一种化妆品中α-羟基酸的检测方法与流程

本申请涉及化妆品检测，尤其是涉及一种检测化妆品中10种α-羟基酸的方法。

背景技术：

1、α-羟基酸是一类羟基附着在α位的有机酸，也称aha。在皮肤科，aha已被用作浅表剥脱剂，并且可调节角质层和改善痤疮。10种α-羟基酸包括葡糖醛酸、酒石酸、羟基乙酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、2-羟基丁酸、扁桃酸、二苯乙醇酸、羟基辛酸。aha是弱有机酸，有一个或多个羟基。aha主要通过降低角质细胞凝聚力来剥脱角质，通常以浅层和中等深度剥脱的形式应用，目前被广泛应用于化妆品中。

2、市面上的抗皱类的化妆品中均宣称添加了α-羟基酸，但通过肉眼是无法观察到的，通常会采用液相色谱法来检测。液相色谱法是用液体作为流动相的色谱法，将化妆品提取液放置于玻璃柱中，不同的色素在柱中得到分离而形成不同颜色的谱带，每个色带代表不同的色素，以用于分离有色物质。

3、但采用液相色谱法检测时，化妆品中存在干扰因子，会产生干扰因子的色谱和紫外光谱图与标准溶液中对应成分一致的情况，不利于判断监测出的是干扰因子还是需要检测的因子，如葡糖酸会干扰酒石酸的测定，乳糖酸会干扰葡糖醛酸的测定，使检测结果不准确，不利于对α-羟基酸进行定性检测。

技术实现思路

1、本申请提供一种检测化妆品中10种α-羟基酸的方法，采用液相色谱-质谱结合的方式对检测化妆品10种α羟基酸进行定性检测，通过离子对的相对丰度来判断化妆品中存在的成分，避免化妆品中的干扰因子对检测的干扰，有利于对α-羟基酸进行定性检测。

2、本申请采用如下的技术方案：

3、首先，检测方法包括：对待测化妆品进行前处理，制得待测液；

4、选取α-羟基酸的标准品，制得标准液；

5、将所述待测液和所述标准液分别进行液质联用检测：

6、通过比对hplc色谱图中各α-羟基酸的保留时间，以及分析ms质谱图中各α-羟基酸的碎片离子的相对离子丰度k，判定待测样品中是否存在对应的α-羟基酸。

7、进一步地，上述判定待测样品中是否存在对应的α-羟基酸的方法包括：首先，分析样品液的hplc色谱图与标准液的hplc色谱图中色谱峰的保留时间是否一致；

8、若保留时间一致，再根据ms质谱图计算所述待测液中α-羟基酸的碎片离子的离子丰度与所述标准液中α-羟基酸的碎片离子的离子丰度比值k，并计算k与所述待测液中监测离子对的离子丰度的差值δk；

9、若δk在预设的最大偏差范围内，说明所述待测化妆品中含有对应的α-羟基酸。

10、进一步地，上述所述最大偏差值的设定值根据相对离子丰度k的大小来设定：

11、当50％＜k时，预设的最大偏差值为±20％；

12、当20％＜k≤50％时，预设的最大偏差值为±25％

13、当10％＜k≤20％时，预设的最大偏差值为±30％。

14、当k≤10％时，预设的最大偏差值为±50％。

15、进一步地，液质联用检测过程中hplc色谱条件包括：

16、色谱柱：c18色谱柱或等效色谱柱；

17、流动相：a相为含甲酸的乙腈溶液、b相为甲酸水溶液；

18、流速为0.2-0.4ml/min，进样量为4-6μl。

19、优选的，上述色谱柱尺寸规格为150mm×2.1mm×3μm。

20、1.进一步地，上述hplc的洗脱程序为：0-4min，a相的体积为0％、b相的体积为100％；

21、4-15min，a相的体积由0％变为95％、b相的体积由100％变为5％；

22、15-17min，a相的体积为95％、b相的体积为5％；

23、17-17.1min，a相的体积由95％变为0％、b相的体积由5％变为100％；

24、17.1-22min，a相的体积为0％、b相的体积为100％。

25、进一步地，上述液质联用检测过程中质谱条件包括：

26、离子源：电喷雾离子源(esi源)；

27、监测模式：负离子多离子反应监测模式。

28、进一步地，上述质谱检测中，监测离子对及其相关电压参数如下：

29、雾化器流速：2-4l/min；干燥气流速：13-18l/min；脱溶剂管温度：295-305℃；离子源加热温度：495-505℃；碰撞气：ar或he，220-240kpa；离子化电压：3500-4500v。

30、优选的，上述干燥气流为氮气，碰撞气为ar。

31、进一步地，上述待测液的制备方法包括：首先称取化妆品样品0.5-1.5g，恒温加热25min-35min；

32、将8-12ml水加入所述样品中，涡旋混合，制成混合液；

33、对所述混合液进行超声提取25-35min，制成提取液；

34、再将所述提取液高速离心10-20min，取上清液过滤后制成待测液。

35、优选的，上述恒温加热的温度为90℃，加热时间为30min。

36、优选的，上述超声提取的温度为60℃，超声提取时间为30min。

37、优选的，上述高速离心的转速为10000rpm，高速离心时间为15min。

38、优选的，上述过滤选用0.45μm的滤膜进行。

39、优选的，上述步骤二中还可以添加有异丙醇，涡旋混合时间为30s，便于溶解如油包水等难于在水中的分散剂。

40、进一步地，上述α-羟基酸包括：葡糖醛酸、酒石酸、羟基乙酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、2-羟基丁酸、扁桃酸、二苯乙醇酸、羟基辛酸

41、综上所述，本申请包括以下至少一种有益技术效果：

42、1.本申请以10种α-羟基酸为标准品，在一定的色谱和质谱条件下，采用液质联合检测法，检测化妆品中是否存在10种α羟基酸。通过两种检测法结合对比的方式，能够得到更多10种α-羟基酸的信息，有利于进一步确定α-羟基酸的种类。避免干扰因子对检测的干扰，使检测结果更准确，有利于对α-羟基酸进行定性检测；

43、2.本申请采用的检测方法，快速且准确、灵敏度高、操作简便，可信度高，具有一定的专属性，适用于检测不同品种化妆品中α-羟基酸的种类。

44、3.本申请利用超声法提取样品中的α-羟基酸，提取方法简单，操作简便，效率高，耗时短。

技术特征：

1.一种化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：检测方法包括：对待测化妆品进行前处理，制得待测液；

2.根据权利要求1所述的化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：判定待测样品中是否存在对应的α—羟基酸的方法包括：首先，分析样品液的hplc色谱图与标准液的hplc色谱图中色谱峰的保留时间是否一致；

3.根据权利要求2所述的化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：所述最大偏差值的设定值根据相对离子丰度k的大小来设定：

4.根据权利要求1所述的化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：所述液质联用检测过程中hplc色谱条件包括：

5.根据权利要求4所述的化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：所述hplc的洗脱程序为：

6.根据权利要求1所述的化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：所述液质联用检测过程中质谱条件包括：离子源：电喷雾离子源（esi源）；

7.根据权利要求6所述的化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：所述质谱检测中，监测离子对及其相关电压参数如下：

8.根据权利要求1所述的化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：所述待测液的制备方法包括：首先称取化妆品样品0.5-1.5g，恒温加热25min-35min；

9.根据权利要求1所述的化妆品中α—羟基酸的检测方法，其特征在于：所述α—羟基酸包括：葡糖醛酸、酒石酸、羟基乙酸、苹果酸、乳酸、柠檬酸、2-羟基丁酸、扁桃酸、二苯乙醇酸、羟基辛酸。

技术总结
本申请涉及一种化妆品中α—羟基酸的检测方法，涉及化妆品检测技术领域，检测方法为对待测化妆品进行前处理，制得待测液；选取α—羟基酸的标准品，制得标准液；将所述待测液和所述标准液分别进行液质联用检测：通过比对HPLC色谱图中各α—羟基酸的保留时间，以及分析MS质谱图中各α—羟基酸的碎片离子的相对离子丰度K，判定待测样品中是否存在对应的α—羟基酸。本申请采用液质联合检测法，检测化妆品中是否存在10种α羟基酸。通过两种检测法结合对比的方式，能够的得到更多10种α—羟基酸的信息，有利于进一步确定α—羟基酸的种类。避免干扰因子对检测的干扰，使检测结果更准确，有利于对α—羟基酸进行定性检测。

技术研发人员：金勇,张磊磊,申冲冲,沈欢
受保护的技术使用者：上海国齐检测技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14