一种时间分辨荧光微球为标记材料的血清抗体试纸卡装置

1.本实用新型涉及生物医药技术领域，特别是涉及一种时间分辨荧光微球为标记材料的血清抗体试纸卡装置。


背景技术：

2.布鲁氏菌病是严重危害畜牧业的动物源性传染性疾病，主要感染反刍动物和人类。其病原为布鲁氏菌，是一种兼性细胞内寄生的致病菌，侵袭力强、传染途径多，能引起多器官的损伤，人感染后可引发生殖系统损伤、脑膜炎、心内膜炎、关节炎等，甚至会丧失劳动能力。家畜感染后主要引发母畜流产，给畜牧业生产造成严重损失，全球约有170个国家和地区流行此病，每年新发病例约50万人。近年来，布鲁氏菌病的人畜疫情在世界范围内均出现了回升势头，并呈持续增长态势，愈演愈烈。我国各省市区都有人畜不同程度的布鲁氏菌病流行。
3.全世界每年因布鲁氏菌病造成的直接经济损失近30亿美元，我国布鲁氏菌病引起的畜牧业经济损失也十分严重，主要集中在布鲁氏菌病疫区如新疆、内蒙古、山西、山东等地。以新疆为例，每年因布鲁氏菌病引起的流产、空怀等少生幼畜达100至140万头，造成巨大的经济损失。布鲁氏菌病不仅影响动物以及动物性产品的贸易，阻碍社会经济的发展，而且还直接威胁人民身体健康和公共卫生安全。目前，布病的诊断主要依赖于实验室诊断，主要包括以下几种方法：
①
细菌培养法；
②
血清学诊断方法：虎红平板凝集实验，缓冲平板凝集实验，补体结合实验，酶联免疫吸附实验，荧光偏振实验，乳汁环状实验，布鲁氏菌素皮肤实验等。病原分离法虽精确，但耗时长，阳性检出率低，对分离环境要求高。目前免疫层析试纸技术由于快速、简便、经济、高效等优势已经在布鲁氏菌病的快速检测发挥着巨大作用，但是以胶体金为标记材料的间接法试纸条技术，由于其胶体金固有缺陷，普遍存在着灵敏度低的问题，其次间接法试纸条技术检测血清样本过程中，尤其血清样本存在大量布鲁氏菌非特异性抗体造成检测结果的假阳性，这两方面缺陷造成了布鲁氏菌病免疫层析试纸技术在基层推广使用遇到很大困难，检测结果不准确性也会造成布鲁氏菌病防控很难开展。
4.本专利在一种保持传统免疫层析试纸优势的基础上，解决了其灵敏度低的问题，提高了检测结果的准确性。


技术实现要素：

5.本实用新型的目的是提供一种时间分辨荧光微球为标记材料的血清抗体试纸卡装置，以解决上述问题，具有检测快速、操作简单的优点，提高了试纸检测灵敏度和检测结果的准确性。
6.为实现上述目的，本实用新型提供了如下方案：一种时间分辨荧光微球为标记材料的血清抗体试纸卡装置，包括下卡盒，所述下卡盒可拆卸连接有上卡盒，所述上卡盒与所述下卡盒之间设有检测组件，所述上卡盒和所述下卡盒为不透光材质；
7.所述检测组件包括支撑板，所述支撑板为十字型结构，所述支撑板一侧与所述下
卡盒接触设置，所述支撑板另一侧固定连接有发光部和引流部，所述引流部搭接在所述发光部上，所述发光部位于所述支撑板中心，所述引流部位于所述支撑板四条边上。
8.优选的，所述引流部包括样本吸收垫、免疫时间分辨球结合垫、样本垫和吸收垫，所述样本吸收垫、所述免疫时间分辨球结合垫、所述样本垫和所述吸收垫与所述支撑板胶接，所述样本吸收垫与所述样本垫相对设置，所述免疫时间分辨球结合垫与所述吸收垫相对设置，所述样本吸收垫、所述免疫时间分辨球结合垫、所述样本垫和所述吸收垫靠近所述发光部一端与所述发光部搭接。
9.优选的，所述发光部包括硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜与所述支撑板胶接，所述硝酸纤维素膜为正方形结构，所述硝酸纤维素膜四个边部分别与所述样本吸收垫、所述免疫时间分辨球结合垫、所述样本垫和所述吸收垫搭接，所述硝酸纤维素膜远离所述支撑板一侧设有检测线和质控线，所述检测线与所述质控线平行设置，所述检测线为布鲁氏菌抗原涂层，所述质控线为绵羊igg抗体涂层，所述检测线与所述质控线一端与所述样本垫相接触，所述检测线与所述质控线另一端与所述样本吸收垫相接触。
10.优选的，所述免疫时间分辨球结合垫靠近所述硝酸纤维素膜一端设有标记层，所述标记层为喷涂有时间分辨荧光微球标记的金黄色葡萄球菌蛋白a的涂层。
11.优选的，所述上卡盒远离所述支撑板一侧开设有缓冲液加样孔、样本加样孔和长条孔，所述缓冲液加样孔和所述样本加样孔向所述支撑板一侧凹陷，所述缓冲液加样孔与所述免疫时间分辨球结合垫位置相对应，所述样本加样孔与所述样本垫位置相对应，所述长条孔与所述硝酸纤维素膜位置相对应，所述检测线和所述质控线与所述长条孔相垂直。
12.优选的，所述上卡盒靠近所述下卡盒一侧边部固定连接有若干第一安装柱，所述上卡盒靠近所述下卡盒一侧中部固定连接有若干第二安装柱，所述下卡盒靠近所述上卡盒一侧固定连接有若干第一安装套和若干第二安装套，所述第一安装套与第一安装柱相适配，所述第二安装套与所述第二安装柱相适配。
13.优选的，所述上卡盒靠近所述支撑板一侧固定连接有若干第一压板，若干所述第一压板分为两组，一组所述第一压板位置与所述样本吸收垫上表面抵接，另一组所述第一压板位置与所述吸收垫上表面抵接，所述上卡盒靠近所述支撑板一侧固定连接有若干第二压板，若干所述第二压板分为两组，一组所述第二压板位置与所述样本吸收垫下表面抵接，另一组所述第二压板位置与所述吸收垫下表面抵接。
14.优选的，所述上卡盒靠近所述支撑板一侧固定连接有若干突刺，若干所述突刺分为两组，一组所述突刺位置与所述样本吸收垫相对应，另一组所述突刺位置与所述吸收垫相对应，所述突刺用于刺入所述样本吸收垫和所述吸收垫内部。
15.本实用新型具有如下技术效果：上卡盒和下卡盒为不透光材质保证检测组件内感光物质能长期保存，引流部控制样本的进出，控制缓冲液将发光物质引入发光部，发光部内的抗原用于和样本反应，并显示荧光，样本由上卡盒加入，并通过上卡盒观察是否产生荧光，此种方式检测快速、操作简单，提高了试纸检测灵敏度和检测结果的准确性。
附图说明
16.为了更清楚地说明本实用新型实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本实用新型的
一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
17.图1为本实用新型爆炸结构示意图；
18.图2为检测组件结构示意图；
19.图3为上卡盒架结构示意图；
20.图4为下卡盒架结构示意图；
21.其中，1、下卡盒；2、上卡盒；3、支撑板；4、样本吸收垫；5、免疫时间分辨球结合垫；6、样本垫；7、吸收垫；8、硝酸纤维素膜；9、缓冲液加样孔；10、样本加样孔；11、长条孔；12、检测线；13、质控线；14、第一安装柱；15、第二安装柱；16、突刺；17、第一压板；18、第一安装套；19、第二安装套；20、第二压板；21、标记层。
具体实施方式
22.下面将结合本实用新型实施例中的附图，对本实用新型实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本实用新型一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本实用新型中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本实用新型保护的范围。
23.为使本实用新型的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图和具体实施方式对本实用新型作进一步详细的说明。
24.参照图1
‑
4，本实用新型一种时间分辨荧光微球为标记材料的血清抗体试纸卡装置，包括下卡盒1，下卡盒1可拆卸连接有上卡盒2，上卡盒2与下卡盒1之间设有检测组件，上卡盒2和下卡盒1为不透光材质；
25.检测组件包括支撑板3，支撑板3为十字型结构，支撑板3一侧与下卡盒1接触设置，支撑板3另一侧固定连接有发光部和引流部，引流部搭接在发光部上，发光部位于支撑板3中心，引流部位于支撑板3四条边上。上卡盒2和下卡盒1为不透光材质保证检测组件内感光物质能长期保存，引流部控制样本的进出，控制缓冲液将发光物质引入发光部，发光部内的抗原用于和样本反应，并显示荧光，样本由上卡盒2加入，并通过上卡盒2观察是否产生荧光，此种方式检测快速、操作简单，提高了试纸检测灵敏度和检测结果的准确性。
26.进一步优化方案，引流部包括样本吸收垫4、免疫时间分辨球结合垫5、样本垫6和吸收垫7，样本吸收垫4、免疫时间分辨球结合垫5、样本垫6和吸收垫7与支撑板3胶接，样本吸收垫4与样本垫6相对设置，免疫时间分辨球结合垫5与吸收垫7相对设置，样本吸收垫4、免疫时间分辨球结合垫5、样本垫6和吸收垫7靠近发光部一端与发光部搭接。样本吸收垫4、样本垫6和吸收垫7由吸水纸制成，有利于液体的渗透。
27.进一步优化方案，发光部包括硝酸纤维素膜8，硝酸纤维素膜8与支撑板3胶接，硝酸纤维素膜8为正方形结构，硝酸纤维素膜8四个边部分别与样本吸收垫4、免疫时间分辨球结合垫5、样本垫6和吸收垫7搭接，硝酸纤维素膜8远离支撑板3一侧设有检测线12和质控线13，检测线12与质控线13平行设置，检测线12为布鲁氏菌抗原涂层，质控线13为绵羊igg抗体涂层，检测线12与质控线13一端与样本垫6相接触，检测线12与质控线13另一端与样本吸收垫4相接触。
28.进一步优化方案，免疫时间分辨球结合垫5靠近硝酸纤维素膜8一端设有标记层
21，标记层21为喷涂有时间分辨荧光微球标记的金黄色葡萄球菌蛋白a的涂层。免疫时间分辨球结合垫5由玻璃纤维制成，免疫时间分辨球结合垫5表面喷涂有时间分辨荧光微球标记的金黄色葡萄球菌蛋白a，在免疫时间分辨球结合垫5上加入缓冲液后，时间分辨荧光微球标记的金黄色葡萄球菌蛋白a溶解在缓冲液中并溶进硝酸纤维素膜8，血清样本中的布鲁氏菌抗体与硝酸纤维素膜8上检测线12上抗原反应被固定在检测线12上，带有时间分辨荧光微球标记的金黄色葡萄球菌蛋白a的缓冲液与抗原抗体复合物反应并显示荧光，其余时间分辨荧光微球标记的金黄色葡萄球菌蛋白a与绵羊igg抗体反应并显示荧光。
29.进一步优化方案，上卡盒2远离支撑板3一侧开设有缓冲液加样孔9、样本加样孔10和长条孔11，缓冲液加样孔9和样本加样孔10向支撑板3一侧凹陷，缓冲液加样孔9与免疫时间分辨球结合垫5位置相对应，样本加样孔10与样本垫6位置相对应，长条孔11与硝酸纤维素膜8位置相对应，检测线12和质控线13与长条孔11相垂直。缓冲液加样孔9与免疫时间分辨球结合垫5中空白部分相对应，缓冲液加样孔9用于滴加缓冲液，样本加样孔10用于滴加血清样本，长条孔11用于观察是否产生荧光。
30.进一步优化方案，上卡盒2靠近下卡盒1一侧边部固定连接有若干第一安装柱14，上卡盒2靠近下卡盒1一侧中部固定连接有若干第二安装柱15，下卡盒1靠近上卡盒2一侧固定连接有若干第一安装套18和若干第二安装套19，第一安装套18与第一安装柱14相适配，第二安装套19与第二安装柱15相适配。第二安装套19与第二安装柱15用于将上卡盒2和下卡盒1连接，第一安装套18和第一安装柱14用于加固上卡盒2和下卡盒1的连接。
31.进一步优化方案，上卡盒2靠近支撑板3一侧固定连接有若干第一压板17，若干第一压板17分为两组，一组第一压板17位置与样本吸收垫4上表面抵接，另一组第一压板17位置与吸收垫7上表面抵接，上卡盒2靠近支撑板3一侧固定连接有若干第二压板20，若干第二压板20分为两组，一组第二压板20位置与样本吸收垫4下表面抵接，另一组第二压板20位置与吸收垫7下表面抵接。第一压板17和第二压板20用于压紧检测组件，防止检测组件在盒体内晃动。
32.进一步优化方案，上卡盒2靠近支撑板3一侧固定连接有若干突刺16，若干突刺16分为两组，一组突刺16位置与样本吸收垫4相对应，另一组突刺16位置与吸收垫7相对应，突刺16用于刺入样本吸收垫4和吸收垫7内部。突刺16可刺入样本吸收垫4和吸收垫7内部，防止检测组件移位。
33.本实用新型的工作过程：检测样本时，首先在样本加样孔10中滴加血清样本，血清样本通过样本垫6再通过硝酸纤维素膜8，如果是阳性血清，样本中的布鲁氏菌抗体与硝酸纤维素膜8中检测线12上抗原反应而被固定在检测线12上，血清流过硝酸纤维素膜8被样本吸收垫4吸收，然后在缓冲液加样孔9滴加缓冲液使免疫时间分辨球结合垫5在缓冲液的润湿作用下溶解进入硝酸纤维素膜8上，免疫时间分辨荧光微球上的金黄色葡萄球菌蛋白a与检测线12上抗原抗体复合物的抗体fc段反应而显荧光，其余免疫时间分辨微球与质控线13上的绵羊igg抗体反应而显示荧光。
34.这样的检测试纸卡的结构有两方面的优势：首先可以避免在传统检测血清抗体是假阳性的结果，因为当血清是阳性但是血清中布鲁氏菌抗体较少而且非特异性抗体较多，使用传统试纸条非特异性抗体会把标记材料上捕获蛋白(金黄色葡萄球菌蛋白a)饱和，布鲁氏菌特异性抗体没有机会结合而造成假阳性，但是使用此结构加样检测，先加血清样本，
阳性样本中布鲁氏菌特异性抗体先结合硝酸纤维素膜8上抗原，就完全可以避免传统试纸条的假阳性结果。其次，我们设计上下卡盒必须严密包裹十字形试纸条且上下卡盒设计为黑色或黑灰色等不透光材料，这样可以保护时间分辨荧光微球，使其不发生荧光淬灭，保证试纸卡的灵敏度。本实用新型具有检测快速、操作简单、更重要的是该时间分辨荧光检测卡保质期长、检结果更加准确。
35.在本实用新型的描述中，需要理解的是，术语“纵向”、“横向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。
36.以上所述的实施例仅是对本实用新型的优选方式进行描述，并非对本实用新型的范围进行限定，在不脱离本实用新型设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本实用新型的技术方案做出的各种变形和改进，均应落入本实用新型权利要求书确定的保护范围内。