一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法

本发明属于胰蛋白酶检测，具体涉及一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法。

背景技术：

1、目前，胰蛋白酶活性检测方法有质谱法、光谱法、凝胶电泳法、电化学法等，仪器价格昂贵，检测成本高，需专人操作，普适性差，且耗时长。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种以距离为输出信号的胰蛋白酶含量检测方法，该方法操作简单，不涉及大型仪器，混合纤维素微孔滤膜成本低，降低检测成本。

2、为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法，该方法为：

3、s1、将100μl的质量分数为5％的明胶水溶液滴加在混合纤维素微孔滤膜上，扩散3min，用游标卡尺读取扩散直径，并记为d0；

4、s2、分别向质量分数为5％的明胶水溶液中加入不同浓度的胰蛋白酶溶液，在温度为37℃的条件下，发生酶催化反应10min，然后取100μl的反应液滴加于混合纤维素微孔滤膜上，扩散3min，用游标卡尺读取扩散直径，并记为d；

5、s3、根据d-d0的变化值，制得直径变化值随胰蛋白酶浓度变化的标准曲线；

6、s4、取含有胰蛋白酶的待测样品按步骤s2进行，用游标卡尺读取扩散直径，并记为d待测样品，将所述d待测样品代入s3中得到的标准曲线中，可计算出待测样品中胰蛋白酶含量。

7、优选地，s1中所述混合纤维素微孔滤膜的孔径为1.0μm。

8、优选地，s2中所述胰蛋白酶溶液的浓度为0.01mg/ml～10mg/ml。

9、优选地，s2中所述明胶水溶液和胰蛋白酶溶液的体积比为9：1。

10、优选地，s4中所述含有胰蛋白酶的待测样品包括血清。

11、本发明与现有技术相比具有以下优点：

12、本发明操作简单，不涉及大型仪器，混合纤维素微孔滤膜成本低，降低检测成本。

13、下面结合附图和实施例对本发明作进一步详细说明。

技术特征：

1.一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法，其特征在于，该方法为：

2.根据权利要求1所述的一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法，其特征在于，s1中所述混合纤维素微孔滤膜的孔径为1.0μm。

3.根据权利要求1所述的一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法，其特征在于，s2中所述胰蛋白酶溶液的浓度为0.01mg/ml～10mg/ml。

4.根据权利要求1所述的一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法，其特征在于，s2中所述明胶水溶液和胰蛋白酶溶液的体积比为9：1。

5.根据权利要求1所述的一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法，其特征在于，s4中所述含有胰蛋白酶的待测样品包括血清。

技术总结
本发明提供了一种基于距离信号读出的胰蛋白酶含量检测方法，将100μL的质量分数为5％的明胶水溶液滴加在混合纤维素微孔滤膜上，扩散3min，用游标卡尺读取扩散直径d<subgt;0</subgt;；分别向质量分数为5％的明胶水溶液中加入不同浓度的胰蛋白酶溶液，在温度为37℃的条件下，发生酶催化反应10min，然后取100μL的反应液滴加于混合纤维素微孔滤膜上，扩散3min，用游标卡尺读取扩散直径，记为d；根据d‑d<subgt;0</subgt;的变化值，制得直径变化值随胰蛋白酶浓度变化的标准曲线；取含有胰蛋白酶的待测样品用游标卡尺读取扩散直径d<subgt;待测样品</subgt;，代入S3中得到的标准曲线中，计算出待测样品中胰蛋白酶含量。本发明操作简单，不涉及大型仪器，混合纤维素微孔滤膜成本低，降低检测成本。

技术研发人员：刘晓霞,侯文雅,张国娟,郭晓迪,吕丹
受保护的技术使用者：山西农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13