表2列出了实施例各高粱品种的总酚含量测定结果。
[0159]
表2实施例各高粱品种的总酚含量测定结果
[0160][0161][0162]
上述实施方式仅为本技术的优选实施方式，不能以此来限定本技术保护的范围，本领域的技术人员在本技术的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本技术所要求保护的范围。