纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法

1.本发明属于蛋白质检测技术领域，涉及蛋白质含量的检测方法，具体地说是纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法。


背景技术：

2.对于需要长时间保存的重要纸质文件、书籍、档案类文物等材料，为避免塑料档案盒上标签脱落，而造成管理混乱，通常采用可直接在档案盒表面书写标记的纸质档案盒来保存。在纸张保存中，ph值降低被证明是造成纸张褪色和失去强度的主要原因，而无酸纸档案盒采用由植物纤维纸浆经消除有机酸处理后得到的无酸纸制成，盒体纸质坚实、强度高，且能够保护盒内保存的材料不受酸的侵蚀，被广泛使用。
3.除ph值外，蛋白含量也为检测纸张保存质量的重要指标。由于对构成纸张的纤维材料有分解作用的酶，化学本质多为蛋白质，并且目前市面上所出售的纸质档案盒种类质量参差不齐，尤其在档案盒裱糊过程中所添加的面粉含量标准不统一，而面粉中的蛋白质为档案馆库中微生物滋生和害虫繁殖提供了营养基础，易造成所保藏纸张的霉变和虫害。因此，需要通过对纸质档案盒中蛋白含量进行检测来规范不同厂家的面粉添加量，从而评判纸质档案盒是否合乎标准。但目前没有针对纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法，尤其，和食品、饮品等其它样品中蛋白质的检测不同，蛋白质从档案盒表面提取困难。因此，研究一种提高提取效果、简单快捷的检测方法对于档案管理、文物保藏等有重要意义。


技术实现要素：

4.本发明的目的，是要提供一种纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法，通过超声提取蛋白质，结合bca法，以达到提高提取效果、简单快捷检测纸质档案盒蛋白质含量的目的。
5.为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：
6.一种纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法，是取纸质档案盒进行超声处理得提取液，再采用bca法检测提取液中蛋白质含量。
7.作为本发明的一种限定，它包括依次进行的以下步骤：
8.s1.提取液制备：
9.取纸质档案盒加入3～8倍重量的提取溶剂，经超声处理，得提取液；
10.s2.拟合标准曲线：
11.混匀bca试剂a和bca试剂b，得bca工作液；
12.取梯度浓度的蛋白标准品分别加入10倍体积的bca工作液，静置，分别检测在波长为562nm处的od值，经拟合，得标准曲线；
13.s3.提取液检测：
14.取提取液加入10倍体积的bca工作液，检测在波长为562nm处的od值，代入标准曲线，得提取液中蛋白质含量以代表纸质档案盒中蛋白质含量。
15.作为本发明的进一步限定，所述超声处理的温度为20～30℃，时间为3～5min。
16.作为本发明的再进一步限定，所述提取溶剂为超纯水。
17.作为本发明的更进一步限定，所述bca试剂a和bca试剂b的体积比为45～55:1。
18.作为本发明的另一种限定，所述静置为37℃放置20～30min或60℃放置20～40min。
19.本发明由于采用了上述技术方案，其与现有技术相比，所取得的技术进步在于：
20.本发明提供了一种纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法，丰富了纸张保存质量评价指标中蛋白质含量的检测方法，通过超声处理将档案盒表面的蛋白质提取至提取液，再利用bca法检测，以bca法检测结果代表纸质档案盒中蛋白质含量，本发明不仅通过超声处理提高蛋白质提取效果，还通过调整bca法中温度参数、体积比等使检测简单快捷；
21.本发明可高通量进行检测，可制成试剂盒应用于工业生产，对于档案管理、文物保藏等有重要意义。
22.下面结合附图及具体实施例对本发明作更进一步详细说明。
附图说明
23.图1是本发明对比例中牛血清白蛋白标准品和三组档案盒提取液的显色结果图；
24.图2是本发明对比例中的标准曲线及三组档案盒中蛋白质含量检测结果图。
具体实施方式
25.下面通过具体实施例对本发明做进一步详细说明。应当理解，所描述的实施例仅用于解释本发明，并不限定本发明。
26.下述实施例中若未注明的实验具体条件，通常按照常规条件，或者按照试剂公司所推荐的条件；下述实施例中所用的试剂、耗材等，如无特殊说明，均可通过商业途径获得，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为纯水，所用方法如无特殊说明，均为本领域常规工艺方法。
27.实施例1 一种纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法
28.本实施例包括依次进行的以下步骤：
29.s1.提取液制备：
30.取纸质档案盒将盒体纸板剪碎，称取0.15g纸板，至ep管，加入1ml超纯水(6.67倍重量)，封口ep管后，经25℃超声处理5min，得提取液；
31.s2.拟合标准曲线：
32.按体积比为50:1混匀5ml的bca试剂a和100μl的bca试剂b，得bca工作液；
33.取20μl浓度分别为0、0.025g/l、0.05g/l、0.1g/l、0.2g/l、0.3g/l、0.4g/l和0.5g/l的牛血清白蛋白标准品，至96孔板的样品孔中，分别加入200μl的bca工作液，37℃静置20min，采用酶标仪检测96孔板中样品在波长为562nm处的od值，本步骤重复4次，以浓度为横坐标，取各浓度牛血清白蛋白标准品od值检测结果的平均值为纵坐标，经拟合8个点坐标，得标准曲线y＝1.8145x+0.145995，r2＝0.99947；
34.s3.提取液检测：
35.取20μl提取液加入200μl的bca工作液，37℃静置20min，采用酶标仪检测在波长为562nm处的od值，代入标准曲线，得提取液中蛋白质含量为1.173077961g/l，以代表纸质档
案盒中蛋白质含量。
36.对比例 不同纸质档案盒中蛋白质含量检测
37.本对比例按照实施例1的方法，对从市面上购得的普通纸质档案盒、国产无酸纸档案盒和进口无酸纸档案盒的蛋白质含量进行检测，具体检测方法与实施例1相同，不同之处仅在于s1中档案盒种类不同。
38.普通纸质档案盒、国产无酸纸档案盒和进口无酸纸档案盒依次标记为p、g和j，牛血清白蛋白标准品和三组档案盒提取液加入bca工作液静置后，显色结果如图1，牛血清白蛋白标准品及p、g和j提取液检测结果拟合至标准曲线，如图2，结果表明p、g和j三组档案盒中蛋白质含量分别为0.681427398g/l、1.173077961g/l和0.992050131g/l，表明本发明的方法能成功检测不同纸质档案盒中蛋白质含量，且结果与理论一致，可信度高。
39.实施例2-6 纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法
40.实施例2-6分别为一种纸质档案盒中蛋白质含量的检测方法，它们的步骤与实施例1基本相同，不同之处仅在于工艺参数的不同，具体详见表1：
41.表1实施例2-6工艺参数
[0042][0043][0044]
上述实施例的检测结果表明，本发明能有效检测纸质档案盒中蛋白质含量。
[0045]
需要注意，上述实施例，仅是本发明的较佳实施例，并非是对本发明所作的其他形式的限定，任何熟悉本专业的技术人员都可能利用上述技术内容作为启示加以变更或改型为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明权利要求的技术实质，对以上实施例所作出的简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明权利要求保护的范围。