技术特征：
1.一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，其特征在于，包括如下步骤：s1.样品处理；s2.采用液相色谱-质谱联用仪对样品进行检测；其中，步骤s2中液相色谱条件为：采用阴离子交换色谱柱；流动相a为酸性流动相，有机相成分为20％～50％乙腈，同时含有1～10mm的缓冲盐，酸碱度通过加入甲酸进行调节，控制在4～6；流动相b为碱性流动相，有机相成分为20％～50％乙腈，同时含有1～10mm的缓冲盐，酸碱度通过加入甲酸进行调节，控制在9～10；进样器温度为4℃；进样量为2.0μl；流速为0.4ml/min；基于流动相a和流动相b的梯度洗脱程序为0～0.50、10～30％b，0.50～2.50、95％b，2.50～3.50、95％b，3.50～3.51、10～30％b，3.51～5.00系统控制；其中，步骤s2中质谱条件为：扫描方式为选择离子监测，离子化模式为负离子模式，离子源为电喷雾离子源，碰撞气压力中等，帘气压力为25psi，雾化气压力为40psi，辅助气压力为50psi，喷雾电压为-4500v，雾化气温度为550℃。2.根据权利要求1所述的一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，其特征在于，步骤s1中，样品湿冰环境温度下融化后，涡旋混匀；取定量样品至96孔板中；向96孔板中分别加入定量内标工作溶液，加入定量acn，混合均匀，加入定量水混匀；将96孔板放入离心机进行离心；转移定量上清溶液至96孔板后，吹干，用定量水复溶；震荡，然后将溶液转移到进样板中进样。3.根据权利要求1所述的一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，其特征在于，步骤s2中，流动相a配制时，按体积比取定量h2o至玻璃瓶中，加入定量挥发性缓冲盐溶液，混匀，用可挥发性酸调节ph至4.0-6.0，然后定量加入乙腈，混匀后超声15分钟。4.根据权利要求3所述的一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，其特征在于，步骤s2中，流动相a配制时，所述挥发性缓冲盐为醋酸铵或甲酸铵，可挥发性酸为甲酸或乙酸。5.根据权利要求1所述的一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，其特征在于，步骤s2中，流动相b配制时，按体积比例取定量h2o至玻璃瓶中，加入定量挥发性缓冲盐溶液，混匀，用可挥发性碱调节ph至9.0-11.0，然后定量加入乙腈，混匀后超声15分钟。6.根据权利要求5所述的一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，其特征在于，步骤s2中，流动相b配制时，所述挥发性缓冲盐为醋酸铵或甲酸铵，可挥发性碱为氨水。7.根据权利要求1所述的一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，其特征在于，步骤s2中，洗针液r0和r3配制时，按体积比例取定量乙腈和定量h2o至玻璃瓶中，加入定量的氨水，混匀。8.根据权利要求1所述的一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，其特征在于，步骤s2中，质谱检测时，待测物的q1为[m-1]，其中q1为母离子的质量数，m为待测物的单一同位素分子量；三磷酸化合物的子离子为二磷酸片段，质荷比为159.0；检测的离子对为[m-1]/159.0。
技术总结
本发明公开了一种三磷酸类化合物浓度液相质谱联用检测方法，以满足三磷酸化合物的半定量和定量的生物样本分析检测；液相部分的流动相使用易挥发成分的缓冲盐体系并对流动相的酸碱度进行控制，以满足大部分三磷酸的检测工作，从而通过引入友好型的溶剂成分解决传统流动相无法直接进入质谱的问题，解决了三磷酸传统方法干扰大的问题，有效的提高了三磷酸化合物液相方法的稳定性以及与质谱的兼容性，并通过计算机辅助有效解决了液相质谱方法对三磷酸化合物标准品的依赖。磷酸化合物标准品的依赖。
技术研发人员：权腾飞 谈伟锋 段泽琳
受保护的技术使用者：熙华（太仓）新药开发有限公司
技术研发日：2022.09.07
技术公布日：2022/11/22