一种氢醌乳膏中有关物质的检测方法及其应用与流程

本发明属于药物分析，尤其涉及一种氢醌乳膏中有关物质的检测方法及其应用。

背景技术：

1、氢醌乳膏是临床上比较常用的减轻色素沉着的药物，可以通过影响黑素细胞的代谢过程而产生祛斑的作用。氢醌作为酪氨酸酶抑制剂主要通过络合作用抑制酪氨酸酶活性，具有美白皮肤的作用。自20世纪60年代起，许多国家将氢醌制剂用作增白剂和皮肤科治疗色素沉着症、祛斑等外用制剂。但氢醌制备储存中生成的杂质(如对苯醌、连苯三酚、间苯二酚、邻苯二酚等)对皮肤、粘膜及中枢神经呼吸系统具有较强的刺激作用，控制氢醌制剂杂质的研究从未停止，因此，有关物质的研究对于氢醌制剂质量控制具有及其重要的临床价值。

2、筛选高效分离并检测氢醌制剂及其有关物质的检测方法，进而有效控制药品质量，以保障药品的有效性和安全性成为迫切的技术问题。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服上述现有技术的不足之处而提供一种能够高效分离并检测氢醌乳膏中有关物质的检测方法及其应用。

2、为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：一种氢醌乳膏中有关物质的检测方法，所述检测方法包括以下步骤：

3、取氢醌乳膏适量，制成供试品溶液；

4、采用反相高效液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶作为色谱柱填料，以流动相进行梯度洗脱；

5、所述流动相包括流动相a和流动相b，所述流动相a为磷酸二氢钾溶液，所述流动相b为乙腈；

6、所述梯度洗脱的程序为：0～20min，流动相a的体积占比为90～98％，20～35min，流动相a的占比为由90～98％改变至15～25％，35～40min，流动相a的占比为15～25％，40～45min，流动相a的占比为由15～25％改变至90～98％，45～50min，流动相a的占比为90～98％。

7、本发明提供的氢醌乳膏中有关物质的检测方法中，通过选择合适的检测方法，能够实现氢醌乳膏中氢醌和有关物质的高效分离与检测，并且能够缩短检测时间、提高检测效率；同时该检测方法还具备专属性好、灵敏度高的优点，能够应用于氢醌乳膏中有关物质的高效分离、含量测定或其药品的质量控制。

8、作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述梯度洗脱的程序为：0～20min，流动相a的体积占比为95％，20～35min，流动相a的占比为由95％改变至20％，35～40min，流动相a的占比为20％，40～45min，流动相a的占比为由20％改变至95％，45～50min，流动相a的占比为95％。

9、作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述磷酸二氢钾溶液的质量浓度为1～2g/l，并采用磷酸调节磷酸二氢钾溶液的ph值为3.65～3.95。

10、作为本发明所述检测方法的优选实施方式，如下(a)～(e)中的至少一种：

11、(a)检测波长：218-222nm和244-248nm；

12、(b)流速为0.8-1.2ml/min；

13、(c)柱温：25-35℃；

14、(d)进样体积：5-15μl；

15、(e)色谱柱：gl-sciences 4.6×250mm 5μm c18，lc-01-0279或gl-sciences4.6×250mm 5μm c18，lc-01-0265。

16、发明人研究发现，当采用上述高效液相条件时，得到的检测方法综合效果更好。

17、作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述供试品溶液的制备方法为：将氢醌乳膏加入至摩尔浓度为0.4～0.6mol/l的磷酸二氢钾溶液中后振荡，随后用摩尔浓度为0.4～0.6mol/l的磷酸二氢钾溶液将其稀释成每1ml含氢醌2mg的溶液，接着离心，取下层溶液，将下层溶液稀释成每1ml含氢醌1mg的溶液，过滤，取滤液，取滤液，接着将滤液稀释成每1ml含氢醌10μg的溶液，得供试品溶液。

18、作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述振荡的温度为35～45℃，振荡的时间为10～20min；所述离心的转速为3500-4500rpm，离心的时间为3-8min。

19、作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述将下层溶液稀释成每1ml含氢醌1mg的溶液以及将滤液稀释成每1ml含氢醌10μg的溶液中，使用的稀释剂为流动相a和流动相b以95:5的质量比混合得到的溶液。

20、发明人研究发现，当将氢醌乳膏经过上述处理后，得到样品溶液在后续测试中能够更好的实现氢醌与有关物质的分离，得到专属性好、灵敏度高的检测结果。

21、作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述有关物质包括2,5-二羟基苯磺酸钾、间苯三酚、连苯三酚、偏苯三酚和对苯醌。

22、作为本发明所述检测方法的优选实施方式，所述氢醌乳膏中，对苯醌的含量≤0.02％，2,5-二羟基苯磺酸钾、间苯三酚、连苯三酚和偏苯三酚的含量≤2％，除2,5-二羟基苯磺酸钾、间苯三酚、连苯三酚、偏苯三酚和对苯醌以外的杂质总含量≤0.3％。

23、另外，本发明还提供了所述检测方法在氢醌乳膏的质量控制中的应用。

24、本发明提供的检测方法能够高效分离并检测氢醌乳膏中的氢醌和有关物质，并且发明人研究发现，在对氢醌乳膏样品进行热破坏、酸破坏、碱破坏、光破坏和氧化破坏后，还能够有效的检测出样品中的有关物质，因此，本发明提供的检测方法能够有效的应用于氢醌乳膏的质量控制中。

25、与现有技术相比，本发明的有益效果为：

26、本发明提供的氢醌乳膏中有关物质的检测方法通过选择合适的检测方法，能够实现氢醌乳膏中氢醌和有关物质的高效分离与检测，并且能够缩短检测时间、提高检测效率；同时该检测方法还具备专属性好、灵敏度高的优点，能够应用于氢醌乳膏中有关物质的高效分离、含量测定或其药品的质量控制。

技术特征：

1.一种氢醌乳膏中有关物质的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：0～20min，流动相a的体积占比为95％，20～35min，流动相a的占比为由95％改变至20％，35～40min，流动相a的占比为20％，40～45min，流动相a的占比为由20％改变至95％，45～50min，流动相a的占比为95％。

3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述磷酸二氢钾溶液的质量浓度为1～2g/l，并采用磷酸调节磷酸二氢钾溶液的ph值为3.65～3.95。

4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，如下(a)～(e)中的至少一种：

5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备方法为：将氢醌乳膏加入至摩尔浓度为0.4～0.6mol/l的磷酸二氢钾溶液中后振荡，随后用摩尔浓度为0.4～0.6mol/l的磷酸二氢钾溶液将其稀释成每1ml含氢醌2mg的溶液，接着离心，取下层溶液，将下层溶液稀释成每1ml含氢醌1mg的溶液，过滤，取滤液，接着将滤液稀释成每1ml含氢醌10μg的溶液，得供试品溶液。

6.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述振荡的温度为35～45℃，振荡的时间为10～20min；所述离心的转速为3500-4500rpm，离心的时间为3-8min。

7.根据权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述将下层溶液稀释成每1ml含氢醌1mg的溶液以及将滤液稀释成每1ml含氢醌10μg的溶液中，使用的稀释剂为流动相a和流动相b以95:5的质量比混合得到的溶液。

8.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述有关物质包括2,5-二羟基苯磺酸钾、间苯三酚、连苯三酚、偏苯三酚和对苯醌。

9.根据权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述氢醌乳膏中，对苯醌的含量≤0.02％，2,5-二羟基苯磺酸钾、间苯三酚、连苯三酚和偏苯三酚的含量≤2％，除2,5-二羟基苯磺酸钾、间苯三酚、连苯三酚、偏苯三酚和对苯醌以外的杂质总含量≤0.3％。

10.如权利要求1-9任一项所述的检测方法在氢醌乳膏的质量控制中的应用。

技术总结
本发明公开了一种氢醌乳膏中有关物质的检测方法及其应用，属于药物分析技术领域；本发明提供的氢醌乳膏中有关物质的检测方法通过选择合适的检测方法，能够实现氢醌乳膏中氢醌和有关物质的高效分离与检测，并且能够缩短检测时间、提高检测效率；同时该检测方法还具备专属性好、灵敏度高的优点，能够应用于氢醌乳膏中有关物质的高效分离、含量测定或其药品的质量控制。

技术研发人员：苏冠荣,尹贝立
受保护的技术使用者：广东人人康药业有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15