一种柱前衍生化高效液相色谱快速测定羰基烷烃肟类化合物的方法与流程

本发明涉及一种柱前衍生化高效液相色谱快速测定羰基烷烃肟类化合物的方法，属于化学分析。

背景技术：

1、肟类化合物(如二甲基酮肟、丁酮肟、乙醛肟等)作为新型除氧剂，具有低毒、高效、速度快且具有钝化保护作用，在欧美日等发达国家得到了广泛的应用，我国也于九十年代开发成功，并得到了较为成功的推广；同时，肟类化合物也是氟噻唑吡乙酮、四唑吡氨酯等农药产品的重要中间体。由于含羰基肟类化合物的合成涉及亚硝酸钠水溶液参与，鉴于其结构的特性，在液相色谱中拖尾严重而且易水解，不能直接使用反相液相色谱进行定量测定；因此发明一种可以准确和快速地分析羰基烷烃肟类化合物的方法意义重大。

2、当前，利用液相色谱法测定肟类化合物主要是乙醛肟、头孢克肟、肟菌酯、头孢喹肟等肟类化合物；2,4-二硝基苯肼(dnph)是常见且重要的羰基试剂，主要应用于醛、酮、酮酸的衍生，也可用于非醛酮类化合物的衍生，如苯胺、氨基酸等。但利用2,4-二硝基苯肼柱前衍生化液相色谱法直接测定羰基烷烃肟类化合物进行测定分析方法未见报道。

3、目前对肟类化合物的分析方法主要有：

4、1.反相高效液相色谱法：骆雨璇、吴苏亚、陈醒等，高效液相色谱法测定头孢克肟的含量[j]，东南国防医药，2019,21(6):621-624；刘本发、刘海波，高效液相色谱法测定湿法冶金lix984n铜萃取剂中醛肟和酮肟[j]，冶金分析，2016,36(10):62-68；夏佳、席时东，uplc测定盐酸头孢甲肟原料药及注射剂的有关物质[j]，中国现代应用药学，2019,36(22):2769-2772；毕津莲、李湘斌，高效液相色谱法测定头孢克肟胶囊的含量[j]，中国现代医学杂志，2008,18(21):3214-3216；何家驹、刘君娣、蒋斌，乙醛肟的高效液相色谱分析[j]，辽宁化工，1999,28(1):57-58。

5、2.液相色谱-质谱联用：张蕊、邓露晴、李祥英等，液相色谱-质谱联用测定咖啡中肟菌酯及代谢物残留[j]，华南农业大学学报，2019,40(1):72-76；刘世娟、王海涛、徐雅芫等，凝胶渗透色谱/液相色谱串联质谱法测定畜禽及水产品组织中头孢喹肟的残留量[j]，分析测试学报，2012,31(4):480-485；tekes k,hasan m y,sheen r,et al.high-performance liquid chromatographic determination of the plasma concentrationof k-27,a novel oxime-type cholinesterase reactivator[j].journal ofchromatography a,2006,1122(1-2):84-87.

6、3.气相色谱-质谱联用：klewicz k,mariuszemissionprofile of butan-2-one oxime from commercially available neutral siliconesealant[j],microchemical journal,2020,156:104982；wichard t,poulet s a,pohnertg.determination and quantification of alpha,beta,gamma,delta-unsaturatedaldehydes as pentafluorobenzyl-oxime derivates in diatom cultures and naturalphytoplankton populations:application in marine field studies[j].journal ofchromatography b,2005,814(1):155-161。

7、4.其他分析方法：陈永林，丙酮肟的测定[j]，化学世界，1962,(6):41；成凤桂、欧知义、雷海，水解-氧化还原滴定法测定锅炉钝化液中的丙酮肟[j]，分析试验室，2000,19(2):21-23；吴剑、李忠、尹艳凤等，分光光度法测定贝克曼重排产物中的微量环己酮肟[j]，2004,27(2):57-29。

8、已有的这些仪器分析方法测定的肟类化合物主要是结构简单的醛、酮肟和含有芳香环的肟及其衍生物；对于含有芳香环的肟类化合物，其肟基团对峰型的影响相比烷烃肟类化合物较小，从而可以直接用液相色谱直接测定；肟经常作为醛酮与羟胺衍生产物出现，文献已报道醛酮衍生得到的肟再用硅烷化试剂衍生，利用气相质谱测定醛酮含量，并没有直接测定肟类化合物含量。另外，对含有羰基的烷烃肟类化合物分析测定鲜有报道；因此，发明一种快速、准确地测定含有羰基的烷烃肟类化合物的分析方法，该方法不仅能直接应用到含有羰基的烷烃肟类化合物的定量分析，还能够对以合成含有羰基的烷烃肟类化合物的反应液进行中间控制分析，跟踪其反应过程，为合成含有羰基的烷烃肟类化合物及下游工艺条件的优化提供科学依据，具有重大意义。

技术实现思路

1、鉴于上述已有检测方法的不足，以及对含有羰基烷烃肟类化合物进行快速测定分析的实际需求，本发明填补上述现有技术未有对含羰基烷烃肟类化合物分析的空白，开发了一种柱前衍生化高效液相色谱快速测定羰基烷烃肟类化合物的方法，提出了一种简单快速、准确性高的柱前衍生化液相色谱法分析羰基烷烃肟类化合物的分析方法。

2、本领域普通技术人员将理解“约”、“大约”，并且在使用该术语的上下文中将在某种程度上变化。如果术语的使用对于本领域普通技术人员来说是不清楚的，考虑到使用它的上下文，“约”、“大约”将意味着高达特定术语的加或减20％。

3、本文中所述的“主要由……组成”指构成该混合物的主要成分。如无特别说明，通常重量百分比含量高于50％即可称为主要成分。主要成分可以是纯净物，也可以由一类结构或化学性质相近、本领域技术人员能够知晓它们通常能归为一类的混合物组成。

4、本文中任何有关温度范围、ph范围、重量(质量)范围、分子量范围、百分比范围等，不论是否使用“范围”或“各个范围”的措词进行表达，都包括所指定的端点以及两端点间的各点。

5、本发明涉及一种柱前衍生化液相色谱法直接测定羰基烷烃肟类化合物的分析方法：

6、在柱前衍生中，使用常见的2,4-二硝基苯肼(dnph)或2,6-二氟苯肼作为衍生试剂进行衍生化，加入稀盐酸，使目标物与衍生试剂反应(优选在超声条件下)，得到稳定的待测产物(衍生化产物)。在其中一个或多个具体实施方式中，优选为2,4-二硝基苯肼(dnph)作为衍生试剂进行衍生化。

7、在色谱条件中选用通常的适用于分析弱极性物质的色谱柱，优选为反相柱，可以进一步选用c8/c18柱作为色谱柱；流动相采用选自磷酸水-乙腈体系、磷酸水-甲醇、水-乙腈等体系中的一种。

8、在其中一个或多个具体实施方式中，流动相磷酸水-乙腈体系组分的体积百分比组成为：乙腈、0.05～0.1％磷酸水。

9、在其中一个或多个具体实施方式中，流动相磷酸水-甲醇体系组分的体积百分比组成为：甲醇、0.05～0.1％磷酸水。

10、在其中一个或多个具体实施方式中，流动相水-乙腈体系组分的体积百分比组成为：乙腈、水。

11、在其中一个或多个具体实施方式中，流动相流速为1.5-2.5ml/min，柱温为25-45℃。

12、在其中一个或多个具体实施方式中，检测器采用紫外检测器，检测波长选用220-390nm。

13、

14、所述羰基烷烃肟类化合物结构式为式i或式ii或它们各自的顺反异构体或各自顺反异构体的混合物，其中r1可以选自氢、卤素、烃基(优选为烷烃)或卤代烃等；r2可以选自氢或者卤素。r1进一步优选为氢、烷烃、卤素或卤代烃；r2进一步优选为氢或者卤素。

15、本发明具有如下优点或技术效果：

16、1，可以直接应用到监测羰基烷烃肟类化合物。

17、2，具有分析结果准确，分析速度快。

18、3，为合成羰基肟类化合物及下游反应工艺条件的优化提供依据，对提高产物收率，增加经济效益具有重要指导意义。