一种小分子PEG的定量检测方法与流程

本发明属于药物分析，具体涉及一种小分子peg的定量检测方法。

背景技术：

1、小分子peg本身性质极性较大，无紫外吸收，无法采用选择性检测器紫外检测器进行检测；现在普遍使用的elsd(蒸发光散射检测器，evaporative light-scatteringdetector)和cad检测器(电雾式检测器)。目前，小分子peg一般采用液相色谱(lc)方法检测，由于小分子peg组分沸点较低，lc-cad响应值较弱，定量不准确。

技术实现思路

1、为了解决上述的技术问题，本发明采用气相色谱和氢火焰离子化检测器(gc-fid)为检测仪器，提供了一种小分子peg的定量检测方法，其具体检测过程包括：

2、步骤1，将小分子peg样品与溶剂混合均匀，小分子peg样品溶解后得到小分子peg样品溶液。

3、步骤2，将步骤1获得的小分子peg样品溶液进样至gc-fid进行检测。

4、优选地，步骤1中的小分子peg为peg1、peg2、peg3、peg4、peg5和peg6中的任意一种或者多种的组合物。

5、优选地，步骤1中的溶剂选自乙腈、二氯甲烷、甲醇中的任意一种，进一步优选为甲醇。

6、优选地，小分子peg样品溶液中的peg浓度为1-5mg/ml，例如：1mg/ml、2mg/ml、3mg/ml、4mg/ml、5mg/ml。

7、优选地，步骤2中gc的进样方式为分流进样、不分流进样或直接注入进样方式中的任意一种，进一步优选为直接注入方式进样。

8、优选地，步骤2中的gc的载气为氮气或氦气，进一步优选为氮气。

9、优选地，步骤2中的gc采用恒流模式进样，载气流速为0.5-5ml/min，进一步优选为1-5ml/min，例如：1ml/min、1.5ml/min、2.0ml/min、2.5ml/min、3.0ml/min、3.5ml/min、4.0ml/min、4.5ml/min、5.0ml/min。

10、优选地，步骤2中的gc进样口为填充柱进样口或者毛细管柱进样口，进一步优选为毛细管柱进样口。

11、在本发明的一个实施方式中，定量检测小分子peg的气相色谱仪为shimadzugc2010pro气相色谱仪。

12、优选地，步骤2所述gc的固定相为非极性固定相，例如hp-5ms、hp-5、rtx-5ms、rxi-5ms、rxi-5sil ms、pte-5、bpx-5、at-5ms、zb-5ms、slb-5ms、equity-5，特别是hp-5ms。

13、优选地，步骤2中gc的色谱柱长度为10～60m，例如：10m、15m、20m、25m、30m、60m，特别是30m。

14、优选地，步骤2中的gc的色谱柱的内径为0.1～0.6mm，例如0.10mm、0.15mm、0.25mm、0.32mm、0.53mm，特别是0.25mm。

15、优选地，步骤2中的gc的色谱柱膜厚为0.1～2.0μm，例如0.10μm、0.15μm、0.20μm、0.25μm、0.50μm、1.0μm、2.0μm，特别是0.25μm。

16、在本发明的一个实施方式中，检测小分子peg的气相色谱柱为hp-5ms色谱柱，进一步优选为agilent hp-5msi 30m*0.250mm,0.25μm。

17、优选地，步骤2中的gc的进样口温度为250-400℃，优选为250-350℃，例如：250℃、275℃、300℃、325℃、350℃。

18、优选地，步骤2中的gc的分流比为5:1-30:1，例如：5:1、10:1、15:1、20:1、25:1、30:1。

19、优选地，步骤2中gc的吹扫流量为1-5ml/min，例如1ml/min、2ml/min、3ml/min、4ml/min、5ml/min。

20、优选地，gc的进样体积为0.5-5.0μl，进一步优选为0.5-3.0μl，例如0.5μl、1.0μl、1.5μl、2.0μl、2.5μl、3.0μl。

21、优选地，步骤2中的gc采用程序升温方式，具体过程为：起始温度为50-65℃(优选为60℃)，保持0min；然后以15℃/min的速率升温至300-340℃(优选为320℃)，保持7.0min。

22、在本发明的一个实施方式中，步骤2中的氢火焰离子化检测器(fid)参数设置如下：

23、检测器温度为300-450℃，优选为300-400℃，例如300℃、320℃、340℃、360℃、380℃、400℃。

24、氢气流量为25-50ml/min，优选为30-50ml/min，例如30ml/min、35ml/min、40ml/min、45ml/min、50ml/min。

25、空气流量为300-500ml/min，优选为350-450ml/min，例如350ml/min、380ml/min、400ml/min、430ml/min、450ml/min。

26、尾吹气流量为10-40ml/min，优选为15-40ml/min，例如：15ml/min、17ml/min、20ml/min、25ml/min、27ml/min、30ml/min、32ml/min、35ml/min、37ml/min、40ml/min。

27、本发明还提供上述检测方法在小分子peg产品的质量控制和评估中的应用。

28、本发明的有益效果：

29、一、本发明采用gc-fid方法检测小分子peg，响应值高，避免了小分子peg在液相色谱上响应较弱的缺陷。

30、二、本发明的小分子peg检测方法，操作简单、系统适用性、专属性、检测性、定量性、线性范围等方面符合要求且具有较高耐用性。

技术特征：

1.一种小分子peg的定量检测方法，其特征在于：将小分子peg样品溶液进样至gc-fid进行检测。

2.根据权利要求1所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述gc的色谱柱为(5％-苯基)-甲基聚硅氧烷非极性气相色谱柱。

3.根据权利要求1或2所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述gc的载气为氮气或氦气，优选为氮气。

4.根据权利要求1或2所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述gc采用恒流模式，载气流速为0.5-5ml/min。

5.根据权利要求1或2所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述gc的进样口温度为250-400℃，优选为250-350℃，进一步优选为300℃。

6.根据权利要求1或2所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述gc的分流比为5:1-30:1。

7.根据权利要求1或2所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述gc的吹扫流量为1-5ml/min。

8.根据权利要求1或2所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述gc的进样体积为0.5-5μl。

9.根据权利要求1或2所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述gc采用程序升温方法，设置以下参数：

10.根据权利要求1或2所述的小分子peg的定量检测方法，其特征在于：所述的fid设置以下参数：

技术总结
本发明公开了一种小分子PEG的定量检测方法，其将小分子PEG样品溶液进样至GC‑FID进行检测。本发明响应值高，避免了小分子PEG在液相色谱上响应较弱的缺陷。而且检测操作简单、系统适用性、专属性、检测性、定量性、线性范围等方面符合要求且具有较高耐用性。

技术研发人员：李旭哲,李洋,何平,赵宣
受保护的技术使用者：天津键凯科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16