技术特征：
1.一种利用高效液相色谱同时测定卡博替尼类似物、杂质a和杂质b的方法，所述的卡博替尼类似物、杂质a和杂质b的结构式分别为(i)、(ii)和(iii)，其特征在于，所述方法包括以下步骤：(1)系统适用性试验和灵敏度测试制备系统适用性溶液：取卡博替尼类似物工作对照品、杂质a对照品和杂质b对照品与溶剂混合，制成浓度为0.005mg/ml～0.5mg/ml的系统适用性溶液；其中，所述溶剂由超纯水与乙腈以体积比为70:30混合而成；制备灵敏度测试溶液：取卡博替尼类似物工作对照品，用所述溶剂定量稀释，制成浓度为0.1μg/ml的灵敏度测试溶液；分别以所述系统适用性溶液和所述灵敏度测试溶液在以下色谱条件下进行系统适用性试验和灵敏度测试，校定检测系统；所述色谱条件为：色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，以醋酸盐缓冲液与乙腈比例为70：30的混合溶液为流动相a，以乙腈为流动相b，梯度洗脱，所述醋酸盐缓冲液的浓度为0.005mol/l～0.01mol/l，ph值为8.5～9.5，所述色谱柱的柱温为25℃～35℃，流速为0.9ml/min～1.1ml/min，检测波长为254nm，进样器温度为2℃～20℃；分别精密量取10μl所述系统适用性溶液和10μl所述灵敏度测试溶液，注入液相色谱仪，记录色谱图，校定检测系统至卡博替尼类似物的峰与杂质a和杂质b的峰之间的分离度大于1.5，所述灵敏度测试溶液的色谱图中卡博替尼类似物峰的信噪比不小于10。(2)制备供试品溶液和对照品溶液；取卡博替尼类似物待测样品，加所述溶剂制成浓度为0.5mg/ml的供试品溶液；取卡博替尼类似物工作对照品，加所述溶剂制成浓度为5μg/ml的对照品溶液；(3)通过高效液相色谱测定所述供试品溶液中卡博替尼类似物、杂质a和杂质b的含量将所述对照品溶液注入步骤(1)校定后的液相色谱仪，调节检测灵敏度，再将所述供试品溶液注入所述液相色谱仪，在步骤(1)所述的色谱条件下进行高效液相色谱测定，记录色谱图；(4)计算所述卡博替尼类似物待测样品中卡博替尼类似物、杂质a和杂质b的含量；按外标法以峰面积计算卡博替尼类似物、杂质a和杂质b的含量。2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的梯度洗脱为：0分钟～5分钟，线性梯度洗脱，流动相a的比例从100％变化为80％，流动相b的比例从0％变化为20％；5分钟～16分钟，等度洗脱，流动相a的比例保持80％不变，流动相b的比例保持20％不
变；16分钟～17分钟，线性梯度洗脱，流动相a的比例从80％变化为65％，流动相b的比例从20％变化为35％；17分钟～22分钟，等度洗脱，流动相a的比例保持65％不变，流动相b的比例保持35％不变；22分钟～24分钟，线性梯度洗脱，流动相a的比例从65％变化为30％，流动相b的比例从35％变化为70％；24分钟～29分钟，等度洗脱，流动相a的比例保持30％不变，流动相b的比例保持70％不变；29分钟～32分钟，流动相a和b回到初始比例；32分钟～40分钟，色谱柱重新平衡。3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的醋酸盐选自醋酸铵。4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的醋酸盐缓冲液为浓度为0.005mol/l，ph值为9.0的醋酸铵溶液。5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的色谱条件为：流速为1.0ml/min，柱温为30℃，进样器温度为室温，所述醋酸盐缓冲液是由醋酸铵约0.77g，加水2000ml溶解，再加氨水调节ph值至9.0制成的。6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的色谱柱为waters xbridge shield rp18色谱柱。7.如权利要求1-6任一项所述的方法，其特征在于，所述的卡博替尼类似物待测样品为卡博替尼类似物原料药。
技术总结
本发明公开了一种同时测定卡博替尼类似物及其有关物质的高效液相色谱分析法，色谱条件为色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶柱，以醋酸盐缓冲液-乙腈(70：30)为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，醋酸盐缓冲液的浓度为0.005～0.01mol/L，pH值为8.5～9.5，柱温为25～35℃，流速为0.9～1.1ml/min，检测波长为254nm，进样器温度为2～20℃，进样量为10μl。本发明所述测定方法可快速准确的检测出卡博替尼类似物及其有关物质，操作简单，重现性好，灵敏度高，可较好地控制卡博替尼类似物原料药产品质量，为合成工艺优化提供了保证。为合成工艺优化提供了保证。
技术研发人员：郭青 石涛 李汉然 孔萌 卢晓莹 冯贻东 黄汉敏
受保护的技术使用者：深圳海王医药科技研究院有限公司
技术研发日：2021.12.27
技术公布日：2022/4/15