溴乙酸甲酯的检测方法与流程

1.本发明属于药品检测技术领域，具体涉及一种溴乙酸甲酯的检测方法。


背景技术：

2.溴乙酸甲酯是一种化工原料，可以用于合成除草剂，也可作为染料和药物合成的中间体。现有技术中采用气相色谱法测定溴乙酸甲酯的含量时，色谱柱温度通常为恒温，采用面积归一化法以峰面积计算其含量，但其无法有效的分离溴乙酸甲酯中可能包含的其它杂质成分。
3.中国专利cn 113049712 a公开一种测定环丙基甲基酮含量的方法，包括步骤：(i)提供待测样品溶液和内标标准品溶液；(ii)使待测样品溶液和内标标准品溶液进样并进行气相色谱分析，从而获得对应的气相色谱图，从而得到待测样品中环丙基甲基酮的含量；其中所述的气相色谱采用中等极性毛细管色谱柱进行。此专利是针对医药中间体环丙基甲基酮的含量测定，其专属性强，无法借鉴应用于其它药品检测。
4.目前，亟需提供一种快速、高效、准确的溴乙酸甲酯的检测方法。


技术实现要素：

5.本发明的目的是提供一种溴乙酸甲酯的检测方法，可以有效的分离甲醇、甲氧基乙酸甲酯、甲氧基乙酸、溴乙酸甲酯和溴乙酸，能快速、高效、准确的测定溴乙酸甲酯中的甲醇、甲氧基乙酸、溴乙酸和甲氧基乙酸甲酯的含量。
6.本发明所述的溴乙酸甲酯的检测方法是采用气相色谱法对溴乙酸甲酯中的甲醇、甲氧基乙酸、溴乙酸和甲氧基乙酸甲酯进行含量测定。
7.本发明所述的溴乙酸甲酯的检测方法具体是配制对照品溶液和供试品溶液，将空白溶剂、供试品溶液和对照品溶液依次注入气相色谱仪，记录气相色谱图，采用外标法测定得到供试品溶液中甲醇、甲氧基乙酸、溴乙酸和甲氧基乙酸甲酯的含量。
8.所述的对照品溶液的配制方法是量取甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml、溴乙酸贮备液1ml和溴乙酸甲酯贮备液1ml，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，即得。
9.所述的甲醇贮备液的配制方法是取甲醇50mg，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，即得；
10.甲氧基乙酸甲酯贮备液的配制方法是取甲氧基乙酸甲酯50mg，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，即得；
11.甲氧基乙酸贮备液的配制方法是取甲氧基乙酸50mg，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，即得；
12.溴乙酸贮备液的配制方法是取溴乙酸50mg，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，即得；
13.溴乙酸甲酯贮备液的配制方法是取溴乙酸甲酯50mg，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，即得。
14.所述的供试品溶液的配制方法是取溴乙酸甲酯样品1g，加稀释剂稀释至10ml，摇
匀，即得。
15.所述的稀释剂为乙腈。
16.所述的空白溶剂为乙腈。
17.所述的气相色谱法中的色谱条件如下：
18.色谱柱：固定相5％苯基95％二甲基聚硅氧烷的石英毛细管柱；
19.进样口温度：135-145℃；
20.检测器：火焰离子化检测器fid；
21.检测器温度：195-205℃；
22.分流比：3-7:1；
23.载气：氮气；
24.载气流量：3.8-4.2ml/min；
25.进样方式：直接进样；
26.进样量：1μl；
27.柱箱升温程序：初始柱箱温度40-50℃保持1min，以10℃/min升温至130℃保持10min，以20℃/min升温至200℃保持4min。
28.本发明所述的溴乙酸甲酯的检测方法还包括配制供试品加标溶液，将供试品加标溶液注入气相色谱仪，记录气相色谱图，将供试品加标溶液的色谱图、供试品溶液的色谱图和对照品溶液的色谱图进行比对验证。
29.所述的供试品加标溶液的配制方法是取溴乙酸甲酯样品1g，加入甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml和溴乙酸贮备液1ml，用稀释剂稀释至10ml，摇匀，即得。
30.供试品加标溶液的作用是为了考察验证已知杂质(甲醇、甲氧基乙酸甲酯、甲氧基乙酸和溴乙酸)与相邻峰、溴乙酸甲酯与相邻峰之间的分离度是否满足分离度大于1.5的要求。
31.本发明的有益效果如下：
32.现有技术中采用气相色谱法检测时色谱柱温度通常为恒温，采用面积归一化法以峰面积计算溴乙酸甲酯的含量，色谱柱恒温下测定溴乙酸甲酯中的杂质成分，不易分离，无法对溴乙酸甲酯的质量进行严格的控制。本发明基于溴乙酸甲酯的合成路线，制定杂质谱为甲醇、甲氧基乙酸甲酯、甲氧基乙酸和溴乙酸，通过控制杂质的限度水平来降低引起副反应的可能性，进而控制溴乙酸甲酯的质量。
33.本发明可以有效的分离甲醇、甲氧基乙酸甲酯、甲氧基乙酸、溴乙酸甲酯和溴乙酸，能快速、高效、准确的测定溴乙酸甲酯中的甲醇、甲氧基乙酸、溴乙酸和甲氧基乙酸甲酯的含量。
附图说明
34.图1是实施例1中空白溶剂的色谱图。
35.图2是实施例1中供试品溶液的色谱图。
36.图3是实施例1中供试品加标溶液的色谱图。
37.图4是实施例1中对照品溶液的色谱图。
38.图5是实施例2中空白溶剂的色谱图。
39.图6是实施例2中供试品溶液的色谱图。
40.图7是实施例2中供试品加标溶液的色谱图。
41.图8是实施例2中对照品溶液的色谱图。
42.图9是实施例3中空白溶剂的色谱图。
43.图10是实施例3中供试品溶液的色谱图。
44.图11是实施例3中对照品溶液的色谱图。
具体实施方式
45.以下结合实施例对本发明做进一步描述。
46.实施例1
47.(1)对照品溶液的配制方法是量取甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml、溴乙酸贮备液1ml和溴乙酸甲酯贮备液1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
48.甲醇贮备液的配制方法是取甲醇50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
49.甲氧基乙酸甲酯贮备液的配制方法是取甲氧基乙酸甲酯50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
50.甲氧基乙酸贮备液的配制方法是取甲氧基乙酸50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
51.溴乙酸贮备液的配制方法是取溴乙酸50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
52.溴乙酸甲酯贮备液的配制方法是取溴乙酸甲酯50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
53.(2)供试品溶液的配制方法是取溴乙酸甲酯样品1g，加乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
54.(3)空白溶剂为乙腈。
55.(4)供试品加标溶液的配制方法是取溴乙酸甲酯样品1g，加入甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml和溴乙酸贮备液1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
56.(5)专属性：配制上述空白溶剂、供试品溶液、对照品溶液和供试品加标溶液。
57.(6)定量限：量取对照品溶液1ml置10ml量瓶中，加入溴乙酸贮备液0.1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得定量限溶液。
58.(7)检测限：量取甲醇贮备液0.02ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液0.1ml、甲氧基乙酸贮备液0.25ml、溴乙酸贮备液1ml和溴乙酸甲酯贮备液0.25ml，用乙腈稀释至500ml，摇匀，即得检测限溶液。
59.(8)线性溶液：分别量取甲醇贮备液、甲氧基乙酸甲酯贮备液、甲氧基乙酸贮备液、溴乙酸贮备液和溴乙酸甲酯贮备液各适量，用乙腈稀释制成一系列浓度的溶液：
60.每1ml中含0.1mg甲醇、0.1mg甲氧基乙酸甲酯、0.1mg甲氧基乙酸、0.1mg溴乙酸和0.1mg溴乙酸甲酯的溶液；
61.每1ml中含0.3mg甲醇、0.3mg甲氧基乙酸甲酯、0.3mg甲氧基乙酸、0.3mg溴乙酸和
0.3mg溴乙酸甲酯的溶液；
62.每1ml中含0.4mg甲醇、0.4mg甲氧基乙酸甲酯、0.4mg甲氧基乙酸、0.4mg溴乙酸和0.4mg溴乙酸甲酯的溶液；
63.每1ml中含0.5mg甲醇、0.5mg甲氧基乙酸甲酯、0.5mg甲氧基乙酸、0.5mg溴乙酸和0.5mg溴乙酸甲酯的溶液；
64.每1ml中含0.8mg甲醇、0.8mg甲氧基乙酸甲酯、0.8mg甲氧基乙酸、0.8mg溴乙酸和0.8mg溴乙酸甲酯的溶液；
65.每1ml中含1mg甲醇、1mg甲氧基乙酸甲酯、1mg甲氧基乙酸、1mg溴乙酸和1mg溴乙酸甲酯的溶液。
66.(9)精密度：取溴乙酸甲酯样品1g置10ml量瓶中，依次加入甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml和溴乙酸贮备液1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得精密度溶液(平行配制12份)。
67.(10)回收率：
68.定量限浓度：取溴乙酸甲酯样品1g置10ml量瓶中，依次加入对照品溶液1ml和溴乙酸贮备液0.1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得(平行配制3份)。
69.50％限度浓度：取溴乙酸甲酯样品1g置10ml量瓶中，依次加入甲醇贮备液0.5ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液0.5ml、甲氧基乙酸贮备液0.5ml和溴乙酸贮备液0.5ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得(平行配制3份)。
70.100％限度浓度：取溴乙酸甲酯样品1g置10ml量瓶中，依次加入甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml和溴乙酸贮备液1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得(平行配制3份)。
71.150％限度浓度：取溴乙酸甲酯样品1g置10ml量瓶中，依次加入甲醇贮备液1.5ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1.5ml、甲氧基乙酸贮备液1.5ml和溴乙酸贮备液1.5ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得(平行配制3份)。
72.(11)样品检测：分别取批次1、批次2和批次3的溴乙酸甲酯样品，配制成不同批次的溴乙酸甲酯供试品溶液。
73.(12)测定方法：精密量取空白溶剂、供试品溶液、对照品溶液、供试品加标溶液、定量限溶液、检测限溶液、线性溶液、精密度溶液和回收率溶液各1μl注入气相色谱仪，色谱条件见表1，记录色谱图，专属性色谱结果见图1、图2、图3和图4。专属性、定量限、检测限、线性、精密度、回收率及样品检测结果见表2-8。
74.表1实施例1的色谱条件
[0075][0076]
表2专属性检测结果
[0077][0078][0079]
表3定量限检测结果
[0080]
峰名称定量限浓度mg/ml相当于供试品溶液％信噪比甲醇0.04920.05352.4甲氧基乙酸甲酯0.04990.05240.6甲氧基乙酸0.05910.06143.2
溴乙酸甲酯0.05390.05129.2溴乙酸0.10070.1093.5
[0081]
表4检测限检测结果
[0082]
峰名称检测限浓度mg/ml相当于供试品溶液％信噪比甲醇0.00020.00026.9甲氧基乙酸甲酯0.00100.00104.4甲氧基乙酸0.00300.00303.7溴乙酸甲酯0.00270.00276.0溴乙酸0.01010.01015.3
[0083]
表5线性检测结果
[0084]
峰归属线性方程斜率截距100％响应值的25％相关系数r甲醇y＝22.7592x+0.401722.75920.40172.84960.9979甲氧基乙酸甲酯y＝18.0340x+0.240518.03400.24052.24230.9988甲氧基乙酸y＝11.8219x+0.029111.82190.02911.69490.9990溴乙酸甲酯y＝11.3200x+0.187911.32000.18791.54980.9989溴乙酸y＝7.1572x-0.00527.15720.00520.87380.9987
[0085]
表6精密度检测结果
[0086]
序号甲醇甲氧基乙酸甲酯甲氧基乙酸溴乙酸10.5320.6930.6290.59720.5280.6910.6270.59730.5230.6870.6240.59240.5340.6960.6340.60350.5240.6900.6270.59660.5250.6900.6250.59570.5670.6680.5940.58780.5670.6680.5960.59090.5650.6630.5930.588100.5630.6630.5930.588110.5670.6680.5980.592120.5320.6680.5980.59212份平均含量％0.5440.6790.6120.593rsd％3.611.952.800.79
[0087]
表7回收率检测结果
[0088][0089][0090]
表8样品检测结果
[0091]
供试品溶液批次1批次2批次3甲醇含量0.006％0.060％0.190％甲氧基乙酸甲酯含量0.126％0.150％0.130％甲氧基乙酸含量未检出未检出未检出溴乙酸含量未检出0.050％0.250％
[0092]
结论：在实施例1色谱条件下，空白溶剂不干扰测定，供试品加标溶液中各已知杂质与相邻峰、主成分峰与相邻峰分离度均大于1.5，分离良好。经方法学验证，定量限、检测限、线性、精密度和回收率均良好。
[0093]
批次1的供试品溶液中检出已知杂质甲醇0.006％和甲氧基乙酸甲酯0.126％，未检出溴乙酸和甲氧基乙酸。批次2的供试品溶液中检出已知杂质甲醇0.060％、甲氧基乙酸甲酯0.150％和溴乙酸0.050％，未检出甲氧基乙酸。批次3的供试品溶液中检出已知杂质甲醇0.190％、甲氧基乙酸甲酯0.130％和溴乙酸0.250％，未检出甲氧基乙酸。
[0094]
综上，采用实施例1色谱条件检测溴乙酸甲酯中的甲醇、甲氧基乙酸甲酯、甲氧基乙酸和溴乙酸，杂质检测能力良好。
[0095]
实施例2
[0096]
(1)对照品溶液的配制方法是量取甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml、溴乙酸贮备液1ml和溴乙酸甲酯贮备液1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
[0097]
甲醇贮备液的配制方法是取甲醇50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
[0098]
甲氧基乙酸甲酯贮备液的配制方法是取甲氧基乙酸甲酯50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
[0099]
甲氧基乙酸贮备液的配制方法是取甲氧基乙酸50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
[0100]
溴乙酸贮备液的配制方法是取溴乙酸50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
[0101]
溴乙酸甲酯贮备液的配制方法是取溴乙酸甲酯50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
[0102]
(2)供试品溶液的配制方法是取溴乙酸甲酯样品1g，加乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
[0103]
(3)空白溶剂为乙腈。
[0104]
(4)供试品加标溶液的配制方法是取溴乙酸甲酯样品1g，加入甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml和溴乙酸贮备液1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
[0105]
(5)测定方法：精密量取空白溶剂、供试品溶液、对照品溶液和供试品加标溶液各1μl注入气相色谱仪，色谱条件见表9，记录色谱图，色谱结果见图5、图6、图7和图8，采用外标法以峰面积测定得到供试品溶液中甲醇、甲氧基乙酸、溴乙酸和甲氧基乙酸甲酯的含量，供试品溶液、对照品溶液和供试品加标溶液的检测结果见表10。
[0106]
表9实施例2的色谱条件
[0107][0108]
表10实施例2的供试品溶液、供试品加标溶液和对照品溶液的检测结果
[0109]
[0110][0111]
结论：在实施例2色谱条件下，供试品加标溶液中各已知杂质与相邻峰、主成分峰与相邻峰分离度均大于1.5，分离良好。供试品溶液中检出已知杂质甲醇0.007％和甲氧基乙酸甲酯0.133％，未检出溴乙酸和甲氧基乙酸。
[0112]
实施例3
[0113]
(1)对照品溶液的配制方法是量取甲醇贮备液1ml、甲氧基乙酸甲酯贮备液1ml、甲氧基乙酸贮备液1ml、溴乙酸贮备液1ml和溴乙酸甲酯贮备液1ml，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
[0114]
甲醇贮备液的配制方法是取甲醇50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
[0115]
甲氧基乙酸甲酯贮备液的配制方法是取甲氧基乙酸甲酯50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
[0116]
甲氧基乙酸贮备液的配制方法是取甲氧基乙酸50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
[0117]
溴乙酸贮备液的配制方法是取溴乙酸50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得；
[0118]
溴乙酸甲酯贮备液的配制方法是取溴乙酸甲酯50mg，用乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
[0119]
(2)供试品溶液的配制方法是取溴乙酸甲酯样品1g，加乙腈稀释至10ml，摇匀，即得。
[0120]
(3)空白溶剂为乙腈。
[0121]
(4)测定方法：精密量取空白溶剂、供试品溶液和对照品溶液各1μl注入气相色谱仪，色谱条件见表11，记录色谱图，色谱结果见图9、图10和图11，采用外标法以峰面积测定得到供试品溶液中甲醇、甲氧基乙酸、溴乙酸和甲氧基乙酸甲酯的含量，供试品溶液和对照品溶液的检测结果见表12。
[0122]
表11实施例3的色谱条件
[0123][0124]
表12实施例3的供试品溶液和对照品溶液的检测结果
[0125][0126]
结论：在实施例3色谱条件下，对照品溶液中各已知杂质与相邻峰、主成分峰与相邻峰分离度均大于1.5，分离良好。供试品溶液中检出已知杂质甲醇0.007％和甲氧基乙酸甲酯0.125％，未检出溴乙酸和甲氧基乙酸。