一种制备孢囊线虫阴门锥切片的装置

1.本实用新型涉及线虫鉴定技术领域，尤其涉及一种制备孢囊线虫阴门锥切片的装置。


背景技术：

2.孢囊线虫(heterodera spp.)是世界上重要的定居性植物内寄生线虫。孢囊线虫病是土传病害，其传播性很强。在我国，几乎所有的北方大豆产区都存在大豆孢囊线虫(h.glycines)的危害。而在小麦产区，大部分省市都有禾谷孢囊线虫(h.avenae)的分布。
3.孢囊线虫的整个生活史经历4次蜕皮。以大豆孢囊线虫为例，大豆孢囊线虫一生分为卵、4个幼虫龄期和成虫。原肠胚形成后，在卵壳内胚胎生长发育，第一次蜕皮后，二龄幼虫(j2)的前端形成口针，根据环境条件的不同，未孵化出的二龄幼虫可以在保护性卵囊内存活很多年，这可以说是生活史的休眠阶段。每个卵孵化出单条幼虫。当j2用其口针刺破卵壳从卵中孵化出来时，释放到土壤的j2开始寻找合适的寄主，j2进入寄主的根系，通常在紧靠根尖生长区的后方位置侵入，然后转移到中柱鞘进而选择一个合适的取食位点，刺激寄主植物形成合胞体，用于提供它们发育所需的营养，并在此合胞体上取食和发育；取食后便发生第二次蜕皮成为三龄幼虫(j3)。第4次蜕皮时，雌虫撑破根皮层，成熟的雌虫呈柠檬性，雌虫死后表皮颜色逐渐变褐色，内含几十至几百粒卵。
4.形态学鉴定是孢囊线虫鉴定的基础，孢囊线虫雌雄异形，雌虫成熟时，虫体膨大成柠檬形或梨形，虫体较大，不能活动；雄虫为细长的蠕虫形，可活动。传统的形态学鉴定主要根据孢囊阴门锥的形态特征和二龄幼虫的形态特征，其中雌虫孢囊的阴门锥形态、会阴区构造及其相关联的内部构造是孢囊线虫分类的重要依据。
5.因此，如何快速高效获得孢囊线虫孢囊的阴门锥，是孢囊线虫形态学鉴定的重点也是难点。常规的获取方法是用手术刀切除孢囊的后四分之一的位置，然后进行清洗整理。但是阴门锥体型小，在制片过程中易丢失。而且阴门锥及其内部相关联的结构复杂、细微，在切取时易损伤，影响鉴定结果。


技术实现要素：

6.本实用新型的目的在于提供一套方便孢囊线虫阴门锥切取的装置，保证阴门锥的完整性，提高制片的成功率。
7.具体技术方案如下：
8.本实用新型提供了一种制备孢囊线虫阴门锥的切片装置，包括：载虫玻片，镊子和切片刀；
9.所述载虫玻片上至少设有两个凹槽；所述镊子两分叉臂的前端均设有用于固定孢囊的圆片；所述切片刀的一端为开刃的刀片，另一端为细勾状挑针。
10.作为优选，所述凹槽为半球形，深度为0.2-0.8mm；切取过程，将孢囊置于凹槽内，可以起到固定的作用，使整个操作过程中孢囊始终在显微镜的视野中。
11.每次切取一个孢囊线虫阴门锥时，均需要有一个凹槽用于放置孢囊，另一个凹槽用于清洗和修正切取下来的阴门锥。故，作为优选，所述载虫玻片上凹槽的数量为2的倍数。
12.作为优选，所述圆片的直径为1～2mm；两圆片的接触面上设有螺纹。将固定孢囊用的镊子端部设计成带螺纹的圆片状，是因为圆片可以减少镊子端部对孢囊的损伤，可以避免操作过程中使阴门锥变形，影响鉴定结果；而螺纹也可以增加摩擦力，防止孢囊滑脱。
13.作为优选，所述镊子两分叉臂上均设有凹凸的条状纹路。镊子中间部分设计有凹凸的条状纹路，可以增加摩擦力，方便使用。
14.作为优选，所述切片刀供拿握的中间部位设有凹凸的条状纹路。切片刀中部设计凹凸的条状纹路，也可以增加摩擦力，方便操作。
15.作为优选，所述刀片还配有刀鞘；可以在不使用的时候保护刀片。
16.作为优选，所述刀片长度为0.5-1cm。
17.切片刀的另一端为细勾状挑针，可以直接用于挑取切离孢囊的阴门锥，减少操作时间。挑针可以是动物毛发、金属细丝等制成。
18.与现有技术相比，本实用新型具有以下有益效果：
19.本实用新型采用带有凹槽的载虫玻片、带圆片的镊子以及带刀片和挑针的切片刀进行组合，可以快速高效地从孢囊线虫中切取阴门锥，获取的阴门锥结构完整，解决了现有技术中因阴门锥体型小而易丢失易损伤的问题，大大提高了制片的成功率。
附图说明
20.图1为本实用新型制备孢囊线虫阴门锥切片的装置的结构示意图；
21.其中，a为载虫玻片；b为镊子；c为切片刀；
22.1为载虫玻片，2为凹槽，3为镊子，4为分叉臂，5为圆片，6为螺纹，7为切片刀，8为刀片，9为刀鞘，10为挑针，11为条状纹路。
具体实施方式
23.以下结合附图和具体实施例对本实用新型作进一步详细说明。
24.如图1所示，一种制备孢囊线虫阴门锥切片的装置，由载虫玻片a，镊子b和切片刀c组成；
25.其中，所述载虫玻片1上设有8个凹槽2，凹槽2为半球形，深度为0.6mm。切取过程，将孢囊置于凹槽2内，可以起到固定的作用，使整个操作过程中孢囊始终在显微镜的视野中。
26.镊子3设有两个分叉臂4，两分叉臂4的前端均设有用于固定孢囊的圆片5，圆片5的直径为1.5mm，两圆片5的接触面上设有螺纹6。将固定孢囊用的镊子端部设计成带螺纹的圆片状，是因为圆片可以减少镊子端部对孢囊的损伤，可以避免操作过程中使阴门锥变形，影响鉴定结果；而螺纹也可以增加摩擦力，防止孢囊滑脱。两个分叉臂上均设有凹凸的条状纹路。镊子中间部分设计有凹凸的条状纹路，可以增加摩擦力，方便使用。
27.切片刀7的一端为开刃的刀片8，另一端为细勾状挑针10；可以直接用于挑取切离孢囊的阴门锥，减少操作时间；挑针可以是动物毛发、金属细丝等制成。中间部位为供拿握的区域，切片刀供拿握的中间部位设有凹凸的条状纹路11，也可以增加摩擦力，方便操作。
刀片还配有刀鞘9，可以在不使用的时候保护刀片，刀片长度为0.5cm，更适合于孢囊的切割。
28.上述制备孢囊线虫阴门锥的切片装置的工作过程如下：
29.先将从土壤中分离出来的孢囊线虫的孢囊用蒸馏水清洗2次，随后用37℃的蒸馏水浸泡24小时，使虫体软化。
30.取一片载虫玻片，在玻片上的两个凹槽中分别滴加一滴45％的乳酸；在体视显微镜下，用镊子夹取一粒孢囊置于凹槽中。取下切片刀的刀鞘，一只手用镊子固定孢囊，另一只手执切片刀，并用刀片切除孢囊阴门锥部分。待阴门锥与孢囊分离后，转换切片刀，用挑针将阴门锥转移至另一含有45％乳酸的凹槽中清洗和修正。修整后的阴门锥可用于制作玻片。


技术特征：
1.一种制备孢囊线虫阴门锥切片的装置，其特征在于，包括：载虫玻片，镊子和切片刀；所述载虫玻片上至少设有两个凹槽；载虫玻片上凹槽的数量为2的倍数；所述凹槽为半球形，深度为0.2-0.8mm；每次切取一个孢囊线虫阴门锥时，均需要有一个凹槽用于放置孢囊，另一个凹槽用于清洗和修正切取下来的阴门锥；所述镊子两分叉臂的前端均设有用于固定孢囊的圆片，所述圆片的直径为1～2mm；两圆片的接触面上设有螺纹；所述切片刀的一端为开刃的刀片，另一端为细勾状挑针；切片刀供拿握的中间部位设有凹凸的条状纹路。2.如权利要求1所述的制备孢囊线虫阴门锥切片的装置，其特征在于，所述镊子两分叉臂上均设有凹凸的条状纹路。3.如权利要求1所述的制备孢囊线虫阴门锥切片的装置，其特征在于，所述刀片还配有刀鞘。4.如权利要求1所述的制备孢囊线虫阴门锥切片的装置，其特征在于，所述刀片长度为0.5-1cm。

技术总结
本实用新型公开了一种制备孢囊线虫阴门锥切片的装置，包括：载虫玻片，镊子和切片刀；所述载虫玻片上至少设有两个凹槽；所述镊子两分叉臂的前端均设有用于固定孢囊的圆片；所述切片刀的一端为开刃的刀片，另一端为细勾状挑针。本实用新型采用带有凹槽的载虫玻片、带圆片的镊子以及带刀片和挑针的切片刀进行组合，可以快速高效地制备孢囊线虫阴门锥的切片，获取的阴门锥结构完整，解决了现有技术中因阴门锥体型小而易丢失易损伤的问题，大大提高了制片的成功率。片的成功率。片的成功率。


技术研发人员：田忠玲 周佳艳 吴思婕
受保护的技术使用者：浙江树人学院
技术研发日：2022.04.01
技术公布日：2022/12/6