一种分析动物组织中短链氯化石蜡的前处理方法与流程

本发明涉及环境污染物监测，具体涉及一种分析动物组织中短链氯化石蜡的前处理方法。

背景技术：

1、通常人们氯化石蜡(sccps)是直链正构烷烃的氯代衍生物，在工业中作为增塑剂、阻燃剂广泛使用。其中sccps在2017年被列入《斯德哥尔摩公约》中进行管控，是一类广受关注的持久性有机污染物。目前，sccps已经在全球各地和包括海洋软体动物在内的多种环境基质中有检出，说明其具有广泛的环境赋存。

2、现有技术中，通过振荡萃取生物样品中氯化石蜡是常用的萃取方法。现有分析动物组织中短链氯化石蜡前处理方法包括以下步骤：用二氯甲烷振荡萃取生物样品中氯化石蜡，旋转蒸发至1-2ml，将溶剂置换为正己烷，用从下而上的填充材料为2g无水硫酸钠，2g弗洛里硅土、4g硅胶、5g氧化铝、4g无水硫酸钠的层析柱进行净化，先用20ml正己烷预淋洗层析柱，将置换后的溶液上样，用70ml体积比为7：3的正己烷和二氯甲烷混合溶液洗脱，收集洗脱液，旋转蒸发至1-2ml，氮吹浓缩定容至1ml，进样加入ε-hch，上机检测sccps。

3、本申请发明人在研究中发现：在现有的方法中，操作复杂，处理速度慢，样品用量大、洗脱所用的有机溶剂使用量大，回收率低。

技术实现思路

1、本申请实施例提供一种分析动物组织中短链氯化石蜡的前处理方法，目的是针对动物组织基质复杂的问题提供一种样品用量少、有机溶剂用量少、回收率高、除杂效果好以及处理速度快的前处理方法，实现对生物样品中sccps的定量分析。本发明采用加速溶剂萃取的方式提取肌肉中sccps，采用固相萃取柱去除肌肉中基质和浓缩sccps，保证提取效率的同时减少前处理过程中sccps的损失。

2、为解决上述技术问题，本申请提出的技术方案是：

3、本发明提供一种分析动物组织中短链氯化石蜡的前处理方法，包括：

4、(1)将稳定同位素13c标记的六氯癸烷(13c10-1,5,5,6,6,10-hexcd)、生物样品和硅藻土混合均匀；

5、(2)用正己烷和二氯甲烷的混合溶液作为萃取溶液，使用加速溶剂萃取设备萃取动物组织中的氯化石蜡；

6、(3)收集萃取后的溶液，氮吹浓缩至5ml；

7、(4)在层析柱中从下往上填充弗洛里硅土、中性硅胶、酸性硅胶；

8、(5)使用正己烷活化净化柱后，步骤(3)获得的浓缩溶液上样后，使用正己烷和二氯甲烷的混合溶液净化洗脱；

9、(6)收集净化后的溶液氮吹至近干后，置换溶剂为正己烷，转移至进样小瓶中；

10、(7)复溶后，加入ε-六六六(ε-hch)作为进样内标，使用气相色谱串联高分辨率质谱检测sccps的浓度。

11、进一步地，所述步骤(2)中，加速溶剂萃取设备的萃取压力为1500psi，萃取温度90℃，每次热平衡为6min，静态萃取15min，三次循环。

12、进一步地，所述步骤(1)中，生物样品质量范围为0.5-1.0g。

13、进一步地，所述步骤(2)中，所述的萃取液二氯甲烷和正己烷混合溶液其比例为体积比1：1。

14、进一步地，所述步骤(4)中，层析柱中弗洛里硅土、中性硅胶、酸性硅胶的质量比为1.5：1：1。

15、进一步地，所述步骤(5)中，活化层析柱所用溶液为10ml正己烷，洗脱层析柱所用溶液为15ml体积比为3：2的二氯甲烷和正己烷混合溶液。

16、进一步地，前处理加入的内标为20ng的13c10-1,5,5,6,6,10-hexcd；为降低仪器波动带来的误差加入的进样内标是20ng的ε-hch。

17、相比于现有技术，本发明一种分析动物组织中短链氯化石蜡的前处理方法取得了如下有益技术效果：

18、本发明一种分析动物组织中短链氯化石蜡的前处理方法可根据防护需求灵活设置，使用二氯甲烷和正己烷的混合溶液进行加速溶剂萃取，同时使用层析柱去除基质，降低基质效应的干扰，用高比例的二氯甲烷洗脱层析柱，减少有机溶剂用量，前处理方法操作简单，所用有机溶剂少，回收率高。

技术特征：

1.一种分析动物组织中短链氯化石蜡的前处理方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的前处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中，加速溶剂萃取设备的萃取压力为1500psi，萃取温度90℃，每次热平衡为6min，静态萃取15min，三次循环。

3.根据权利要求1或2所述的前处理方法，其特征在于，所述步骤(1)中，生物样品质量范围为0.5-1.0g。

4.根据权利要求1或2所述的前处理方法，其特征在于，所述步骤(2)中，所述的萃取液二氯甲烷和正己烷混合溶液其比例为体积比1：1。

5.根据权利要求1或2所述的前处理方法，其特征在于，所述步骤(4)中，层析柱中弗洛里硅土、中性硅胶、酸性硅胶的质量比为1.5：1：1。

6.根据权利要求1或2所述的前处理方法，其特征在于，所述步骤(5)中，活化层析柱所用溶液为10ml正己烷，洗脱层析柱所用溶液为15ml体积比为3：2的二氯甲烷和正己烷混合溶液。

7.根据权利要求1或2所述的前处理方法，其特征在于，前处理加入的内标为20ng的13c10-1,5,5,6,6,10-hexcd；为降低仪器波动带来的误差加入的进样内标是20ng的ε-hch。

技术总结
本发明提供一种用于分析生物样品中短链氯化石蜡的前处理方法，使用二氯甲烷和正己烷的混合溶液进行快速溶剂萃取，再使用层析柱进行净化和浓缩，使用高效气相色谱串联高分辨率质谱进行检测。本申请的方法可以有效提取生物样品中SCCPs并对其含量进行定量研究，所需有机溶剂较少、操作简单、回收率较高，为短链氯化石蜡的环境赋存与生态风险评估提供基础方法。

技术研发人员：刘稷燕,冯悦,陈伟芳,江桂斌
受保护的技术使用者：国科大杭州高等研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14