一种工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的检测方法

1.本发明涉及大麻检测技术领域，具体涉及一种工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的检测方法。


背景技术：

2.工业大麻是指四氢大麻酚含量低于0.3％的大麻，中国将工业大麻称为汉麻(hemp)，是大麻科(cannabinaceae)大麻属(cannabis)一年生草本植物，分为工业大麻和毒品大麻，国内外广泛应用的大麻为工业大麻。工业大麻的秆芯所磨制成的粉末，也就是汉麻秆芯超细粉体改性涂层技术应用在军服，能发挥出产品的高强度、高性能的特性。
3.专利申请号为cn202111022160.2的专利，其在说明书中记载有“，采用大麻二酚和四氢大麻酚标准品配置不同浓度的标准溶液；用乙醇提取样品，以c18色谱柱分离，在紫外检测器220nm波长处检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量，计算样品中大麻二酚和四氢大麻酚含量。将所述大麻二酚的标准工作液和所述四氢大麻酚的标准工作液按照已确立的液相色谱条件进行分析，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对试样进行定量，保证大麻二酚和四氢大麻酚的响应值在测定线性范围内。本发明的方法简单、便于操作，测定结果准确可靠”，上述专利虽然能够进行大麻二酚和四氢大麻酚的检测，但是其直接进行提取和过滤，分离度不佳，使得所检测的结果，误差较大，重复性不佳，无法满足使用需求。
4.综上所述，研发一种工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的检测方法，仍是大麻检测技术领域中急需解决的关键问题。


技术实现要素：

5.针对现有技术所存在的上述缺点，本发明在于提供一种工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的检测方法，本发明所提供的方法，能够提升所提取的大麻二酚和四氢大麻酚的纯净度，使得检测结果波动较小，更可靠。
6.为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：
7.本发明提供了一种工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的检测方法，包括以下步骤：
8.(1)取大麻样品，将大麻样品晾干后于振动筛上过筛，再用粉碎机粉碎，获得粉碎物；
9.(2)将粉碎物置于干燥箱内干燥，获取水分不大于8％的干燥物；
10.(3)将干燥物采用二氧化碳进行超临界萃取，获得萃取物；
11.(4)向萃取物内加入有机溶剂，再超声提取，离心收集上清液，将上清液浓缩至原体积的1：20-22，获得浓缩物；
12.(5)用大麻二酚、四氢大麻酚标准对照品配得系列对照品溶液，采用高效液相色谱仪对浓缩物以及对照品溶液进行检测，以浓度为横轴，峰面积为纵轴，绘制标准工作曲线，
用标准工作曲线对试样进行定量。
13.本发明进一步的设置为：在步骤(1)中所述的大麻样品为大麻叶或大麻茎中的任意一种。
14.本发明进一步的设置为：在步骤(1)中，所述的粉碎机的转速为300-320r/min，粉碎时间为12-14min。
15.本发明进一步的设置为：在步骤(2)中，所述的干燥箱的温度为95-105℃，干燥时间为20-60min。
16.本发明进一步的设置为：在步骤(3)中，所述的超临界萃取温度为30-60℃，压力为10-30mpa，二氧化碳的流量为600-700kg/h。
17.本发明进一步的设置为：在步骤(4)中，所述的有机溶剂为正丁醇、叔丁基甲基醚或四氯化碳中的任意一种。
18.本发明进一步的设置为：在步骤(4)中，所述的萃取物与机溶剂的质量比为1:3-5。
19.本发明进一步的设置为：在步骤(4)中，所述的超声提取的时间为5-20min，功率为400-600w。
20.本发明进一步的设置为：在步骤(4)中，所述的离心的转速为8000-12000r/min，时间为10-12min。
21.本发明进一步的设置为：在步骤(5)中，所述的高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱为c
18
柱，柱高3.9mm，内径300mm，粒度10μm，流动相为甲醇-水(80:20)，流速为1ml/min，进样量为20μl，波长为210nm。
22.有益效果
23.采用本发明提供的技术方案，与已知的公有技术相比，具有如下有益效果：
24.本发明所提供的方法，以大麻叶或大麻茎为样本，通过将大麻样品晾干过筛，并粉碎，于干燥箱内干燥，采用二氧化碳进行超临界萃取，再通过向萃取物内加入有机溶剂，超声提取，离心收集上清液，用大麻二酚、四氢大麻酚标准对照品配得系列对照品溶液，采用高效液相色谱仪对浓缩物以及对照品溶液进行检测，以浓度为横轴，峰面积为纵轴，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对试样进行定量，所提供的方法，能够提升所提取的大麻二酚和四氢大麻酚的纯净度，使得检测结果波动较小，更可靠。
附图说明
25.图1为本发明性能检测中波动率的统计图。
具体实施方式
26.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
27.下面结合实施例对本发明作进一步的描述。
28.实施例1：
29.本发明提供了一种工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的检测方法，包括以下步
骤：
30.(1)取大麻样品，将大麻样品晾干后于振动筛上过筛，再用粉碎机粉碎，获得粉碎物。
31.进一步的，大麻样品为大麻叶或大麻茎中的任意一种。
32.进一步的，粉碎机的转速为300r/min，粉碎时间为12min。
33.(2)将粉碎物置于干燥箱内干燥，获取水分不大于8％的干燥物。
34.进一步的，燥箱的温度为95℃，干燥时间为20min。
35.(3)将干燥物采用二氧化碳进行超临界萃取，获得萃取物。
36.进一步的，超临界萃取温度为30℃，压力为10mpa，二氧化碳的流量为600kg/h。
37.(4)向萃取物内加入有机溶剂，再超声提取，离心收集上清液，将上清液浓缩至原体积的1：20，获得浓缩物。
38.进一步的，有机溶剂为正丁醇。
39.进一步的，萃取物与机溶剂的质量比为1:3。
40.进一步的，超声提取的时间为5min，功率为400w。
41.进一步的，离心的转速为8000r/min，时间为10min。
42.(5)用大麻二酚、四氢大麻酚标准对照品配得系列对照品溶液，采用高效液相色谱仪对浓缩物以及对照品溶液进行检测，以浓度为横轴，峰面积为纵轴，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对试样进行定量。
43.进一步的，高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱为c
18
柱，柱高3.9mm，内径300mm，粒度10μm，流动相为甲醇-水(80:20)，流速为1ml/min，进样量为20μl，波长为210nm。
44.实施例2：
45.本发明提供了一种工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的检测方法，包括以下步骤：
46.(1)取大麻样品，将大麻样品晾干后于振动筛上过筛，再用粉碎机粉碎，获得粉碎物。
47.进一步的，大麻样品为大麻茎中的任意一种。
48.进一步的，粉碎机的转速为310r/min，粉碎时间为13min。
49.(2)将粉碎物置于干燥箱内干燥，获取水分不大于8％的干燥物。
50.进一步的，燥箱的温度为100℃，干燥时间为40min。
51.(3)将干燥物采用二氧化碳进行超临界萃取，获得萃取物。
52.进一步的，超临界萃取温度为45℃，压力为20mpa，二氧化碳的流量为650kg/h。
53.(4)向萃取物内加入有机溶剂，再超声提取，离心收集上清液，将上清液浓缩至原体积的1：21，获得浓缩物。
54.进一步的，有机溶剂为正丁醇、叔丁基甲基醚或四氯化碳中的任意一种。
55.进一步的，萃取物与机溶剂的质量比为1:4。
56.进一步的，超声提取的时间为12min，功率为500w。
57.进一步的，离心的转速为10000r/min，时间为11min。
58.(5)用大麻二酚、四氢大麻酚标准对照品配得系列对照品溶液，采用高效液相色谱仪对浓缩物以及对照品溶液进行检测，以浓度为横轴，峰面积为纵轴，绘制标准工作曲线，
用标准工作曲线对试样进行定量。
59.进一步的，高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱为c
18
柱，柱高3.9mm，内径300mm，粒度10μm，流动相为甲醇-水(80:20)，流速为1ml/min，进样量为20μl，波长为210nm。
60.实施例3：
61.本发明提供了一种工业大麻中大麻二酚和四氢大麻酚的检测方法，包括以下步骤：
62.(1)取大麻样品，将大麻样品晾干后于振动筛上过筛，再用粉碎机粉碎，获得粉碎物。
63.进一步的，大麻样品为大麻叶或大麻茎中的任意一种。
64.进一步的，粉碎机的转速为320r/min，粉碎时间为14min。
65.(2)将粉碎物置于干燥箱内干燥，获取水分不大于8％的干燥物。
66.进一步的，燥箱的温度为105℃，干燥时间为60min。
67.(3)将干燥物采用二氧化碳进行超临界萃取，获得萃取物。
68.进一步的，超临界萃取温度为60℃，压力为30mpa，二氧化碳的流量为700kg/h。
69.(4)向萃取物内加入有机溶剂，再超声提取，离心收集上清液，将上清液浓缩至原体积的1：22，获得浓缩物。
70.进一步的，有机溶剂为正丁醇、叔丁基甲基醚或四氯化碳中的任意一种。
71.进一步的，萃取物与机溶剂的质量比为1:5。
72.进一步的，超声提取的时间为20min，功率为600w。
73.进一步的，离心的转速为12000r/min，时间为12min。
74.(5)用大麻二酚、四氢大麻酚标准对照品配得系列对照品溶液，采用高效液相色谱仪对浓缩物以及对照品溶液进行检测，以浓度为横轴，峰面积为纵轴，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对试样进行定量。
75.进一步的，高效液相色谱仪的色谱条件为：色谱柱为c
18
柱，柱高3.9mm，内径300mm，粒度10μm，流动相为甲醇-水(80:20)，流速为1ml/min，进样量为20μl，波长为210nm。
76.性能检测：
77.取大麻叶作为样本，分别采用实施例1、实施例2和实施例3的方法进行大麻二酚和四氢大麻酚的检测，再采用专利申请号为cn202111022160.2的方法进行大麻二酚和四氢大麻酚的检测，分别作为实验1组、实验2组、实验3组和对照组，重复10次，统计各组10次重复实验检测结果的波动率，记录相关数据于表1。
78.表1：各组重复实验的波动率
79.[0080][0081]
由表1和图1可知，实验组(实验1组、实验2组和实验3组)的复实验的波动率明显低于对照组(p＜0.05)，各实验组之间的复实验的波动率差异并不明显(p＞0.05)。本发明所提供的方法，能够提升所提取的大麻二酚和四氢大麻酚的纯净度，使得检测结果波动较小，更可靠。
[0082]
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不会使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。